检索结果-南通市图书馆

生物化学与生物物理进展 1995年第4期22卷 322-326页

作者：卢一凡邓继先肖成祖马清钧北京军事医学科学院生物工程研究所

综述了内含子在转基因动物基因表达中的作用，对内源性内含子和异源内含子对转基因表达的影响进行分析，讨论了内含子提高转基因动物基因表达效率的三种可能机制，并指出在表达载体构建中应考虑到内含子的重要性．

关键词：转基因动物内含子基因表达基因工程

酵母基因上游与内含子可能存在的转录协同作用

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生物化学与生物物理进展 2005年第1期32卷 46-52页

作者：张昆林张静罗静初北京大学生物信息中心北京大学生命科学学院蛋白质工程和植物基因工程国家重点实验室北京100871 云南大学统计系云南大学应用统计中心昆明650091

前期研究表明,酵母高转录基因内含子与低转录基因内含子的序列结构有较大差异,高转录基因内含子中存在一些潜在的正调控位点,而且这些内含子非常靠近基因上游区,有的内含子甚至位于5'-UTR区. 这些结果提示,高转录基因内含子可能参与转... 详细信息

前期研究表明,酵母高转录基因内含子与低转录基因内含子的序列结构有较大差异,高转录基因内含子中存在一些潜在的正调控位点,而且这些内含子非常靠近基因上游区,有的内含子甚至位于5'-UTR区. 这些结果提示,高转录基因内含子可能参与转录调控,并可能与上游转录调控有协同作用. 为探索内含子与上游区的协同作用,将基因上游序列(翻译起始点上游800 bp或两个相邻基因之间部分)取出,仍使用寡核苷酸频率比较方法,抽提出高转录基因上游区可能的转录正调控元件,这些元件与实验所得结果吻合得较好. 然后定义“寡核苷酸对”,其中一个位于上游区,另一个位于内含子,对“最近距离”在一定范围内(84 bp)的寡核苷酸对进行分析,抽提出匹配基因数显著高于随机匹配数的寡核苷酸对(主要是四核苷酸对和五核苷酸对),分析这些寡核苷酸对的相互作用模式(位置分布及可能的作用因子,如RAP1,ABF1和TAF等),获得了酵母基因上游与内含子之间可能存在的一些转录协同作用模式. 这些结果有助于对基因转录调控机制的认识.

关键词：基因上游内含子寡核苷酸对协同作用酵母基因

猴附睾特异性表达基因LCN6第5号内含子的克隆及分析

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华东理工大学学报（自然科学版） 2005年第3期31卷 305-308页

作者：沈佳张永莲刘强赵健华东理工大学生物工程学院上海200237 中国科学院上海生物化学与细胞研究所上海200031

用PCR法扩增了猴LCN6基因第5号内含子区的基因组DNA片断,并将该片断克隆到T-载体中,用SouthernBlot的方法鉴定阳性克隆。经测序后与人LCN6基因的第5号内含子相比较,两者的同源性达到了87%。根据对已有小鼠,大鼠,猴及人LCN6基因第5号内含... 详细信息

用PCR法扩增了猴LCN6基因第5号内含子区的基因组DNA片断,并将该片断克隆到T-载体中,用SouthernBlot的方法鉴定阳性克隆。经测序后与人LCN6基因的第5号内含子相比较,两者的同源性达到了87%。根据对已有小鼠,大鼠,猴及人LCN6基因第5号内含子DNA序列比较,可知在LCN6基因的进化中由于基因组DNA序列,特别是剪切位点的改变使得原本在小鼠中转录的一个转录子mLCN6β在大鼠、猴及人中不被转录。

关键词：附睾 LCN6 内含子 PCR 进化

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一类新内含子的研究状况

生物化学与生物物理进展 1997年第6期24卷 496-499页

作者：刘晓琼施先宗华中师范大学昆虫学研究所武汉430079

在真核细胞基因组中发现一类新内含子———AT AC内含子 ,除结构特征与普遍存在的核mRNA前体内含子有明显不同外 ,剪接机制上也存在一定差异 .文章介绍了该内含子的分布 ,结构特征及剪接机理。

关键词：内含子 AT-AC内含子主内含子分子生物化学

内含子A提高分枝杆菌热休克蛋白65 DNA疫苗的免疫原性

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中华预防医学杂志 2012年第1期46卷 58-63页

作者：吴娟马辉范小勇曲勍罗玉萍 Douglas B．Lowrie 复旦大学附属上海市公共卫生临床中心科学研究部上海201508 南昌大学生命科学与食品工程学院

目的探讨以内含子A增强外源抗原在真核细胞中的表达效率及其对DNA疫苗在小鼠中免疫原性的影响。方法以分枝杆菌热休克蛋白65（Hsp65）为模式抗原，将其分别克隆入含有内含子A和不含内含子A的真核表达载体pCMV4．0和pVAX1，将表达Hsp65... 详细信息

