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九蒸九晒熟地黄化学成分研究

中国药学杂志 2021年第6期56卷 449-456页

作者：刘娟娟吕锦锦张靖柯朱登辉李孟石静亚郑晓珂冯卫生河南中医药大学郑州450046 河南省中药开发工程技术研究中心郑州450046

目的研究九蒸九晒熟地黄中的化学成分。方法采用体积分数70%丙酮回流提取,提取物反复利用大孔吸附树脂、十八烷基硅烷键合硅胶填料(ODS)、硅胶及半制备液相等多种色谱方法进行分离纯化,根据化合物的理化性质及波谱特征确定化合物的结构... 详细信息

目的研究九蒸九晒熟地黄中的化学成分。方法采用体积分数70%丙酮回流提取,提取物反复利用大孔吸附树脂、十八烷基硅烷键合硅胶填料(ODS)、硅胶及半制备液相等多种色谱方法进行分离纯化,根据化合物的理化性质及波谱特征确定化合物的结构。结果从熟地黄体积分数70%丙酮提取物中分离得到21个单体化合物,根据其NMR图谱数据结合文献资料,确定21个化合物分别是p-hydroxyphenethyl-O-β-D-glucopyranoside(1)、phenylethyl-O-β-D-glucopyranoside(2)、1'-O-香草酰基-β-D-葡萄糖苷(3)、adoxoside(4)、darendoside B(5)、京尼平苷(6)、8-表番木鳖酸(7)、脱咖啡酰基毛蕊糖苷(8)、毛蕊花糖苷(9)、异毛蕊花糖苷(10)、2-(3,4-二羟苯基)-乙醇β-D-吡喃葡萄糖(11)、ferruginoside B(12)、kankanoside F(13)、leucoseceptoside A(14)、purpureaside C(15)、jionoside A1(16)、rehmaionoside C(17)、2-(4-羟基苯基)-2-氨基乙醇(18)、2,3-二羟基苯甲酸(19)、间苯三酚三甲醚(20)和香草乙酮(21)。结论从熟地黄中分离得到的21个化合物均为已知化合物,且化合物2~3、12~13、18~21是首次从地黄中分离得到。

关键词：九蒸九晒熟地黄糖苷类酚酸类 1'-O-香草酰基-β-D-葡萄糖苷

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九蒸九晒黄精炮制工艺的研究进展

中草药 2020年第21期51卷 5631-5637页

作者：秦宇雯张丽萍赵祺鲍康德姜程曦温州大学生命科学研究院浙江温州325035 温州医科大学药学院浙江温州325035 浙江省生物医药协同创新中心浙江温州325035 池州市九华山黄精研究所安徽池州242811

九蒸九晒黄精始创于中国古代,发扬于近现代;其炮制工艺历经生用→单蒸→重蒸→九蒸九晒的演变,可达到降低毒性、增强疗效、改变归经、利于贮存、消灭病菌等目的。黄精经九蒸九晒炮制后化学成分和药性药效均发生显著变化,广泛应用于医药... 详细信息

九蒸九晒黄精始创于中国古代,发扬于近现代;其炮制工艺历经生用→单蒸→重蒸→九蒸九晒的演变,可达到降低毒性、增强疗效、改变归经、利于贮存、消灭病菌等目的。黄精经九蒸九晒炮制后化学成分和药性药效均发生显著变化,广泛应用于医药品、保健品、食品、化妆品等领域。从九蒸九晒黄精炮制工艺的历史沿革、炮制机制、成分变化及临床应用等方面进行综述,为优化九蒸九晒黄精炮制工艺研究提供科学依据,为建立九蒸九晒黄精的质量标准控制体系奠定基础,也为遵古炮制研究提供参考依据。

关键词：黄精九蒸九晒炮制工艺历史沿革炮制机制应用开发

基于经典“九蒸九晒”法不同炮制程度何首乌的化学质量概貌评价

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中国中药杂志 2019年第23期44卷 5151-5158页

