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β-谷甾醇对猪卵母细胞体外成熟和胚胎发育的影响

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畜牧兽医学报 2024年第4期55卷 1629-1637页

作者：蓝昕蕊赵宝宝张碧菡林晓语马会明王勇胜西北农林科技大学动物医学院杨凌712100 宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室银川750004

旨在探索一种自然植物提取的抗氧化分子——β-谷甾醇(β-sitosterol,SITO)对猪卵母细胞体外成熟效率和早期胚胎体外发育质量的影响。本研究以在猪卵母细胞体外成熟培养基中添加不同浓度SITO为试验组,不添加SITO(含0.16%DMSO)的培养基... 详细信息

旨在探索一种自然植物提取的抗氧化分子——β-谷甾醇(β-sitosterol,SITO)对猪卵母细胞体外成熟效率和早期胚胎体外发育质量的影响。本研究以在猪卵母细胞体外成熟培养基中添加不同浓度SITO为试验组,不添加SITO(含0.16%DMSO)的培养基为对照组,对屠宰场所得猪卵巢中收集到的卵母细胞进行体外培养,试验组浓度分别为10、20、40μmol·L~(-1),不同浓度各重复3次,每组培养卵母细胞150~200枚。培养46 h后,对卵母细胞成熟率进行统计,并收集成熟卵母细胞进行活性氧、细胞凋亡、线粒体膜电位染色以及相关基因的实时荧光定量PCR;对成熟卵母细胞进行孤雌激活,2 d后统计卵裂率,7 d后统计囊胚率,并统计囊胚细胞总数。结果发现,20μmol·L~(-1)SITO处理显著提高了猪卵母细胞的体外成熟率,且促进了孤雌激活后囊胚的形成并增加了囊胚细胞数,降低了卵母细胞中ROS含量,提高了抗氧化应激基因SOD和CAT的表达;同时,SITO降低卵母细胞的凋亡水平,增加抗凋亡基因BCL-2的表达,降低促凋亡基因Caspase 3和BAX的表达。此外,SITO可增强线粒体膜电位(ΔΨm),增加TFAM基因的表达。综上所述,本研究结果表明,在猪卵母细胞体外成熟培养基中添加20μmol·L^(-1)SITO能够显著促进猪卵母细胞的体外成熟率、提高胚胎的体外发育能力和胚胎质量。

关键词： β-谷甾醇猪卵母细胞胚胎发育 ROS 凋亡

β-谷甾醇对TGF-β1诱导的小鼠乳腺纤维化的影响

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中国兽医学报 2024年第5期44卷 994-999页

作者：徐平阚兴池黄雅萍付守鹏柳巨雄吉林大学动物医学学院吉林长春130062 上海市动物疫病预防控制中心上海201103 之江实验室智能计算平台研究中心浙江杭州311121

乳腺纤维化对奶牛养殖业造成巨大的经济损失,本研究的目的是探究β-谷甾醇(BSS)对TGF-β1诱导的小鼠乳腺纤维化是否具有缓解作用。试验分为空白对照组、模型组、模型+药物处理组,以乳腺灌注TGF-β1的方式构建小鼠乳腺纤维化模型,待模型... 详细信息

乳腺纤维化对奶牛养殖业造成巨大的经济损失,本研究的目的是探究β-谷甾醇(BSS)对TGF-β1诱导的小鼠乳腺纤维化是否具有缓解作用。试验分为空白对照组、模型组、模型+药物处理组,以乳腺灌注TGF-β1的方式构建小鼠乳腺纤维化模型,待模型构建完24 h收集小鼠乳腺组织。应用HE染色和Masson染色评价乳腺组织病理结构的变化情况;应用荧光定量PCR方法检测乳腺组织中collagenⅠ、α-SMA、vimentin (VIM)等纤维化相关蛋白的mRNA水平变化;应用Western blot和免疫荧光技术检测collagenⅡ、E-cadherin (E-cad)和α-SMA用于评价乳腺组织中纤维化蛋白表达情况。结果显示,BSS预处理后可以显著缓解TGF-β1诱导的小鼠乳腺病理损伤,显著抑制collagenⅠ、α-SMA、VIM mRNA水平的升高,显著抑制collagenⅡ、α-SMA蛋白水平的升高和E-cad蛋白水平的降低。BSS通过抑制纤维化表型指标的升高有效缓解纤维化病变的发生发展。

