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气道损伤上皮细胞诱导成纤维细胞转分化的病理意义及离子基础

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中华结核和呼吸杂志 2007年第9期30卷 691-696页

作者：陈兴无徐军广州医学院第一附属医院广州呼吸疾病研究所

目的研究气道损伤上皮对上皮下成纤维细胞(SEF)转分化为肌纤维母细胞的影响,探讨支气管哮喘(简称哮喘)特征性气道重塑的机制。方法将气道上皮细胞培养槽与 SEF 或成纤维细胞胶原凝胶共培养4 d,根据培养槽中人气道上皮细胞株(16HBE)的不... 详细信息

目的研究气道损伤上皮对上皮下成纤维细胞(SEF)转分化为肌纤维母细胞的影响,探讨支气管哮喘(简称哮喘)特征性气道重塑的机制。方法将气道上皮细胞培养槽与 SEF 或成纤维细胞胶原凝胶共培养4 d,根据培养槽中人气道上皮细胞株(16HBE)的不同处理方法分为7组。A组:培养槽中无细胞;B 组:培养槽中为正常16HBE;C 组:培养槽中为机械损伤的16HBE;D 组:培养槽中为机械损伤并经细菌脂多糖刺激的16HBE;E 组:培养槽中为预先加入内皮素受体 A 阻断剂BQ123继以机械损伤+细菌脂多糖刺激的16HBE;F 组:培养槽中为预先加入转化生长因子β_1(TGF-β_1)中和抗体继以机械损伤+细菌脂多糖刺激的16HBE;G 组:培养槽中为预先加入 BQ123与 TGF-β_1中和抗体继以机械损伤+细菌脂多糖刺激的16HBE。应用免疫荧光、免疫印迹法观察成纤维细胞α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况,测量各组胶原凝胶(每组计数8个样本)的直径变化,以了解转分化的肌纤维母细胞的收缩反应及其上述处理因素的影响;此外,分别选择部分 A、B、D 组共培养的 SEF 以16HBE 损伤(机械损伤+细菌脂多糖刺激24 h)上清液刺激,观察经共培养诱导转分化的 SEF 胞内钙离子([Ca^(2+)]i)浓度的动态变化(每组至少分析6个细胞)。结果与其他各组比较,D 组 SEF 表达α-SMA 凝胶收缩百分比为[(53±8)%],与 B 组[(10±10)%]、C 组[(24±8)%]、E组[(36±9)%]、F 组[(37±3)%]、G 组[(31±7)%]比较差异均有统计学意义(F=24.80、38.10,P 均上皮促进 SEF 转分化为表达α-SMA、具有显著收缩反应能力的肌纤维母细胞;损伤上皮通过释放内皮素1(ET-1)和TGF-β_1介导了这种转分化的过程;转分化的肌纤维母细胞在损伤上皮培养上清液刺激下,[Ca^(2+)]i内流增加可能是启动其收缩反应能力增强的早期事件。

关键词：细胞上皮成纤维细胞气道

微型角膜刀法准分子激光角膜上皮瓣下磨镶术后兔角膜上皮瓣结构及活性的研究

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中华眼科杂志 2007年第7期43卷 651-657页

作者：刘维锋杜之渝赵武校黄正刘德杰陈颖重庆医科大学附属第二医院眼科中心 400010

目的探讨角膜微型刀上皮瓣下准分子激光原位角膜磨镶术（Epi-LASIK）术后上皮瓣形态结构、活性的变化、周边上皮（上皮瓣切口缘与角膜缘之间的区域）增生情况及其对细胞凋亡的影响。方法对29只新西兰白兔的双眼进行手术，28只眼行Epi—... 详细信息

