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间歇式吸附与连续式脱附耦合亲和层析法研究

化学工程 2003年第5期31卷 40-45,4页

作者：李剑君杨伯伦西安交通大学环境与化学工程学院陕西西安710049

用间歇式吸附和连续式脱附耦合的亲和层析法分离纯化了溶菌酶。采用Langmuir Freundlich方程描述等温吸附线 ,通过间歇式吸附实验结果得到了该方程的相关参数以及蛋白质在吸附剂孔内的扩散系数。以蛋白质回收率和吸附剂利用率为基准比... 详细信息

用间歇式吸附和连续式脱附耦合的亲和层析法分离纯化了溶菌酶。采用Langmuir Freundlich方程描述等温吸附线 ,通过间歇式吸附实验结果得到了该方程的相关参数以及蛋白质在吸附剂孔内的扩散系数。以蛋白质回收率和吸附剂利用率为基准比较了间歇式吸附和连续式吸附在操作时间上的差异。结果表明在蛋白质回收率和吸附剂利用率完全相等的情况下 ,间歇式吸附所用时间远小于连续式吸附时间。

关键词：间歇式吸附连续式脱附耦合亲和层析法 Langmuir-Freundlich方程

亲和层析法纯化小麦幼嫩胚乳肌动蛋白及其特性的初步研究

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科学通报 1990年第12期35卷 940-942页

作者：金仕萍凌俊张伟成中国科学院上海植物生理研究所上海200032

正在发育的小麦幼嫩籽粒中,珠心和胚乳组织内均呈现有活跃的原生质细胞间运动现象。我们发现胞间运动可被细胞松弛素B(Cytochalasin B)可逆性抑制,显示出肌动蛋白参与此类运动的可能性。

关键词：小麦胚乳肌动蛋白亲和层析法

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亲和层析法纯化内耳髓鞘蛋白零

中华耳鼻咽喉科杂志 2003年第4期38卷 307-308,I005页

作者：林熹汪吉宝张榕程庆高永琳黄翔福建医科大学附属第一医院耳鼻咽喉科福州350005 华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉科福建医科大学生物化学教研室

在内耳的螺旋神经节及蜗神经的髓鞘上存在髓鞘蛋白零(myelin protein zero，P0蛋白)，相对分子量为30 000~[1]。内耳P0蛋白可能是某些自身免疫性内耳病(autoimmune inner ear disease，AIED)的自身抗原~[1,2]。现介绍用亲和层析法纯化内... 详细信息

在内耳的螺旋神经节及蜗神经的髓鞘上存在髓鞘蛋白零(myelin protein zero，P0蛋白)，相对分子量为30 000~[1]。内耳P0蛋白可能是某些自身免疫性内耳病(autoimmune inner ear disease，AIED)的自身抗原~[1,2]。现介绍用亲和层析法纯化内耳P0蛋白，为进一步探讨P0蛋白在自身免疫性内耳病中的作用提供实验基础。

关键词：亲和层析法内耳髓鞘蛋白零纯化螺旋神经节蜗神经自身免疫性内耳病自身抗原

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亲和层析法分离纯化猪血浆α_2-巨球蛋白

生物化学杂志 1992年第2期8卷 251-256页

作者：郑远旗贾一平四川大学生物系生化教研室成都610064 四川大学

本文报道通过聚乙二醇分级沉淀,Cibacron Blue F3GA Sepharose4B染料亲和层析和Zn螯合Sepharose4B亲和层析从猪血浆中分离纯化的方法,经高pH不连续PAGE、低pH不连续PAGE和SDS-PAGE检测证明为电泳纯。N-末端氨基酸为丝氨酸,亚基分子量为1... 详细信息

本文报道通过聚乙二醇分级沉淀,Cibacron Blue F3GA Sepharose4B染料亲和层析和Zn螯合Sepharose4B亲和层析从猪血浆中分离纯化的方法,经高pH不连续PAGE、低pH不连续PAGE和SDS-PAGE检测证明为电泳纯。N-末端氨基酸为丝氨酸,亚基分子量为182000。

关键词：亲和层析法 α2-巨球蛋白

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亲和层析法纯化大鼠单克隆抗体

北京医科大学学报 1990年第4期22卷 307-308页

作者：赵强孙素莲张秀霞北京市肿瘤防治研究所

我们承担了“大鼠杂交瘤技术的建立及应用的研究”,已初步获得了成功。大鼠杂交瘤体系具有诸多优点,为小鼠杂交瘤体系的良好补充。其快速特异,简便易行的单克隆抗体(McAb)提纯方法,是明显优于小鼠的特点之一。纯化原理为Lou大鼠免疫球蛋... 详细信息

我们承担了“大鼠杂交瘤技术的建立及应用的研究”,已初步获得了成功。大鼠杂交瘤体系具有诸多优点,为小鼠杂交瘤体系的良好补充。其快速特异,简便易行的单克隆抗体(McAb)提纯方法,是明显优于小鼠的特点之一。纯化原理为Lou大鼠免疫球蛋白(Ig)轻链95％为Kappa型,其K轻链恒定区有二个不同个体基因型(1a、1b),定位稳定,二种鼠完全组织相容。

关键词：单克隆抗体亲和层析法

亲和层析法分离纯化玉米精细胞质膜特异糖蛋白

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中国生物化学与分子生物学报 1998年第3期14卷 339-341页

作者：陈丽邵邻相汪洁杨中汉北京大学生命科学学院

亲和层析法分离纯化玉米精细胞质膜特异糖蛋白陈丽邵邻相汪洁杨中汉（北京大学生命科学学院，北京１００８７１）ＩｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄＰｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＳｐｅｒｍＣｅｌＰｌａｓｍａＭｅｍｂｒａｎｅＧｌｙｃｏｐｒｏ... 详细信息

亲和层析法分离纯化玉米精细胞质膜特异糖蛋白陈丽邵邻相汪洁杨中汉（北京大学生命科学学院，北京１００８７１）ＩｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄＰｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＳｐｅｒｍＣｅｌＰｌａｓｍａＭｅｍｂｒａｎｅＧｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎｓｏｆＺｅａｍａｙｓｂｙＡ...

