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前列腺特异膜抗原的研究进展

军事医学科学院院刊 2009年第1期33卷 88-90页

作者：李学超陈立军军事医学科学院附属医院泌尿外科北京100071

前列腺特异膜抗原(prostate-specific membrane antigen,PSMA)是存在于前列腺细胞膜上的组织特异性抗原,因其在前列腺癌,尤其是激素难治性前列腺癌及转移灶中的高表达而具有重要的临床意义。本文综述了PSMA的生物学特性及其在前列腺癌... 详细信息

前列腺特异膜抗原(prostate-specific membrane antigen,PSMA)是存在于前列腺细胞膜上的组织特异性抗原,因其在前列腺癌,尤其是激素难治性前列腺癌及转移灶中的高表达而具有重要的临床意义。本文综述了PSMA的生物学特性及其在前列腺癌诊断和治疗中的研究进展。

关键词：前列腺特异膜抗原前列腺癌

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前列腺特异膜抗原基因的克隆和真核表达

中山大学学报（医学科学版） 2005年第B3期26卷 38-40页

作者：戴淑琴王军业曹开源徐霖袁广卿中山大学肿瘤防治中心检验科广东广州510060 中山大学肿瘤防治中心胸科广东广州510060 中山大学中山医学院检验系广东广州510060

【目的】克隆前列腺特异膜抗原(PSMA)基因的编码区序列,并进行真核表达。【方法】用 RT-PCR 方法扩增前列腺癌组织标本中的 PSMA cDNA 序列,并将其克隆至真核表达载体 pcDNA3.0。用脂质体转染法,把 pcDNA3.0-PSMA 转染哺乳动物细胞,鉴定... 详细信息

【目的】克隆前列腺特异膜抗原(PSMA)基因的编码区序列,并进行真核表达。【方法】用 RT-PCR 方法扩增前列腺癌组织标本中的 PSMA cDNA 序列,并将其克隆至真核表达载体 pcDNA3.0。用脂质体转染法,把 pcDNA3.0-PSMA 转染哺乳动物细胞,鉴定 PSMA 蛋白的表达。【结果】序列测定结果表明,两条引物之间的片段长度为2279bp,与预期长度一致。将克隆的编码区序列与 GenBank 的 PSMA 序列进行 Blast 对比分析,同源性为99.7%;间接免疫荧光法显示表达的蛋白质为膜蛋白,免疫印迹表明表达蛋白质的相对分子质量为100ku。【结论】成功扩增了 PSMA 编码区序列,构建了 PSMA 真核表达载体,建立了 PSMA 稳定表达的细胞株。经免疫分析,证实了真核细胞内表达的 PSMA 为分子质量正确的膜蛋白,且具有良好的抗原性。所获得的 PSMA 真核表达系统为进一步研究 PSMA 基因修饰的 DCs 疫苗对前列腺癌的治疗提供了物质基础。

关键词：前列腺特异膜抗原克隆,分子真核表达

前列腺特异膜抗原mRNA检测方法的建立及应用

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临床检验杂志 2003年第6期21卷 355-356页

作者：杨道理李保昌济南军区总医院实验诊断科山东济南250031

目的　建立前列腺特异膜抗原 (PSM)mRNA检测方法。方法　利用异硫氰酸胍 /酚 /氯仿 /异戊醇一步法从前列腺癌患者外周血有核细胞或前列腺癌组织中提取总RNA ,进行RT PCR扩增。结果　在PCR反应体系中投入相当于 1～ 1 0 0个癌细胞所含总... 详细信息

目的　建立前列腺特异膜抗原 (PSM)mRNA检测方法。方法　利用异硫氰酸胍 /酚 /氯仿 /异戊醇一步法从前列腺癌患者外周血有核细胞或前列腺癌组织中提取总RNA ,进行RT PCR扩增。结果　在PCR反应体系中投入相当于 1～ 1 0 0个癌细胞所含总RNA量时 ,均能得到清晰的 2 6 2bp的产物带。结论　本法有很高的稳定性和灵敏度。临床应用有助于早期发现前列腺癌转移。

关键词：前列腺特异膜抗原 mRNA 检测前列腺癌逆转录聚合酶链反应外周血癌组织

前列腺特异膜抗原在Pichia pastoris酵母中的表达及鉴定

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中国生物化学与分子生物学报 2002年第3期18卷 352-355页

作者：叶传忠赵旭东许明李平作张永康陈常庆复旦大学附属中山医院泌尿外科上海200032 中国科学院上海生物工程研究中心上海200233

前列腺特异膜抗原是一种具有高度前列腺特异性的糖蛋白 ,其表达的增高与肿瘤的术后复发、激素抵抗及较差的预后正相关 ,在前列腺癌的诊断和治疗中有广泛的应用前景 .从前列腺癌组织提取总RNA ,利用RT PCR技术获得PSMA基因的全长序列 ,... 详细信息

