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凝血酶在脑出血后脑损伤过程中促进细胞自噬性死亡的研究

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中华实验外科杂志 2014年第2期31卷 322-324页

作者：胡枢坤吴靖宇黄峰平复旦大学附属华山医院神经外科上海200040

目的探讨凝血酶在脑出血后脑损伤过程中与细胞自噬性死亡的关系.方法制作大鼠脑出血模型,干预组同时注射凝血酶抑制剂水蛭素.制作大鼠凝血酶脑损伤模型,对照组注射同体积生理盐水,应用免疫组织化学染色和Western blot检测自噬相关指标... 详细信息

目的探讨凝血酶在脑出血后脑损伤过程中与细胞自噬性死亡的关系.方法制作大鼠脑出血模型,干预组同时注射凝血酶抑制剂水蛭素.制作大鼠凝血酶脑损伤模型,对照组注射同体积生理盐水,应用免疫组织化学染色和Western blot检测自噬相关指标,电镜直接观察自噬细胞.结果 Western blot检测提示,脑出血大鼠注射水蛭素后的微管相关蛋白l轻链3（LC3）Ⅱ/LC3 Ⅰ为1.030±0.170,组织蛋白酶D（Cathepsin D）为（6.63±1.22）像素,低于单纯脑出血大鼠LC3Ⅱ/LC3 Ⅰ的1.410±0.080和Cathepsin D的9.12±0.72;大鼠注射凝血酶后的LC3Ⅱ/LC3 Ⅰ为0.730±0.070,Cathepsin D为10.34±2.22,高于对照组大鼠LC3Ⅱ/LC3 Ⅰ的0.402±0.104和Cathepsin D的4.94±1.11;电镜下可在凝血酶处理大鼠脑内检测到大量自噬细胞.结论凝血酶可以促进大鼠脑出血后细胞自噬性死亡的激活.

关键词：脑出血脑损伤凝血酶自噬

凝血酶体外促进肺癌细胞Glc-82周期进程和增殖及其分子机制

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军事医学 2012年第2期36卷 128-132页

作者：许芝山朱凌云王秀冬赵云峰于爱平曲阜师范大学生命科学学院山东曲阜273165 军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京100850

目的探讨凝血酶体外促进肺癌细胞Glc-82周期进程和增殖及其作用机制。方法采用CCK8法检测凝血酶(thrombin)对Glc-82细胞增殖活性的影响,确定其量效和时效关系;利用碘化丙锭(propidium iodide,PI)单染和AnnexinⅤ-FITC/PI双染在流式细胞... 详细信息

目的探讨凝血酶体外促进肺癌细胞Glc-82周期进程和增殖及其作用机制。方法采用CCK8法检测凝血酶(thrombin)对Glc-82细胞增殖活性的影响,确定其量效和时效关系;利用碘化丙锭(propidium iodide,PI)单染和AnnexinⅤ-FITC/PI双染在流式细胞仪上检测细胞周期和凋亡;以荧光实时定量PCR检测10号染色体上与张力蛋白同源缺失的磷酸酶基因(phosphatase and tensin homologue deleted on chromatosome 10,PTEN)mRNA水平的变化,免疫印迹法检测PTEN蛋白表达和AKT磷酸化水平的变化。结果凝血酶(0.5和1.0 U/ml)可以有效促进细胞的增殖(P凝血酶(0.5 U/ml)促进Glc-82细胞由G1期向S期转化,可以抑制PTEN的表达,提高AKT磷酸化水平,但对细胞凋亡没有影响。结论凝血酶(0.5 U/ml)可以促进肺癌细胞Glc-82周期进程和细胞增殖,可能系通过PTEN/PI3K/AKT信号分子途径发挥作用。

