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三阴性乳腺癌人类白细胞抗原-g抑制T细胞免疫功能机制的研究

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中国临床研究 2024年第10期37卷 1499-1505页

作者：李晓诗罗琴周庆钟科蒋安科夏林玉胡清林成都医学院第一附属医院甲乳外科四川成都610500

目的研究三阴性乳腺癌(TNBC)细胞中人类白细胞抗原-g(HLA-g)表达与T细胞活化发挥免疫抑制功能的机制。方法在三组乳腺癌细胞系(MDA-MB-231,HCC1937,MDA-MB-468)中,实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)、Western blot检测并筛选出HLA-g高表... 详细信息

目的研究三阴性乳腺癌(TNBC)细胞中人类白细胞抗原-g(HLA-g)表达与T细胞活化发挥免疫抑制功能的机制。方法在三组乳腺癌细胞系(MDA-MB-231,HCC1937,MDA-MB-468)中,实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)、Western blot检测并筛选出HLA-g高表达,纤维蛋白原样蛋白1(FgL1)、程序性死亡因子配体1(PD-L1)、唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素15(SIgLEC15)低表达的乳腺癌细胞系为HCC1937;将HCC1937细胞分为NC组(对照组)与KD组(敲减组),进行RNA干扰(RNAi)慢病毒载体构建并转染KD组细胞以敲减HLA-g基因,且进行验证。HCC1937细胞分别进行HLA-g抗体封闭/未封闭处理,Jurkat细胞分别进行CD3、CD28激活/未激活处理,两种细胞共培养分为8组:NC^(--)组、KD^(--)组、NC^(+-)组、KD^(+-)组、NC^(-+)组、KD^(-+)组、NC^(++)组和KD^(++)组;细胞划痕实验、MTT法、ELISA法分别检测各组细胞迁移率、增殖率以及细胞上清液的干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-2水平。结果RT-qPCR提示HCC1937细胞HLA-g基因敲减成功;KD^(++)组迁移率较NC^(++)组显著增高(P细胞增殖率差异无统计学意义(P>0.05);KD^(++)组的IFN-γ浓度较NC^(++)组、NC^(-+)组显著降低(P0.05)。结论TNBC细胞HLA-g可能促进活性T细胞分泌IFN-γ,HLA-g降低后IFN-γ抑制T细胞免疫功能,促进肿瘤转移。

关键词：三阴性乳腺癌人类白细胞抗原-g T细胞干扰素-γ 白细胞介素-2 免疫功能

人类白细胞抗原-g在母-胎免疫界面的功能和作用机制

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中华生殖与避孕杂志 2022年第4期42卷 407-412页

作者：尚进庄白妹姚元庆中国人民解放军总医院研究生院北京100853 中国人民解放军总医院第一医学中心妇产科北京100853

人类白细胞抗原-g(human leucocyte antigen g, HLA-g)作为非经典的主要组织相容性复合物Ⅰ类分子, 在母-胎界面的绒毛膜外滋养层细胞上特异性表达。妊娠期间, 胎儿同种异源的绒毛膜外滋养细胞侵入子宫黏膜, 却免于母体来源的免疫细胞攻... 详细信息

人类白细胞抗原-g(human leucocyte antigen g, HLA-g)作为非经典的主要组织相容性复合物Ⅰ类分子, 在母-胎界面的绒毛膜外滋养层细胞上特异性表达。妊娠期间, 胎儿同种异源的绒毛膜外滋养细胞侵入子宫黏膜, 却免于母体来源的免疫细胞攻击, 其中HLA-g起到极其关键的作用。关于HLA-g在母-胎界面特殊调控方式的研究, 特别是与各类免疫细胞及膜表面受体作用的分子机制, 引起学者的广泛关注。本文将着重对HLA-g在母-胎界面的表达、调节及与相关免疫细胞作用机制进行综述。

关键词：人类白细胞抗原-g 母-胎界面母-胎免疫耐受绒毛外滋养细胞

人类白细胞抗原-g在急性白血病患者的表达及意义

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南方医科大学学报 2010年第11期30卷 2446-2448页

作者：李蕊曹星辉刘灿吴秀丽凌奕文张钰冯茹刘启发南方医科大学南方医院血液科广东广州510515

目的检测急性白血病患者膜结合型人类白细胞抗原-g(mHLA-g)和分泌型HLA-g(sHLA-g)的表达,探讨HLA-g表达水平的变化对急性白血病发生和发展的影响。方法采用酶联免疫吸附法和流式细胞术分别检测40例初发、10例难治复发、30例化疗前后患者... 详细信息

