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三叶草斑潜蝇幼期密度效应及其与美洲斑潜蝇的种间竞争

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中国农业科学 2014年第21期47卷 4269-4279页

作者：益浩王凯歌张林雅雷仲仁罗宏伟廉振民周国启中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室陕西师范大学生命科学学院三亚市农业技术推广服务中心

【目的】研究三叶草斑潜蝇(Liriomyza trifolii)卵密度和幼虫密度对其生长发育的影响,探索其种内竞争的密度效应;明确三叶草斑潜蝇与美洲斑潜蝇(***)在不同1龄幼虫密度下,各自幼虫对食物资源的竞争能力,探索两种斑潜蝇之间的种间竞争取... 详细信息

【目的】研究三叶草斑潜蝇(Liriomyza trifolii)卵密度和幼虫密度对其生长发育的影响,探索其种内竞争的密度效应;明确三叶草斑潜蝇与美洲斑潜蝇(***)在不同1龄幼虫密度下,各自幼虫对食物资源的竞争能力,探索两种斑潜蝇之间的种间竞争取代机制。【方法】在实验室饲养条件下,用针刺死三叶草斑潜蝇多余的卵和幼虫,使其形成不同的卵密度梯度和1龄幼虫密度梯度,再继续培养。根据相关文献判定昆虫各种致死因子是否存在密度依存性的方法,令N1为该因子作用前的虫口数,N2为该因子作用后的虫口数。以lgN1为因变量,lgN2为自变量,求回归系数,再以lgN1为自变量,lgN2为因变量,求回归系数。如果这两条直线在b=1的等分线一侧,则认为作用于N1→N2之间的因子为密度依存因子,如果这两条直线在b=1的等分线两侧,则不认为是密度有关因子。选取美洲斑潜蝇和三叶草斑潜蝇各1、2和3对成虫,在固定叶片面积上产卵24 h后,形成不同的卵和幼虫密度,统计后代中两种斑潜蝇的生长状况,分析卵密度和1龄幼虫密度对种间竞争取代的影响。【结果】三叶草斑潜蝇卵期不存在密度效应,卵密度对卵的存活、生长发育以及发育速率均没有显著影响,实验室饲养条件下三叶草斑潜蝇卵存活率均在91%以上;幼虫期存在明显的密度制约效应,幼虫密度对幼虫的存活率、平均蛹重、化蛹率、羽化率、成虫寿命和单雌产卵量均有显著的影响。在寄主植物矮生菜豆上,三叶草斑潜蝇1龄幼虫密度超过0.87头/cm2时,幼虫死亡率上升,平均蛹重减少,化蛹率和羽化率降低,成虫寿命缩短且繁殖力下降。1龄幼虫密度对三叶草斑潜蝇幼虫和蛹的发育速率没有影响,对羽化成虫的雌性比也没有影响;卵密度对两种斑潜蝇各自的竞争力没有影响,不同卵密度下两种斑潜蝇总的孵化率均在94.25%以上。两种斑潜蝇的幼虫密度越高种间竞争越激烈,在幼虫密度较低时,两种斑潜蝇子代数量相当,幼虫密度较高时,三叶草斑潜蝇子代数量明显的高于美洲斑潜蝇的子代数量。【结论】三叶草斑潜蝇卵密度对其种群消长没有显著影响,1龄幼虫密度过高时种内竞争激烈,对其试验种群的增长有很大的抑制作用。与美洲斑潜蝇相比,三叶草斑潜蝇幼虫的种间竞争能力更大,主要原因是三叶草斑潜蝇的幼虫比美洲斑潜蝇的幼虫拥有更强的抗拥挤能力、适应环境恶化的能力以及对食物资源的占有能力。

关键词：三叶草斑潜蝇美洲斑潜蝇密度制约种间竞争

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三叶草斑潜蝇的寄生蜂及其应用

昆虫知识 2010年第4期47卷 646-651页

作者：皇甫伟国唐璞柴伟钢吴琼孙梅梅高明清谌江华陈学新宁波市农业科学研究院宁波315040 教育部作物病虫分子生物学重点开放实验室浙江大学昆虫科学研究所杭州310029

本文就三叶草斑潜蝇Liriomyza trifolii(Burgess)的寄生蜂种类、生物学特性、寄主选择性和农药对寄生蜂的影响及寄生蜂在生物防治中的应用等方面的研究进展进行了综述。

