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人芽囊原虫感染致大鼠肠道紧密连接破坏的机制研究

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中国血吸虫病防治杂志 2021年第1期33卷 28-34,39页

作者：卢韵宇裴培张立林薛飒韩雪闭香连赵红英刘登宇傅晓茵广西医科大学基础医学院寄生虫学教研室南宁530021 广东省珠海市人民医院广西壮族自治区人民医院

目的探讨大鼠感染人芽囊原虫后引起肠道屏障损伤的机制。方法将30只SD大鼠随机分为对照组及感染1、3、6、9周组(感染组),每组6只。各感染组大鼠经口感染人芽囊原虫2×108个/鼠,对照组大鼠经口灌胃等体积磷酸盐缓冲液。分别于感染后1、3... 详细信息

目的探讨大鼠感染人芽囊原虫后引起肠道屏障损伤的机制。方法将30只SD大鼠随机分为对照组及感染1、3、6、9周组(感染组),每组6只。各感染组大鼠经口感染人芽囊原虫2×108个/鼠,对照组大鼠经口灌胃等体积磷酸盐缓冲液。分别于感染后1、3、6、9周收集7 h大鼠尿液检测肠道通透性,随后采用颈椎脱臼法处死大鼠,取盲肠组织检测肠道细胞通透性。采用实时荧光定量PCR技术检测大鼠盲肠细胞紧密连接跨膜蛋白基因Occludin、Claudin-1及凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达水平;以原位末端标记法(TdT-mediated dUTP nick-end labeling,TUNEL法.)检测盲肠细胞凋亡。结果对照组及感染1、3、6、9周组大鼠尿液中乳果糖与甘露醇排出率比值中位数分别为0.29、0.72、0.44、0.46和0.38,差异有统计学意义(H=12.09,P人芽囊原虫感染可能通过引发大鼠肠道上皮细胞凋亡而破坏细胞间紧密连接,导致肠道通透性增高,进而破坏肠道屏障功能。

关键词：人芽囊原虫肠道上皮细胞肠道屏障肠道通透性紧密连接凋亡大鼠

人芽囊原虫感染大鼠的方式改良及病理切片观察

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2019年第2期37卷 161-166,172页

作者：刘静辛致炜裴培傅晓茵廖德君卢韵宇薛飒廖振捷刘登宇广西医科大学基础医学院寄生虫学教研室南宁530021 台湾成功大学医学院寄生虫学科台南70101 黔南民族医学高等专科学校病原生物学教研室都匀558000 台湾成功大学生物科学与科技学院生物科技与产业科学系台南70101

目的建立人芽囊原虫感染大鼠动物模型。方法将30只雄性SD大鼠随机分为对照组和4个感染组(10~5、 10~6、 10~7和10~8),每组6只。4个感染组分别灌服人芽囊原虫滋养体10~5、 10~6、 10~7和10~8个/鼠,对照组灌服等量PBS。感染后第3天开始收... 详细信息

目的建立人芽囊原虫感染大鼠动物模型。方法将30只雄性SD大鼠随机分为对照组和4个感染组(10~5、 10~6、 10~7和10~8),每组6只。4个感染组分别灌服人芽囊原虫滋养体10~5、 10~6、 10~7和10~8个/鼠,对照组灌服等量PBS。感染后第3天开始收集粪样,于洛克氏-鸡蛋-血清(LES)培养基中培养72 h后镜下观察,PCR和测序确认感染前后虫株的基因型。感染后第3～18天连续收集5次大鼠粪样培养观察,记录阳性鼠感染情况。感染后第21天将大鼠全部无痛处死,分别收集十二指肠、空肠、回肠、结肠和盲肠等肠段的内容物培养72 h后观察,计算其最终感染数和感染密度;并取不同部位的组织进行切片,苏木精-伊红(HE)染色后观察肠道内是否存在虫体。采用皮尔森相关性分析比较各肠段寄生数目的相关关系。结果 10~5、 10~6、 10~7和10~8感染组中确定感染人芽囊原虫的大鼠数目分别为2、 3、 5和6只。其中10~5感染组感染后第6天检出阳性结果,其余感染组第3天检出阳性,对照组均为阴性。PCR及序列比对证实,感染大鼠分离的人芽囊原虫与感染所用虫株均为ST7型。肠道内容物培养结果显示,回肠、盲肠和结肠的内容物均成功培养出人芽囊原虫,且盲肠与结肠内的虫数之间呈正相关,盲肠与结肠内容物培养获得的人芽囊原虫数呈正相关性(r=0.541, P 人芽囊原虫。HE染色结果显示,盲肠有人芽囊原虫寄生并存在黏蛋白,未发现虫体入侵、炎细胞浸润、黏膜糜烂等病理损伤;其余肠段未发现人芽囊原虫寄生。结论采用人芽囊原虫滋养体可成功建立大鼠感染模型。灌服10~5个人芽囊原虫滋养体可成功感染大鼠, 10~8个滋养体的感染效果稳定,各组随着感染人芽囊原虫数量的增加,感染的大鼠数也增加。

