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低氧诱导因子-1a对脂多糖导致的急性肺损伤NF-kB表达的影响

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中国现代医药杂志 2017年第7期19卷 21-24页

作者：江林敏鄢洁熊彬西南医科大学附属第一医院呼吸内二科四川泸州646000

目的观察大鼠脂多糖导致的急性肺损伤模型中NF-k B及低氧诱导因子-1a(HIF-1a)的表达及两者之间的相关性。方法通过往气管注入脂多糖建立急性肺损伤模型,然后于建模后的3、9、24h分别比较各组大鼠肺湿/干重比(W/D)、动脉血氧分压(PaO_2)... 详细信息

目的观察大鼠脂多糖导致的急性肺损伤模型中NF-k B及低氧诱导因子-1a(HIF-1a)的表达及两者之间的相关性。方法通过往气管注入脂多糖建立急性肺损伤模型,然后于建模后的3、9、24h分别比较各组大鼠肺湿/干重比(W/D)、动脉血氧分压(PaO_2)、肺组织病理切片和肺损伤病理评分;免疫印迹法(Western blot)检测肺组织匀浆HIF-1a浓度、酶联免疫吸附(ELISA)法测定大鼠NF-k B含量,并将NF-k B及HIF-1a做相关性分析。结果 (1)ALI组3、9、24h PaO_2均较对照组明显降低(P1a蛋白较对照组明显升高(P1a蛋白表达增加,与NF-k B等炎症因子相互作用,促进炎症的发生发展。

关键词：急性肺损伤低氧诱导因子-1a 核因子kB 炎症

SUMO-1调控低氧诱导因子-1a在低氧诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用

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SUMO-1调控低氧诱导因子-1a在低氧诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖...

作者：王静南华大学

学位级别：硕士

【目的】研究低氧对体外培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）增殖的影响，以及在低氧情况下PASMCs中的SUMO-1、HIF-1α及其下游靶基因VEGF的表达变化规律及相互关系;探讨SUMO-1对HIF-1α和VEGF基因表达的影响以及它们在低氧所致的PAS... 详细信息