作者：成颜芬聂欣谭睿张良吴亿晗章津铭傅超美成都中医药大学药学院四川成都611137 西南交通大学医学院四川成都610031

遵循古法九蒸九晒,探究何首乌不同炮制过程中化学成分的变化规律和质量概貌。采用传统经典黑豆汁九蒸九晒法和现行版药典法进行炮制,测定不同炮制程度何首乌成品中二苯乙烯苷、蒽醌、多糖含量;并建立HPLC化学指纹图谱,采用SIMCA 14.1软... 详细信息

遵循古法九蒸九晒,探究何首乌不同炮制过程中化学成分的变化规律和质量概貌。采用传统经典黑豆汁九蒸九晒法和现行版药典法进行炮制,测定不同炮制程度何首乌成品中二苯乙烯苷、蒽醌、多糖含量;并建立HPLC化学指纹图谱,采用SIMCA 14.1软件对不同炮制成品进行正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA),以评价各样品之间的质量差异。含量测定结果表明,随着炮制次数和蒸晒时间的增加,九蒸九晒炮制过程中的何首乌和药典品中二苯乙烯苷、结合蒽醌总体呈现降低趋势,游离蒽醌、总蒽醌、多糖呈现上升趋势,且发现六蒸六晒品作为何首乌九蒸九晒法的炮制终点。指纹图谱结果表明,不同炮制过程何首乌之间化学成分存在显著差异,指认出二苯乙烯苷(13号峰),大黄素(21号峰),大黄素甲醚(24号峰),通过比较样品中26个色谱峰经归一化处理后的相对峰面积(参照峰为7号峰),发现炮制品中12个色谱峰的相对峰面积较于生品升高,13个色谱峰则降低;结合相对峰面积的OPLS-DA统计分析,可进一步将不同炮制程度的何首乌样品分为三类,样品S1为Ⅰ类,S2~S5为Ⅱ类,S6~S11为Ⅲ类,且VIP大于1.0的有8个色谱峰,按大小依次为13,21,4,3,11,14,5,24号色谱峰,该8种化学成分是区分九蒸九晒炮制过程中何首乌样品之间差异的主要成分,同时说明将二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚作为何首乌质量控制指标具有合理性。该文方法符合方法学验证要求,建立了多成分含量测定结合指纹图谱方法,明确六蒸六晒法作为何首乌经典炮制工艺的改良,更加清晰地掌握何首乌在九蒸九晒炮制中化学成分的动态变化全过程,为九蒸九晒法何首乌的化学质量评价模式提供依据。

关键词：何首乌九蒸九晒二苯乙烯苷蒽醌多糖含量测定化学指纹图谱正交偏最小二乘法-判别分析

基于靶标循环放大策略的双色荧光传感体系探索何首乌“九蒸九晒”炮制过程中不同蒸制次数对肾细胞的减毒作用

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中草药 2022年第8期53卷 2383-2389页

作者：高涵刘史佳庞会明田蒋为戚进中国药科大学中药学院江苏南京211198 江苏省中医院药学部江苏南京210029

目的通过采用所建立的双色荧光传感体系nanoflare测定肾细胞分泌的miR-21和miR-200c表达,观察经“九蒸九晒”炮制后的制首乌对肾细胞的毒性作用。方法生首乌和不同炮制次数制首乌的水提物与肾细胞孵育后,利用双色荧光传感体系nanoflare... 详细信息

