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Notch信号对视网膜前体细胞分化的作用

中南大学学报（医学版） 2009年第6期34卷 492-497页

作者：张锟卢光琇高玲唐罗生王建王涛胡蓉中南大学湘雅二医院眼科长沙410011 中南大学生殖与干细胞工程研究所长沙410078

目的:观察Notch信号对体外培养的SD大鼠视网膜前体细胞分化的影响。方法:从胎龄16d的SD大鼠分离视网膜神经上皮,采用悬浮法培养视网膜前体细胞。实验分Notch信号抑制组和对照组两组。第14天行免疫细胞化学法分析细胞类型、Notch信号的... 详细信息

目的:观察Notch信号对体外培养的SD大鼠视网膜前体细胞分化的影响。方法:从胎龄16d的SD大鼠分离视网膜神经上皮,采用悬浮法培养视网膜前体细胞。实验分Notch信号抑制组和对照组两组。第14天行免疫细胞化学法分析细胞类型、Notch信号的表达及变化。结果:视网膜前体细胞大部分表达Notch1胞内段及其下游转录因子Hes1,少量细胞表达bHLH转录因子NeuroD和Mash1;自发分化后大量细胞表达bHLH转录因子NeuroD和Mash1,少量细胞表达Notch1胞内段和Hes1。Notch信号抑制组Nestin,GFAP阳性率显著低于对照组,β-tubulin阳性率显著高于对照组,而Recoverin阳性率与对照组差异无统计学意义。结论:Notch1信号在体外可能参与了对视网膜前体细胞分化的抑制,抑制Notch信号可部分促进视网膜前体细胞向神经元分化,同时抑制了神经胶质细胞的分化。

关键词：前体细胞视网膜 Notch bHLH

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胶质细胞干细胞/前体细胞特性的研究进展

生理学报 2017年第2期69卷 207-217页

作者：谭子健巨淑慧黄潇谷亚坤苏志达第二军医大学神经科学研究所分子神经生物学教育部重点实验室上海200433

胶质细胞是脑内数量最多的神经细胞,包括星形胶质细胞、少突胶质前体细胞、NG2胶质细胞等多种类型,具有维持神经系统内环境稳态、支持和营养神经元、调控神经信号传导等多种重要功能。近年来,随着研究的深入,越来越多的证据表明某些特... 详细信息

胶质细胞是脑内数量最多的神经细胞,包括星形胶质细胞、少突胶质前体细胞、NG2胶质细胞等多种类型,具有维持神经系统内环境稳态、支持和营养神经元、调控神经信号传导等多种重要功能。近年来,随着研究的深入,越来越多的证据表明某些特定的胶质细胞在一定条件下表现出干细胞的特性,发挥干细胞的功能。例如,在病理损伤条件下,星形胶质细胞和少突胶质前体细胞均会被活化而出现增殖、分化,体外分离培养可自我更新形成神经球。这些活化的星形胶质细胞和少突胶质前体细胞形成的神经球能够被诱导分化为星形胶质细胞、少突胶质细胞和神经元。此外,通过强制性表达外源基因能将星形胶质细胞和NG2胶质细胞转分化为神经元,这可能也是其干细胞特性的一种体现。本文在已有研究的基础上,总结了放射状胶质细胞、少突胶质前体细胞、星形胶质细胞、NG2胶质细胞与其它类型胶质细胞的干细胞特性、干细胞特性形成的条件、它们可能产生的子代细胞以及涉及的分子信号调控通路。深入探讨胶质细胞的干细胞特性及生理功能,有利于促进其在神经系统损伤修复领域的临床应用。

关键词：胶质细胞神经干细胞前体细胞生物学特性功能

Graves病患者外周血分泌TRAb前体细胞的存在及意义

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四川大学学报（医学版） 2003年第1期34卷 100-103页

作者：贾卫国安振梅陈德才魏松全四川大学华西医院内分泌科成都610041

目的　探讨分泌 TRAb的前体细胞在 Graves病 (GD)患者外周血中的存在及意义。方法　利用 EB病毒体外激活外周血淋巴细胞 ,测定 GD患者外周血中潜在的 TRAb分泌细胞。结果　 Graves病患者的分泌TRAb的转化 B细胞阳性孔占免疫球蛋白阳性... 详细信息