关键词：凝血酶细胞增殖细胞周期细胞凋亡 PTEN

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凝血酶、胸腺肽和转移因子的低温量热学研究

化学通报 1994年第4期 44-45页

作者：刘云娜谈夫中国科学院化学研究所

凝血酶、胸腺肽和转移因子的低温量热学研究刘云娜，谈夫（中国科学院化学研究所，北京１０００８０）凝血酶、胸腺肽和转移因子是生化试剂，也是３种药物，在制备过程中需要冷冻干燥，传统的做法是将药物水溶液降到一个很低的温度，以... 详细信息

凝血酶、胸腺肽和转移因子的低温量热学研究刘云娜，谈夫（中国科学院化学研究所，北京１０００８０）凝血酶、胸腺肽和转移因子是生化试剂，也是３种药物，在制备过程中需要冷冻干燥，传统的做法是将药物水溶液降到一个很低的温度，以确保药物水溶液的结晶。为研究这些药...

关键词：凝血酶胸腺肽转移因子量热学

凝血酶、花生四烯酸及阿司匹林对中性粒细胞与血小板之间粘附的影响

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中国病理生理杂志 2003年第1期19卷 107-109页

作者：吴蓝鸥沈志强吴平陈植和刘吉开昆明医学院基础药学院药理学教研室云南昆明650031 云南省天然药物药理学重点实验室昆明医学院云南昆明650031 昆明医学院第二附属医院耳鼻咽喉科云南昆明650101 中科院昆明植物研究所开放实验室云南昆明650204

目的 :探讨不同浓度的凝血酶、花生四烯酸 (AA)和阿司匹林对大鼠血小板与中性粒细胞之间粘附作用的影响。方法 :应用改良的Hamburger等和沈志强等方法观察大鼠血小板与中性粒细胞之间的粘附作用。结果 :凝血酶在 50U/L就能促进血小板中... 详细信息

目的 :探讨不同浓度的凝血酶、花生四烯酸 (AA)和阿司匹林对大鼠血小板与中性粒细胞之间粘附作用的影响。方法 :应用改良的Hamburger等和沈志强等方法观察大鼠血小板与中性粒细胞之间的粘附作用。结果 :凝血酶在 50U/L就能促进血小板中性粒细胞之间的粘附 ,且随浓度增加而增大 ,在 30 0U/L时达最大作用 ,再随着浓度的增加 ,粘附率反而下降。 2 5μmol/L的AA即表现为促进细胞间粘附作用 ,并随浓度的增加而增强 ,于 1 0 0μmol/L时达最大作用 ,若再增加浓度 ,则粘附率明显下降 ;阿司匹林对上述两种血小板激活剂引起的血小板 -中性粒细胞间的粘附具有明显抑制作用 ,且呈浓度相关性 ,其IC50 分别为 62 9和 51 4μmol/L。结论 :凝血酶和AA在一定范围内呈浓度依赖性促进血小板 -中性粒细胞的粘附作用 ,但浓度再增加 ,则粘附率反而下降 ;阿司匹林可明显抑制凝血酶和AA引起的血小板

关键词：凝血酶花生四烯酸阿司匹林中性粒细胞血栓性疾病血小板粘附

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注射用尖吻蝮蛇凝血酶对兔凝血功能的影响

中国药理学与毒理学杂志 2013年第1期27卷 43-47页

作者：樊华张鹏康强王秀英辽宁省食品药品检验所辽宁沈阳110023 沈阳市食品药品检验所辽宁沈阳110000

目的研究注射用尖吻蝮蛇凝血酶(Hem)对兔凝血功能的影响,为临床应用提供实验依据。方法于日本大耳白兔耳静脉分别一次性iv给予Hem 0.25,0.5和1.0 U·kg-1和阳性对照药注射用血凝酶(HAI)1.0克氏单位(KU)·kg-1,于给药前(0 min)和给药后10... 详细信息