关键词：玉米精细胞质膜糖蛋白亲和层析法纯化

二磷酸腺苷琼脂糖亲和层析法纯化HSP70多肽复合物

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华中科技大学学报（医学版） 2002年第3期31卷 245-247页

作者：杨杪黄畦王瑞波谭皓柯磊肖成峰邬堂春华中科技大学同济医学院职业医学研究所武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院胸心外科武汉430030

采用二磷酸腺苷 (ADP)琼脂糖亲和层析的方法 ,从小鼠肝脏或肿瘤组织中纯化热休克蛋白 (HSP) 70多肽复合物。用 Western blot和硝酸银染色对所纯化的蛋白质进行鉴定 ,表明纯化的蛋白质为均一的 HSP70。为了证实纯化的 HSP70是否为 HSP70... 详细信息

采用二磷酸腺苷 (ADP)琼脂糖亲和层析的方法 ,从小鼠肝脏或肿瘤组织中纯化热休克蛋白 (HSP) 70多肽复合物。用 Western blot和硝酸银染色对所纯化的蛋白质进行鉴定 ,表明纯化的蛋白质为均一的 HSP70。为了证实纯化的 HSP70是否为 HSP70多肽复合物 ,将此纯化物与 10 mmol/ L ATP,3mm ol/ L Mg Cl2 ,0 .5 mmol/ L Ca Cl2 孵育后 ,用centricon 10滤过并收集小分子片段 ,经反向高压液相色谱分析 ,发现在 2 15 nm和 2 2 0 nm有很多吸收峰 ,证明此 HSP70为 HSP70多肽复合物。一般情况下 ,采用 ADP琼脂糖亲和层析方法 1g组织可以获得 12 0μg

关键词：二磷酸腺苷琼脂糖亲和层析法纯化 HSP70多肽复合物

单克隆抗体亲和层析法纯化HFRS病毒血凝素抗原的研究

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单克隆抗体通讯 1989年第1期5卷 8-13页

作者：汪力亚汪美先王海涛姜绍谆第四军医大学微生物学教研室

用蔗糖-丙酮法从HFRS病毒陈株感染的乳小白鼠鼠脑中提取粗制血凝素，特此粗制血箍素通过抗HFRS病毒血凝素McAb 3G1与Sepherose 4B偶联的免疫吸附柱，获得纯化HFRS病毒血凝素抗原具有较高的血凝滴度和良好的免疫原性．用SDS—PAGE和Weste... 详细信息

用蔗糖-丙酮法从HFRS病毒陈株感染的乳小白鼠鼠脑中提取粗制血凝素，特此粗制血箍素通过抗HFRS病毒血凝素McAb 3G1与Sepherose 4B偶联的免疫吸附柱，获得纯化HFRS病毒血凝素抗原具有较高的血凝滴度和良好的免疫原性．用SDS—PAGE和Western-blot技术分析该纯化的血凝素抗原，并与同法纯他的正常鼠脑抗原比较，证明谊特异性血凝素抗原分子量为5×10^4道尔顿。用2株抗HFRS病毒以及10株抗HFRS病毒血凝素McAb，以ELISA阻断试验分析纯化50K血凝素，结果育10株McAb可阻断McAb3G1与其结合，其抗碌决定簇之间有部分相同或重叠，提示这些具有不同特性的抗原决定簇确实位于同一蛋白上。以上结果表明，该SOK血疑素蛋白特性及结构均较复杂，尚待进一步研究。

关键词：单克隆抗体亲和层析法血凝素抗原肾综合征出血热病毒血凝素

亲和层析法纯化小鼠腹水来源的单克隆抗体的实验研究

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中国血液流变学杂志 2007年第3期17卷 372-374页

作者：徐颖蒋玉平马泓冰胡玉敏孙中文张学光苏州大学医学生物技术研究所江苏苏州215007

目的建立从小鼠腹水中纯化抗CD28单克隆抗体(mAb)2F5的一步亲和层析方法。方法小鼠mAb腹水样品经离心过滤后,进行亲和层析柱纯化。分别对样品稀释倍数、上样流速、梯度洗脱体积对m A b纯度的影响进行检测。结果样品在稀释4倍以上、上样... 详细信息

目的建立从小鼠腹水中纯化抗CD28单克隆抗体(mAb)2F5的一步亲和层析方法。方法小鼠mAb腹水样品经离心过滤后,进行亲和层析柱纯化。分别对样品稀释倍数、上样流速、梯度洗脱体积对m A b纯度的影响进行检测。结果样品在稀释4倍以上、上样流速为1.0mL/min以及Gly-HCl(pH 2.7)一步洗脱条件下,可获得纯度大于90%的mAb 2F5,回收率为80%。结论该研究建立的一步亲和层析纯化方法操作简便,所得mAb的纯度和回收率较高。

关键词：单克隆抗体纯化亲和层析法小鼠腹水