目的探讨以内含子A增强外源抗原在真核细胞中的表达效率及其对DNA疫苗在小鼠中免疫原性的影响。方法以分枝杆菌热休克蛋白65（Hsp65）为模式抗原，将其分别克隆入含有内含子A和不含内含子A的真核表达载体pCMV4．0和pVAX1，将表达Hsp65的不同重组质粒瞬时转染人胚肾上皮细胞系293T并免疫接种BALB／c小鼠，应用ELISA分析其所诱导产生的抗原特异性抗体水平及亚类，并以酶联免疫斑点试验（ELISPOT）和胞内细胞因子染色技术（ICS）分析其诱导产生的细胞免疫应答反应。结果含有内含子A的重组表达质粒pCMV4．0hsp65较之不含内含子A的pVAX1hsp65在293T细胞中的抗原表达量更高，免疫小鼠6周后诱导产生的抗-Hsp65特异性总IgG抗体水平（3．76±0．23对3．15±0．22，P〈0．01）和IgG2a／IgG1比值（4．08±0．04对2．234-0．12，P〈0．01）也更高，差异有统计学意义；分泌γ-干扰素（IFN-γ）的CD4^＋T淋巴细胞频率[（2．0±0．058）％对（1．5±0．087）％，t=4．804，P〈0．01]和CD8^＋T淋巴细胞频率[（0．6±0．058）％对（1．0±0．115）％，t=3．098，P〈0．05]增加，差异有统计学意义，提示其诱导产生了增强的Thl型免疫应答。结论内含子A可增强分枝杆菌Hsp65在真核细胞中的表达效率并可提高DNA疫苗在小鼠中的免疫原性。

关键词：内含子疫苗 DNA 免疫热休克蛋白质类

酵母基因内含子中二聚体寡核苷酸转录调控位点的统计分析

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生物化学与生物物理进展 2004年第5期31卷 449-454页

作者：胡俊张静云南大学应用统计中心

对高效和低效转录酵母基因内含子序列中寡核苷酸的出现频率进行对照分析 ,结果显示高效和低效内含子序列的结构有差异 ,而且高效转录内含子序列含有较多潜在的转录因子结合位点 .观察实验获得的转录调控位点 ,发现许多调控位点不是相邻... 详细信息

对高效和低效转录酵母基因内含子序列中寡核苷酸的出现频率进行对照分析 ,结果显示高效和低效内含子序列的结构有差异 ,而且高效转录内含子序列含有较多潜在的转录因子结合位点 .观察实验获得的转录调控位点 ,发现许多调控位点不是相邻接的寡核苷酸 ,而是由一对保守寡核苷酸构成 ,这对寡核苷酸被一段长度固定的非保守区域间隔开 .于是对此形式的二聚体寡核苷酸 (dyad)在高效和低效内含子序列中出现的频率进行统计比较分析 ,抽提出在高效内含子组出现的频率显著高于在低效内含子组出现频率的二聚体寡核苷酸 ,分析这些二聚体寡核苷酸在两组内含子序列中的分布特征 ,并对照实验结果。

关键词：酵母内含子二聚体寡核苷酸频率分析转录调控位点

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真核生物mRNA二级结构与内含子剪接

生物化学与生物物理进展 1999年第4期26卷 362-366页

作者：张静刘次全云南大学统计系昆明650091 中国科学院昆明动物研究所昆明650223

对６８个外显子内含子外显子序列片段以及相应的外显子外显子序列片段的二级结构进行分析后发现，内含子５′端和３′端的碱基Ｇ（剪接位点）中大约９０％位于二级结构的环区或是茎区的端部并靠近环，而且位于环区的Ｇ ... 详细信息

对６８个外显子内含子外显子序列片段以及相应的外显子外显子序列片段的二级结构进行分析后发现，内含子５′端和３′端的碱基Ｇ（剪接位点）中大约９０％位于二级结构的环区或是茎区的端部并靠近环，而且位于环区的Ｇ也多靠近环的基部；９２％的外显子拼接位点也有类似性质．约８２％的分枝点Ａ位于环区或环与茎的连接部位．