目的　探讨分泌 TRAb的前体细胞在 Graves病 (GD)患者外周血中的存在及意义。方法　利用 EB病毒体外激活外周血淋巴细胞 ,测定 GD患者外周血中潜在的 TRAb分泌细胞。结果　 Graves病患者的分泌TRAb的转化 B细胞阳性孔占免疫球蛋白阳性孔的百分率远高于正常对照。正常对照中也可以检出较低频率的TRAb前体细胞。EBV转化的 TRAb前体细胞以分泌 Ig M型抗体为主。结论　在 Graves病患者体内 ,有较高频率的潜在分泌 TRAb前体细胞存在。

关键词： Graves病促甲状腺素受体自身抗体 B淋巴细胞前体细胞

源于体外培养胰岛中表达Ngn3的细胞是胰腺内分泌前体细胞的新证据

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中华外科杂志 2005年第1期43卷 42-45页

作者：宋陆军秦新裕牛伟新沈坤堂刘凤林 K.A.Andreoni D.A.Gerber J.H.Fair L.Rice A.Pleasant J.Wang 复旦大学附属中山医院普外科上海200032 Transplantation and Stem Cell Lab Department of SurgeryUniversity of North Carolina at Chape lHillUSA Jian Wang

目的　评估表达Ngn3的细胞对成体胰岛维护和更新的作用及其意义。方法　用 6～ 8周龄的C5 7BL/ 6小鼠分离胰岛。胆总管内插管成功后 ,切除胰腺组织并用浓度为 2 5mg/ml胶原蛋白酶V灌注消化。手工拣取胰岛后 ,置于 6 0mm培养皿内 ,每个... 详细信息

目的　评估表达Ngn3的细胞对成体胰岛维护和更新的作用及其意义。方法　用 6～ 8周龄的C5 7BL/ 6小鼠分离胰岛。胆总管内插管成功后 ,切除胰腺组织并用浓度为 2 5mg/ml胶原蛋白酶V灌注消化。手工拣取胰岛后 ,置于 6 0mm培养皿内 ,每个培养皿内含 10～ 12个胰岛 ,用RPMI 16 4 0 (12 5mmol/LHEPES ,5 2mmol/L葡萄糖和 2 %胎牛血清 )培养液培养。用A6抗体 ,胰岛素抗体 ,胰高血糖素抗体 ,Nestin抗体 ,Ngn3抗体和 5′ 溴 2 脱氧尿嘧啶 (5 bromo 2′ deoxy uridine,BrdU)抗体进行胰岛细胞免疫荧光染色。结果　在增殖的胰岛细胞中 ,只有不到 15 %的细胞表达Ngn3,其中约有 30 %以上的细胞同时表达A6。在培养的胰岛细胞中存在表达Ngn3的细胞 ,这一结果与其他在胚胎发育和成体胰岛中的研究结果一致。本研究发现培养的胰岛细胞中存在同时表达A6和Ngn3的细胞。A6被认为是可分化为胆管上皮细胞的肝脏前体细胞的标记物。胰岛内表达A6的细胞可能来源于成体胰管 ,并迁移至胰岛内。细胞表达A6的同时表达Ngn3,表明这些细胞在胰岛内可分化为内分泌细胞。结论　培养的胰岛细胞中发现共同表达Ngn3和A6的细胞 ,表明胰岛内的 4种内分泌细胞可能来源于成体胰岛中的同一内分泌细胞系。

关键词：胰岛细胞细胞表达抗体前体细胞胰腺标记物治疗成体干细胞培养皿内分泌细胞

siRNA真核表达载体对大鼠耳蜗前体细胞Notch3基因表达的影响

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解放军医学杂志 2013年第5期38卷 369-372页

作者：王军利许映龙许珉西安交通大学第二附属医院耳鼻喉科西安710004

目的构建Notch3基因的siRNA真核表达载体,探讨其对大鼠耳蜗前体细胞中Notch3基因表达的影响。方法机械分离并胰酶消化新生大鼠耳蜗感觉上皮,悬浮培养基培养耳蜗前体细胞。根据Notch3基因序列设计并合成2对siRNA,插入pSilencer4.1-CMV ne... 详细信息