目的通过采用所建立的双色荧光传感体系nanoflare测定肾细胞分泌的miR-21和miR-200c表达,观察经“九蒸九晒”炮制后的制首乌对肾细胞的毒性作用。方法生首乌和不同炮制次数制首乌的水提物与肾细胞孵育后,利用双色荧光传感体系nanoflare对给药前后细胞培养基中的miR-21和miR-200c进行定量检测。结果通过比较不同炮制次数的何首乌水提物的毒性,发现伴随着炮制次数的增加,双色荧光传感体系的荧光恢复强度在不断减弱,制首乌水提物处理后的细胞培养基中miR-21和miR-200c的表达在不断减少,说明在炮制过程中毒性逐渐减弱,炮制至第9次时毒性明显减弱,对肾细胞未产生明显毒性,表明制首乌水提物对肾细胞的毒性随炮制次数增加在不断降低。结论生首乌毒性很强,而经炮制后的制首乌毒性逐渐减弱,在炮制次数超过9次后基本无毒,表明通过“九蒸九晒”在细胞水平可以达到减毒的作用,为制首乌炮制工艺与质量标准的完善提供参考。

关键词：药物性肾损伤微小RNA 靶标循环放大策略何首乌炮制减毒九蒸九晒

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS分析黄精九蒸九晒炮制过程中化学成分的变化

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中草药 2022年第16期53卷 4948-4957页

作者：梁泽华潘颖洁邱丽媛吴鑫雨徐晓强舒月文袁强浙江中医药大学药学院浙江杭州311400 浙江枣椿堂农业发展有限公司浙江龙游324400

目的应用固相萃取结合超高效液相色谱-电喷雾四级杆飞行时间质谱联用技术(UPLC-Q-TOF-MS),对黄精九蒸九晒炮制过程中的化学成分进行分析鉴定。方法采用ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以乙腈-0.1%甲酸水作为流... 详细信息

目的应用固相萃取结合超高效液相色谱-电喷雾四级杆飞行时间质谱联用技术(UPLC-Q-TOF-MS),对黄精九蒸九晒炮制过程中的化学成分进行分析鉴定。方法采用ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以乙腈-0.1%甲酸水作为流动相梯度洗脱,体积流量0.3 mL/min,在电喷雾负离子模式下进行检测,四级杆飞行时间串联质谱对各主要色谱峰进行归属。结果根据所获得的精确相对分子质量,同时结合色谱保留行为、质谱裂解规律、特征碎片离子、对照品比对以及相关文献报道,共鉴定炮制前后黄精中的61个化学成分,包括16个甾体皂苷类成分、12个黄酮类成分、5个木脂素类成分、1个香豆素类成分、3个生物碱类成分、4个脂肪酸类成分、3个氨基酸类成分、2个糖类成分、4个酯类成分、1个醛类成分、1个有机酸类成分及9个未知成分。结论炮制对黄精中的化学成分影响很大,随着炮制时间的增加如成分异构化、原生苷种类以及含量减少、苷元含量的增加等。九蒸九晒黄精增效作用炮制或许与其化学成分变化有关,为黄精九蒸九晒炮制机制的研究提供理论依据,为黄精的进一步开发利用提供科学依据。

关键词：黄精 UPLC-Q-TOF-MS 九蒸九晒炮制成分变化薯蓣皂苷元黄精皂苷A

九蒸九晒熟地黄多糖影响Lewis肺癌荷瘤小鼠细胞凋亡发生机制的研究

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中药材 2018年第12期41卷 2795-2801页

作者：李娴李姗姗王新新赵素容刘浩蚌埠医学院安徽蚌埠233030

目的:探讨九蒸九晒熟地黄多糖(RGP)对Lewis肺癌细胞凋亡的作用机制,为临床治疗提供实验依据。方法:建立Lewis肺癌小鼠模型,给予不同剂量RGP,给药3 w,利用流式细胞术检测凋亡;Western blot检测凋亡蛋白;ELISA检测免疫指标。体外实验RGP... 详细信息