关键词： β-谷甾醇乳腺纤维化细胞外基质转化生长因子β1

β-谷甾醇对增生性瘢痕成纤维细胞作用机制的网络药理学分析

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中国组织工程研究 2024年第2期28卷 216-223页

作者：左俊马少林新疆医科大学第一附属医院整形科新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830000

背景:目前针对增生性瘢痕有效的预防和治疗措施仍然有限。而大多数植物中草药不良反应小且来源丰富,为预防和治疗增生性瘢痕提供了新的思路和方法。目的:通过网络药理学和分子对接技术探讨植物来源β-谷甾醇作用于增生性瘢痕成纤维细胞... 详细信息

背景:目前针对增生性瘢痕有效的预防和治疗措施仍然有限。而大多数植物中草药不良反应小且来源丰富,为预防和治疗增生性瘢痕提供了新的思路和方法。目的:通过网络药理学和分子对接技术探讨植物来源β-谷甾醇作用于增生性瘢痕成纤维细胞的潜在分子机制,并通过细胞学实验进行初步验证。方法:通过网络药理学方法,利用相关数据库及软件筛选β-谷甾醇的药物靶点,获取增生性瘢痕相关疾病靶点,取交集得到β-谷甾醇作用于增生性瘢痕的潜在作用(交集)靶点,使用Cytoscape软件和STRING数据库构建“药物-靶点-疾病”网络和蛋白质互作网络(PPI),同时筛选出PPI中核心作用靶点。通过DAVID数据库对交集靶点进行GO生物学功能和KEGG通路富集分析,结合文献分析进一步确立与交集靶点关系密切的信号通路及核心靶点基因,应用AutoDock软件对β-谷甾醇和核心靶点蛋白进行分子对接。采用体外细胞实验验证β-谷甾醇对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖、凋亡、细胞周期分布和核心靶点基因mRNA表达的影响。结果与结论:①β-谷甾醇和增生性瘢痕的交集靶点共56个,PPI网络中筛选出10个核心靶点:酪氨酸激酶(SRC)、丝裂原活化蛋白激酶3(MAPK3)、半胱氨酸蛋白酶3(CASP3)、载脂蛋白E(APOE)、雌激素受体1(ESR1)、固醇调节元件结合转录因子1(SREBF1)、过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)、C-反应蛋白(CRP)、细胞间黏附分子1(ICAM1)和过氧化氢酶(CAT)。②结合文献报道和KEGG通路、GO功能分析结果,进一步认定MAPK信号通路与交集靶点关系密切,确定MAPK3(即为ERK1-MAPK)、CASP3、P53和肿瘤坏死因子为其核心靶点。③分子对接结果提示β-谷甾醇与核心靶点蛋白结合良好。④细胞实验结果表明,100μmol/L的β-谷甾醇能抑制增生性瘢痕成纤维细胞增殖,降低线粒体膜电位、诱导细胞凋亡(Pβ-谷甾醇可能通过激活肿瘤坏死因子通路,上调CASP3和P53的表达,诱导增生性瘢痕成纤维细胞凋亡,同时抑制ERK-MAPK通路使细胞周期阻滞从而降低增生性瘢痕成纤维细胞增殖活性。

关键词：增生性瘢痕成纤维细胞 β-谷甾醇细胞凋亡 MAPK3(ERK1-MAPK) 肿瘤坏死因子 CASP3 P53 网络药理学细胞周期

基于代谢组学解析抗感水稻中差异代谢物中β-谷甾醇对褐飞虱的杀虫活性

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环境昆虫学报 2024年

作者：王兴云张新强李菁孟姗姗尚晨旭郜新强李佳丽张曼曼张坤朋王景顺安阳工学院博士后创新实践基地安阳工学院生物与食品工程学院河南大学生命科学学院河南省太行山林业有害生物野外科学观测研究站