目的探讨角膜微型刀上皮瓣下准分子激光原位角膜磨镶术（Epi-LASIK）术后上皮瓣形态结构、活性的变化、周边上皮（上皮瓣切口缘与角膜缘之间的区域）增生情况及其对细胞凋亡的影响。方法对29只新西兰白兔的双眼进行手术，28只眼行Epi—LASIK，24只眼行PRK，随机分为4组，在术后1、3、5、7d取标本，6只未手术眼作为空白对照组。采用透射电镜、光镜观察形态结构的变化；冰冻切片行酶组织化学检测上皮瓣细胞活性的变化；石蜡切片行凋亡及增殖细胞核抗原免疫组织化学检测。结果透射电镜发现KM5000D型上皮刀分离的上皮瓣基底膜完整，细胞之间结合紧密，术后上皮瓣与基质粘合牢固。1、3、5、7d上皮瓣细胞三磷酸腺苷酶和葡萄糖．6．磷酸酶活性（上皮瓣与周边上皮细胞酶活性比值）分别为79％、58％、69％、86％和79％、63％、77％、97％；各组Epi-LASIK眼周边上皮细胞活性与空白对照组差异无统计学意义（F=1．09，P〉0．05）。各组Epi-LASIK眼周边上皮增生与空白对照差异无统计学意义（F=1．10，P〉0．05）。Epi-LASIK和PRK组在术后1d基质细胞凋亡数为（3．429±1．693）和（3．796±1．998）个／10000μm^2，差异无统计学意义（t=-0．33，P〉0．05）；而Epi-LASIK眼术后3、5、7d基质细胞凋亡少于PRK，差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论KM5000D型上皮刀分离的上皮瓣结构完整，细胞结合紧密，能保持较高活性，无明显刺激周边角膜上皮增生，有助于抑制凋亡的发生。（中华腠科杂志，2007，43：651-657）

关键词：角膜切削术上皮下激光上皮角膜增生细胞凋亡兔

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三种基因转录因子在大鼠耳蜗大上皮嵴的表达

中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2005年第9期40卷 664-666页

作者：张媛胡吟燕宋巍郭维维翟所强解放军总医院耳鼻咽喉科研究所北京100853

目的检测Math1、Hes1及Hes5在大鼠耳蜗大上皮嵴(greaterepithelial ridge,GER)的表达,初步探讨各基因对毛细胞分化和再生的作用。方法分别取出生当天(P0),出生后第1天(P1)、第3天(P3)、第4天(P4)和第5天(P5)大鼠耳蜗,利用机械分离和酶... 详细信息

目的检测Math1、Hes1及Hes5在大鼠耳蜗大上皮嵴(greaterepithelial ridge,GER)的表达,初步探讨各基因对毛细胞分化和再生的作用。方法分别取出生当天(P0),出生后第1天(P1)、第3天(P3)、第4天(P4)和第5天(P5)大鼠耳蜗,利用机械分离和酶消化相结合的方法分离出相对纯化的GER细胞。Trizol法提取GER细胞总RNA,逆转录聚合酶链反应检测Math1、Hes1及Hes5在GER的表达,琼脂糖凝胶电泳检测结果。结果Math1在P0～P5大鼠GER均有表达,Hes1只在P0～P3大鼠GER有表达,而Hes5在P0～P5大鼠GER中均无表达。结论Math1的表达水平可能只有累积至一定量,才能诱导GER增殖、分化成毛细胞,并且此过程可能同时受Hes1的控制。

关键词：逆转录聚合酶链反应转录因子毛细胞,内基因转录因子大鼠耳蜗上皮聚合酶链反应检测琼脂糖凝胶电泳细胞分化

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结膜上皮干细胞的体外培养与分化的研究进展

中华眼科杂志 2011年第1期47卷 79-82页

作者：李炜炜孙旭光首都医科大学附属北京同仁医院北京同仁眼科中心北京市眼科学与视觉科学重点实验室北京市眼科研究所 100005

结膜上皮干细胞可以分化为结膜上皮细胞和杯状细胞,在维持正常眼表与损伤修复中具有关键作用,具有较强的自我更新和增殖分化能力.因此,结膜上皮干细胞是结膜组织工程种子细胞的重要来源.现就结膜上皮干细胞的生物特性、在眼表的分布、... 详细信息

结膜上皮干细胞可以分化为结膜上皮细胞和杯状细胞,在维持正常眼表与损伤修复中具有关键作用,具有较强的自我更新和增殖分化能力.因此,结膜上皮干细胞是结膜组织工程种子细胞的重要来源.现就结膜上皮干细胞的生物特性、在眼表的分布、常用的检测方法、体外培养情况、诱导分化为杯状细胞的研究进展进行分析.