【目的】研究低氧对体外培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）增殖的影响，以及在低氧情况下PASMCs中的SUMO-1、HIF-1α及其下游靶基因VEGF的表达变化规律及相互关系;探讨SUMO-1对HIF-1α和VEGF基因表达的影响以及它们在低氧所致的PASMCs增殖中的作用，进而参与低氧性肺动脉高压（HPH）的发生发展，为HPH发病机制提供新的理论依据。【方法】实验共分三个部分。(1)分离大鼠PASMCs并低氧处理：组织贴壁法分离并原代培养雄性SD大鼠PASMCs，光镜下观察细胞的形态，并通过透视电镜以及α-SM-actin的免疫细胞学法进行鉴定。将2-3代对数生长期的细胞置于37℃，含有1%O2、5%CO2、94%N2的三气培养箱中，处理不同的时间复制体外大鼠HPH分子模型。(2)检测低氧对大鼠PASMCs的影响：将细胞分别在常氧和（或）低氧情况下处理2h、6h、12h、24h、48h，用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法和增殖细胞核抗原（PCNA）的免疫细胞化学法检测低氧对细胞增殖的影响。同样方法将细胞分为常氧对照组和缺氧2h、6h、12h、24h组，逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法和Western blo（tWB）法分别检测PASMCs中SUMO-1、HIF-1α和VEGF mRNA和蛋白的表达水平。免疫细胞荧光法分别检测常氧及低氧情况下SUMO-1和HIF-1α在PASMCs中的表达情况。(3)用携带SUMO-1基因的慢病毒干预大鼠PASMCs，检测低氧对PASMCs的影响：构建携带有siRNA和真核表达SMUO-1的慢病毒，感染至PASMCs中，将细胞随机分为空白对照组、空载病毒组、沉默SUMO-1组（SUMO-1-RNAi-LV）和真核表达SUMO-1组（SUMO-1-LV），将上述几组分别在低氧情况下处理0h、2h、6h、12h、24h、48h，Brdu渗入法检测低氧对各组PASMCs的增殖的影响。再将上述各组分别常氧和缺氧处理12h，RT-PCR和WB法分别检测SUMO-1、HIF-1α和VEGF mRNA和蛋白表达情况。【结果】1.分离大鼠PASMCs并鉴定：（1）组织块贴壁法成功分离出雄性大鼠PASMCs。用含1%青霉素-链霉素、15%胎牛血清的DMEM/F12培养基原代培养，3-5d后有少量细胞从组织块周围游离出来，7-10d后细胞融合成片，呈典型“峰-谷”状分布，消化传代至第3代;（2）倒置相差显微镜下，PASMCs呈长梭形放射状生长，细胞中心有卵圆形细胞核。细胞铺满瓶壁时，形成“峰—谷”状表现。（3）α-SM-actin的免疫细胞化学显示，细胞质中有较多与细胞纵轴相平行的丝状物被染成棕黄色，阳性率达到96%以上;免疫细胞荧光显示，胞浆中有较强的红色荧光，呈与细胞纵轴平行的丝状排列，而细胞核未着色;均表明为大鼠PASMCs。（4）透视电镜下，可见细胞及胞核均呈长梭形，异染色质多;胞浆内有许多与细胞纵轴平行的肌丝，大量胞饮，肌膜下有少量密斑和密体，缺乏高尔基体。2．低氧对大鼠PASMCs的影响：（1）MTT比色法结果：常氧和低氧情况下，随着时间的递增，大鼠PASMCs的吸光度（A值）亦逐渐增加，且各时间点缺氧组A值均高于相对应的常氧组。比较缺氧组之间的差异显示：A值在缺氧12h组开始明显增高（p＜0.05），缺氧24h组达到高峰值（p＜0.05），而缺氧48h组进入平台期。（2）PCNA的免疫细胞化学法结果：随着缺氧时间的递增，PASMCs中的阳性细胞逐渐增多。且阳性细胞比率在缺氧12h组开始明显增高，与对照组比较有统计学意义（p＜0.05），缺氧24h组达到高峰值（p＜0.05），而缺氧48h组进入平台期。（3）大鼠PASMCs中的SUMO-1、VEGF mRNA在缺氧2h组表达明显增多（p＜0.05），缺氧12h组达高峰（p＜0.05），缺氧24h组趋于平台期;HIF-1α mRNA表达随着缺氧时间的递增而增加，但与对照组比较差异无显著性（P＞0.05）。（4）大鼠PASMCs中的SUMO-1、HIF-1α、VEGF蛋白表达均随着缺氧时间的递增而增加，且在缺氧12h组达到高峰值（p＜0.05），缺氧24h组趋于平台期。（5）常氧和低氧时SUMO-1均表达于大鼠PASMCs的细胞核中;而HIF-1α在常氧情况下少量表达于细胞质中，低氧时明显表达于细胞核中。3. SUMO-1基因干预后，低氧对大鼠PASMCs的影响：（1）Brdu渗入法结果显示：随着缺氧时间的递增，各组大鼠PASMCs中的阳性细胞比率均逐渐增高。SUMO-1-RNAi-LV组的阳性细胞比率均低于相应各组，缺氧12h、24

关键词：低氧诱导因子-1a SUMO-1 肺动脉平滑肌细胞增殖低氧性肺动脉高压

脐血高迁移率族蛋白-1、低氧诱导因子-1a、神经元特异性烯醇酶及脐动脉血气分析评价新生儿窒息的临床研究

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中国临床医生杂志 2017年第4期45卷 98-100页

作者：熊雨美王萍杨好妹洪燕吴玫瑰广州市妇女儿童医疗中心急诊儿科广东广州510623 广州市妇女儿童医疗中心新生儿科广东广州510623

目的探讨脐血高迁移率族蛋白-1(HMGB1)、低氧诱导因子-1a(HIF-1a)、神经元特异性烯醇酶(NSE)及脐动脉血气分析指标评价新生儿窒息的临床价值。方法选取60例窒息新生儿为研究对象,根据Apgar评分分为轻度组(46例)和重度组(14例),另选取同... 详细信息

