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ⅱ型猪圆环病毒Cap蛋白单克隆抗体的制备及特性鉴定

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黑龙江畜牧兽医 2010年第3期 119-121页

作者：李海忠符芳张永欣李曦宋淑萍中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学黑龙江哈尔滨150030

为了研究PCV2 Cap蛋白的检测方法,试验应用哈尔滨兽医研究所猪传染病研究室猪病分子诊断组已构建的基因工程重组菌NLS-Cap M15,经IPTG诱导表达获得原核表达ⅱ型猪圆环病毒Cap蛋白,经亲和层析纯化后免疫6周龄Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/... 详细信息

为了研究PCV2 Cap蛋白的检测方法,试验应用哈尔滨兽医研究所猪传染病研究室猪病分子诊断组已构建的基因工程重组菌NLS-Cap M15,经IPTG诱导表达获得原核表达ⅱ型猪圆环病毒Cap蛋白,经亲和层析纯化后免疫6周龄Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA筛选获得了3株分泌Cap蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为2C3、2F3、1E10。结果表明:2C3、2F3均属于IgG1型,1E10属于IgG2a亚型,轻链都是κ链;经Western-blot检测,获得的3株单抗均可以特异性的识别Cap蛋白;ELISA检测其腹水效价均为1.0×105;间接免疫荧光检测单抗2C3、2F3、1E10反应均为阳性,表明这3株单抗能够识别PCV2病毒。

关键词： ⅱ型猪圆环病毒 Cap蛋白单克隆抗体

Ⅱ型猪细环病毒及ⅱ型猪圆环病毒双重荧光定量PCR检测方法的建立

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中国兽医杂志 2020年第4期56卷 43-47页

作者：刘东旭闫满尹柏双苗丽娟李国江吉林农业科技学院动物科技学院动物医学系吉林吉林132101 预防兽医学吉林省重点实验室吉林吉林132101

为了在临床上能够同时、快速、准确的检测Ⅱ型猪细环病毒(TTSuV2)和ⅱ型猪圆环病毒(PCV2),本试验根据GenBank上公布的TTSuV2和PCV2序列中的高度保守片段设计引物,并分别合成标记羧基荧光素试剂(FAM)和六氯荧光素(HEX)报告基团的探针,建... 详细信息

为了在临床上能够同时、快速、准确的检测Ⅱ型猪细环病毒(TTSuV2)和ⅱ型猪圆环病毒(PCV2),本试验根据GenBank上公布的TTSuV2和PCV2序列中的高度保守片段设计引物,并分别合成标记羧基荧光素试剂(FAM)和六氯荧光素(HEX)报告基团的探针,建立双重荧光定量PCR检测方法,并对该方法的灵敏度、稳定性和特异性进行评价。结果显示,建立的双重荧光定量PCR检测方法对TTSuV2和PCV2的最低检测浓度均为1×10~2拷贝/μL,与猪源的其他病毒性病原体无交叉反应。应用建立的检测方法对采集的300份病料样品进行检测。结果显示,PCV2单独感染率为36.0%,TTSuV2单独感染率为60.0%,2种病毒混合感染率为14.8%。表明本试验建立的双重荧光定量PCR检测方法比普通PCR更加敏感,可应用于临床检测TTSuV2和PCV2,并可分析TTSuV2和PCV2的载量与相关疾病的关系。

关键词： Ⅱ型猪细环病毒 ⅱ型猪圆环病毒双重荧光定量PCR

应用SYBR GreenI实时荧光定量PCR检测ⅱ型猪圆环病毒

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中国兽医杂志 2007年第12期43卷 13-14页

作者：许洪喜符芳鲁晶红李曦中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 黑龙江八一农垦大学黑龙江大庆163319

ⅱ型猪圆环病毒(porcine circovirus type 2,PCV-2)为近年来引起多种综合征的重要病原[1-3],且经常与猪呼吸与繁殖障碍综合症、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒、猪流感病毒发生混合感染[4-5].

关键词：实时荧光定量PCR ⅱ型猪圆环病毒荧光定量PCR检测繁殖障碍综合症猪伪狂犬病病毒应用病原诊断猪细小病毒

ⅱ型猪圆环病毒SYBR Green Ⅰ模式实时定量PCR检测方法的建立

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黑龙江八一农垦大学学报 2007年第4期19卷 67-71页

作者：曹涤非贾赟胡传伟吴斌任月岳慧吕品杨玉英黑龙江八一农垦大学动物科技学院辽宁出入境检验检疫局大连医科大学宁夏大学山东农业大学

登录GenBank下载猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type2,PCV-2)的全基因组序列,根据其保守区域,设计1对特异性引物,采用SYBR Green Ⅰ随机结合渗入法,建立该模式的实时定量PCR检测方法,构建了检测PCV-2型的标准DNA模版,循环阈值(Ct)... 详细信息