关键词：干细胞结膜上皮细胞,培养的细胞分化

细菌感染引起大鼠气道上皮细胞损伤及其机制探讨

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中华病理学杂志 2001年第5期30卷 353-356页

作者：熊密许浒车东媛华中科技大学同济医学院病理学教研室武汉430030

目的　探讨肺炎克雷伯杆菌感染导致气道 ,尤其是小气道上皮细胞的损伤及其发生机制。方法　应用多次经鼻腔注入肺炎克雷伯杆菌液的呼吸道感染方法诱发大鼠气道炎症、慢性阻塞性肺疾病动物模型 ,采用扫描电镜、透射电镜及光镜动态观察大... 详细信息

目的　探讨肺炎克雷伯杆菌感染导致气道 ,尤其是小气道上皮细胞的损伤及其发生机制。方法　应用多次经鼻腔注入肺炎克雷伯杆菌液的呼吸道感染方法诱发大鼠气道炎症、慢性阻塞性肺疾病动物模型 ,采用扫描电镜、透射电镜及光镜动态观察大鼠气道的损伤改变 ,用免疫组织化学(SABC法 )和原位杂交法检测小气道上皮细胞肌动蛋白、肿瘤坏死因子 (TNF) α、fos及Jun蛋白及其mRNA表达的变化 ,用放射免疫分析法检测肺组织中TNF α含量。结果　肺炎克雷伯杆菌感染组第1周 ,气管上皮细胞纤毛粘连、倒伏 ,部分脱落 ,小气道上皮细胞间紧密连接破坏 ,间隙增宽 ;第 2周细胞内微丝排列呈束状。第 2、4周 ,各级支气管上皮细胞损伤加重 ,慢性炎症明显 ,细支气管管壁增厚 ,管腔狭窄 ,形成肺气肿。与对照组相比 ,TNF αmRNA表达在第 2、4周显著增高 (P 上皮细胞fos蛋白及其mRNA水平从第 1周起显著增高(P 上皮细胞损伤表现为纤毛粘连、倒伏、脱落 ,细胞间隙增宽 ,有利于细菌侵袭 ,其原因可能与细胞内微丝排列改变有?

关键词：肺疾病阻塞性细菌感染气管上皮细胞活素类

再生丝素膜对转基因角膜上皮细胞表达细胞因子的影响

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中华眼科杂志 2009年第11期45卷 992-998页

作者：张晓峰刘铁连盛伟华杨吉成缪竞成苏州大学附属第一医院眼科 215006 苏州大学医学部细胞与分子生物学教研室 215006

目的探讨再生丝素膜对转基因人角膜上皮细胞表达细胞因子的影响，以及转基因细胞修饰的再生丝索膜构建生物材料复合体的可能性。方法实验研究。兔角膜缘注射重组腺病毒载体血管内皮生长因子165（Ad-VEGF165）诱导新生血管，测量角膜新... 详细信息

