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microRNA-654调控巨噬细胞游走抑制因子抗东方泰勒虫感染长角血蜱的作用

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中国兽医科学 2022年第8期52卷 1023-1030页

作者：罗金刘文阁任巧云严若峰宋小凯刘光远李祥瑞南京农业大学动物医学院教育部动物健康与食品安全国际合作联合实验室江苏南京210095 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046

为了解microRNA(mi RNA)调控巨噬细胞游走抑制因子(MIF)抗东方泰勒虫感染长角血蜱的作用,利用PCR扩增获得MIF基因的完整ORF,并进行体外原核表达,制备抗原免疫家兔,验证MIF重组蛋白对长角血蜱发育的影响。另外,预测可能调控MIF基因的mi ... 详细信息

为了解microRNA(mi RNA)调控巨噬细胞游走抑制因子(MIF)抗东方泰勒虫感染长角血蜱的作用,利用PCR扩增获得MIF基因的完整ORF,并进行体外原核表达,制备抗原免疫家兔,验证MIF重组蛋白对长角血蜱发育的影响。另外,预测可能调控MIF基因的mi RNA分子,用双荧光素酶报告系统分析mi RNA与靶标基因之间的调控关系,并解析此作用下靶标基因引起的抗病原作用。结果显示,MIF基因是一个包含348 bp核酸,编码116个氨基酸的片段。动物免疫试验证实,MIF+GST重组蛋白对蜱发育的各项生理指标影响较小。并且MIF受mi R-654的负调控,其调控效率达到60%。在蜱体中,mi RNA抑制后的MIF表达对东方泰勒虫感染不同发育阶段的长角血蜱有一定的识别和清除作用,可降低蜱体中约55%的虫体。尽管MIF对蜱的发育没有明显影响,但是在蜱抗病原感染过程中扮演着重要的角色。mi RNA作为功能基因的重要调控因子,在MIF识别和清除病原方面发挥着重要作用。为进一步蜱传疾病的防控提供了新的策略。

关键词：巨噬细胞游走抑制因子 microRNA 长角血蜱东方泰勒虫抗感染

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东方泰勒虫直接PCR检测方法的建立及应用

东方泰勒虫直接PCR检测方法的建立及应用

作者：赵云延边大学

学位级别：硕士

东方泰勒虫(Theileria Oriental)是一种经蜱传播的胞内原生动物寄生虫,在世界范围内广泛分布。该病原体能够引发牛东方泰勒虫病,其主要临床表现为发热、溶血性贫血、生产力下降、乳牛和肉牛的流产或死亡,给养牛业造成了经济损失和危害... 详细信息

东方泰勒虫(Theileria Oriental)是一种经蜱传播的胞内原生动物寄生虫,在世界范围内广泛分布。该病原体能够引发牛东方泰勒虫病,其主要临床表现为发热、溶血性贫血、生产力下降、乳牛和肉牛的流产或死亡,给养牛业造成了经济损失和危害。目前,血液直接PCR检测方法因其不需要提取DNA而直接应用血液,从而节约时间减少成本故逐渐发展并应用于动物疾病流行病学研究。因此本试验直接以患东方泰勒虫病的牛血液为模板,建立了血液直接PCR检测方法。本文首先根据Genbank上发布的东方泰勒虫p33基因序列[DQ078264.1]设计一对特异性引物,并以血液为模版,采用血液直接PCR反应体系扩增出一条416 bp大小的条带,通过测序得到的核酸序列与基因文库中发表的p33基因进行序列比对同源性高达99%,进而确定该目的片段为p33基因。此外,本试验设计的引物均未能对弓形虫、新孢子虫、牛附红细胞体扩增出目的条带,说明该方法具有良好的特异性。同时,该方法能检测出1μL血液最大稀释倍数为40倍。说明该方法具有良好的敏感性。另外,分别对5份同一批的东方泰勒虫阳性血液样品进行血液直接PCR检测以及常规PCR检测并重复3次试验结果一致说明该方法重复性良好。采集吉林省多个县市共210份疑似牛东方泰勒虫抗凝血进行血液直接PCR检测,与常规PCR法进行比较,确定该方法在诊断检测方面的优势。结果显示,直接PCR总阳性率为30.0%,而常规PCR总阳性率为25.7%,两种方法的符合率为94.0%,一致性分析Kappa值为0.85。阳性符合率为80.0%,阴性符合率为92.0%;通化地区阳性率最高,为75.0%,而洮南地区阳性率最低,为12.0%,不同地区阳性率之间存在统计学差异(P东方泰勒虫感染率为21.1%～75.9%结果相符。结果表明该方法更值得推广和应用。本试验建立一种简便、快捷、敏感、特异的东方泰勒虫快速检测方法,可适用于东方泰勒虫病的诊断和流行病调查。