关键词： mRNA 外显子内含子剪接位点分枝点二级结构

内含子方向对MAR表达载体重组CHO细胞转基因表达的调控作用

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四川大学学报（医学版） 2016年第2期47卷 189-191,243页

作者：李琴赵春澎王小引孙秋丽王天云新乡医学院分析测试实验室新乡453003 新乡医学院生物化学与分子生物学教研室新乡453003

目的分析内含子方向对核基质结合区(matrix attachment region,MAR)表达载体在重组中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)细胞中对转基因表达水平的影响。方法 PCR扩增β-珠蛋白MAR,克隆至表达载体上,构建含MAR表达载体,将载体上一... 详细信息

目的分析内含子方向对核基质结合区(matrix attachment region,MAR)表达载体在重组中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)细胞中对转基因表达水平的影响。方法 PCR扩增β-珠蛋白MAR,克隆至表达载体上,构建含MAR表达载体,将载体上一段内含子序列酶切正向、反向连接到载体上。酶切和测序鉴定正确后,转染中国仓鼠卵巢CHO细胞,G418筛选稳定转化的细胞株,ELISA分析氯霉素乙酰转移酶(chloramphenicol acetyltransferase,CAT)基因的表达水平。结果具有正向内含子的含MAR和不含MAR的表达载体CAT基因表达水平均高于含反向内含子的表达载体(P内含子存在情况下,MAR不能提高转基因表达。结论在重组CHO细胞中,内含子的方向影响转基因表达水平,正向内含子和MAR能提高转基因表达,反向内含子不能提高转基因表达水平。

关键词：核基质结合区内含子转基因表达 CHO细胞

内含子在人凝血Ⅸ因子反转录病毒载体中的表达及剪接作用

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Acta Genetica Sinica 1998年第6期25卷 471-477页

作者：邢永娜卢大儒高晓波邱信芳薛京伦复旦大学遗传学研究所上海200433

构建了带有内含子的反转录病毒表达载体，研究内含子对hFⅨ的表达影响。反转录病毒载体经过PA317细胞包装后，稳定保留内含子是进一步研究内含子对hFⅨ表达影响的关键。首先构建了GlNaC－i－Ⅸ、GlNaC－i'-Ⅸ表达元件正向插入的反转录... 详细信息

构建了带有内含子的反转录病毒表达载体，研究内含子对hFⅨ的表达影响。反转录病毒载体经过PA317细胞包装后，稳定保留内含子是进一步研究内含子对hFⅨ表达影响的关键。首先构建了GlNaC－i－Ⅸ、GlNaC－i'-Ⅸ表达元件正向插入的反转录病毒载体。其中，GlNaC－i－Ⅸ带有源于IL－2的异源内含子，GlNaC－i'－Ⅸ带有来自hFⅨ自身的第一内含子；其中间部分顺序缺失，只包括剪接供体和剪接受体位点。用RT－PCR方法发现，反转录病毒介导基因转移的载体中的内含子都被剪切掉。为避免内含子的剪切，又构建了表达元件反向插入的反转录病毒载体GlNaC－i'－ⅨR、GlNaPAi'ⅨBAM。用同样的方法证明，反向插入载体中的内含子被保留下来。证明表达元件反向插入的反转录病毒载体可以得到稳定的含有内含子的表达载体，ELISA检测证明内含子能提高hFⅨ表达。为进一步提高hFⅨ在体外细胞和体内的表达水平提供依据。

关键词：内含子反转录病毒载体血友病B hFIX

水稻Hsp70基因第一个内含子中snoRNA基因簇的保守性及分布特点

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中山大学学报（自然科学版） 1999年第1期38卷 43-48页

作者：钟翎王诚炳屈良鹄中山大学生命科学学院

对水稻、野生稻和茭白Ｈｓｐ７０基因第一个内含子进行ＰＣＲ分析及部分序列测定，分析结果表明植物Ｈｓｐ７０基因内含子编码多个ｓｎｏＲＮＡ的基因组织具有一定的保守性和分布范围，揭示了植物内含子编码的ｓｎｏＲＮＡ在进化过程中... 详细信息

对水稻、野生稻和茭白Ｈｓｐ７０基因第一个内含子进行ＰＣＲ分析及部分序列测定，分析结果表明植物Ｈｓｐ７０基因内含子编码多个ｓｎｏＲＮＡ的基因组织具有一定的保守性和分布范围，揭示了植物内含子编码的ｓｎｏＲＮＡ在进化过程中具有比脊椎动物和酵母更加丰富的多样性和移动性．

关键词： Hsp70基因内含子 snoRNA基因簇水稻保守性