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肥大细胞、NGF及ASIC3与实验性大鼠Ⅲ型前列腺炎模型慢性骨盆疼痛的相关研究

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肥大细胞、NGF及ASIC3与实验性大鼠Ⅲ型前列腺炎模型慢性骨盆疼痛...

作者：郑明星昆明医科大学

学位级别：硕士

[目的]探讨前列腺组织中肥大细胞、NGF及ASIC3在实验性大鼠Ⅲ型前列腺炎慢性骨盆疼痛中的表达的意义。[方法]选取雄性SD大鼠60只,分为对照组15只(0.9%NaCl盆腔区域皮下、双侧肩胛皮下多点注射)、Ⅲ型前列腺炎模型/EAP组15只(完全弗氏佐... 详细信息

[目的]探讨前列腺组织中肥大细胞、NGF及ASIC3在实验性大鼠Ⅲ型前列腺炎慢性骨盆疼痛中的表达的意义。[方法]选取雄性SD大鼠60只,分为对照组15只(0.9%NaCl盆腔区域皮下、双侧肩胛皮下多点注射)、Ⅲ型前列腺炎模型/EAP组15只(完全弗氏佐剂与前列腺组织混合悬液盆腔区域皮下、双侧肩胛皮下多点注射)、干预组(Ⅰ )15只(EAP模型组基础上加入肥大细胞类胰蛋白酶脱落抑制剂色甘酸钠),干预组(Ⅱ) 15只(EAP模型组基础上加入ASIC3抑制剂阿米洛利)。建立EAP模型过程中,予Von-Frey测痛纤维于第0d、5d、10d、20d、30d、40d于对照组、EAP组进行骨盆区域痛觉测试。建模成功后,干预组(Ⅰ)予色甘酸钠连续腹腔内注射10d,干预组(Ⅱ)予阿米洛利连续腹腔内注射10d,每2d对干预组(!)、干预组(Ⅱ)及EAP组进行痛觉测试。选取4组大鼠的前列腺,进行HE染色及甲苯胺蓝染色病理学检查,并通过免疫组化和Western blot方法检测肥大细胞类胰蛋白酶、NGF及ASIC3的表达。[结果]***-Frey测痛结果显示EAP组大鼠骨盆疼痛表现较对照组明显升高(P 前列腺呈不规则改变,腺体间质内淋巴细胞和中性粒细胞浸润,腺体周围充血;对照组大鼠前列腺未见明显炎症细胞浸润及充血。2.大鼠前列腺组织肥大细胞的研究中,甲苯胺蓝染色:肥大细胞总数及脱颗粒的肥大细胞数目较对照组增加(P 腺体充血及炎症细胞浸润情况较EAP组减轻。免疫组化染色提示:肥大细胞类胰蛋白酶较对照组表达增加(P型组减轻(P 前列腺组织NGF的研究中,免疫组化提示:NGF的蛋白表达较对照组表达增加(P 前列腺组织ASIC3的研究中,HE染色:干预组(Ⅱ)腺体充血及炎症细胞浸润情况较EAP组无明显改变。免疫组化染色提示:ASIC3表达较对照组表达增加(P型组减轻(P 前列腺组织混合悬液的自身免疫法可以成功构建实验性Ⅲ型前列腺炎大鼠模型。2. Von-Frey测痛纤维对对照组、EAP组、干预组(Ⅰ )进行骨盆区域痛觉测试;测试结果与各组前列腺的病理改变相吻合。3. EAP大鼠前列腺组织中肥大细胞的总数及脱颗粒的肥大细胞数目增加,肥大细胞脱颗粒抑制剂色甘酸钠可一定程度上可缓解慢性骨盆疼痛症状,肥大细胞是导致Ⅲ型前列腺炎骨盆区域疼痛介质之一。4. EAP大鼠前列腺组织中NGF表达增加,NGF与EAP大鼠慢性骨盆疼痛呈正相关。5. EAP大鼠前列腺组织中ASIC3表达增加,ASIC3抑制剂阿米洛利可一定程度上可缓解慢性骨盆疼痛症状,ASIC3是导致Ⅲ型前列腺炎骨盆区域疼痛介质之一。