目的检测急性白血病患者膜结合型人类白细胞抗原-g(mHLA-g)和分泌型HLA-g(sHLA-g)的表达,探讨HLA-g表达水平的变化对急性白血病发生和发展的影响。方法采用酶联免疫吸附法和流式细胞术分别检测40例初发、10例难治复发、30例化疗前后患者及10例正常人sHLA-g和mHLA-g的表达情况。结果正常人血清中sHLA-g的平均水平为5.87±2.07ng/ml,初发患者为10.05±6.5ng/ml、难治复发患者为12.32±5.85ng/ml;正常人mHLA-g的平均水平为(0.29±0.20)%,初发患者(0.60±0.44)%、难治复发患者(0.77±0.41)%。白血病初发患者sHLA-g和mHLA-g水平均显著高于正常人组(P0.05)。15例1疗程化疗后获得完全缓解患者sHLA-g和mHLA-g水平显著低于化疗前(Pg和mHLA-g水平较治疗前无明显差异(P>0.05)。结论 HLA-g表达水平变化可能与急性白血病的病情发展、疗效以及预后有关。

关键词：白血病,急性人类白细胞抗原-g 预后

人类白细胞抗原-g基因上游调控区单核苷酸多态性与重度子痫前期发病的关系

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中华微生物学和免疫学杂志 2018年第7期38卷 518-522页

作者：琚娟张展高峻峻王宝金郑州大学第三附属医院妇产科 450052 郑州大学 450000

目的探讨人类白细胞抗原-g（HLA-g）上游调控区单核苷酸多态性与重度子痫前期发病的关系。方法选择2008年10月至2009年3月郑州大学第三附属医院妇产科住院的39例孕晚期重度子痫前期孕妇为病例组，另选择同期正常孕晚期孕妇43例为对照组... 详细信息

目的探讨人类白细胞抗原-g（HLA-g）上游调控区单核苷酸多态性与重度子痫前期发病的关系。方法选择2008年10月至2009年3月郑州大学第三附属医院妇产科住院的39例孕晚期重度子痫前期孕妇为病例组，另选择同期正常孕晚期孕妇43例为对照组，两组孕妇均为汉族居民。采用PCR测序技术对两组孕妇进行HLA-g基因上游调控区单核苷酸多态性的等位基因和基因型分析，分别比较两组孕妇间单核苷酸多态性位点的等位基因和基因型频率分布。结果（1）中国汉族孕妇中，HLA-g基因上游调控区－1179～－689位点之间共检测到8个单核苷酸多态性位点；（2）重度子痫前期组孕妇HLA-g基因－964位点基因型gg的频率为12.8%（5/39），显著低于对照组的37.2%（16/43），两组比较差异有统计学意义（P＝0.012）；重度子痫前期组孕妇HLA-g基因－964位点等位基因g的频率为38.5%（30/78），显著低于对照组的57.0%（49/86），两组比较，差异有统计学意义（P＝0.018）；（3）重度子痫前期组孕妇HLA-g －716位点基因型TT的频率为17.9%（7/39），显著低于对照组的41.9%（18/43），两组比较差异有统计学意义（P＝0.019）；重度子痫前期组孕妇HLA-g －716位点等位基因T的频率为39.7%（31/78），显著低于对照组的60.5%（52/86），两组比较差异有统计学意义（P＝0.008）；（4）HLA-g －1140A/T、－762C/T、－725C/g的基因型及等位基因在重度子痫前期组和对照组的分布差异无统计学意义（P〉0.05）。结论中国汉族孕妇中，HLA-g基因上游调控区部分单核苷酸多态性与重度子痫前期的发病有关，－964位点等位基因为g或基因型为gg、－716位点等位基因为T或基因型为TT时，发生重度子痫前期的风险会降低。

关键词：子痫前期人类白细胞抗原-g 上游调控区单核苷酸多态性

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人类白细胞抗原－g与肝脏疾病研究进展

中华传染病杂志 2017年第3期35卷 187-189页

作者：胡彬颜卫华温州医科大学附属台州医院中心实验室浙江省临海市317000

人类白细胞抗原－g（human leucocyte antigen-g，HLA-g）属于非经典HLAI类分子（HLAIb），其基因及其编码的蛋白不同于经典HLAI类分子，如HLA—g基因具有有限多态性、独特的启动子结构，HLA—g分子主要表达在母胎界面的绒毛外滋养层细... 详细信息

人类白细胞抗原－g（human leucocyte antigen-g，HLA-g）属于非经典HLAI类分子（HLAIb），其基因及其编码的蛋白不同于经典HLAI类分子，如HLA—g基因具有有限多态性、独特的启动子结构，HLA—g分子主要表达在母胎界面的绒毛外滋养层细胞及仅可递呈种类有限的抗原肽等特点。

关键词：人类白细胞抗原-g 肝脏疾病绒毛外滋养层细胞类分子母胎界面 g基因 HLA 多态性

人类白细胞抗原-g与人乳头瘤病毒致宫颈癌相关性研究进展

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中国实用妇科与产科杂志 2014年第3期30卷 228-230页