目的探讨脐血高迁移率族蛋白-1(HMGB1)、低氧诱导因子-1a(HIF-1a)、神经元特异性烯醇酶(NSE)及脐动脉血气分析指标评价新生儿窒息的临床价值。方法选取60例窒息新生儿为研究对象,根据Apgar评分分为轻度组(46例)和重度组(14例),另选取同期出生的80例正常新生儿为对照组。分别检测各组新生儿脐动脉血气指标(pH、PaCO_2、PaO_2和BE)及脐血HMGB1、HIF-1a、NSE水平。结果轻度组和重度组患儿脐血pH、PaO_2和BE明显低于对照组,脐血PaCO_2又高于对照组;且重度组和轻度组患儿各脐动脉血气分析结果比较,差异均具有显著性(P1a、NSE水平明显高于对照组,而重度组患儿脐血HMGB1、HIF-1a、NSE水平又显著高于轻度组(P1a、NSE水平与脐血PaCO_2呈显著正相关(P1a、NSE水平与新生儿窒息密切相关,结合动脉血气分析检测有助于新生儿窒息的早期诊断和预后判断。

关键词：高迁移率族蛋白-1 低氧诱导因子-1a 神经元特异性烯醇酶新生儿窒息

鱼藤素抑制糖尿病大鼠视网膜中低氧诱导因子-1a(HIF-1a)的表达研究

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江西医药 2015年第12期50卷 1371-1374页

作者：吴宏禧游志鹏南昌大学第二附属医院眼科南昌330006

目的鱼藤素抑制糖尿病大鼠视网膜中低氧诱导因子-1a(HIF-1a)的表达。方法⑴健康SD大鼠35只进行完全随机化分组,10只SD大鼠为对照组,25只SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)60mg/kg建立糖尿病模型组。⑵从造模成功第1周始,每... 详细信息

目的鱼藤素抑制糖尿病大鼠视网膜中低氧诱导因子-1a(HIF-1a)的表达。方法⑴健康SD大鼠35只进行完全随机化分组,10只SD大鼠为对照组,25只SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)60mg/kg建立糖尿病模型组。⑵从造模成功第1周始,每隔1周糖尿病模型组右眼玻璃体腔注射鱼藤素(右眼作为实验眼组),左眼玻璃体腔注射缓冲液(左眼作为糖尿病眼组);健康大鼠对照组双眼(正常眼组)玻璃体腔注射缓冲液。⑶各组大鼠10周后取视网膜进行免疫组化及ELISA法测定HIF-1a表达。结果免疫组化示实验眼组和糖尿病眼组视网膜中HIF-1a阳性细胞表达数均比正常眼组多,同时实验眼组大鼠视网膜中HIF-1a阳性细胞表达数低于糖尿病眼组。ELISA法测得糖尿病眼组与实验眼组视网膜组织中的HIF-1a含量皆高于正常眼组(P1a的表达,说明鱼藤素在早期糖尿病大鼠视网膜病变中起到保护作用。

关键词：鱼藤素糖尿病视网膜病变链脲佐菌素低氧诱导因子-1a

急性脑梗死发病与低氧诱导因子-1a的相关性分析

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解放军预防医学杂志 2018年第4期36卷 508-509页

作者：林宝全阳洪卢先富梁志坚广西医科大学第四附属医院柳州市工人医院神经内科广西柳州545005 广西医科大学第一附属医院神经内科

目的分析急性脑梗死发病与低氧诱导因子-1a(HIF-1a)的相关性。方法选取2015年7月-2016年8月于我院进行诊疗的急性脑梗死患者62例为观察组。另取同期健康体检者62例为对照组。对比两组在不同时间点的血清HIF-1a浓度。根据脑梗死面积大小... 详细信息

目的分析急性脑梗死发病与低氧诱导因子-1a(HIF-1a)的相关性。方法选取2015年7月-2016年8月于我院进行诊疗的急性脑梗死患者62例为观察组。另取同期健康体检者62例为对照组。对比两组在不同时间点的血清HIF-1a浓度。根据脑梗死面积大小将观察组患者分为小面积梗死组以及大面积梗死组,对比不同时间点两组HIF-1a浓度,并作相关性分析。结果在不同时间点,观察组HIF-1a浓度均显著高于对照组(P1a浓度均显著低于大面积梗死组(P1a浓度与脑梗死面积存在显著正相关关系(r=0.754,P=0.000)。结论 HIF-1a参与了急性脑梗死的发生、发展过程,且与患者梗死面积存在显著正相关。

