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中国环境科学 2020年第9期40卷 3887-3893页

作者：徐倩茹赵飞夏娜娜李欣慧高绪超杨永传毕学军青岛理工大学环境与市政工程学院山东青岛266033 山东省青岛生态环境监测中心山东青岛266000

本文总结了近年来在垃圾渗滤液和再生水生物毒性检测方面的主要体外试验模型和检测方法,并整理了这些模型和方法在生物毒性评价中的应用.目前常用的体外试验模型包括人源细胞系、其他哺乳动物细胞以及微生物细胞,相比较而言,人源细胞系... 详细信息

本文总结了近年来在垃圾渗滤液和再生水生物毒性检测方面的主要体外试验模型和检测方法,并整理了这些模型和方法在生物毒性评价中的应用.目前常用的体外试验模型包括人源细胞系、其他哺乳动物细胞以及微生物细胞,相比较而言,人源细胞系在检测结果外推至人体时具有更强的说服力,因而其应用最为广泛.体外检测方法可概括为细胞毒性、遗传毒性和内分泌干扰效应检测三个方面,其中内分泌干扰效应的研究较多集中于雌激素效应.最后,本文提出开发三维体外细胞模型、体外试验与化学分析相结合、全面分析内分泌干扰效应和建立成组体外试验体系是渗滤液和再生水生物毒性检测方法的发展方向.

关键词：垃圾渗滤液再生水生物毒性体外试验模型体外检测方法

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麻痹性贝类毒素体外生物毒性检测方法的建立

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癌变．畸变．突变 2019年第4期31卷 323-326页

作者：于志强孙运陈小青刘汉伟马中春宁波中盛产品检测有限公司/宁波海关技术中心

目的:建立麻痹性贝类毒素体外生物毒性检测方法。方法:小鼠神经干细胞(NSC)培养于96孔培养板中,至对数生长期,每孔加入170μL培养液和10μL石房蛤毒素(STX)标准品(分别为0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4ng),再加入10mmol/L的乌本苷10... 详细信息

目的:建立麻痹性贝类毒素体外生物毒性检测方法。方法:小鼠神经干细胞(NSC)培养于96孔培养板中,至对数生长期,每孔加入170μL培养液和10μL石房蛤毒素(STX)标准品(分别为0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4ng),再加入10mmol/L的乌本苷10μL及1mmol/L的藜芦碱10μL。同时设置乌本苷及藜芦碱对照孔,以及空白对照孔。CCK-8溶液孵育后用酶标仪测定各孔D(450)值,根据石房蛤毒素标准液含量与D(450)值之间的剂量反应关系,建立标准曲线。结果:培养的正常NSC第1天为单细胞悬液,第2~3天聚集成为小神经球,第4天为大神经球;加入乌本苷及藜芦碱后较多细胞出现肿胀破裂,加入STX后可见肿胀或破裂死亡的细胞,但细胞形态多为正常。并于0.2~1.0ng范围内建立了麻痹性贝类毒素体外生物毒性检测方法并建立了标准曲线,其回归方程为y=1.252+0.495x(r=0.9980,P体外生物毒性检测方法,该研究为神经性贝类毒素的体外检测相关研究奠定了基础。

关键词：麻痹性贝类毒素小鼠神经干细胞体外检测方法乌本苷藜芦碱

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新风胶囊抗氧化活性的初步研究

新风胶囊抗氧化活性的初步研究

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作者：唐利宇安徽中医药大学

学位级别：硕士

目的:1获取新风胶囊抗氧化活性最佳极性部位,并针对最佳极性部位中的抗氧化活性成分进行定性定量研究;2建立新风胶囊抗氧化活性成分的TLC图谱,以完善质量控制标准。3解决新风胶囊抗氧化活性的临床表现与药学研究的断层,为临床应用提供... 详细信息

目的:1获取新风胶囊抗氧化活性最佳极性部位,并针对最佳极性部位中的抗氧化活性成分进行定性定量研究;2建立新风胶囊抗氧化活性成分的TLC图谱,以完善质量控制标准。3解决新风胶囊抗氧化活性的临床表现与药学研究的断层,为临床应用提供更多科学依据。方法:1采用适宜的抗氧化活性评价体系,通过多种抗氧化能力体外检测方法考察,比较不同极性部位的抗氧化能力。本研究采用对新风胶囊各极性部位的自由基的清除能力及总还原能力两方面综合评价的方法,平行比较它们的抗氧化活性强弱。综合评价方法包括:DPPH自由基清除法、ABTS自由基清除法、超氧阴离子自由基清除法、羟自由基的清除法以及总还原能力的测定方法。多种方法的综合运用对不同极性部位抗氧化活性进行了研究。同时还引申测定了不同极性部位总黄酮、总酚的含量,用以探究极性部位的抗氧化组成。采用薄层色谱技术对新风胶囊最佳极性部位中抗氧化活性的成分进行检视,以加强对新风胶囊抗氧化活性的药效和物质基础的追踪。采用高效液相色谱技术对新风胶囊最佳极性部位中抗氧化活性成分进行进一步的辨识,并测定各成分含量。2采用DPPH自由基清除作用的薄层色谱-生物自显影技术,鉴识新风胶囊方中两种黄酮类抗氧化活性成分。3结合多种方法,包括新风胶囊体外抗氧化能力的测定、抗氧化成分定性定量研究、DPPH-TLC图谱法,迈出了新风胶囊抗氧化活性研究的第一步。结果:1新风胶囊乙酸乙酯极性部位具有良好的抗氧化活性,较其他极性部位抗氧化成分富集。新风胶囊乙酸乙酯极性部位,含有毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素三种抗氧化活性成分,其中每1 g新风胶囊中含有0.0222×10-4%的毛蕊异黄酮葡萄糖苷、0.0266×10-5%的毛蕊异黄酮、0.0149×10-5%的芒柄花素。同时未检测出雷公藤红素,与TLC的研究结果一致。2成功建立新风胶囊两种抗氧化活性成分(毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮葡萄糖苷)的TLC图谱,完善了质量控制标准。3本实验通过对新风胶囊抗氧化活性的初步研究,连接起抗氧化活性临床研究与药学研究的断层,为其临床应用提供了更多依据。结论:新风胶囊具有较好的抗氧化活性。在新风胶囊各极性部位中,乙酸乙酯极性部位富含多种多类抗氧化活性成分,并表现出了最强的抗氧化活性,可作为极具开发前景的新型天然有机抗氧化剂。研究表明,毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素是新风胶囊中具有抗氧化活性的成分,因此推测黄酮类成分可能是院内制剂新风胶囊发挥抗氧化作用的主要物质基础。新风胶囊抗氧化活性的初步研究为院内制剂抗氧化活性的相关研究提供了较为简单、系统的方法和思路。

关键词：新风胶囊抗氧化体外检测方法含量薄层生物自显影技术

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