目的构建Notch3基因的siRNA真核表达载体,探讨其对大鼠耳蜗前体细胞中Notch3基因表达的影响。方法机械分离并胰酶消化新生大鼠耳蜗感觉上皮,悬浮培养基培养耳蜗前体细胞。根据Notch3基因序列设计并合成2对siRNA,插入pSilencer4.1-CMV neo载体,进行酶切及测序鉴定。采用脂质体法向大鼠耳蜗前体细胞转染重组质粒,采用Real time-PCR和Western blotting法检测重组质粒对Notch3基因的干扰效果。结果经前体细胞标记物Abcg2染色鉴定证实原代培养的细胞球为耳蜗前体细胞。酶切及测序鉴定证实成功构建了siRNA真核表达载体pSilencer-Notch3-S1和pSilencer-Notch3-S2。Real-time PCR和Western blotting检测结果显示所构建的Notch3基因真核表达载体成功地干扰了目的基因的表达。与空白对照组比较,转染pSilencer-Notch3-S1和pSilencer-Notch3-S2的细胞Notch 3 mRNA和蛋白表达量均有明显减少,而转染空质粒的细胞与空白对照组比较无显著差异。结论成功构建了大鼠Notch3基因的RNAi真核表达载体,该载体在大鼠耳蜗前体细胞中对Notch3基因的表达可发挥抑制作用。

关键词： Notch3 小分子干扰耳蜗前体细胞

萝卜硫素通过p-mTOR/p-S6信号通路增强CD8^+记忆细胞前体细胞的分化

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中国肿瘤生物治疗杂志 2018年第9期25卷 920-927页

作者：李红张震周斌吕全军张毅郑州大学公共卫生学院河南郑州450052 郑州大学第一附属医院生物细胞治疗中心河南郑州450052

目的:检测萝卜硫素(sulforaphane, SFN)对CD8^+T细胞分化、表型及胞内因子分泌的影响并探讨其可能的调控机制。方法:在体外培养实验中,按照SFN处理的剂量分为对照(0 mmol/L)组、SFN 10 mmol/L组、SFN 20 mmol/L组。采用流式细胞术检测SF... 详细信息

目的:检测萝卜硫素(sulforaphane, SFN)对CD8^+T细胞分化、表型及胞内因子分泌的影响并探讨其可能的调控机制。方法:在体外培养实验中,按照SFN处理的剂量分为对照(0 mmol/L)组、SFN 10 mmol/L组、SFN 20 mmol/L组。采用流式细胞术检测SFN对CD8^+T细胞分化、表型及胞内因子分泌的影响以及mTOR siRNA对CD8^+T细胞CD127和LKRG1表达的影响;采用q RT-PCR检测抗凋亡因子Bcl-2和Bcl-6的表达水平,Annexin-V/PI双染法检测SFN对CD8^+T细胞凋亡的影响,Western blotting检测信号通路蛋白p-mTOR、p-S6以及内参b-actin蛋白的表达。结果:SFN促进CD8^+记忆细胞前体细胞的形成、显著降低CD8^+T细胞PD-1和Tim-3的表达水平(P细胞的凋亡受到显著抑制,p-mTOR和p-S6蛋白表达水平也显著降低(P细胞因子IL-2、IFN-g、TNF-a的分泌(P细胞前体细胞的形成,获得更多年轻化的T细胞,为临床免疫细胞治疗提供新的思路。

关键词：萝卜硫素 p-mTOR/p-S6信号通路 CD8^+记忆细胞前体细胞

大鼠肝脏前体细胞——小圆细胞的分离与特性的初步研究

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实验生物学报 2004年第6期37卷 475-481页

作者：阎钟钰安威王萍贾继东首都医科大学细胞生物系北京100054 首都医科大学北京友谊医院肝病研究中心北京100050

通过与大鼠肝卵圆细胞的对比,对肝脏中一种新的前体细胞——小圆细胞进行分离和初步特性分析。以分步消化法制备小圆细胞,MTT法观察其增殖特点,以白蛋白、细胞角蛋白19、甲胎蛋白为标志物,应用免疫细胞化学染色的方法,对其进行鉴定。同... 详细信息

通过与大鼠肝卵圆细胞的对比,对肝脏中一种新的前体细胞——小圆细胞进行分离和初步特性分析。以分步消化法制备小圆细胞,MTT法观察其增殖特点,以白蛋白、细胞角蛋白19、甲胎蛋白为标志物,应用免疫细胞化学染色的方法,对其进行鉴定。同时用DMSO刺激小圆细胞分化,检测分化结果,并与卵圆细胞加以比较。结果显示,小圆细胞增殖不明显。小圆细胞与卵圆细胞均表达白蛋白和角蛋白19。DMSO刺激后小圆细胞向卵圆细胞分化,分化前细胞AFP呈阳性,分化后细胞形状、标志物表达与卵圆细胞一致。本实验提示,小圆细胞很可能是早于卵圆细胞的一种肝脏前体细胞。

