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IGSF10通过抑制FAK/PI3K/AKT信号通路降低右美托咪定对乳腺癌促进作用的研究

中华肿瘤防治杂志 2022年第14期29卷 1052-1061页

作者：吴娜萍张磊方琦王磊苏州大学附属第三医院乳腺外科江苏常州213000

目的探讨免疫球蛋白超家族成员10(IGSF10)对右美托咪定(DEX)干预的乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭、上皮细胞-间充质转化(EMT)的影响及作用机制。方法以人正常乳腺上皮细胞MCF-10A,人乳腺癌细胞MCF-7、ZR-75-1、MDA-MB-231和MDA-MB-415为... 详细信息

目的探讨免疫球蛋白超家族成员10(IGSF10)对右美托咪定(DEX)干预的乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭、上皮细胞-间充质转化(EMT)的影响及作用机制。方法以人正常乳腺上皮细胞MCF-10A,人乳腺癌细胞MCF-7、ZR-75-1、MDA-MB-231和MDA-MB-415为研究对象,定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白质印迹法检测IGSF10在细胞中的表达。选取IGSF10表达最低的细胞株为后续实验的研究对象。分为空白对照组、过表达阴性对照组和IGSF10过表达组,用于研究IGSF10对乳腺癌细胞恶性生物学行为的影响;分为空白对照组、DEX组、DEX+过表达阴性对照组和DEX+IGSF10过表达组,用于研究IGSF10对DEX诱导的乳腺癌细胞的影响。IGSF10过表达质粒载体转染乳腺癌细胞;细胞计数盒8(CCK8)、克隆形成实验、划痕实验、Transwell小室实验分别检测IGSF10对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响;蛋白质印迹法检测IGSF10对增殖细胞核抗原(PCNA)、Ki-67、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、E-钙黏蛋白(E-cadberin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、黏着斑激酶(FAK)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)和蛋白激酶B(AKT)表达的影响。结果与人正常乳腺上皮细胞MCF-10A相比,乳腺癌细胞系MCF-7(0.66±0.06和0.76±0.07)、ZR-75-1(0.60±0.04和0.69±0.05)、MDA-MB-231(0.31±0.04和0.38±0.06)和MDA-MB-415(0.39±0.03和0.43±0.05)中IGSF10 mRNA和蛋白表达水平降低(F值分别为105.80和66.41,均P10表达最低的MDA-MB-231细胞株进行后续实验。与空白对照组和过表达阴性对照组相比,IGSF10过表达组24和48 h细胞活力(F_(24 h)=35.84,F_(48 h)=28.30,均P蛋白表达下调(F值分别为20.68、22.58、38.49、31.93、35.49、28.33、78.22、52.17和10.60,均P蛋白表达上调,F=17.15,P=0.003。与空白对照组相比,DEX组24和48 h细胞活力、克隆数量、细胞迁移和侵袭能力均增加,PCNA、Ki-67、MMP-2、MMP-9、N-cadherin、Vimentin、磷酸化(p-)FAK/FAK、p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT蛋白表达上调,且E-cadherin蛋白表达下调。IGSF10过表达部分逆转了DEX对MDA-MB-231细胞的增殖、迁移、侵袭和EMT的影响。结论IGSF10可能通过调节FAK/PI3K/AKT信号通路抑制乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和EMT,并且逆转了DEX对乳腺癌细胞恶性行为的促进作用。

关键词：乳腺癌免疫球蛋白超家族成员10 右美托咪定 FAK/PI3K/AKT信号通路增殖侵袭迁移

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