关键词：三叶草斑潜蝇寄生蜂生物防治研究进展

三叶草斑潜蝇hsp70的克隆及其表达量在高低温胁迫下的变化

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植物保护学报 2010年第2期37卷 159-164页

作者：郑丹崔旭红李红亮蔡冲高永生商晗武中国计量学院生命科学学院杭州310018

为了明确高低温胁迫对三叶草斑潜蝇hsp70表达量的影响,采用RT-PCR和RACE技术获得了1条三叶草斑潜蝇诱导型热激蛋白基因hsp70,命名为Lthsp70-1,并利用实时荧光定量PCR技术检测其在温度胁迫后的表达量。该基因的开放阅读框为1923bp,编码64... 详细信息

为了明确高低温胁迫对三叶草斑潜蝇hsp70表达量的影响,采用RT-PCR和RACE技术获得了1条三叶草斑潜蝇诱导型热激蛋白基因hsp70,命名为Lthsp70-1,并利用实时荧光定量PCR技术检测其在温度胁迫后的表达量。该基因的开放阅读框为1923bp,编码640个氨基酸。氨基酸序列中含有HSP70家族的签名序列IFDLGGGTFDVSIL和IVLVGGSTRIPK、DnaK特征基序IDLGTT(Y)S(C)V、非细胞器基序RARFEEL,以及C末端的保守序列EEVD。实时荧光定量PCR结果显示:成虫在31～33℃范围内,其hsp70表达量随温度升高而上升,33℃时达到最高峰;35～39℃时,hsp70表达量迅速下降;蛹经0℃胁迫0.5～2.0h,其hsp70表达量随时间延长呈上升趋势。由此可见,高低温胁迫均能诱导三叶草斑潜蝇hsp70的表达。

关键词：三叶草斑潜蝇热激蛋白基因hsp70 实时荧光定量PCR 表达量温度胁迫

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三叶草斑潜蝇和美洲斑潜蝇的分子鉴定

昆虫知识 2006年第4期43卷 558-561页

作者：管维王章根蔡先全王云华陈定虎中山出入境检验检疫局技术中心中山528400

以三叶草斑潜蝇Liriomyzatrifolii(Burgess)与美洲斑潜蝇LiriomyzasativaeBlanchand为材料,通过特异引物18SP1和5.8SP2,分别扩增出它们的rDNA非编码区ITS1的片段,根据序列分析和比较结果,重新设计出2条新的特异性引物Fly3和Flyus,并筛选... 详细信息

关键词：三叶草斑潜蝇美洲斑潜蝇 ITS1 序列分析

三叶草斑潜蝇对6种寄主植物的选择适应性及其与寄主化学物质含量的关系

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植物保护 2010年第3期36卷 93-96页

作者：郑丹崔旭红李志江陈阳商晗武中国计量学院生命科学学院杭州310018

研究了6种寄主植物(茄子、芹菜、菜豆、青菜、番茄、辣椒)对三叶草斑潜蝇生长发育、存活的影响和三叶草斑潜蝇对这些寄主的偏好性及其选择性机制。结果表明:三叶草斑潜蝇在6种寄主植物上的生长发育历期从短到长依次是茄子<芹菜<菜豆<番... 详细信息

研究了6种寄主植物(茄子、芹菜、菜豆、青菜、番茄、辣椒)对三叶草斑潜蝇生长发育、存活的影响和三叶草斑潜蝇对这些寄主的偏好性及其选择性机制。结果表明:三叶草斑潜蝇在6种寄主植物上的生长发育历期从短到长依次是茄子三叶草斑潜蝇在寄主植物单位面积上的产卵量与植物叶片中可溶性糖含量呈负相关,在单位面积上的取食斑数与植物叶片中叶绿素含量呈正相关。

关键词：三叶草斑潜蝇发育历期存活率选择性

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三叶草斑潜蝇和美洲斑潜蝇汉译名的演变

植物检疫 1999年第3期13卷 46-47页

作者：张慧杰李建社段运虎山西省农业科学院棉花研究所山西省运城地区农业局植保站

斑潜蝇属ＬｉｒｉｏｍｙｚａＭｉｋ隶属双翅目，潜蝇科，植潜蝇亚科Ｐｈｙｔｏｍｙｚｉｎａｅ。该属全世界已经记述了３００余种，遍及各个动物地理分布区，但以北温带地区的物种最为丰富［１］。由于多食性斑潜蝇是世界上蔬菜和观赏植... 详细信息

斑潜蝇属ＬｉｒｉｏｍｙｚａＭｉｋ隶属双翅目，潜蝇科，植潜蝇亚科Ｐｈｙｔｏｍｙｚｉｎａｅ。该属全世界已经记述了３００余种，遍及各个动物地理分布区，但以北温带地区的物种最为丰富［１］。由于多食性斑潜蝇是世界上蔬菜和观赏植物的重要害虫，因此，许多国家和地区...