利用代谢组学筛选抗性水稻中有活性的代谢物质，为开发控制褐飞虱Nilaparvata lugens的绿色植物源农药开拓思路。基于水稻品种对褐飞虱有抗性的差异，采用生长发育和存活率比较方法，验证了水稻品种Mudgo和TN1对褐飞虱的抗性差异；通过... 详细信息

利用代谢组学筛选抗性水稻中有活性的代谢物质，为开发控制褐飞虱Nilaparvata lugens的绿色植物源农药开拓思路。基于水稻品种对褐飞虱有抗性的差异，采用生长发育和存活率比较方法，验证了水稻品种Mudgo和TN1对褐飞虱的抗性差异；通过代谢组学分析抗褐飞虱水稻Mudgo和感褐飞虱水稻TN1代谢物的不同，筛选了品种间有显著差异的物质β-谷甾醇和无显著差异的物质豆甾醇作为褐飞虱生测物质，进行存活率和适合度功能验证，明确其对褐飞虱的功能效应。褐飞虱在Mugdo和TN1两种水稻品种上的生命参数间存在显著差异，在Mudgo水稻上发育历期延长，体重、体长和存活率降低。代谢组学分析共检测到69种差异代谢物，主要为脂质（36%）、碳水化合物（23%）、氨基酸（19%）、次生代谢物质（14%）、核酸（6%）及其他物质（1%）等6大类物质。褐飞虱人工饲料添加剂生测数据显示，褐飞虱取食20.0 μg/mL和500.0 μg/mL浓度β-谷甾醇，雌虫体重显著降低；取食500.0 μg/mL浓度β-谷甾醇，雄虫体重显著降低。此外，取食不同浓度豆甾醇对褐飞虱体重均无显著性影响。β-谷甾醇对褐飞虱的存活率有显著降低作用，而豆甾醇只有在4.0、100.0和500.0 μg/mL浓度下有降低作用。确认了水稻品种Mudgo对褐飞虱有显著的抗性，可显著降低存活率，抑制生长。代谢组学筛选到的69种差异代谢物可作为抗褐飞虱绿色植物源农药的备选库；其中，差异显著的代谢物质β-谷甾醇对褐飞虱体重和存活率有显著降低作用，可作为防治褐飞虱的植物源农药。

关键词：褐飞虱水稻抗性品种Mudgo 代谢组学 β-谷甾醇豆甾醇生长发育存活率

玉米植物甾醇中豆甾醇、菜油甾醇、β-谷甾醇的定量分析方法

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中国油脂 2024年

作者：刘景凡孙聪梁少华河南工业大学粮油食品学院

建立了高效液相色谱法，对玉米植物甾醇中豆甾醇、菜油甾醇、β-谷甾醇含量进行检测。以甾醇混标准品为外标进行定量，以色谱级异丙醇定容，采用Waters Symmetry C18 ( 4. 6 mm×250 mm，5 μm) 色谱柱，PDA检测器，检测波长为205 nm，... 详细信息

建立了高效液相色谱法，对玉米植物甾醇中豆甾醇、菜油甾醇、β-谷甾醇含量进行检测。以甾醇混标准品为外标进行定量，以色谱级异丙醇定容，采用Waters Symmetry C18 ( 4. 6 mm×250 mm，5 μm) 色谱柱，PDA检测器，检测波长为205 nm，甲醇-水( 体积比92: 8)为流动相。结果表明: 在125～2000 μg/mL浓度范围内，3种甾醇单体标准曲线回归方程的R2分别为0.9995、0.9990、0.9991，3种甾醇单体存在良好的线性关系。3种甾醇单体的峰面积和保留时间的相对标准偏差值(RSD)在仪器精密度实验中介于0.24%～1.23%；在样品重复性实验中介于0.61%～2.38%；在日内稳定性实验中介于0.13%～2.92%；在日间稳定性实验中介于0.67%～3.43%；甾醇加标回收率总量在88.10%～97.38%之间，3种甾醇单体的加标回收率平均值在76.93%～105.84%之间，RSD值均小于5%。该方法具有灵敏度高、准确性好、操作简便、稳定性好的特点，实现了玉米植物甾醇中豆甾醇、菜油甾醇和β-谷甾醇的定量分析。

