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PPP2R5C与儿童急性t淋巴细胞白血病Molt-4细胞活性及Hsp90-GR信号关系的研究

中国实验血液学杂志 2022年第1期30卷 84-91页

作者：刘蕾李海涛郑华月党惠兵南阳医学高等专科学校第一附属医院儿二科河南南阳473000 南阳医学高等专科学校第一附属医院血液内科河南南阳473000

目的:探讨PPP2R5C对儿童急性t淋巴细胞白血病Molt-4细胞活性的影响及其相关机制。方法:通过靶向PPP2R5C基因的小干扰RNA(si RNA)技术下调Molt-4细胞中PPP2R5C的表达,同时设置空白对照组、阴性对照组及17-DMAG组,其中阴性对照组转染si RN... 详细信息

目的:探讨PPP2R5C对儿童急性t淋巴细胞白血病Molt-4细胞活性的影响及其相关机制。方法:通过靶向PPP2R5C基因的小干扰RNA(si RNA)技术下调Molt-4细胞中PPP2R5C的表达,同时设置空白对照组、阴性对照组及17-DMAG组,其中阴性对照组转染si RNA-NC,17-DMAG组使用终浓度为6.4μmol/L的热休克蛋白90(HSP90)抑制剂17-DMAG处理细胞48 h,采用实时荧光定量PCR(Rt-q PCR)和免疫印迹法(Western blot)检测转染效率;CCK-8法检测各组细胞增殖活性,Ed U检测各组细胞增殖水平,流式细胞术检测各组细胞周期分布比例,Annexin V-FItC/PI染色检测细胞凋亡,Rt-q PCR和Western blot检测各组细胞中HSP90和糖皮质激素受体(GR)的表达变化。结果:Molt-4细胞转染si RNA-PPP2R5C后,细胞中PPP2R5C m RNA与蛋白表达均明显下调,与空白对照组和si-NC组相比有显著性差异(P细胞的增殖活性明显降低(P细胞率明显减少(P细胞比例减少而G2期细胞比例增加(P细胞凋亡率也明显增加(P细胞中,PPP2R5C m RNA与蛋白表达较空白对照组和si-NC组明显下调(P细胞中PPP2R5C m RNA与蛋白表达较空白对照组和si-NC组也明显下调(P儿童急性t淋巴细胞白血病Molt-4细胞的活性,使细胞发生G2期阻滞,并促进细胞凋亡,其机制可能与抑制Hsp90-GR信号途径相关。

关键词：儿童急性t淋巴细胞白血病 PPP2R5C 细胞活性热休克蛋白90 糖皮质激素受体

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Ig/tCR基因重排在儿童急性t淋巴细胞白血病中的表达模式特点

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中国循证儿科杂志 2019年第2期14卷 106-111页

作者：王婵娟崔蕾李伟京赵晓曦高超吴敏媛王天有李志刚国家儿童医学中心、首都医科大学附属北京儿童医院、北京市儿科研究所、血液疾病研究室北京100045 国家儿童医学中心、首都医科大学附属北京儿童医院、血液肿瘤中心、儿童血液病与肿瘤分子分型北京市重点实验室、儿科学国家重点学科、儿科重大疾病研究教育部重点实验室北京100045

目的:探讨免疫球蛋白(Ig)/t细胞受体(tCR)基因重排在儿童急性t淋巴细胞白血病(t-ALL)中的表达模式特点及其与临床生物学特征的相关性。方法:回顾性纳入首都医科大学附属北京儿童医院(我院)2005年1月1日至2008年12月31日收治的初治t-ALL... 详细信息

目的:探讨免疫球蛋白(Ig)/t细胞受体(tCR)基因重排在儿童急性t淋巴细胞白血病(t-ALL)中的表达模式特点及其与临床生物学特征的相关性。方法:回顾性纳入首都医科大学附属北京儿童医院(我院)2005年1月1日至2008年12月31日收治的初治t-ALL患儿,分析其初诊时骨髓单个核细胞的Ig/tCR基因重排情况,根据重排情况分为阳性组和阴性组,比较不同组别的临床生物学特征。结果:①52例儿童t-ALL中男37例(71.2%),入院时中位年龄8.0(1.8~16.0)岁,初诊时WBC中位数为140.5(2.7~667.1)×10^9·L^-1,中危38例(73.1%)、高危14例(26.9%)。中位随访时间136.3(1.2~171.7)个月,长期完全缓解38例(73.1%)、复发10例(19.2%),其他原因死亡4例(7.7%)。②tCRB、tCRG、tCRD和IgH克隆性基因重排的发生率分别为85%、85%、38%和21%,94%的患儿检出至少1种基因重排,88%的患儿检出至少2种基因重排。tCRB、tCRD、tCRG和IgH重排分别以完全性Vβ-(Dβ)-Jβ、Vδ-Jδ、VγⅠ-Jγ1.3/2.3和DH-JH不完全重排为主。各种重排的胚系片段使用和连接区序列极具多样性。③10例复发患儿中有6例检测了复发时的Ig/tCR基因重排模式,4例与初诊时完全一致,2例发生改变。④SIL-tAL1融合基因阳性率在11例IgH重排阳性患儿中0%(0/14),在41例IgH重排阴性患儿中为34.1%(14/41),P=0.025。⑤tCRB基因重排阳性组高危比例(20.5%,9/44)低于阴性组(62.5%,5/8),P=0.025。tCRB或tCRG基因重排阳性组第33d缓解率(89.4%,42/44)高于阴性组(10.6%,5/8),P=0.022,第78dMRD水平≥10^-3的比例(10.8%,4/37)低于阴性组(50.0%,3/6),P=0.045。结论:儿童t-ALL初诊时Ig/tCR克隆性基因重排的胚系片段使用和连接区序列极具多样性,有助于进一步性MRD检测标志的筛选。