目的:探讨九蒸九晒熟地黄多糖(RGP)对Lewis肺癌细胞凋亡的作用机制,为临床治疗提供实验依据。方法:建立Lewis肺癌小鼠模型,给予不同剂量RGP,给药3 w,利用流式细胞术检测凋亡;Western blot检测凋亡蛋白;ELISA检测免疫指标。体外实验RGP以不同浓度作用于Lewis肺癌细胞。流式细胞术检测细胞凋亡;MTT法检测细胞增殖;荧光染色检测线粒体膜电位;Western blot检测凋亡蛋白。结果:动物实验中,与模型组比较,RGP组的凋亡指数、凋亡蛋白(Bax、Caspase)表达以及免疫指标均显著升高(P<0.01),Bcl-2表达显著降低(P<0.01),且呈剂量依赖性。细胞实验中,RGP组细胞凋亡率、凋亡蛋白(Bax、Caspase)表达显著升高(P<0.01);肺癌细胞增殖减少;线粒体膜电位降低,Bcl-2表达显著降低(P<0.01),且呈浓度依赖性。结论:RGP可抑制Lewis肺癌细胞增殖,促进凋亡,这一系列反应可能与诱发凋亡蛋白和增强免疫应答有关。

关键词：九蒸九晒熟地黄多糖增殖凋亡免疫

熟地黄炮制(九蒸九晒)过程中药效化学成分量变化及炮制辅料对其影响研究

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中草药 2016年第5期47卷 752-759页

作者：孟祥龙马俊楠张朔生李坤薛非非张洁原志翠田叶飞王明芳山西中医学院制药与食品工程学院山西晋中030619

目的基于HPLC法探讨炮制辅料黄酒对九蒸九晒制备得到的熟地黄的化学成分动态变化的影响差异性。方法色谱柱为Hypersil GOLD a Q C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),体积流量为1 m L/min,柱温为25℃。梓醇定量测定:流动相为乙腈-0.1%磷... 详细信息

目的基于HPLC法探讨炮制辅料黄酒对九蒸九晒制备得到的熟地黄的化学成分动态变化的影响差异性。方法色谱柱为Hypersil GOLD a Q C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),体积流量为1 m L/min,柱温为25℃。梓醇定量测定:流动相为乙腈-0.1%磷酸水(1∶99),检测波长为210 nm;地黄苷A定量测定:流动相为乙腈-0.1%磷酸水(3∶97),检测波长为203 nm;地黄苷D和益母草苷定量测定:流动相为乙腈-0.1%磷酸水(4∶96),检测波长为203 nm;毛蕊花糖苷定量测定:流动相为乙腈-0.1%磷酸水(16∶84),检测波长为334 nm;5-羟甲基糠醛(5-HMF)定量测定:流动相为乙腈-0.1%磷酸水(11∶89),检测波长为284 nm。糖类成分的测定:色谱柱为Accurasil NH2柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(72∶28),体积流量为1 m L/min,柱温25℃,检测器为ELSD,Alltech2000ES,漂移管温度93℃,气体体积流量2.6 L/min。采用SPSS 20.0进行统计分析,将清蒸-九蒸九晒与酒蒸-九蒸九晒制得的不同蒸晒次数的熟地黄中12种化学成分定量测定数据进行配对样本t-检验。结果随蒸晒次数的增加,清蒸法与酒蒸法制得熟地黄中梓醇及益母草苷、毛蕊花糖苷、水苏糖、蔗糖、棉子糖均减少;地黄苷A及地黄苷D略为增加;5-HMF、果糖、葡萄糖、甘露三糖均增加。结论建立的方法符合方法学验证要求。在古法熟地黄九蒸九晒的炮制过程中,炮制辅料黄酒对炮制品的质量存在显著影响,且清蒸法与酒蒸法均以第3次、第4次及第6次蒸晒所得熟地黄的相关物质的量呈较大的波动性。

关键词：熟地黄中药炮制九蒸九晒炮制辅料梓醇地黄苷A 地黄苷D 益母草苷毛蕊花糖苷 5-羟甲基糠醛糖类成分

基于智能感官分析技术的九蒸九晒大黄饮片气味表征

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中国实验方剂学杂志 2022年第20期28卷 116-121页

作者：刘涛涛代悦于淼肖永庆李丽中国中医科学院中药研究所北京100700

目的:通过对大黄九蒸九晒炮制过程中的气味物质进行分析,探究九蒸九晒炮制过程中大黄气味的变化规律。方法:运用电子鼻系统对1~9次蒸晒大黄、生大黄、熟大黄样品进行气味分析,通过主成分分析(PCA)、线性判别分析(LDA)及载荷(Loadings)... 详细信息