前列腺特异膜抗原是一种具有高度前列腺特异性的糖蛋白 ,其表达的增高与肿瘤的术后复发、激素抵抗及较差的预后正相关 ,在前列腺癌的诊断和治疗中有广泛的应用前景 .从前列腺癌组织提取总RNA ,利用RT PCR技术获得PSMA基因的全长序列 ,构建了重组酵母表达载体pPIC3.5K PSMA .电击法转化Pichiapastoris酵母 ,通过表型筛选和PCR鉴定证实该基因已稳定整合入Pichiapastoris酵母基因组中 .SDS PAGE显示 ,获得的PSMA蛋白分子量约 10 0kD ,表达产物经West ern印迹证实可特异地与PSMA单克隆抗体 4G5结合 .结果表明 ,成功地获得PSMA编码的cDNA并在酵母细胞中获得表达 .

关键词：前列腺特异膜抗原毕赤酵母基因表达鉴定

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前列腺特异膜抗原基因的克隆及其蛋白表达

山东医药 2006年第11期46卷 25-26页

作者：孙秀英刘中路临沂市人民医院山东临沂276003

用RT-PCR法扩增前列腺癌组织标本中的前列腺特异膜抗原(PSMA)cDNA序列,并将其克隆至真核表达载体pcDNA3.0。用脂质体转染法将pcDNA3.0-PSMA转染哺乳动物细胞,鉴定PSMA蛋白表达。序列测定结果表明,两条引物间的片断长度为2279bp,与预期... 详细信息

用RT-PCR法扩增前列腺癌组织标本中的前列腺特异膜抗原(PSMA)cDNA序列,并将其克隆至真核表达载体pcDNA3.0。用脂质体转染法将pcDNA3.0-PSMA转染哺乳动物细胞,鉴定PSMA蛋白表达。序列测定结果表明,两条引物间的片断长度为2279bp,与预期长度一致;将克隆的编码区序列与Genebank的PSMA序列进行Blast对比分析,同源性为99.7%;间接免疫荧光法显示表达的蛋白质为膜蛋白,免疫印迹表明表达蛋白质的相对分子质量为100kD。提示成功扩增了PSMA编码区序列,构建了PSMA真核表达载体,建立了PSMA稳定表达的细胞株;此研究为PSMA基因修饰的树突状细胞疫苗治疗前列腺癌奠定了基础。

关键词：前列腺特异膜抗原癌基因前列腺肿瘤

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前列腺特异膜抗原的结构模型研究

上海第二医科大学学报 2003年第6期23卷 481-484页

作者：叶传忠林传捷张芳林张磬叶敏陈建华黄云腾上海第二医科大学新华医院泌尿外科上海200092 福建医科大学第一医院信息科瑞金医院中国科学院上海生物化学研究所

目的对前列腺特异膜抗原(PSMA)进行结构模建并尝试其小分子抑制物的设计。方法通过网络资源和分子设计软件SYBYL进行PSMA的三维模建和小分子抑制物的设计。结果以气单胞菌氨肽酶(AMP)的晶体结构为模板使用Composer模块,获得PSMA胞外... 详细信息

目的对前列腺特异膜抗原(PSMA)进行结构模建并尝试其小分子抑制物的设计。方法通过网络资源和分子设计软件SYBYL进行PSMA的三维模建和小分子抑制物的设计。结果以气单胞菌氨肽酶(AMP)的晶体结构为模板使用Composer模块,获得PSMA胞外区三维结构模型。采用分子对接方法,以AMP和p-碘基-D-苯丙酸-氧肟酸(AIDPH)的复合物晶体结构IIGB为参照,将AIDPH对接到PSMA的结构上,相对应形成疏水作用一端的残基为Y279、Y294、Y298及Y301,与IIGB的晶体结构中的蛋白-抑制剂间的疏水作用非常相似,相对应于另一端形成氢键的4个残基中有3个相同,说明两个复合物氢键形成的方式大体一致。结论成功获得PSMA三维结构的理论模型。AIDPH有望作为设计PSMA靶向性药物的前导基团。

关键词：前列腺特异膜抗原结构模型串线法药物设计前列腺癌

抗前列腺特异膜抗原单克隆抗体的标记及在荷瘤裸鼠体内的分布研究

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中国肿瘤临床 2005年第7期32卷 409-411,417页

作者：徐鸿绪王晓波曾文涛梅骅刘长征中山大学附属第一医院外科广州市510080 中山大学基础医学院核医学教研室

目的:研究125I标记的抗前列腺特异膜抗原(PSM A)单克隆抗体(125I-Ed-5)及正常小鼠IgG(125I-NM IgG)在荷人前列腺癌瘤裸鼠体内的分布,探讨应用125I-Ed-5进行放射免疫显像诊断和放射免疫治疗实验性人前列腺癌的可行性。方法:建立荷人前列... 详细信息