关键词： t细胞受体免疫球蛋白基因重排儿童急性t淋巴细胞白血病

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Fzd6在儿童急性t淋巴细胞白血病中的异常表达及对预后的影响

Fzd6在儿童急性T淋巴细胞白血病中的异常表达及对预后的影响

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作者：唐诗重庆医科大学

学位级别：硕士

目的:急性淋巴细胞白血病(ALL)是儿童最常见的恶性肿瘤疾病,根据受累的淋巴细胞类型不同可分为急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)和急性t淋巴细胞白血病(t-ALL)。其中,t-ALL仅占约10%5%的儿童ALL,但其5年生存率仅60%5%。因此,阐释新的t-ALL发... 详细信息

目的:急性淋巴细胞白血病(ALL)是儿童最常见的恶性肿瘤疾病,根据受累的淋巴细胞类型不同可分为急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)和急性t淋巴细胞白血病(t-ALL)。其中,t-ALL仅占约10%5%的儿童ALL,但其5年生存率仅60%5%。因此,阐释新的t-ALL发病机制及增加有效评估患儿预后的指标将有助于改进治疗方案,提高患儿生存率。方法:本研究通过提取13例t-ALL病人骨髓样本及4例对照样本单个核细胞RNA,进行全转录组测序,分析测序数据,绘制热图、采用GO分析、KEGG信号通路,筛选出病人样本中表达增高的Wnt信号通路相关Fzd6基因;分析GEO数据库全球多中心数据中t-ALL的Fzd6基因表达;采用实时荧光定量PCR、Western-blot和免疫荧光检测t-ALL病人标本和t-ALL细胞株(Jurkat、CCRF-CEM、Molt4以及Cutll1)的Fzd6蛋白表达水平;收集40例t-ALL患儿从确诊到2019年3月病历资料,统计患儿复发率及总生存率,绘制生存曲线分析Fzd6对t-ALL患儿预后的影响。结果:通过分析全转录组测序数据,发现与对照组相比,t-ALL病人骨髓细胞中Wnt通路相关基因Fzd1、Fzd2、Fzd6表达分别增高7倍、16倍和13倍,Fzd3表达下降5倍;全球多中心数据库数据显示t-ALL中Fzd6表达增高;采用实时荧光定量PCR检测14例t-ALL病人样本及t-ALL细胞株(Jurkat、CCRF-CEM、Molt4、Cutll1)的基因表达水平,发现仅Fzd6变化趋势与测序结果一致,采用Western-blot和免疫荧光检测t-ALL细胞株中Fzd6蛋白表达水平,发现其表达水平较正常t细胞增高;统计分析40例t-ALL患儿从确诊到2019年3月病历资料,发现在MRD阳性的24例患儿中,Fzd6表达增高的患儿预后较差。结论:Fzd6在儿童t-ALL中表达增高,高表达Fzd6的t-ALL患儿预后差。

关键词：卷曲蛋白6 儿童急性t淋巴细胞白血病表达预后

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IDH1-R123与Notch1突变在儿童急性t淋巴细胞白血病中的作用机制

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中国现代医生 2020年第18期58卷 15-18,22页

作者：王晓丽刘永华江锦红浙江省丽水市人民医院血液科浙江丽水323000

目的探讨IDH1-R123与Notch1双突变对儿童急性t淋巴细胞白血病(ALL)的作用及机制。方法选择2016年5月~2017年12月丽水市人民医院儿童ALL患者58例作为对象,所有患者入院后均完成IDH1-R123与Notch1双突变基因测序,确定IDH1-R123与Notch1双... 详细信息

目的探讨IDH1-R123与Notch1双突变对儿童急性t淋巴细胞白血病(ALL)的作用及机制。方法选择2016年5月~2017年12月丽水市人民医院儿童ALL患者58例作为对象,所有患者入院后均完成IDH1-R123与Notch1双突变基因测序,确定IDH1-R123与Notch1双突变在儿童急性t淋巴细胞白血病中的突变率及突变特征,入组患者均给予诱导、巩固及维持治疗,两组治疗后均完成24个月随访,比较突变儿童与非突变儿童生化指标、临床特征及预后。结果58例儿童ALL患者中33例IDH1-R123与Notch1双突变,突变率为56.90%;突变儿童血WBC计数、平均血红蛋白高于非突变儿童(P儿童平均血小板数低于非突变儿童(Ptch1突变8例,占13.79%,突变位点主要位于HD区域和PESt结构域。其中,HD突变5例,占62.50%,均为氨基酸位点为233;PESt结构域3例,占37.50%;突变儿童与非突变儿童6个月、12个月生存率无统计学意义(P>0.05);突变儿童18个月、24个月生存率低于非突变儿童(Ptch1双突变在儿童急性t淋巴细胞白血病中突变率较高,且与患者不良预后有关,有助于指导临床诊疗。

关键词： IDH1-R123突变 Notch1突变儿童急性t淋巴细胞白血病临床特征

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