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修复性牙本质形成的机理与调控

牙体牙髓牙周病学杂志 2014年第10期24卷 615-619,622页

作者：丛明宇赵亮常蓓王班超方滕娇子孙宏晨吉林大学口腔医学院吉林长春130021

修复性牙本质的形成是牙体组织重要的保护性防御行为,在牙体组织遭受龋损、外伤、严重磨耗等损伤时,对于保护牙髓的活性和功能具有重要意义。修复性牙本质形成的机制较为复杂,有多种细胞参与,并受各类因子调控。本文就修复性牙本质的形... 详细信息

修复性牙本质的形成是牙体组织重要的保护性防御行为,在牙体组织遭受龋损、外伤、严重磨耗等损伤时,对于保护牙髓的活性和功能具有重要意义。修复性牙本质形成的机制较为复杂,有多种细胞参与,并受各类因子调控。本文就修复性牙本质的形成机制及其促进因素作一综述。

关键词：修复性牙本质牙髓干细胞成牙本质细胞生长因子盖髓剂

肝细胞生长因子在大鼠修复性牙本质形成过程中的表达研究

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四川大学学报（医学版） 2007年第1期38卷 126-128页

作者：叶玲凌均棨彭栗谭红周学东四川大学华西口腔医学院牙体牙髓病研究室成都610041 中山大学光华口腔医学院

目的探讨肝细胞生长因子(HGF)在大鼠修复性牙本质形成过程中的作用。方法以窝洞预备形成大鼠修复性牙本质模型,免疫组织化学染色法检测HGF在窝洞预备后3 d、15 d、30 d的大鼠牙髓组织中的表达,采用积分光密度值(IOD)定量修复性牙本质形... 详细信息

目的探讨肝细胞生长因子(HGF)在大鼠修复性牙本质形成过程中的作用。方法以窝洞预备形成大鼠修复性牙本质模型,免疫组织化学染色法检测HGF在窝洞预备后3 d、15 d、30 d的大鼠牙髓组织中的表达,采用积分光密度值(IOD)定量修复性牙本质形成不同阶段HGF的表达。结果窝洞预备后3 d,HGF在大鼠牙髓细胞及成牙本质细胞胞浆中呈强阳性表达(IOD为8.995±0.943);窝洞预备后15 d,HGF在两种细胞的表达仍呈阳性(IOD为5.624±0.951),但弱于3 d组(P牙本质细胞胞浆中HGF均呈弱阳性表达,两者间差异无统计学意义。结论HGF参与了牙髓损伤早期修复及修复性牙本质形成的过程。

关键词：肝细胞生长因子成牙本质细胞修复性牙本质积分光密度值

I型和Ⅲ型胶原在修复性牙本质形成中的免疫定位

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实用口腔医学杂志 2000年第5期16卷 338-340页

作者：陈智樊明文张旗朱奇武汉大学口腔医学院 430079

目的 :研究 I型和型胶原在修复性牙本质形成中的免疫定位和分布特征。方法 :在大鼠第一磨牙制备单面洞 ,观察修复性牙本质形成。免疫组化 SABC法检测 I型胶原和型胶原的免疫反应。结果 :在术后 3d,修复性牙本质尚未形成。I型胶原和 ... 详细信息

目的 :研究 I型和型胶原在修复性牙本质形成中的免疫定位和分布特征。方法 :在大鼠第一磨牙制备单面洞 ,观察修复性牙本质形成。免疫组化 SABC法检测 I型胶原和型胶原的免疫反应。结果 :在术后 3d,修复性牙本质尚未形成。I型胶原和型胶原均分布于牙髓内 ,前期牙本质为弱阳性。术后 15 d,I型胶原和型胶原在牙髓细胞内呈阳性染色。I型胶原在前期牙本质中呈弱阳性。术后 30 d,I型胶原和型胶原的强阳性染色集中于已形成的修复性牙本质下的牙髓内 ,成牙本质细胞样细胞染色呈强阳性。结论 :形成修复性牙本质的成牙本质细胞样细胞合成、分泌 I型胶原和型胶原。

关键词：修复性牙本质胶原牙髓免疫组织化学

局部LPS注射法建立牙周炎动物模型及其对牙髓、修复性牙本质的影响

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局部LPS注射法建立牙周炎动物模型及其对牙髓、修复性牙本质的影响