目的研究注射用尖吻蝮蛇凝血酶(Hem)对兔凝血功能的影响,为临床应用提供实验依据。方法于日本大耳白兔耳静脉分别一次性iv给予Hem 0.25,0.5和1.0 U·kg-1和阳性对照药注射用血凝酶(HAI)1.0克氏单位(KU)·kg-1,于给药前(0 min)和给药后10 min,30 min,2 h和12 h分别采血,应用Lee-White试管法测定全血凝血时间(CT),血球计数仪测定血小板计数(PLT),C2000-4高性能血凝仪测定凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、血浆纤维蛋白原(FIB)和鞣花酸活化部分凝血活酶时间(APTT)。结果正常对照组不同时间点各指标均无明显变化。与给药前比较,CT在给予Hem 0.25,0.5和1.0 U·kg-1和HAI 1.0 KU·kg-1后10 min～12 h明显缩短(P凝血作用,TT缩短可持续12 h。

关键词：尖吻蝮蛇凝血酶凝血酶凝血功能试验

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凝血酶在中枢神经系统中的作用

中国危重病急救医学 2007年第6期19卷 382-384页

作者：杨文琼（综述）孙圣刚（审校）郧阳医学院附属东风医院神经内科湖北十堰442008 华中科技大学同济医学院附属协和医院神经内科湖北武汉430022

凝血酶不仅是凝血级联反应中的关键酶，且能与多种类型细胞反应而引起广泛的细胞生物学效应。凝血酶对神经系统，尤其是中枢神经系统的作用正日益受到广泛的重视。凝血酶的神经作用机制较为复杂，低浓度时有细胞保护作用，高浓度时则有... 详细信息

凝血酶不仅是凝血级联反应中的关键酶，且能与多种类型细胞反应而引起广泛的细胞生物学效应。凝血酶对神经系统，尤其是中枢神经系统的作用正日益受到广泛的重视。凝血酶的神经作用机制较为复杂，低浓度时有细胞保护作用，高浓度时则有细胞毒性作用，但具体机制尚未完全阐明，现对近年来凝血酶相关研究进展进行综述。

关键词：凝血酶凝血酶受体神经毒性神经保护

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凝血酶诱导皮质神经元凋亡及其机制研究

中华实验外科杂志 2004年第12期21卷 1508-1510页

作者：曾非余绍祖陈谦学武汉大学人民医院神经精神病研究所 430060 武汉大学人民医院神经外科 430060

目的　研究凝血酶 (Tm )诱导大鼠脑皮质神经元凋亡的机制及组织型谷氨酰胺转移酶 (tTG)的作用。方法　不同浓度Tm单独或与PAR 1受体抑制剂组织蛋白酶 (CAT)G一起处理原代培养大鼠脑皮质神经元 ,流式细胞仪和Hoechest荧光检测细胞凋亡 ;... 详细信息

目的　研究凝血酶 (Tm )诱导大鼠脑皮质神经元凋亡的机制及组织型谷氨酰胺转移酶 (tTG)的作用。方法　不同浓度Tm单独或与PAR 1受体抑制剂组织蛋白酶 (CAT)G一起处理原代培养大鼠脑皮质神经元 ,流式细胞仪和Hoechest荧光检测细胞凋亡 ;免疫荧光染色和微量滴定法检测细胞内tTG酶蛋白表达和酶活性。结果　Tm能剂量依赖性诱导脑皮质细胞凋亡 ,0 .62 5U /mTm诱导的细胞凋亡率为 10 .0 % ,细胞内tTG酶活性为 (11.3± 0 .2 )mU/mg ;5U/mlTm引起的凋亡率增至 3 1.0 % ,tTG酶活性亦升至 (3 1.1± 0 .9)mU /mg ,同时免疫荧光也检测到酶蛋白表达。结论　Tm通过PAR 1受体诱导脑皮质神经元凋亡 ,tTG可能参加胞浆内信号传导途径。

关键词：凝血酶皮质神经元大鼠神经元凋亡组织型谷氨酰胺转移酶信号传导

凝血酶对人肝癌细胞株HepG_2增殖影响及诱导凋亡作用研究

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第三军医大学学报 2009年第23期31卷 2355-2357页