关键词：急性脑梗死低氧诱导因子-1a 相关性梗死面积

红景天苷对术后认知功能及海马核因子-kB、低氧诱导因子-1a和凋亡相关蛋白表达的影响

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国际麻醉学与复苏杂志 2020年第1期41卷 6-10页

作者：葛叶盈陈洁王秀珍袁力勇袁娜宁波市第六医院麻醉科 315040

目的观察红景天苷(salidroside,SAL)对肝部分切除术后老年小鼠认知功能及海马NF-κB、低氧诱导因子(hypoxia-inducible factor,HIF)-1α和凋亡相关蛋白表达的影响,探讨NF-κB、HIF-1α和凋亡相关蛋白[B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 related X protein,Bax)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(caspase-3)]在术后认知功能障碍(post-operative cognitive dysfunction,POCD)发病机制中的作用。方法健康雄性C57B/6小鼠48只,18月龄,体重25~35 g,采用随机数字表法将其分为3组(每组16只):假手术组(sham组)、手术生理盐水组(手术组)和SAL组,根据手术后测试时点不同分为术后1、3 d两个亚组,每亚组8只。手术组和SAL组行肝部分切除术建立手术模型,SAL组小鼠腹腔注射SAL;sham组在肝部分切除术相同手术部位做切开缝合术。用Morris水迷宫测试小鼠的学习记忆能力,采用Western blot法检测海马NF-κB、HIF-1α、Bcl-2、Bax及caspase-3表达。结果与sham组比较,手术组术后1、3 d逃避潜伏期明显延长,空间探索跨越平台次数减少,海马NF-κB、HIF-1α、Bax、caspase-3表达增加,Bcl-2表达减少(P<0.01);与手术组比较,SAL组逃避潜伏期缩短,空间探索跨越平台次数增加,海马NF-κB、HIF-1α、Bax、caspase-3表达减少,Bcl-2表达增加(P<0.05)。结论POCD的发病机制与海马NF-κB、HIF-1α及凋亡相关蛋白表达有关,SAL通过抑制NF-κB、HIF-1α及凋亡相关蛋白表达改善肝部分切除术后小鼠的认知功能。

关键词：红景天苷核因子-kB 低氧诱导因子-1a 细胞凋亡,神经元术后认知功能障碍

舌粘膜鳞癌中低氧诱导因子-1a的表达及意义

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舌粘膜鳞癌中低氧诱导因子-1a的表达及意义

低氧诱导因子-1α沉默对膀胱癌细胞株BIU-87增殖、侵袭及转移的影响

第五次全国口腔颌面—头颈肿瘤学术研讨会

作者：韩波李龙江代炜四川大学华西口腔医学院头颈肿瘤外科四川大学华西口腔医学院头颈肿瘤外科四川大学华西口腔医学院头颈肿瘤外科

＜正＞目的:探讨低氧诱导因子-1a（Hypoxia inducible factor-1a,HIF-1a）在原发性舌粘膜鳞癌中的表达变化及其意义。方法:通过免疫组织化学方法,了解HIF-1a在60例原发性舌癌中的表达,分析其表达水平与舌癌临床分期、病理分级以及预后... 详细信息

＜正＞目的:探讨低氧诱导因子-1a（Hypoxia inducible factor-1a,HIF-1a）在原发性舌粘膜鳞癌中的表达变化及其意义。方法:通过免疫组织化学方法,了解HIF-1a在60例原发性舌癌中的表达,分析其表达水平与舌癌临床分期、病理分级以及预后等临床病理因素之间的关系。结果:31例（52％）舌癌标本中存在 HIF-1a过度表达,不同分化程度的舌癌组织HIF-1a的表达水平差异没有统计学意义（p＞0．05）;而临床分期不同的舌癌组织中HIF-1a的表达水平差异均存在统计学意义;有淋巴结转移的患者其原发灶肿瘤组

关键词：低氧诱导因子-1a 舌癌免疫组化

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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中华实验外科杂志 2013年第2期30卷 322-325页