作者：瞿凤环青岛大学

学位级别：硕士

目的：通过局部脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）（?）主射法建立一种实验性牙周炎动物模型,以明确LPS在牙周炎发生发展过程中的作用：同时观察牙周炎动物模型形成后牙髓状态及修复性牙本质的状况,以明确牙周炎时LPS对牙髓细胞及修复... 详细信息

目的：通过局部脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）（?）主射法建立一种实验性牙周炎动物模型,以明确LPS在牙周炎发生发展过程中的作用：同时观察牙周炎动物模型形成后牙髓状态及修复性牙本质的状况,以明确牙周炎时LPS对牙髓细胞及修复性牙本质的影响。方法： 1、建立牙周炎动物动物模型LPS浓度的选择选取6只大鼠以其上颌右侧为实验侧,上颌左侧为对照侧,分别在大鼠实验侧第1、2磨牙之间颊腭侧自龈沟注射0.2、2、20 mg/mL的LPS各0.1 mL,隔日一次,3次/周;对照侧同时在相同部位注射等体积生理盐水,3次/周。每周全麻后拍摄X片一次,确定牙周炎动物模型形成后,处死大鼠,记录牙周炎形成的时间及程度,参照人类牙周炎的发生发展状态,选择建立大鼠牙周炎模型合适的LPS浓度。 2、牙周炎动物模型的建立选取SD雄性大鼠20只,上颌右侧为实验侧,上颌左侧为对照侧,在大鼠实验侧第1和第2磨牙之间颊腭侧自龈沟注射LPS各0.1 mL,3次/周,记录牙龈指数,每周拍摄X片一次,确定牙周炎动物模型形成后,分别于术后3周、5周随机处死大鼠,取含上颌第1磨牙和第2磨牙的上颌骨,一部分去除牙周软组织后,测定并记录牙槽骨吸收值,用SPSS10.0计算机软件统计分析数据;另一部分制备组织切片,HE染色,观察。 3、LPS对牙髓细胞及修复性牙本质的影响大鼠牙周炎动物模型形成后,取含上颌第1磨牙和第2磨牙的上颌骨,固定、脱钙,常规制备组织切片,HE染色,观察牙髓状态及修复性牙本质的情况。结果： 1、建立牙周炎动物模型LPS浓度的选择预实验时局部注射0.2 mg/mL LPS的大鼠形成牙周炎缓慢,而20 mg/mL LPS组1周牙槽骨有吸收建立牙周炎模型,2 mg/mL LPS注射后,3周时牙槽骨轻微吸收,5周时牙槽骨吸收明显,建立模型速度与人类牙周炎相近,更接近人类牙周炎发病状态。 2、牙周炎动物模型的建立选择2 mg/mL LPS注射3周后形成牙周炎动物模型,牙龈轻微红肿,探诊出血,牙槽骨开始破坏吸收。第5周时牙槽嵴顶消失,硬骨板模糊不清;牙槽骨吸收明显,超过根长1/3但未超过根长1/2;测量牙槽骨吸收值,记录并统计分析发现,第3周和第5周时对照侧牙槽骨的吸收值无统计学意义,第3周及第5周实验侧牙槽骨吸收多于对照侧,有统计学意义,第5周时第1磨牙牙槽骨吸收多于第2磨牙牙槽骨吸收有统计学意义。病理切片发现牙周袋形成,牙槽骨内可见多处破骨细胞,牙槽嵴顶吸收低平。 3、LPS对牙髓细胞及修复性牙本质的影响大鼠牙周炎模型形成后,病理切片发现牙槽骨内可见多处破骨细胞,真性牙周袋形成;牙髓内成牙本质细胞空泡性变,成牙本质细胞减少,排列紊乱,有炎症细胞浸润（以淋巴细胞为主）,有修复性牙本质形成。结论： 1、用2 mg/mL LPS自颊腭侧龈沟注射0.1 mL,建立的牙周炎动物模型,操作简单,是研究牙周炎的良好的动物模型。 2、牙周炎时LPS可能通过注射部位处的根管侧支损伤牙髓细胞,形成修复性牙本质。

关键词：脂多糖牙周炎牙髓修复性牙本质动物模型

内毒素对大鼠牙髓组织形成修复性牙本质的影响及其机制的探讨

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内毒素对大鼠牙髓组织形成修复性牙本质的影响及其机制的探讨

作者：于晓晨青岛大学

学位级别：硕士

目的：本实验通过局部注射内毒素(lipopolysaccharide, LPS)建立实验性牙髓组织逆行性感染动物模型,观察修复性牙本质形成的情况,以及牙髓组织中RANKL蛋白、OPG蛋白及碱性磷酸酶(ALP)的表达情况,以明确LPS对牙髓组织形成修复性牙本质的... 详细信息