关键词：东方泰勒虫 p33基因直接PCR

延边某地长角血蜱和全沟硬蜱体内东方泰勒虫的分子生物学检测

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中国兽医杂志 2016年第8期52卷 90-92页

作者：李鸣金春梅李红旺孙经宇宋贺赵冠姝于龙政延边大学农学院动物医学系吉林延吉133000

为调查吉林省延边地区自然生境内游离蜱携带东方泰勒虫的情况,以东方泰勒虫主要表面蛋白基因(MPSP)基因为靶基因,采用PCR方法对延边地区自然生境内的游离蜱DNA进行扩增。在长角血蜱的DNA中检测了东方泰勒虫,检出率为29%;而全沟硬蜱中没... 详细信息

为调查吉林省延边地区自然生境内游离蜱携带东方泰勒虫的情况,以东方泰勒虫主要表面蛋白基因(MPSP)基因为靶基因,采用PCR方法对延边地区自然生境内的游离蜱DNA进行扩增。在长角血蜱的DNA中检测了东方泰勒虫,检出率为29%;而全沟硬蜱中没有检测到东方泰勒虫。结果表明,自然生境中的游离长角血蜱体内携带着东方泰勒虫。

关键词：蜱东方泰勒虫长角血蜱全沟硬蜱

牛东方泰勒虫与嗜吞噬细胞无形体的流行病特征及诊断方法研究进展

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牡丹江医学院学报 2018年第1期39卷 95-97页

作者：董琦张春军于龙政牡丹江医学院黑龙江牡丹江157011 延边大学动物医学系吉林延边133002

牛东方泰勒虫是由泰勒科泰勒属的东方泰勒虫寄生于牛体内的一种血液原虫;嗜吞噬细胞无形体是一种革兰阴性菌,专性细胞内寄生,主要侵染宿主的髓系细胞和非髓系细胞,引起人粒细胞无形体病。论文总结近年来对牛东方泰勒虫与嗜吞噬细胞无形... 详细信息

牛东方泰勒虫是由泰勒科泰勒属的东方泰勒虫寄生于牛体内的一种血液原虫;嗜吞噬细胞无形体是一种革兰阴性菌,专性细胞内寄生,主要侵染宿主的髓系细胞和非髓系细胞,引起人粒细胞无形体病。论文总结近年来对牛东方泰勒虫与嗜吞噬细胞无形体分子流行病的研究,如致病特征和诊断方法的研究成果,并对文献进行分析,关于牛东方泰勒虫与嗜吞噬细胞无形体的分子流行病的研究,还有很多领域的问题亟待研究解决,由于前期研究提示不同地域来源的病原体具有不同的遗传进化背景,可能具有不同的致病特征和诊断方法,我们需要进一步研究各地牛东方泰勒虫和嗜吞噬细胞无形体的流行病特征和适宜的诊断方法的进展。

关键词：东方泰勒虫嗜吞噬细胞无形体牛 PCR 流行病学

牛东方泰勒虫P32主要表面蛋白基因的克隆与分析

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寄生虫与医学昆虫学报 2007年第4期14卷 204-207页

作者：杨艳玲张西臣张国才白光彦李建华吉林大学畜牧兽医学院长春130062 吉林市丰满区小白山乡畜禽防疫服务中心吉林132108

通过PCR技术从感染吉林株东方泰勒虫的病牛血液中扩增出868bp的表面蛋白P32基因,经测序比较分析发现与韩国株核苷酸和氨基酸的同源性分别为99%和98%。和我国延边株核苷酸和氨基酸的同源性分别为99%和98%。将所得的吉林株东方泰勒虫P32... 详细信息

通过PCR技术从感染吉林株东方泰勒虫的病牛血液中扩增出868bp的表面蛋白P32基因,经测序比较分析发现与韩国株核苷酸和氨基酸的同源性分别为99%和98%。和我国延边株核苷酸和氨基酸的同源性分别为99%和98%。将所得的吉林株东方泰勒虫P32蛋白基因序列提交GenBank,基因注册号为EU047751。

关键词：东方泰勒虫克隆测序 P32表面蛋白 PCR

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吉林省延边地区牛泰勒虫病分子流行病学调查

吉林省延边地区牛泰勒虫病分子流行病学调查

作者：亢健美延边大学

学位级别：硕士

牛泰勒虫是寄生在牛淋巴细胞和红细胞内的一种蜱传性寄生虫,主要引起牛发热、贫血、黄疸及体表淋巴结肿大等临床症状。我国主要存在东方泰勒虫、中华泰勒虫及环形泰勒虫三种牛泰勒虫。牛泰勒虫病与蜱的活动区域、流行状况密切相关,该病... 详细信息