作者：刘廷江杨涛孙福振刘学军河北省人民医院泌尿外科石家庄050051 河北省人民医院泌尿外药剂科石家庄050051

目的采用RNA干扰技术（RNAi）技术观察低氧诱导因子-1a（HIF-1a）对人膀胱癌细胞株BIU一87增殖、侵袭及转移的影响。方法体外培养BIU-87细胞，实时荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCIt）和Westernblot检测低氧（90％氮气＋5％氢气＋5％二氧... 详细信息

目的采用RNA干扰技术（RNAi）技术观察低氧诱导因子-1a（HIF-1a）对人膀胱癌细胞株BIU一87增殖、侵袭及转移的影响。方法体外培养BIU-87细胞，实时荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCIt）和Westernblot检测低氧（90％氮气＋5％氢气＋5％二氧化碳）和常氧下及HIF—lcx—siRNA转染前后BIU-87中HIF-1a、增殖细胞核抗原（PCNA）、基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9的表达；采用磺酰罗丹明B（SRB）法检测HIF-a-siRNA转染后的细胞增殖水平，细胞划痕和Transwell试验检测迁移和侵袭能力。结果低氧8、24h条件下，HIF—ln蛋白（0．56±0．08、1．33±0．21）、MMP-2mRNA（1．85±0．21、2．94±0．29）、MMP-2蛋白（0．68±0．11、1．37±0．22）、MMP一9mRNA（2．08±0．32、3．49±0．44）、MMP一9蛋白（0．89±0．12、1．40±0．23）表达与正常氧条件比较HIF一1d蛋白（0．33±0．05）、MMP一2mRNA（O．95±0．13）、MMP-2蛋白（0．47±0．07）、MMP-9mRNA（1．21±0．17）、MMP一9蛋白（0．58±0．14）表达均显著升高（均P〈0．05），HIF-1a mRNA（1．05±0．09、0．96±0．11）与正常氧条件（1．16±0．13）比较无明显变化；HIF-1a-siRNA转染后与转染前比较能有效沉默HIF—1a与转染前（1．12±0．17、315．25±40．94、96．86±9．85）比较，HIF。1饯．siRNA能降低增殖、侵袭及迁移细胞数（0．63±0．08、139．62±19．67、69．17±7．39）（均P〈0．05）；BIU一87中PCNAmRNA（0．57±0．07）、PCNA蛋白（0．52±0．09）、MMP-2mRNA（0．64±0．08）、MMP-2蛋白（0．53±0．07）、MMP-9mRNA（0．49±0．06）、MMP-9蛋白（0．69±0．07）表达与转染前比较显著降低（0．99±0．14、0．80±0．13、1．06±0．13、0．87±0．12、0．99±0．12、1．12±0．14）（P〈0．05）。结论低氧下，HIF一10l—siRNA通过沉默HIF-1a，降低PCNA、MMP-2、MMP-9表达而抑制膀胱癌细胞增殖、侵袭及转移。

关键词：低氧诱导因子-1a 膀胱肿瘤 RNA干扰增殖细胞核抗原金属基质蛋白酶

C-反应蛋白抑制缺氧状态下人脐静脉内皮细胞表达低氧诱导因子-1α

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第一军医大学学报 2004年第7期24卷 746-748页

作者：宋云峰吴平生赖文岩第一军医大学南方医院心内科广东广州510515

目的研究C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)对低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)表达的影响。方法利用COCl_2(浓度为100μmol/L)模拟缺氧环境,使其分别与4个试验组的CRP(浓度分别为5,10,50,100μg/ml)同时作用于脐静脉内皮细胞,以仅加CoCl_2(100μmol/L)组为对照;同时设空白对照组。刺激24h后提取蛋白。用Western-blotting半定量检测HIF-1α的蛋白表达量,数据用SPSS11.0软件进行统计分析。结果 CRP在5μg/ml水平即减少HIF-1α表达(P<0.001),在100μg/ml水平达到最大作用,其作用效果呈剂量反应关系(P<0.001)。结论 CRP抑制缺氧状态下人脐静脉内皮细胞表达HIF-1α。此结果证实CRP直接作用于血管,抑制缺氧组织血管新生。

关键词： C-反应蛋白低氧诱导因子-1a CoCl2