目的：本实验通过局部注射内毒素(lipopolysaccharide, LPS)建立实验性牙髓组织逆行性感染动物模型,观察修复性牙本质形成的情况,以及牙髓组织中RANKL蛋白、OPG蛋白及碱性磷酸酶(ALP)的表达情况,以明确LPS对牙髓组织形成修复性牙本质的影响及可能机制。方法：Wistar大鼠随机分为实验组和空白对照组,实验组于上颌右侧,第一磨牙远中颊侧龈沟注射4mg/ml内毒素0.1ml,于对侧相同位置注射等量生理盐水作为阴性对照,一周三次,持续四周以形成逆行性牙髓感染动物模型,空白对照组不作处理。形成模型后,对实验组和空白对照组进行血液以及牙髓组织内毒素浓度的检测,通过HE染色观察两组大鼠牙髓组织修复性牙本质形成情况,免疫组化方法检测牙髓组织中RANKL、OPG及ALP的表达情况。结果：实验组与空白对照组之间大鼠血液中内毒素的含量差别有显著的统计学意义,P修复性牙本质形成明显,髓腔变窄,牙本质小管排列紊乱。实验组牙髓组织细胞间质内RANKL、OPG、ALP均强阳性表达,对照组三种被测蛋白均略有着色。结论：1.内毒素在一定条件下能刺激大鼠牙髓组织,使其发生保护性反应,从而促进其矿化作用,加速修复性牙本质形成。***-OPG系统在大鼠牙髓组织中表达,当LPS介导的感染存在时表达强烈,可能在牙髓矿化作用中起一定作用。

关键词：内毒素牙髓修复性牙本质骨保护蛋白

修复性牙本质形成过程中相关信号通路研究进展

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武警后勤学院学报（医学版） 2018年第9期27卷 796-799页

作者：阙克华王芳刘杨秋天津医科大学口腔医院天津300070 天津市儿童医院天津300134

修复性牙本质是牙齿在受到外界刺激时形成的第三期牙本质,属于牙齿的自身防御及保护机制,防止外界刺激对牙齿进一步的损害。在修复性牙本质形成的过程中,修复性牙本质形成的原理和机制十分复杂,其中有多种信号通路参与,现就修复性牙本... 详细信息

修复性牙本质是牙齿在受到外界刺激时形成的第三期牙本质,属于牙齿的自身防御及保护机制,防止外界刺激对牙齿进一步的损害。在修复性牙本质形成的过程中,修复性牙本质形成的原理和机制十分复杂,其中有多种信号通路参与,现就修复性牙本质形成过程中信号通路作用机制的最新进展做一综述。

关键词：修复性牙本质成牙本质细胞信号通路

修复性牙本质形成过程中一氧化氮的功能——I:一氧化氮合成酶的表达

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临床口腔医学杂志 2007年第1期23卷 29-32页

作者：梅予锋南京医科大学口腔医学院儿童牙病科江苏南京210029

目的:观察大白鼠磨牙窝洞制备后,修复性牙本质形成过程中一氧化氮合酶NOS的表达。方法:大白鼠磨牙窝洞制备后制作冰冻切片,免疫组化染色观察成牙本质细胞与牙髓细胞中一氧化氮合酶的表达。结果:正常大白鼠磨牙中,内皮型一氧化氮合酶(eN... 详细信息

目的:观察大白鼠磨牙窝洞制备后,修复性牙本质形成过程中一氧化氮合酶NOS的表达。方法:大白鼠磨牙窝洞制备后制作冰冻切片,免疫组化染色观察成牙本质细胞与牙髓细胞中一氧化氮合酶的表达。结果:正常大白鼠磨牙中,内皮型一氧化氮合酶(eNOS)呈阳性反应,而诱导型一氧化氮合酶(iNOS)呈阴性反应。牙体制备后即刻,损伤的成牙本质细胞中两种一氧化氮合酶均呈弱阳性反应;制备1d后,在牙髓牙本质界中浸润的中性粒细胞中表现为诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的强阳性反应,并在制备3d后,扩展至全部牙髓细胞;同阶段,内皮型一氧化氮合酶(eNOS)在上述细胞中,均呈弱阳性反应。制备7d后,修复性牙本质深部成牙本质细胞中,诱导型一氧化氮合酶(iN-OS)呈阴性反应,而内皮型一氧化氮合酶(eNOS)呈阳性反应。结论:一氧化氮参与了修复性牙本质形成过程中成牙本质细胞的分化与功能调节。