关键词：人芽囊原虫滋养体感染大鼠模型

人芽囊原虫生物学特性——形态特征、繁殖方式及与细菌的关系研究

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卫生研究 2006年第6期35卷 739-742页

作者：乔继英张旭魏志超杨珺华李亚青张荣西安交通大学医学院环境与基因相关疾病教育部重点实验室西安710061 西安交通大学医学院免疫学与病原生物学系西安交通大学医学院医学检验中心

目的观察人芽囊原虫(Blastocystis hominis,B.h)的生殖方式,对B.h与细菌的关系及相互间微环境的影响进行初步探索。方法分别对新鲜粪便标本和RPMI 1640培养基中B.h,经碘液染色和苏木素染色观察其形态,对B.h阳性的粘液便、粘液血便进行... 详细信息

目的观察人芽囊原虫(Blastocystis hominis,B.h)的生殖方式,对B.h与细菌的关系及相互间微环境的影响进行初步探索。方法分别对新鲜粪便标本和RPMI 1640培养基中B.h,经碘液染色和苏木素染色观察其形态,对B.h阳性的粘液便、粘液血便进行肠道常见致病菌的培养和鉴定,并通过B.h与大肠埃希菌共培养实验,观察两者相互作用。结果本研究确证了四种B.h繁殖方式:二分裂生殖、内二芽生殖、复分裂增殖及出芽生殖。半数B.h阳性标本未检出已知肠道致病菌。B.h对大肠埃希菌有一定抑制作用。结论B.h存在多种繁殖方式;B.h可能单独致病,其致病机制与微生态改变有关。

关键词：人芽囊原虫形态繁殖方式细菌

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人芽囊原虫感染合并其他疾病研究进展

中国血吸虫病防治杂志 2021年第5期33卷 535-539页

作者：陈慧慧刘琴邓艳张红卫田利光中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所、国家热带病研究中心国家卫生健康委员会寄生虫病原与媒介生物学重点实验室WHO热带病合作中心、科技部国家级热带病国际联合研究中心、上海交通大学医学院国家热带病研究中心全球健康学院上海200025 河南省疾病预防控制中心

人芽囊原虫是一种常见肠道寄生原虫,感染者一般无明显临床症状,少数感染者尤其是合并感染或免疫系统功能受损者可出现腹痛、腹泻、恶心、呕吐等症状,严重时可能危及生命。本文就人芽囊原虫合并感染其他病原体及其他疾病研究进展作一综述... 详细信息

人芽囊原虫是一种常见肠道寄生原虫,感染者一般无明显临床症状,少数感染者尤其是合并感染或免疫系统功能受损者可出现腹痛、腹泻、恶心、呕吐等症状,严重时可能危及生命。本文就人芽囊原虫合并感染其他病原体及其他疾病研究进展作一综述,为人芽囊原虫感染防控提供参考。

关键词：人芽囊原虫合并感染共病

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人芽囊原虫标本染色方法的改进

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2008年第6期26卷 444-445页

作者：张瑞其陈厚彪危会萍苏水莲赣南医学院显微实验室赣州341000 赣县妇幼儿童医院儿科赣县341100 赣州市立医院赣州341000

人芽囊原虫标本经肖氏液固定后,用改良的哈氏苏木素染色。结果表明,标本内部结构清晰,中心体明显,与传统的铁苏木素染色方法相比,染色效果好,制片时间短,操作步骤简单。

关键词：人芽囊原虫标本染色

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人芽囊原虫保存方法的初步研究

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2007年第1期25卷 57-60页

作者：田春林万孝玲刘登宇何登贤广西医科大学寄生虫学教研室南宁530021

目的观察冻存剂、温度等因素对人芽囊原虫活力的影响,探索理想的人芽囊原虫保存方法。方法从患者阳性粪便中分离人芽囊原虫,分装到2 ml无菌冻存管内,分别加入10%二甲基亚砜(dimethylsulfoxide,DMSO)、40%丙三醇(GL)和15%乙二醇(EG)作冻... 详细信息

目的观察冻存剂、温度等因素对人芽囊原虫活力的影响,探索理想的人芽囊原虫保存方法。方法从患者阳性粪便中分离人芽囊原虫,分装到2 ml无菌冻存管内,分别加入10%二甲基亚砜(dimethylsulfoxide,DMSO)、40%丙三醇(GL)和15%乙二醇(EG)作冻存剂,放置于不同的温度下保存,用台盼蓝染色法和原虫培养法测定细胞的活力和增殖能力。结果虫体在室温(18℃～20℃)下可存活3周,在4℃～6℃存活不到1周。加入冻存剂后,置-20℃和液氮(-196℃)下可存活3个月以上。用40%GL作冻存剂,于液氮低温下冻存的虫体保存半年后复苏,活力仍达41.7%,培养72 h后多见分裂相细胞。结论应用40%GL作为冻存剂,在液氮中低温保存人芽囊原虫效果较佳。4℃不适于保存人芽囊原虫。

关键词：人芽囊原虫保存温度

人芽囊原虫对实验感染昆明小鼠肠黏膜超微结构的影响

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2006年第3期24卷 187-191页

作者：张红卫李文颜秋叶贺丽君苏云普郑州大学公共卫生学院劳动卫生与职业病学教研室郑州450016 河南中医学院寄生虫学教研室郑州450003 河南省疾病预防控制中心郑州450003