目的探讨再生丝素膜对转基因人角膜上皮细胞表达细胞因子的影响，以及转基因细胞修饰的再生丝索膜构建生物材料复合体的可能性。方法实验研究。兔角膜缘注射重组腺病毒载体血管内皮生长因子165（Ad-VEGF165）诱导新生血管，测量角膜新生血管生长面积，分析角膜组织血管内皮细胞生长因子免疫组织化学结果。用再生丝素膜培养角膜上皮细胞，观察细胞形态、生长曲线、Ad—VEGF165感染效率。收集再生丝素膜Ad—VEGF165转基因角膜上皮细胞培养上清，酶联免疫吸附试验法检测上清中血管内皮生长因子、血管生成素1、表皮生长因子、转化生长因子等细胞因子浓度。采用双因素方差分析基因感染和再生丝素膜材料两因素对HCECs细胞因子表达水平的比较。结果（1）角膜缘注射Ad-VEGF165后第1周、第1个月角膜新生血管面积分别为（7．60±1．12）mm^2、（12．28±2．54）mm^2，注射后第3天、第1周、第1个月角膜基质内可见血管内皮生长因子阳性表达。（2）再生丝素膜及无再生丝素膜两种培养条件，角膜上皮细胞细胞形态、生长曲线、Ad-VEGF165感染效率均无明显差异。（3）再生丝素膜培养Ad-VEGF165转基因角膜上皮细胞上清中各细胞因子浓度分别为血管内皮生长因子（721．67±66．97）ng／L、表皮生长因子（1042．67±315．81）ng／L、血管生成素1（2421．00±0．00）ng／L、转化生长因子（313．33±34．06）ng／L。无再生丝素膜Ad-VEGF165转基因角膜上皮细胞培养上清各细胞因子浓度分别为血管内皮生长因子（721．67±66．97）ng／L、表皮生长因子（860．33±315．81）ng／L、血管生成素1（1960．33±797．90）ng／L、转化生长因子（278．00±53．11）ng／L。Ad—VEGF165感染角膜上皮细胞培养上清中各细胞因子浓度均显著高于对照组，分别为血管内皮生长因子（F=168．16，P〈0．0001）、表皮生长因子（F=52．76，P〈0．0001）、血管生成素1（F=12．47，P=0．001）、转化生长因子（F=5．647，P=0．016）。再生丝素膜与无再生丝素膜两种培养条件下，血管内皮生长因子（F=0．071，P=0．793）、表皮生长因子（F=0．563，P=0．465）、血管生成素1（F=0．14，P=0．714）、转化生长因子（F=0．008，P=0．932）浓度比较差异无统计学意义。结论再生丝素膜与细胞培养板一样，Ad-VEGF165转基因角膜上皮细胞目的基因能获得高效表达，同时还使角膜上皮细胞自分泌的新生血管相关细胞因子表皮生长因子、血管生成素1、转化生长因子等获得高效表达。

关键词：丝素蛋白上皮角膜上皮细胞腺病毒科血管内皮生长因子A

人工智能技术辅助测量宫颈黏膜鳞状上皮厚度及其与宫颈癌前病变的相关性分析

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中华病理学杂志 2021年第4期50卷 339-343页

作者：王爱春王利群李静李明霞涂铃铃张潆心刘爱军解放军总医院第一医学中心病理科北京100853 解放军总医院第七医学中心病理科北京100700 解放军总医院妇产医学部北京100700 嘉兴清格医疗科技有限公司 100083

目的探讨宫颈黏膜鳞状上皮厚度及其与宫颈癌前病变的相关性。方法筛选解放军总医院第一医学中心及第七医学中心病理科2020年1至6月宫颈活检组织209例,HE切片总计495张,其中含低级别鳞状上皮内病变(LSIL)的切片数为173张,含高级别鳞状上... 详细信息