牛泰勒虫是寄生在牛淋巴细胞和红细胞内的一种蜱传性寄生虫,主要引起牛发热、贫血、黄疸及体表淋巴结肿大等临床症状。我国主要存在东方泰勒虫、中华泰勒虫及环形泰勒虫三种牛泰勒虫。牛泰勒虫病与蜱的活动区域、流行状况密切相关,该病呈现明显的地区性和季节性流行,很难彻底消灭,严重感染时甚至会引起感染牛的死亡,给养牛业带来巨大经济损失和潜在威胁。为了解吉林省延边地区牛泰勒虫感染情况,本试验根据GenBank中Theileria spp的 18SrRNA 基因、*** 的 Tams-1 基因、*** 的 MPSP 基因、***的MPSP基因序列,设计特异性引物,应用PCR方法对吉林省延边地区的和龙、珲春、龙井、延吉等地采集的256份牛血液样本进行了牛泰勒虫病分子检测,并对扩增的基因进行了序列进化分析及虫种鉴定。结果表明,采自吉林省延边地区四个县市的256份牛血液样本经PCR检测均有牛泰勒虫感染;经对扩增基因的序列分析,确定感染虫体为中华泰勒虫和东方泰勒虫两种虫体,无环形泰勒虫感染;其中中华泰勒虫的感染率为37.5%(96/256),东方泰勒虫感染率为39.1%(100/256),中华泰勒虫和东方泰勒虫混合感染率为34.8%(89/256)。本试验为吉林省延边地区牛泰勒虫病的有效防控提供了科学的流行病学资料。

关键词：牛泰勒虫东方泰勒虫中华泰勒虫延边流行病学

湖南牛场蜱虫携带血液寄生虫和人畜共患病原的调查分析

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湖南牛场蜱虫携带血液寄生虫和人畜共患病原的调查分析

作者：鲍翔宇湖南农业大学

学位级别：硕士

湖南省养牛业正在向规模化方向发展,蜱虫在牛群上的寄生现象仍然存在。许多蜱传病的散发与流行,对公共卫生安全和养牛业健康发展存在潜在的负面影响。为了解湖南省牛场蜱虫携带双芽巴贝斯虫、东方泰勒虫、边缘无浆体、伯氏疏螺旋体、发... 详细信息

湖南省养牛业正在向规模化方向发展,蜱虫在牛群上的寄生现象仍然存在。许多蜱传病的散发与流行,对公共卫生安全和养牛业健康发展存在潜在的负面影响。为了解湖南省牛场蜱虫携带双芽巴贝斯虫、东方泰勒虫、边缘无浆体、伯氏疏螺旋体、发热伴血小板减少综合征新布尼亚病毒、嗜吞噬细胞无形体和埃立克体的情况。于2020年8月～11月份收集了湖南省8个市州37个牛场的微小牛蜱1649只。1649只蜱虫按场点进行混样,每10只蜱虫混为一个样本、如不足10只的部分以实际数量混为一个样本,共得混合样本172份。通过建立多重荧光PCR方法对血液寄生虫进行检测,使用商品化试剂盒对人畜共患病进行检测。血液寄生虫检测结果显示:在37个牛场的172个混样中,双芽巴贝斯虫有22个场点为阳性,场阳性率为59.46%,43份混样为阳性,混样阳性率为25.00%;东方泰勒虫有31个场点为阳性,场阳性率为87.78%,150个混样为阳性,混样阳性率为87.21%。边缘无浆体有26个场点为阳性,场阳性率为70.27%,145个混样为阳性,混样阳性率为84.30%。按湖南省地区分布来看,双芽巴贝斯虫的阳性率在16.24%～77.27%;东方泰勒虫的阳性率在20.00%～100%;边缘无浆体的阳性率在63.64%～100%。微小牛蜱携带病原的高峰期多在8、9月份,并存在混合携带多种病原的情况。人畜共患病原的检测结果显示:在37个牛场的172个混样中,未检测到有携带伯氏疏螺旋体和发热伴血小板减少综合征新布尼亚病毒;嗜吞噬细胞无形体有20个场点为阳性,场阳性率为54.45%,60份混样为阳性,混样阳性率为34.88%;埃立克体有9个场点为阳性,场阳性率为24.32%,12个混样为阳性,混样阳性率为6.98%。按湖南省地区分布来看,嗜吞噬细胞无形体的阳性率为11.97%～100%;埃立克体的阳性率为5.98%～13.64%。结论:湖南省牛场收集的微小牛蜱对双芽巴贝斯虫、东方泰勒虫和边缘无浆体的携带率较高,传播这些病原的可能性非常大。在本次采集的样本中未检测到伯氏疏螺旋体和发热伴血小板减少综合征新布尼亚病毒。但对嗜吞噬细胞无形体的携带率较高,且可能存在自然疫源地,需要对该病原进行长时间的监测。微小牛蜱对埃立克体的携带率总体上较低,还需要更加进一步的研究与调查。

关键词：双芽巴贝斯虫东方泰勒虫边缘无浆体嗜吞噬细胞无形体埃立克体

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家畜泰勒虫种之一瑟氏泰勒虫

郑州牧业工程高等专科学校学报 1985年第S1期 33-36页

作者：袁文甫

瑟代泰勒虫(Yakimoff与Dekhtereff1930)同义名。环形泰勒虫(Dschunkowsky与lush,1904).突变泰勒虫(Theiler.1906)?柯其卡突变泰勒虫(Parzwanidze,1925,quoted by krylov1974)?东方泰勒虫(Yakimoff与Soudats c-henkoff,1931)?

关键词：突变泰勒虫东方泰勒虫环形泰勒虫裂殖体长角血蜱水牛泰勒虫交叉免疫试验梨浆虫小泰勒虫扇头