作者：许惠惠林爱芬颜卫华温州医科大学附属浙江省台州医院中心实验室浙江临海317000

宫颈癌是最常见的女性生殖道恶性肿瘤。人乳头瘤病毒（humanpapillomaviruses，HPV）是宫颈癌的主要致病因子，大多数女性HPV感染是一个短暂且无症状的过程，并可自行消退，

关键词：人类白细胞抗原-g 人乳头瘤病毒宫颈癌

人类白细胞抗原-g突变体cDNA克隆及在K562细胞上的表达

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免疫学杂志 2003年第1期19卷 7-10页

作者：颜卫华范丽安上海第二医科大学上海市免疫学研究所上海200025

目的　克隆人类白细胞抗原 g(Humanleukocyteantligen g ,HLA g)突变体cDNA ,并使其在HLA Ⅰ类阴性的K5 6 2细胞上获得稳定表达 ,为研究配受体之间的识别机制奠定基础。方法　用RT PCR方法从人子宫蜕膜组织扩增出HLA gcDNA ,得到全长... 详细信息

目的　克隆人类白细胞抗原 g(Humanleukocyteantligen g ,HLA g)突变体cDNA ,并使其在HLA Ⅰ类阴性的K5 6 2细胞上获得稳定表达 ,为研究配受体之间的识别机制奠定基础。方法　用RT PCR方法从人子宫蜕膜组织扩增出HLA gcDNA ,得到全长HLA gPCR产物后 ,用桥式PCR方法进行定点点突变 ,将突变的目的基因亚克隆于逆转录 ,将突变的目的基因亚克隆于逆转录mg pLNCX表达载体 ,采用感染的方法将重组质粒转入K5 6 2细胞 ,最后经g4 18筛选及有限稀释 ,利用单克隆抗体W6 32进行FACS及mRNA检测 ,观察HLA g突变体在靶细胞表面的表达。结果　HLA g突变体分子在经mg pLNCX转染的靶细胞表面获得稳定高表达。结论　成功构建了mg pLNCX表达载体 ,并使HLA g突变体分子在HLA Ⅰ类阴性的靶细胞K5 6 2细胞上获得稳定表达。

关键词：人类白细胞抗原-g K562细胞 HLA-g 克隆点突变 RT-PCR方法

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人类白细胞抗原-g与母胎耐受

中华妇产科杂志 2002年第9期37卷 567-569页

作者：颜卫华范丽安上海市免疫研究所免疫与遗传研究室 200025

妊娠过程中，带有父源性人类白细胞抗原（HLA）的胎儿，直接接触富含免疫活性细胞的母体蜕膜，理应受到母体免疫系统识别，产生以细胞免疫为主的免疫应答而遭到母体的排斥。但事实相反，母体对胎儿形成免疫耐受，大多数胎儿在母体子宫... 详细信息

妊娠过程中，带有父源性人类白细胞抗原（HLA）的胎儿，直接接触富含免疫活性细胞的母体蜕膜，理应受到母体免疫系统识别，产生以细胞免疫为主的免疫应答而遭到母体的排斥。但事实相反，母体对胎儿形成免疫耐受，大多数胎儿在母体子宫内安然生长近10个月，直至分娩。母胎耐受现象的维持涉及诸多因素，如胎盘HLA的表达、辅助性T淋巴细胞(Th)Th_1/Th_2平衡、CD_(95)及其配体的相互作用、各种细胞因子和整合素的作用等。其中HLA-g诱导母胎耐受是目前关注的热点。HLA-g通过多种途径诱导母胎耐受，阐明HLA-g在母胎耐受中的作用机制，对移植免疫及肿瘤免疫都将提供有益的启示。

关键词：人类白细胞抗原-g 母胎耐受调节功能 NK细胞

人类白细胞抗原-g cDNA的克隆及序列分析

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广西医科大学学报 2005年第3期22卷 370-372页

作者：杨海波何琳惠池永斌王植柔广西医科大学微生物及免疫学教研室南宁530021 广西医科大学2003级上海第二医科大学免疫所广西肿瘤医院泌尿外科

目的:构建表达人类白细胞抗原-g(HLA-g)蛋白的真核表达载体pcDNA3-HLA-g。方法:从孕妇绒毛组织中提取总RNA,借助RT-PCR技术扩增HLA-g的cDNA并把其插入真核表达载体pcDNA3,然后经酶切和测序法鉴定。结果:经酶切鉴定及测序分析,证实已构... 详细信息

目的:构建表达人类白细胞抗原-g(HLA-g)蛋白的真核表达载体pcDNA3-HLA-g。方法:从孕妇绒毛组织中提取总RNA,借助RT-PCR技术扩增HLA-g的cDNA并把其插入真核表达载体pcDNA3,然后经酶切和测序法鉴定。结果:经酶切鉴定及测序分析,证实已构建表达HLA-g蛋白的真核表达载体pcDNA3-HLA-g。结论:应用RT-PCR扩增及DNA连接技术成功构建HLA-g的真核表达载体。

关键词：人类白细胞抗原-g 克隆序列分析 RT—PCR