登录GenBank下载猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type2,PCV-2)的全基因组序列,根据其保守区域,设计1对特异性引物,采用SYBR Green Ⅰ随机结合渗入法,建立该模式的实时定量PCR检测方法,构建了检测PCV-2型的标准DNA模版,循环阈值(Ct)与标准DNA模板在1.0×102～1.0×107拷贝·μL-1浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.999。该方法用于猪圆环病毒2型的检测具有很高的特异性,其敏感性与常规PCR相比可以提高100倍,可以用于猪圆环病毒2型的快速检测。

关键词： SYBR GreenⅠ ⅱ型猪圆环病毒实时定量PCR

ⅱ型猪圆环病毒感染:断奶后多系统消耗性综合征和其它病症

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国外畜牧学（猪与禽） 2003年第2期23卷 50-52页

作者：董海亮 J.Segales 西班牙巴塞罗那大学动物卫生和解剖系动物卫生研究中心

自从1991年首次报告了加拿大萨斯卡彻温的断奶后多系统消耗性综合征(PMWS)以来,现在全世界都已报告了这一综合征。1997年证实了PMWS患猪的病变中存在猪圆环病毒。对于与PMWS有关的猪圆环病毒进行核苷酸序列分析,结果表明该病毒与以前已... 详细信息

自从1991年首次报告了加拿大萨斯卡彻温的断奶后多系统消耗性综合征(PMWS)以来,现在全世界都已报告了这一综合征。1997年证实了PMWS患猪的病变中存在猪圆环病毒。对于与PMWS有关的猪圆环病毒进行核苷酸序列分析,结果表明该病毒与以前已知的猪圆环病毒相比有重要差异,所以建议将获自细胞培养的病毒称为Ⅰ型猪圆环病毒(PCV1),而将与这一新疾病有关的病毒称为ⅱ型猪圆环病毒(PCV2)。

关键词： ⅱ型猪圆环病毒断奶后多系统消耗性综合征猪皮炎肾病综合征呼吸道疾病复合症增生性坏死性肺炎病因

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ⅱ型猪圆环病毒——滴答作响的定时炸弹?

国外畜牧学（猪与禽） 2003年第2期23卷 47-49页

作者：李希林 Gordon Allan steven Krakowka John Ellis 北爱尔兰农业和乡村发展部美国俄亥俄州立大学兽医学院兽医生物科学系加拿大萨斯卡彻温医科大学

对ⅱ型猪圆环病毒的研究为与猪断奶后多系统消耗性综合征在全球爆发有关的问题提供了大量答案,但还有一些方面迫切需要引起人们的关注,以便为可能出现的梦魇般的前景准备对策。

关键词： ⅱ型猪圆环病毒猪断奶后多系统消耗性综合征遗传病原

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ⅱ型猪圆环病毒对现代养猪生产的重要性

国外畜牧学（猪与禽） 2005年第4期25卷 37-39页

作者：宋晓光 Steven Krakowka 美国俄亥俄州立大学兽医学院兽医生物科学系

很多疾病都可归因于ⅱ型猪圆环病毒感染,促使该病发生的传染性辅助因子正在得到积极的研究。本文论述ⅱ型猪圆环病毒在当代养猪生产中的重要性。

关键词： ⅱ型猪圆环病毒猪综合征发病机理诊断控制

ⅱ型猪圆环病毒流行病学研究进展及疾病诊断与防控

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中国畜牧兽医文摘 2012年第4期28卷 101-103页

作者：杨红菊姜艳彬王海侯东军李颖于雷中国动物疫病预防控制中心北京100125

猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)是目前发现的最小的动物病毒。PCV有2个血清型其中I型猪圆环病毒(PCV1)为非致病性的病毒,而ⅱ型猪圆环病毒(PCV2)为致病性的病毒,它是断奶仔猪多系统衰竭综合症(Post-weaning multisystemic wasting ... 详细信息

猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)是目前发现的最小的动物病毒。PCV有2个血清型其中I型猪圆环病毒(PCV1)为非致病性的病毒,而ⅱ型猪圆环病毒(PCV2)为致病性的病毒,它是断奶仔猪多系统衰竭综合症(Post-weaning multisystemic wasting syndrome,PMWS)的主要病原。引发猪圆环病毒的感染主要因素包括母猪的免疫和感染情况,ⅱ型猪圆环病毒的感染时,常与其他病毒混合感染,也与圆环病毒变种的感染以及母猪本身的健康情况和生产管理水平有关。在疾病诊断方面,由于荧光定量PCR的特异性及敏感性问题,组织病理检测及淋巴组织内是否含有ⅱ型猪圆环病毒仍然是行业内公认的标准。商业化的ⅱ型猪圆环病毒抗体的出现,可以有效地减少断奶仔猪多系统衰竭综合症及相关疾病的影响。本文从圆环病毒的流行病学、诊断及控制断奶仔猪多系统衰竭综合症几个方面进行了综述。

关键词： ⅱ型猪圆环病毒断奶仔猪多系统衰竭综合症流行病学诊断

ⅱ型猪圆环病毒长春株衣壳蛋白基因的克隆及原核表达

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Ⅱ型猪圆环病毒长春株衣壳蛋白基因的克隆及原核表达