目的观察昆明小鼠感染人芽囊原虫后肠黏膜超微结构的改变,探讨人芽囊原虫的致病机制。方法20只昆明小鼠随机分为4组:A和D组为接受免疫抑制剂(地塞米松)处理,B组不用地塞米松处理,C组为正常对照组。A组和B组经口感染204人芽囊原虫包囊等,... 详细信息

目的观察昆明小鼠感染人芽囊原虫后肠黏膜超微结构的改变,探讨人芽囊原虫的致病机制。方法20只昆明小鼠随机分为4组:A和D组为接受免疫抑制剂(地塞米松)处理,B组不用地塞米松处理,C组为正常对照组。A组和B组经口感染204人芽囊原虫包囊等,C组和D组灌注等量Locke氏液作为对照。感染6d后,剖杀各组小鼠取回盲部肠黏膜处理后,扫描和透射电镜下观察其超微结构。结果扫描电镜下见A、B两组人芽囊原虫寄生在小鼠回盲部肠腔和肠黏膜表面,个别虫体入侵肠黏膜及肠黏膜皱襞,部分肠黏膜微绒毛呈局灶性破坏;透射电镜下见部分吸收细胞表面微绒毛数目减少,吸收细胞和杯状细胞线粒体水肿,粗面内质网扩张、脱颗粒,间质内淋巴细胞浸润及嗜酸粒细胞增多。A组病变程度比B组重,C组和D组未见异常。结论感染人芽囊原虫的昆明小鼠回盲部肠黏膜超微结构有严重的损害,肠黏膜损伤程度受机体免疫状态的影响。

关键词：人芽囊原虫小鼠肠黏膜透射电镜扫描电镜超微结构

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人芽囊原虫感染小鼠试验

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2005年第6期23卷 444-448页

作者：姚繁荣乔继英赵晏张旭杨珺华李小琪西安交通大学医学院免疫学与病原生物学系西安交通大学医学院生理学和病理生理学系西安710061

目的通过感染不同免疫状态ICR小鼠寻求人芽囊原虫(Blastocystis hominis,B.h)对小鼠的易感途径及有效感染数量。方法①将104、105、106个培养3代的B.h分别经口及直肠感染ICR小鼠。②106个B.h经直肠感染免疫功能低下该种小鼠,观察感染后... 详细信息

目的通过感染不同免疫状态ICR小鼠寻求人芽囊原虫(Blastocystis hominis,B.h)对小鼠的易感途径及有效感染数量。方法①将104、105、106个培养3代的B.h分别经口及直肠感染ICR小鼠。②106个B.h经直肠感染免疫功能低下该种小鼠,观察感染后不同时间小鼠胃肠道B.h繁殖情况及消化道组织病理改变。结果B.h经口及直肠两种途径均可使小鼠感染,免疫功能低下小鼠感染后出现行动迟缓、精神萎靡、嗜睡、体重下降等,部分小鼠出现腹泻,排粘液便等症状,个别小鼠死亡。经解剖肉眼观察见空回肠、回盲部、结肠的肠壁组织严重水肿、充血、淤血等。在小鼠胃肠道内容物中均发现B.h。病理切片显示,小肠及结肠黏膜上皮脱落,黏膜下层不同程度的炎性细胞浸润,腺体结构不完整。结论B.h经直肠比经口更易感染小鼠,B.h可寄生于小鼠整个胃肠道。小鼠免疫功能降低时,B.h可迅速繁殖、致病性增强,并引起严重的肠黏膜病理改变。

关键词：人芽囊原虫感染小鼠病理变化

人芽囊原虫在DMEM单相培养基中体外培养方法的建立

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卫生研究 2006年第6期35卷 743-746页

作者：张旭乔继英答嵘李亚青姚繁荣西安交通大学医学院环境与基因相关疾病教育部重点实验室西安710061 西安交通大学医学院免疫学与病原生物学系西安交通大学医学院医学检验中心西安710061

目的建立人芽囊原虫（Blastocystis hominis，B．h）在DMEM单相培养基中的体外连续培养方法，为进一步研究其诊断、生活史、致病机制奠定基础。方法比较不同pH值、血清种类、血清浓度及接种量等条件下虫体生长繁殖情况及影响因素。结果... 详细信息

目的建立人芽囊原虫（Blastocystis hominis，B．h）在DMEM单相培养基中的体外连续培养方法，为进一步研究其诊断、生活史、致病机制奠定基础。方法比较不同pH值、血清种类、血清浓度及接种量等条件下虫体生长繁殖情况及影响因素。结果使用DMEM培养基、接种量大于10^5/管、pH7．0～8．0、10％～30％小牛血清（或人、马血清），青、链霉素及二性霉素B，于37℃条件下厌氧培养，每三、六或五天转种一次，可达到体外长期培养B．h的目的。结论使用DMEM单相培养基可用于人芽囊原虫的诊断及体外长期培养。

关键词：人芽囊原虫 DMEM培养基体外培养影响因素