目的:研究125I标记的抗前列腺特异膜抗原(PSM A)单克隆抗体(125I-Ed-5)及正常小鼠IgG(125I-NM IgG)在荷人前列腺癌瘤裸鼠体内的分布,探讨应用125I-Ed-5进行放射免疫显像诊断和放射免疫治疗实验性人前列腺癌的可行性。方法:建立荷人前列腺癌裸鼠移植瘤模型,用125I标记抗PSM A单克隆抗体Ed-5和NM IgG,125I-Ed-5和125I-NM IgG经尾静脉注入荷瘤裸鼠体内,于注射后24、48、72、120小时分批处死,测定肿瘤和血液、肝、肺等重要脏器的单位重量放射性比值(T/NT)、各组织摄取百分比(%ID/g),研究其在荷瘤裸鼠体内的放射性分布情况。结果:125I-Ed-5的标记率为72.3%,放射性比活度为55.2M Bq/m g,放射性化学纯度是90.2%,免疫活性分数为63%。在注射125I-Ed-5后24～120小时内,裸鼠体内肿瘤部位出现选择性放射性浓聚;各组织的T/NT比值在72h达到最高,其中肿瘤/肌肉高达6.36。而在注射125I-NM IgG的对照组中,裸鼠体内未见放射性浓聚,呈全身均匀性分布。结论:标记后的125I-Ed-5免疫活性没有改变,在裸鼠体内对前列腺癌移植瘤有靶向定位作用,为进一步应用125I-Ed-5进行前列腺癌放射免疫显像和放射免疫治疗的实验研究奠定基础。

关键词：前列腺肿瘤前列腺特异膜抗原单克隆抗体分布

大鼠前列腺特异膜抗原基因重组腺病毒诱导小鼠特异性抗体的研究

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四川大学学报（医学版） 2011年第2期42卷 147-151页

作者：王绍军张冬梅杨莉四川大学生命科学学院细胞生物学教研室成都610064 四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室肿瘤生物治疗研究室成都610041

目的构建含大鼠前列腺特异膜抗原基因(PSMA)的重组腺病毒Ad-rPSMA,并研究其在小鼠体内的特异性体液免疫反应。方法提取大鼠脑组织总RNA,经RT-PCR扩增PSMA基因片段,利用Adeasy腺病毒载体系统构建pAd-rPSMA重组腺病毒质粒,包装复制缺陷型... 详细信息

目的构建含大鼠前列腺特异膜抗原基因(PSMA)的重组腺病毒Ad-rPSMA,并研究其在小鼠体内的特异性体液免疫反应。方法提取大鼠脑组织总RNA,经RT-PCR扩增PSMA基因片段,利用Adeasy腺病毒载体系统构建pAd-rPSMA重组腺病毒质粒,包装复制缺陷型重组腺病毒Ad-rPSMA,制备病毒颗粒。用制备的病毒感染HeLa细胞,Western blot检测PSMA基因的表达。以Ad-rPSMA重组腺病毒免疫C57小鼠,检测血清中PSMA特异性抗体。结果成功构建了含有大鼠PSMA基因的重组腺病毒,制备的病毒颗粒数为1.97×1012VP/mL,A260/A280值为1.32,病毒滴度为5×1010IU/mL;Western blot检测可见大鼠PSMA基因在HeLa细胞中的表达;ELISA法检测出免疫小鼠血清中存在PSMA特异性抗体。结论成功构建了大鼠前列腺特异膜抗原基因重组腺病毒Ad-rPSMA,并诱导小鼠产生了针对PSMA的特异性抗体。

关键词：前列腺癌前列腺特异膜抗原腺病毒载体同源异种免疫

反转录聚合酶链反应检测前列腺癌病人外周血中前列腺特异膜抗原

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中华检验医学杂志 2002年第1期25卷 45-46页

作者：马乐吴小晶潘柏年首都医科大学附属北京妇产医院 100006 北京大学第一医院

前列腺特异膜抗原（PSM）存在前列腺细胞上，患者列腺癌时，有很少量PSM进入血清，检测病人血清中PSM的水平，对前列腺癌的诊断有一定的临床意义，但该方法的敏感性和特异性均不理想。我们运用敏感的反转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法... 详细信息

前列腺特异膜抗原（PSM）存在前列腺细胞上，患者列腺癌时，有很少量PSM进入血清，检测病人血清中PSM的水平，对前列腺癌的诊断有一定的临床意义，但该方法的敏感性和特异性均不理想。我们运用敏感的反转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法，检测了33例前列腺癌病人外周血中PSM mRNA的表达，结合临床有关资料，探讨其临床意义。

关键词：前列腺癌外周血前列腺特异膜抗原反转录聚合酶链反应 PSM