关键词： ⅲ型前列腺炎/慢性前列腺炎慢性骨盆疼痛肥大细胞神经生长因子三型酸敏感离子通道

大麻素、大麻素受体2与实验性大鼠Ⅲ型前列腺炎模型疼痛的相关研究

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大麻素、大麻素受体2与实验性大鼠Ⅲ型前列腺炎模型疼痛的相关研究

作者：华四清昆明医科大学

学位级别：硕士

[目的]研究大麻素及大麻素受体2在实验性大鼠Ⅲ型前列腺炎,前列腺组织中的表达,及表达的影响因素及其所伴随的骨盆疼痛的改变。探讨大麻素及大麻素受体2与实验性大鼠Ⅲ型前列腺炎慢性骨盆疼痛的关系。为Ⅲ型前列腺炎疼痛的治疗提供研究... 详细信息

[目的]研究大麻素及大麻素受体2在实验性大鼠Ⅲ型前列腺炎,前列腺组织中的表达,及表达的影响因素及其所伴随的骨盆疼痛的改变。探讨大麻素及大麻素受体2与实验性大鼠Ⅲ型前列腺炎慢性骨盆疼痛的关系。为Ⅲ型前列腺炎疼痛的治疗提供研究思路。[方法]选取性成熟雄性SD大鼠25只,分为对照组5只(0.9%氯化钠盆腔区域皮下、双侧肩胛皮下、腹腔多点注射)、Ⅲ型前列腺炎模型/EAP组20只(完全弗氏佐剂与前列腺组织混合悬液盆腔区域皮下、双侧肩胛皮下及腹腔内多点注射),建模完成后取5只EAP大鼠的前列腺进行HE染色检测建模成功率;将剩下的EAP组大鼠再分为三组:干预组(Ⅰ)5只(EAP模型组基础上加入大麻二酚干预),干预组(11)5只(EAP模型组基础上加入大麻素受体激动剂GW405833干预),干预组(Ⅲ)5只(EAP模型组基础上加入曲马多干预)。建模成功后,干预组(Ⅰ)予大麻素连续腹腔内注射7 d,干预组(Ⅱ)予大麻素受体激动剂GW405833连续腹腔内注射7d,干预组(Ⅲ)予盐酸曲马多注射液腹腔内注射7d,每2d对干预组(Ⅰ)、干预组(Ⅱ),干预组(Ⅲ)及空白对照组进行痛觉测试。选取4组大鼠的前列腺,进行HE染色病理学检查,并通过免疫组化和Western blot、RT-PCR方法从蛋白及基因水平检测CB2受体的表达。建立EAP模型过程中,予Von-Frey测痛纤维于第0 d、5 d、10 d、20 d、30 d、40 d于对照组、EAP组进行骨盆区域痛觉测试。[结果]***染色显示:模型组(EAP组)大鼠前列腺呈不规则改变,腺体间质内淋巴细胞和中性粒细胞浸润,腺体周围充血;空白对照组大鼠前列腺未见明显炎症细胞浸润及充血。2.免疫组化结果:各组大鼠前列腺细胞中均检测到CB2的表达,大鼠前列腺细胞包浆中可见棕色的物质即为CB2受体,建模成功的大鼠中检测到表达CB2的细胞多于空白对照组大鼠。*** blot结果:各个干预组及空白组中均检测到CB2的表达,且干预组与空白对照组相比较CB2的表达差异具有统计学意义(P干预组(Ⅱ)>干预组(Ⅰ)>空白对照组。***-PCR结果:各个干预组及空白组均检测到表达CB2的基因,其中空白组与各干预组比较干预组表达CB2的基因远高于空白组,差异具有统计学意义(P干预组(Ⅱ)>干预组(Ⅰ)>空白对照组。***-Frey测痛结果显示干预组大鼠对疼痛刺激的反应率较对照组明显升高(P前列腺蛋白提纯液,辅以双重免疫佐剂百白破疫苗的方法可以成功构建实验性Ⅲ型前列腺炎大鼠模型。***-Frey测痛纤维可以用于对对照组、EAP组、干预组(Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ)大鼠进行骨盆区域痛觉测试;测试结果与各组前列腺的病理改变相吻合。3.正常大鼠前列腺组织中及EAP大鼠前列腺组织中均存在CB2受体,且EAP模型组中CB2受体数量较对照组大鼠前列腺组织中的CB2受体数量明显增加,差异具有统计学意义(P慢性骨盆疼痛综合征的发生。4.大麻素及大麻素受体2激动剂能够减轻慢性Ⅲ型前列腺炎大鼠模型的疼痛,与传统镇痛剂曲马多相比有其有效性,其镇痛机制可能与大麻素受体2有关,且各个干预组在病理学上的改变与Von-Frey纤维测痛结果相一致。