目的探讨宫颈黏膜鳞状上皮厚度及其与宫颈癌前病变的相关性。方法筛选解放军总医院第一医学中心及第七医学中心病理科2020年1至6月宫颈活检组织209例,HE切片总计495张,其中含低级别鳞状上皮内病变(LSIL)的切片数为173张,含高级别鳞状上皮内病变(HSIL)的切片数为214张。应用人工智能标注软件,辅助测量每张切片上正常宫颈鳞状上皮、LSIL及HSIL的上皮厚度,每张切片分别选取最厚处、最薄处及中间宽度,3个数值之和除以3即为平均鳞状上皮厚度。然后结合年龄及病理学诊断等资料,进行相关统计学分析。结果 (1)正常宫颈黏膜鳞状上皮平均厚度(245.83±91.40) μm,LSIL上皮平均厚度(222.42±81.22) μm,HSIL上皮平均厚度(195.95±66.59) μm,差异具有统计学意义(P上皮平均层数为(15.5±4.2)层,LSIL病变平均层数为(14.8±4.8)层,HSIL病变上皮平均层数为(15.8±4.8)层。三组之间差异无统计学意义(P>0.05);(3)按照≤30岁,31~40岁,41~50岁,51~60岁及>60岁对年龄进行分层分析,结果显示:正常宫颈黏膜鳞状上皮厚度随着年龄增加逐渐变薄(相关系数r=-0.141 9,P上皮厚度和年龄无显著相关性(P>0.05)。在≤50岁年龄分组内,正常宫颈黏膜鳞状上皮最厚,其次为LSIL,而HSIL上皮厚度最薄,且三者之间差异有统计学意义(P50岁年龄分组内,三者鳞状上皮厚度差异无统计学意义(P>0.05)。结论≤50岁患者的宫颈黏膜鳞状上皮厚度随着癌前病变程度增高逐渐变薄,但50岁以后,随着绝经期到来,正常黏膜上皮萎缩,因此黏膜厚度与病变程度不再具有相关性。另外,也提示阴道镜检查时宫颈醋白试验或碘试验表现与黏膜上皮细胞内蛋白变化相关,而非与上皮层次厚度直接相关。

关键词：人工智能子宫颈上皮

组织工程上皮移植治疗烧伤后部分角膜结膜化的初步观察

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中华眼科杂志 2010年第1期46卷 13-17页

作者：骆非邹留河潘志强韩斌首都医科大学附属北京同仁医院北京同仁眼科中心北京市眼科学与视觉科学重点实验室 100730 北京赛尔泰和生物医药科技有限公司

目的探讨组织工程上皮移植治疗眼表烧伤后因角膜缘干细胞功能障碍导致角膜结膜化的临床疗效。方法系列病例研究。选择2007年12月至2008年5月期间，在首都医科大学附属北京同仁医院、北京同仁眼科中心收治的6例（6只眼）因化学烧伤、热... 详细信息

目的探讨组织工程上皮移植治疗眼表烧伤后因角膜缘干细胞功能障碍导致角膜结膜化的临床疗效。方法系列病例研究。选择2007年12月至2008年5月期间，在首都医科大学附属北京同仁医院、北京同仁眼科中心收治的6例（6只眼）因化学烧伤、热烧伤所致的角膜结膜化患者，采用组织工程上皮移植治疗，术后随访观察6～12个月，对患者的视力、角膜新生血管及角膜透明度进行评估。结果在随访期内，术后6例患者中有5例视力轻度提高，1例视力无变化。6例患者术后角膜新生血管较术前改善，但是在随访末期有1例患者术后新生血管再次长入角膜并大于1／2象限。5例患者的角膜透明度较术前提高。4例患者角膜基本透明，2例患者角膜轻度混浊。结论组织工程上皮移植治疗眼烧伤后角膜结膜化可改善眼表损伤程度。

关键词：组织工程上皮角膜眼烧伤干细胞移植

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间质上皮转化与软组织肉瘤研究进展

中华病理学杂志 2016年第1期45卷 63-66页

作者：齐妍庞丽娟邹泓李锋石河子大学医学院病理系 832002

软组织肉瘤为间质源性恶性肿瘤，在所有恶性肿瘤中仅仅不到1％，相对少见（胃肠道间质瘤除外），每年新发病例欧洲约27908例，美国约5000例，全球约20万，软组织肉瘤来源于多种谱系，范围从惰性到高度侵袭性和转移性的肿瘤。软组织肉瘤... 详细信息

软组织肉瘤为间质源性恶性肿瘤，在所有恶性肿瘤中仅仅不到1％，相对少见（胃肠道间质瘤除外），每年新发病例欧洲约27908例，美国约5000例，全球约20万，软组织肉瘤来源于多种谱系，范围从惰性到高度侵袭性和转移性的肿瘤。软组织肉瘤可发生在四肢、躯干、内脏器官等部位，

关键词：胃肠道间质瘤软组织肉瘤转化上皮恶性肿瘤高度侵袭性新发病例内脏器官