关键词：卵圆细胞前体细胞肝脏鼠肝大鼠分化白蛋白 DMSO 表达初步研究

转录因子NKX2-5分子结构与调控心血管前体细胞的生物学功能

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中国组织工程研究 2021年第1期25卷 108-115页

作者：王宏书韩燊刘卒李晓芳钟崇斌李立峰李亚雄蒋立虹昆明医科大学附属延安医院中心实验室云南省昆明市650000 昆明医科大学附属延安医院心脏大血管外科云南省昆明市650000 楚雄州人民医院全科医学科云南省楚雄市675000 楚雄州人民医院胸心外科云南省楚雄市675000 云南省第一人民医院云南省昆明市650100

背景:NKX2-5是哺乳动物心脏发育过程中极其重要的一个转录调节因子。来自于模式动物如大鼠、小鼠及斑马鱼的研究表明,NKX2-5的缺失或功能异常,影响心脏发育,出现类似于人类先天性心脏病的病理表现。然而,对于NKX2-5在心脏发育过程中的... 详细信息

背景:NKX2-5是哺乳动物心脏发育过程中极其重要的一个转录调节因子。来自于模式动物如大鼠、小鼠及斑马鱼的研究表明,NKX2-5的缺失或功能异常,影响心脏发育,出现类似于人类先天性心脏病的病理表现。然而,对于NKX2-5在心脏发育过程中的调控作用及具体机制,目前依然不明确。目的:对NKX2-5的分子结构、功能作用、上下游调控分子进行综述。方法:以检索词"NKX2-5、congenital heart disease、CHD、heart development"在PubMed数据库(网址https://***/pubmed/)中进行检索,文献发表截止时间为2019-04-01。通过对检索到的文献进行下载、阅读,排除与NKX2-5无关的文献、观点重复、结论一致的文献,对剩余的97篇文献进行详细阅读,提取文献中的观点、结论进行综述。结果与结论:①NKX2-5在心脏发育调控中起关键作用,其功能异常或基因突变导致心脏发育异常与功能异常,与人类先天性心脏病的发生密切相关;②NKX2-5调控作用的发挥依赖于其自身的多个功能性结构域。NKX2-5经转录翻译后进入细胞核内,通过与CO-factors结合或单独结合于特定DNA序列,对下游调控分子起激活或抑制作用,从而对心肌前体细胞的增殖、迁移、分化、功能产生影响,维持正确的心脏发育过程及心脏传导系统的正常发育与功能;③NKX2-5的转录、翻译、入核过程、转录激活或抑制作用的发挥也受到多种方式的调控,主要从染色质构象、启动子与增强子功能、RNA解链、转录后修饰、细胞核定位层面对NKX2-5进行调控。

关键词：前体细胞因子转录因子先天性心脏病心脏发育心肌基因细胞

不同临床期Graves’病患者外周血分泌TRAb前体细胞频率的差异(英文)

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免疫学杂志 2002年第1期18卷 1-5页

作者：贾卫国陈德才安振梅魏松全四川大学华西医院内分泌科四川成都610041

目的　探讨分泌TRAb的前体细胞频率与Graves’病临床分期的关系。方法　利用EB病毒体外激活外周血淋巴细胞 ,测定不同临床期GD患者外周血中潜在的TRAb分泌细胞的频率差异。结果　血清TRAb较高的初发和复发期患者的分泌TRAb的转化B细胞... 详细信息

目的　探讨分泌TRAb的前体细胞频率与Graves’病临床分期的关系。方法　利用EB病毒体外激活外周血淋巴细胞 ,测定不同临床期GD患者外周血中潜在的TRAb分泌细胞的频率差异。结果　血清TRAb较高的初发和复发期患者的分泌TRAb的转化B细胞阳性孔占免疫球蛋白阳性孔的百分率远高于正常对照 :2例初发病人的阳性率分别为 34.6 %和2 9 .1% ,1例复发病人阳性率为 30 %。正常对照中也可以检出较低频率的TRAb前体细胞。 2例血清TRAb阴性的缓解期病人的外周血中 ,其中 1例分泌TRAb前体细胞频率 (5 .3% )与正常无差异 ,另 1例TRAb前体细胞频率 (10 .7% )高于正常对照。EBV转化的TRAb前体细胞以分泌IgM型抗体为主。

关键词： Graves'病促甲状腺素受体自身抗体 B淋巴细胞前体细胞 TRAb