作者：丁俊卓忠雄张霞周丽第三军医大学新桥医院超声科全军医学超声专科中心重庆400037 重庆大学生物工程学院生命科学实验教学中心重庆400040

目的观察凝血酶对人肝癌细胞株HepG2增殖的影响及其诱导凋亡的作用。方法体外培养人肝癌细胞HepG2,MTT法观测不同浓度凝血酶在不同时间点对肝癌细胞增殖的影响,TUENL法检测其诱导凋亡作用。结果高浓度凝血酶对肝癌细胞增殖有明显抑制作... 详细信息

目的观察凝血酶对人肝癌细胞株HepG2增殖的影响及其诱导凋亡的作用。方法体外培养人肝癌细胞HepG2,MTT法观测不同浓度凝血酶在不同时间点对肝癌细胞增殖的影响,TUENL法检测其诱导凋亡作用。结果高浓度凝血酶对肝癌细胞增殖有明显抑制作用(P凝血酶能够诱导肝癌细胞凋亡,当浓度大于100U/ml且作用时间大于48h后,各组凋亡指数无显著性差异(P>0.05)。结论高浓度凝血酶能够明显抑制体外生长的人肝癌细胞株HepG2并诱导肝癌细胞凋亡,且存在一定时间(48h内)及浓度(﹤100U/ml)依赖性。

关键词：凝血酶肝癌细胞培养凋亡

凝血酶注射封闭股动脉假性动脉瘤对机体凝血系统的影响

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中国循环杂志 2004年第2期19卷 117-119页

作者：晋军黄岚覃军宋耀明李爱民耿召华周小波于学军林春梅高云华卓忠雄中国人民解放军第三军医大学新桥医院全军心血管内科中心重庆市400037 中国人民解放军第三军医大学新桥医院超声诊断室重庆市400037

目的 :了解超声引导下注射凝血酶 (UGTI)治疗医源性股动脉假性动脉瘤 (PS)对机体凝血指标的影响 ,评价超声引导下注射凝血酶治疗PS的可行性。方法 :15例经股动脉径路选择性冠状动脉 (冠脉 )造影和冠脉介入术后医源性股动脉PS患者接受了... 详细信息

目的 :了解超声引导下注射凝血酶 (UGTI)治疗医源性股动脉假性动脉瘤 (PS)对机体凝血指标的影响 ,评价超声引导下注射凝血酶治疗PS的可行性。方法 :15例经股动脉径路选择性冠状动脉 (冠脉 )造影和冠脉介入术后医源性股动脉PS患者接受了超声引导下注射凝血酶治疗。男性 5例 ,女性 10例 ,平均年龄 (68 5± 12 0 )岁 ,选择性冠脉造影 1例 ,经皮冠脉介入 14例。单腔的单纯型PS 9例 ,2腔或 3腔的复杂型PS 6例。分析PS接受凝血酶治疗剂量、治疗结果以及机体凝血指标。注射凝血酶前、注射凝血酶后 2 4小时、注射凝血酶后 5～ 7天测定了以下指标 :血小板计数、红细胞压积、血红蛋白、活化的凝血激酶时间、凝血酶原时间、凝血酶时间、纤维蛋白原及二维超声心动图检查。结果 :共注射凝血酶 2 1次 ,平均每次注射凝血酶剂量 ,单腔为 (186± 12 0 )IU ,双腔或多腔为 (3 88± 15 0 )IU。 9例单纯型PS患者全部一次成功 ;6例双腔或多腔的复杂型PS患者 4例一次成功 ,2例复杂型PS患者出现“再通” ,经重复注射凝血酶后 ,封闭成功。无一例出现其他部位血栓形成、感染、过敏等并发症。注射凝血酶前后 ,机体各项凝血指标间相比无显著差异。结论 :超声引导下注射凝血酶治疗股动脉PS安全有效 ,PS瘤腔内局部注射凝血酶对机体凝?

关键词：凝血酶注射封闭股动脉假性动脉瘤凝血系统