关键词：一氧化氮合成酶成牙本质细胞修复性牙本质

腺病毒携带的EPO基因对修复性牙本质作用的研究

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腺病毒携带的EPO基因对修复性牙本质作用的研究

作者：柏祥娥吉林大学

学位级别：硕士

目的：龋病、牙外伤和慢性牙损伤可导致牙髓病变、根尖周炎和牙髓-牙周联合病变的发生，所以控制牙髓损伤及其促进其修复显得很重要，而修复其损伤最常见的方法是促进修复性牙本质的形成。本研究为了获得更好的盖髓材料、恢复牙髓的功... 详细信息

目的：龋病、牙外伤和慢性牙损伤可导致牙髓病变、根尖周炎和牙髓-牙周联合病变的发生，所以控制牙髓损伤及其促进其修复显得很重要，而修复其损伤最常见的方法是促进修复性牙本质的形成。本研究为了获得更好的盖髓材料、恢复牙髓的功能，以基因转染为最新研究策略，将腺病毒载体携带的促红细胞生成素（erythropoietin，EPO）基因载于胶原蛋白海绵上，置于大鼠磨牙露髓处，观察其局部成牙本质细胞的变化、牙髓自身的反应、炎症反应及修复性牙本质的形成;评估其调控修复性牙本质形成及牙髓修复的能力，探索更为安全、有效、适应范围更广的保存活髓的治疗方法和应用于临床的可行性。促红细胞生成素（EPO）是一种细胞因子，是由肝脏和成人肾脏产生的促红细胞生成的一种活性糖蛋白，能和表达于红细胞表面的受体结合，刺激骨髓中红系造血母细胞的增殖和分化。人类促红细胞生成素的分子质量在35000左右，由166个氨基酸组成，于19世纪被发现，并于20世纪80年代实现了基因重组人促红细胞生成素的生产，目前已广泛应用于临床。促红细胞生成素是一种具有多种用途的造血激素，临床上应用广泛，但是现阶段主要是利用其造血功能即能促进红系祖细胞增殖和分化，研究重点在心梗、肾衰和贫血等。近几年来，因为EPO受体的发现，在非造血功能方面被广泛应用,比如在促进骨形成上，直接通过作用于骨髓基质细胞，或间接通过造血干细胞的信号通路与骨相互作用。另研究表明它可以通过骨形成蛋白（bone morphogenetic protein，BMP）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）来促进骨形成和组织修复，现有研究表明，BMP有促进修复性牙本质形成的作用，并结合EPO可能参与牙髓炎症反应的研究，我们大胆提出假设， EPO是否在牙髓修复和再生中有潜在的作用，并通过本实验加以证明。方法：建立大鼠牙髓修复性牙本质的模型，将腺病毒携带的促红细胞生成素（EPO）基因载于胶原蛋白海绵上，然后放在大鼠磨牙的露髓处，并以生理盐水载于胶原蛋白海绵上作为对照。正常饲养动物，然后分别在术后3天、7天、14天和28天处死动物，脱钙，石蜡包埋，采用HE染色和免疫组织化学染色分析，并进行组织学观察。结果：术后3天时，实验组和对照组差异不显著。术后7天、14天和28天时，与对照组相比，实验组EPO基因在露髓处牙髓组织中表达明显。实验组可见，术后7天时，炎症反应较轻，偶有RD形成;术后14天时，成牙本质细胞样细胞反应活跃;术后14天和28天时，露髓处局部组织形成RD的能力明显提高。结论：腺病毒携带EPO基因转染作用于露髓处可促进RD形成，并可使成牙本质细胞样细胞反应活跃，坏死牙髓组织明显减少。本研究获得预期的实验结果，为临床的应用奠定了理论基础。提示EPO应用于牙髓组织能促进牙髓再生，为牙髓组织损伤的修复提供了新思路。

关键词：牙髓损伤 EPO基因前期牙本质成牙本质细胞样细胞修复性牙本质

降钙素基因相关肽阳性感觉神经对修复性牙本质形成的影响及机制研究

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降钙素基因相关肽阳性感觉神经对修复性牙本质形成的影响及机制研...