关键词：三叶草斑潜蝇美洲斑潜蝇汉译名检疫

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三叶草斑潜蝇的收集及室内继代饲养方法

江苏农业学报 2011年第3期27卷 678-679页

作者：陈啸寅白玉梅杨鹤同肖婷潘以楼郭建江苏农林职业技术学院江苏句容212400 江苏丘陵地区镇江农业科学研究所江苏句容212400

三叶草斑潜蝇[Liriomyza trifolii（Burgess）,英文名：A-merican serpentine leafniner]属于双翅目（Diptera）潜蝇科（Agromyzidae）斑潜蝇属。原产于北美,近几年来它已经传播到了欧洲、亚洲、非洲等很多地方。2005年12月,首次在中国... 详细信息

三叶草斑潜蝇[Liriomyza trifolii（Burgess）,英文名：A-merican serpentine leafniner]属于双翅目（Diptera）潜蝇科（Agromyzidae）斑潜蝇属。原产于北美,近几年来它已经传播到了欧洲、亚洲、非洲等很多地方。2005年12月,首次在中国广东省中山市蔬菜基地发现其危害[1]。

关键词：三叶草斑潜蝇采集饲养

三叶草斑潜蝇对不同番茄品种的取食与产卵选择

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中国植保导刊 2013年第2期33卷 52-54,29页

作者：王艳艳陈军朱凌玉崔旭红中国计量学院生命科学学院/浙江省生物计量及检验检疫技术重点实验室浙江杭州310018 中国计量学院现代科技学院.浙江杭州310018

为明确三叶草斑潜蝇对不同番茄品种的选择性,研究了三叶草斑潜蝇在8种不同番茄品种上的取食和产卵情况。结果表明,在可选择条件下,三叶草斑潜蝇在不同番茄品种上的取食斑数量由多到少依次为浙杂205>浙粉202>喜庆红株>金秋福禄>浙杂206>... 详细信息

为明确三叶草斑潜蝇对不同番茄品种的选择性,研究了三叶草斑潜蝇在8种不同番茄品种上的取食和产卵情况。结果表明,在可选择条件下,三叶草斑潜蝇在不同番茄品种上的取食斑数量由多到少依次为浙杂205>浙粉202>喜庆红株>金秋福禄>浙杂206>浙杂203>浙杂809>合作903;在浙杂205上产卵量最高,在金秋福禄上产卵量最少。在非选择条件下,三叶草斑潜蝇在合作903上取食斑最多,在浙杂809上的取食斑最少;而在各番茄品种上的产卵量没有明显差异。

关键词：三叶草斑潜蝇番茄取食斑产卵量

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三叶草斑潜蝇单克隆抗体的制备及其初步应用

三叶草斑潜蝇单克隆抗体的制备及其初步应用

作者：郭伟浙江中医药大学

学位级别：硕士

目的以三叶草斑潜蝇(Liriomyza trifolii)为抗原,制备单克隆抗体(Monoclonal antibody,简称单抗),利用生物学技术研究单抗的特性,优化间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测实验条件,建立一套完整的间接ELISA检测方法鉴定三叶草斑潜蝇。通过... 详细信息