目的:通过对大黄九蒸九晒炮制过程中的气味物质进行分析,探究九蒸九晒炮制过程中大黄气味的变化规律。方法:运用电子鼻系统对1~9次蒸晒大黄、生大黄、熟大黄样品进行气味分析,通过主成分分析(PCA)、线性判别分析(LDA)及载荷(Loadings)分析对获得的特征数据进行处理和分析。结果:以蒸晒6次为转折点,可以从气味上将不同蒸晒次数的大黄供试品分为两大类,蒸晒1~5次的大黄供试品可聚为一类,而蒸晒6~9次的大黄供试品气味与蒸晒1~5次样品有明显差异,主要气味物质在蒸晒第6次时达到最大响应,六蒸六晒大黄无机硫类化合物的响应值约为一蒸一晒大黄的2.7倍。此外,与生大黄比较,传统九蒸九晒大黄和现代熟大黄的气味均发生了明显改变,其中九蒸九晒大黄无机硫类化合物的响应值约为生大黄的2.2倍。从气味角度分析,九蒸九晒大黄中无机硫类化合物、氮氧类化合物的响应值均高于熟大黄,提示二者并不能完全等同。结论:电子鼻技术从气味特征上初步明确了大黄九蒸九晒炮制过程中气味的动态变化规律,并且从气味特征上明确了九蒸九晒大黄与熟大黄的差异,为揭示大黄九蒸九晒炮制原理奠定了研究基础。

关键词：电子鼻大黄九蒸九晒智能感官技术中药炮制主成分分析(PCA) 线性判别分析(LDA)

古代经典九蒸九晒炮制过程中何首乌饮片物质基础与颜色特征的相关性分析

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中国实验方剂学杂志 2023年第16期29卷 178-187页

作者：于淼代悦刘涛涛肖永庆李丽中国中医科学院中药研究所北京100700

目的:分析古代经典九蒸九晒炮制过程中何首乌饮片主要化学成分及颜色特征的动态变化规律,探讨二者变化的相关性。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)测定九蒸九晒炮制过程中何首乌饮片没食子酸、二苯乙烯苷、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大... 详细信息

目的:分析古代经典九蒸九晒炮制过程中何首乌饮片主要化学成分及颜色特征的动态变化规律,探讨二者变化的相关性。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)测定九蒸九晒炮制过程中何首乌饮片没食子酸、二苯乙烯苷、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素、大黄素甲醚等6种成分含量;采用电子眼技术对九蒸九晒炮制过程中何首乌饮片颜色进行客观表征;利用偏最小二乘法(PLS)对主要成分含量与颜色特征进行相关性分析。结果:何首乌饮片九蒸九晒炮制过程中,随着蒸晒次数的增加,没食子酸含量逐渐增加,其余成分含量呈现波动性变化,二苯乙烯苷、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷含量总体呈减少趋势,大黄素、大黄素甲醚含量总体呈增加趋势。电子眼结果显示,何首乌饮片九蒸九晒炮制过程中颜色总体变深变红变蓝。6种主要成分含量和颜色的系统聚类分析(HCA)和主成分分析(PCA)结果均显示,何首乌饮片九蒸九晒炮制过程中一蒸一晒至四蒸四晒聚为一类,五蒸五晒至九蒸九晒聚为一类。何首乌饮片九蒸九晒炮制过程中没食子酸、二苯乙烯苷与颜色指标呈显著相关。结论:古代经典九蒸九晒炮制过程中何首乌饮片物质基础与颜色特征的总体变化具有一定规律,通过颜色与指标成分相关性模型的建立,可以实现对何首乌饮片炮制程度的判断及质量评价。

关键词：何首乌古代经典炮制方法九蒸九晒物质基础颜色特征相关性分析