作者：詹朝宁南方医科大学

学位级别：硕士

研究背景牙齿出现龋损和外伤时,牙髓所形成的修复性牙本质(Reparative dentin,RD)可有效隔绝外来的损伤性刺激,为其恢复自身活力提供良好的环境。RD形成过程中存在多种生物学事件,如牙髓神经的分布会在外界刺激下出现变化,同时伴随着神... 详细信息

研究背景牙齿出现龋损和外伤时,牙髓所形成的修复性牙本质(Reparative dentin,RD)可有效隔绝外来的损伤性刺激,为其恢复自身活力提供良好的环境。RD形成过程中存在多种生物学事件,如牙髓神经的分布会在外界刺激下出现变化,同时伴随着神经递质和调质释放的增加;此外,牙髓内微血管也会在牙髓-牙本质复合体损伤之后出现密度和管壁通透性的改变。在各类组织中,神经可通过调节血管的形成而影响组织发育和修复过程。RD的形成过程同样有牙髓神经和血管的参与,但两者对RD形成的具体调控机制,以及两者之间是否存在调控关系仍不明确。本研究旨在揭示RD形成过程中的神经与血管生成之间的调控关系,及其对RD形成的影响。第一章修复性牙本质形成过程中神经-血管新生的时序变化目的:确定牙髓损伤修复过程中神经-血管新生-修复性牙本质形成的动态变化过程,明确神经的出芽、血管的生成以及RD的形成的时序变化。方法:1、牙本质损伤模型的构建:使用球钻于小鼠左侧下颌第一磨牙近中备洞,暴露牙本质后,使用磷酸酸蚀剂处理窝洞3 min;2、组织学染色:于术后不同的时间点(1d,3d,7d,14d,28d)取左侧下颌骨,完成脱钙处理后行石蜡切片,而后行苏木精-伊红染色以及Masson染色;3、免疫荧光染色:分别孵育神经纤维丝(Neruofilament,NF)、血小板-内皮细胞黏附分子(CD31)、内皮粘蛋白(Endomucin,EMCN)抗体和相应的荧光标记二抗。结果:1、在正常牙髓内,成牙本质细胞排列整齐。在术后第1天,损伤区的成牙本质细胞层紊乱。在术后第3天,成牙本质细胞层有序结构恢复。在术后第7天,可见RD形成,并在限定观察时长内面积逐渐增大(P牙本质发生损伤后,神经向损伤区对应的牙髓组织内出芽,早于血管生成和成牙本质细胞层的修复;新生的成牙本质细胞会排布于损伤处的牙髓-牙本质界,进而促进RD的生成。第二章去感觉/交感神经支配对修复性牙本质形成的影响目的:探讨失感觉/交感神经支配对RD形成的影响。方法:1、去下颌磨牙感觉神经支配:离断小鼠左侧下牙槽神经,术后通过纤维丝检测术侧颏部机械痛阈值;2、去下颌磨牙交感神经支配:撕脱小鼠左侧颈上交感神经节,术后观察小鼠眼睑下垂情况;3、牙本质损伤模型的构建:在去神经操作后的第4天,于双侧下颌第一磨牙近中造牙本质损伤模型;4、组织切片染色:制备牙本质损伤后不同时间点的石蜡切片。术后第3天的样本行CD31免疫荧光染色。术后第7天的样本行CD31和EMCN免疫荧光染色。术后第14和28天的样本行组织学染色。结果:1、去感觉神经支配侧颏部机械痛阈值较对侧高(P修复性牙本质形成的调控机制目的:初步探讨感觉神经支配对RD形成的调控机制。方法:1、免疫荧光染色:使用磨牙牙本质损伤切片,行P物质(Substance P,SP)、降钙素基因相关肽(Calcitoningene-relatedpeptide,CGRP)和NF免疫荧光染色;2、抑制CGRP受体:在造双侧磨牙牙本质损伤模型的前10min,使用CGRP受体抑制剂Olcegepant行鼠尾静脉注射。在术后7天内,每天使用Olcegepant行腹腔注射。另设仅注射载体的空载组;3、痛觉行为学观察:记录在牙本质损伤前1天和术后7天内,小鼠面部修整行为的时长;4、组织切片染色:制备牙本质损伤后不同时间点的石蜡切片。术后第3天的样本行CD31免疫荧光染色。术后第7天的样本行CD31和EMCN免疫荧光染色。术后第28天的样本行组织学染色。结果:1、CGRP+感觉神经密度在牙本质损伤后第3天时达到最高值(P牙本质损伤所致的疼痛反应,但其牙髓修复进程也会受到抑制。

关键词：修复性牙本质牙髓神经感觉神经降钙素基因相关肽