关键词： ⅲ型前列腺炎/慢性前列腺炎慢性骨盆疼痛 CB2受体大麻素

ASIC3在实验性大鼠Ⅲ型前列腺炎模型慢性骨盆疼痛中的表达

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昆明医科大学学报 2017年第5期38卷 10-15页

作者：郑明星刘孝东范世成王耀众郎磊郭彩芬昆明医科大学第一附属医院泌尿外一科昆明云南650032

目的探讨三型酸敏感离子通道(ASIC3)与Ⅲ型前列腺炎(CPPS/CP)慢性骨盆疼痛的关系.方法选取雄性SD大鼠45只,分为对照组、Ⅲ型前列腺炎模型/EAP组和干预组,每组15只.建立EAP模型过程中,予Von-Frey测痛纤维于第5、10、20、30、40 d于对照组... 详细信息

目的探讨三型酸敏感离子通道(ASIC3)与Ⅲ型前列腺炎(CPPS/CP)慢性骨盆疼痛的关系.方法选取雄性SD大鼠45只,分为对照组、Ⅲ型前列腺炎模型/EAP组和干预组,每组15只.建立EAP模型过程中,予Von-Frey测痛纤维于第5、10、20、30、40 d于对照组和EAP组进行骨盆区域痛觉测试.建模成功后,干预组予阿米洛利连续腹腔内注射10 d,每2 d对其及EAP组进行痛觉测试.选取3组大鼠的前列腺,进行HE染色染色病理学检查;并通过免疫组化和Western blot方法检测ASIC3的表达.结果 Von-Frey测痛结果显示:EAP模型组大鼠骨盆疼痛表现较对照组明显,干预组大鼠骨盆疼痛表现较EAP组减轻.HE染色提示:EAP组大鼠前列腺间质内淋巴细胞和中性粒细胞浸润,腺体周围充血,腺腔不规则改变.对照组未见明显炎症细胞浸润.与EAP组对比,干预组腺体充血及炎症细胞浸润情况无明显改变.免疫组化染色提示:EAP组大鼠的前列腺组织中,ASIC3表达较对照组表达增加(主要表达于细胞核与细胞浆中)(P前列腺组织中,ASIC3较对照组表达增加(P前列腺组织中ASIC3表达增加,ASIC3是导致Ⅲ型前列腺炎骨盆区域疼痛介质之一,可作为干预及治疗Ⅲ型前列腺炎的其中一个靶向指标.

关键词： ⅲ型前列腺炎/慢性前列腺炎慢性骨盆疼痛三型酸敏感离子通道大鼠模型阿米洛利

肥大细胞与实验性大鼠自身免疫性前列腺炎相关性研究

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中华男科学杂志 2017年第5期23卷 399-405页

作者：郑明星范世成华四清罗云崔庆鹏刘孝东昆明医科大学第一附属医院泌尿外一科云南昆明650032

目的:探讨前列腺组织中的肥大细胞在Ⅲ型前列腺炎(CP/CPPS)中的作用。方法:选取雄性SD大鼠45只,分为对照组(0.9%NaCl盆腔区域及双侧肩胛皮下多点注射)、自身免疫性前列腺炎(EAP)模型组(完全弗氏佐剂与前列腺组织混合悬液盆腔区域及双侧... 详细信息