目的以三叶草斑潜蝇(Liriomyza trifolii)为抗原,制备单克隆抗体(Monoclonal antibody,简称单抗),利用生物学技术研究单抗的特性,优化间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测实验条件,建立一套完整的间接ELISA检测方法鉴定三叶草斑潜蝇。通过比较DNA条形码鉴定法和ELISA检测方法的优缺点,明确ELISA检测方法的优势。采集2012年4月-11月份杭州市区及周边县市田间蔬菜样本,利用基于三叶草斑潜蝇单抗建立的间接ELISA检测方法实现对田间三叶草斑潜蝇种群发生动态的监测,为三叶草斑潜蝇的防治提供实验依据。方法①应用杂交瘤技术,以三叶草斑潜蝇蛹作为抗原,制备针对三叶草斑潜蝇的单抗。②采用Western blot、间接ELISA等生物学技术,研究三叶草斑潜蝇单抗的结合蛋白、效价、特异性、灵敏度、最佳工作浓度、亚类等特性。③以三叶草斑潜蝇蛹做为抗原,豌豆彩潜蝇做为阴性对照,倍比稀释,确定三叶草斑潜蝇幼虫、蛹、成虫样品检测的最佳稀释倍数。④提取了三叶草斑潜蝇基因组DNA,以细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(COI)及内转录第一间隔区(ITS1)序列做为DNA条形码,通过PCR扩增了三叶草斑潜蝇COI和ITS1序列的部分片段,经测序、拼接后,与Genbank中三叶草斑潜蝇、美洲斑潜蝇(Liriomyza sativae)、南美斑潜蝇(Liriomyza huidobrenisis)、豌豆彩潜蝇(Chromatomyia horticola)的COI及ITS1序列进行比对,并进行遗传分析。同时比较DNA条形码鉴定法与间接ELISA检测法鉴定三叶草斑潜蝇的优缺点。⑤采集2012年4月～11月杭州市余杭区、滨江区、西湖区及富阳市等地青菜、芹菜、豇豆、四季豆、莴苣、蒿菜和芥菜等蔬菜作物叶片上的潜叶蝇样本,利用已建立的间接ELISA检测方法鉴定,监测各地田间三叶草斑潜蝇的发生量在潜叶蝇中的比例,从而为三叶草斑潜蝇的发生规律研究和防治提供实验依据。结果①应用杂交瘤技术,筛选获得了一株能够稳定分泌三叶草斑潜蝇单抗的杂交瘤细胞株4C9F2。制备并获得腹水型单抗100mL。②采用间接ELISA方法检测三叶草斑潜蝇单抗与南美斑潜蝇幼虫、蛹、成虫在490nm波长的OD值分别为0.267、0.233和0.271,与豌豆彩潜蝇幼虫、蛹和成虫在490nm处的OD值分别为0.221、0.204、0.229。与三叶草斑潜蝇幼虫、蛹和成虫抗原在490nm处的OD值为0.760、0.880、0.698。腹水型单抗的效价为8.192×106。该抗体的检测灵敏度为45.3μ/L。腹水型单抗稀释2×104倍间接ELISA检测的OD值为1.021。4C9F2单抗亚类为IgA。Western blot表明,该单抗能与三叶草斑潜蝇的分子量约为122kDa和68kDa的蛋白条带结合。③田间采集的单头潜叶蝇蛹、幼虫和成虫样品分别用16mL、1mL和500μL包被液研磨后取100μL用于间接ELISA检测,所得检测OD值分别为0.933、1.129、1.047。④COI和ITS1DNA片段作为条形码均可以将三叶草斑潜蝇同其它3种近缘种区分开。对于COI序列,三叶草斑潜蝇与南美斑潜蝇相似度为68%,亲缘关系最近;对于ITS1序列,三叶草斑潜蝇与美洲斑潜蝇相似度为88.5%,亲缘关系最近。⑤田间样品的检测表明,在2010年9月-11月份之间,余杭区、滨江区、西湖区、富阳市等四个区市采集的样品阳性率均在70%-80%之间。在青菜、芹菜、豇豆、四季豆、莴苣和蒿菜等蔬菜作物上采集的潜叶蝇样品的阳性反应率均在50%以上,但不同农作物间的阳性率差异显著,在芹菜上的阳性反应率最高,达到92.4%。结论①应用杂交瘤技术,筛选获得了一株能够稳定分泌三叶草斑潜蝇单抗的杂交瘤细胞株4C9F2。②该细胞株分泌的单抗效价高、特异性强、灵敏度高。在此基础上建立了田间采集的单头潜叶蝇蛹、幼虫和成虫样品分别用16mL、1mL和500μL包被液研磨后取1001μL包被酶标板,单抗稀释20000倍,酶标二抗稀释4000倍的间接ELISA方法用于鉴定田间采集的潜叶蝇是否为三叶草斑潜蝇。③COI和ITS1DNA序列作为DNA条形码和基于单抗的间接ELISA方法均可用于三叶草斑潜蝇的鉴定。但相对而言,DNA条形码鉴定更适于实验室的科学研究。间接ELISA整个过程只需加样操作,技术难度低,适于大量检测田间样本,为实现对外来入侵物种三叶草斑潜蝇的动态检测提供了很好的方法。④在近缘种中,杭州市余杭区、滨江区、西湖区及富阳市的三叶草斑潜蝇多发于9月～11月份。青菜、芹菜、豇豆、四季豆、莴苣和蒿菜均为三叶草斑潜蝇的寄主植物,其中三叶草斑潜蝇偏好于取食芹菜。

关键词：三叶草斑潜蝇单克隆抗体酶联免疫吸附试验 DNA条形码 ITS1序列 COI序列