目的:探讨前列腺组织中的肥大细胞在Ⅲ型前列腺炎(CP/CPPS)中的作用。方法:选取雄性SD大鼠45只,分为对照组(0.9%NaCl盆腔区域及双侧肩胛皮下多点注射)、自身免疫性前列腺炎(EAP)模型组(完全弗氏佐剂与前列腺组织混合悬液盆腔区域及双侧肩胛皮下多点注射)、干预组(EAP模型组基础上加入肥大细胞类胰蛋白酶脱落抑制剂色甘酸钠),每组15只。建立EAP模型过程中,用Von-Frey测痛纤维在第5、10、20、30、40天对对照组、EAP组进行骨盆区域痛觉测试。建模成功后,干预组予色甘酸钠连续腹腔内注射10 d,每两天对其及EAP组进行痛觉测试。选取3组大鼠的前列腺,进行HE染色及甲苯胺蓝染色病理学检查;并通过免疫组化和Western印迹法检测肥大细胞类胰蛋白酶的表达。结果:Von-Frey测痛结果显示:EAP模型组大鼠骨盆疼痛表现较对照组明显,干预组大鼠骨盆疼痛表现较EAP组减轻。HE染色提示:EAP组大鼠前列腺间质内淋巴细胞和中性粒细胞浸润,腺体周围充血。对照组未见明显炎症细胞浸润。与EAP组对比,干预组腺体充血及炎症细胞浸润情况较之减轻。甲苯胺蓝染色提示:EAP组大鼠的前列腺组织中,肥大细胞总数及脱颗粒的肥大细胞数目较对照组增加(P前列腺组织中,肥大细胞类胰蛋白酶较对照组表达增加(主要表达于细胞核和细胞质中)(P前列腺组织中,肥大细胞类胰蛋白酶较对照组表达增加(P前列腺组织中肥大细胞的总数及脱颗粒的肥大细胞数目增加,肥大细胞是导致Ⅲ型前列腺炎骨盆区域疼痛介质之一,可作为干预及治疗Ⅲ型前列腺炎中一个靶向指标。

关键词： ⅲ型前列腺炎/慢性前列腺炎慢性骨盆疼痛肥大细胞 Von-Frey 色甘酸钠

粒细胞巨噬细胞集落刺激因子、神经生长因子、白介素-17在自身免疫性前列腺炎中的作用

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现代泌尿外科杂志 2023年第10期28卷 894-899页

作者：范世成朱元全李胜斌储永波崔庆鹏云南省第三人民医院泌尿外科云南昆明650032

目的探讨粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、神经生长因子(NGF)、白介素-17(IL-17)在实验性自身免疫性前列腺炎(EAP)大鼠前列腺组织中表达的意义。方法建立实验性自身免疫性前列腺炎大鼠模型并分为对照组、EAP组、抗GM-CSF对照组(阻... 详细信息

目的探讨粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、神经生长因子(NGF)、白介素-17(IL-17)在实验性自身免疫性前列腺炎(EAP)大鼠前列腺组织中表达的意义。方法建立实验性自身免疫性前列腺炎大鼠模型并分为对照组、EAP组、抗GM-CSF对照组(阻断对照组)、抗GM-CSFEAP组(阻断EAP组),予痛觉行为测试。取各组大鼠前列腺组织,免疫组化观察GM-CSF在前列腺组织中表达;通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法检测GM-CSF、NGF、IL-17的mRNA及蛋白表达。结果痛觉测试:抗GM-CSF组在EAP中显示出比EAP组更轻的慢性盆腔疼痛。HE染色:抗GM-CSF组在EAP诱导后组织炎症反应较少。对照组EAP炎症重于抗GM-CSF组。免疫组化:EAP组大鼠前列腺组织在免疫组化检测中,GM-CSF呈阳性表达(主要在细胞核表达)。RT-PCR:抗GM-CSF组EAP后50 d用RT-PCR检测IL-17和NGF,抗GM-CSF显著降低了EAP诱导的前列腺组织中IL-17和NGFmRNA表达的增加。Western blot:抗GM-CSF组EAP后50 d用WB检测IL-17和NGF蛋白表达量,抗GM-CSF显著降低了EAP诱导的前列腺组织中IL-17和NGF蛋白的表达。结论GM-CSF、NGF、IL-17在EAP大鼠前列腺组织中表达增加,它们可能是慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征(CP/CPPS)的重要炎症介质;且在抗GM-CSF后NGF、IL-17的表达下降,说明GM-CSF很有可能成为CP/CPPS的潜在治疗靶点。

关键词： ⅲ型前列腺炎/慢性前列腺炎粒细胞巨噬细胞集落刺激因子神经生长因子白介素-17