关键词：玉米植物甾醇豆甾醇菜油甾醇 β-谷甾醇高效液相色谱法

β-谷甾醇通过PI3K/AKT信号通路抑制裸鼠甲状腺滤泡癌生长的机制研究

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时珍国医国药 2024年第3期35卷 580-584页

作者：邓佳琳朱小雨李家磊贡翊斐王小平上海中医药大学中医学院上海201203 上海中医药大学附属市中医医院上海200040

目的探讨β-谷甾醇通过PI3K/AKT信号通路抑制甲状腺滤泡性癌生长的作用机制。方法构建FTC-238甲状腺滤泡状癌裸鼠腋下异位移植瘤模型,随机分为模型组(n=7,模型鼠+生理盐水),β-谷甾醇单药组(n=7,模型鼠+β-谷甾醇(130mg·kg^(-1)·d^(... 详细信息

目的探讨β-谷甾醇通过PI3K/AKT信号通路抑制甲状腺滤泡性癌生长的作用机制。方法构建FTC-238甲状腺滤泡状癌裸鼠腋下异位移植瘤模型,随机分为模型组(n=7,模型鼠+生理盐水),β-谷甾醇单药组(n=7,模型鼠+β-谷甾醇(130mg·kg^(-1)·d^(-1)))每天一次,LY294002单药组(n=7,模型鼠+LY295002(25g·kg^(-1)·d^(-1)))一周三次,联合用药组(n=7,模型鼠+β-谷甾醇(130mg·kg^(-1)·d^(-1)))每天一次;+LY295002(25g·kg^(-1)·d^(-1))一周三次。21d后获取小鼠血清及肿瘤组织,酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清p-AKT水,Real-time PCR、Western blot法、免疫组化法检测各组裸鼠肿瘤组织中凋亡相关Bcl-2、Bax、Caspase-3的mRNA及蛋白表达,Western blot检测裸鼠肿瘤组织内PI3K/AKT通路关键蛋白p-PI3K、PI3K、p-AKT、AKT的表达情况。结果该实验发现β-谷甾醇能减小肿瘤体积,增加肿瘤组织中Bax和Caspase-3 mRNA及蛋白表达,降低Bcl-2 mRNA及蛋白表达。同时β-谷甾醇可以降低裸鼠血清中p-AKT水平并降低裸鼠荷瘤组织中p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT蛋白表达量。结论 β-谷甾醇可以通过PI3K/AKT通路抑制小鼠甲状腺滤泡状癌生长。

关键词： β-谷甾醇甲状腺滤泡状癌信号通路细胞凋亡

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β-谷甾醇防治肿瘤的机制研究进展

医药导报 2024年

作者：张文文向施陈慧杨潮江西中医药大学癌症研究中心

β-谷甾醇是一种天然的甾体类化合物，因其特有的生物学活性和理化特性广泛应用于医药和食品行业。β-谷甾醇作为真核生物细胞膜的重要组成成分，不仅具有良好的自由基清除作用，还具有化学预防高血脂、动脉硬化和炎症等疾病的作用。近... 详细信息

β-谷甾醇是一种天然的甾体类化合物，因其特有的生物学活性和理化特性广泛应用于医药和食品行业。β-谷甾醇作为真核生物细胞膜的重要组成成分，不仅具有良好的自由基清除作用，还具有化学预防高血脂、动脉硬化和炎症等疾病的作用。近年来，β-谷甾醇对肝癌、胃癌、结直肠癌、肺癌和乳腺癌等癌症均表现出极佳的抑制作用，被认为在癌症的预防与治疗方面具有很好的应用前景。该文通过对β-谷甾醇的抗癌作用及分子机制进行总结，以期为深入了解β-谷甾醇的抗癌作用以及未来在临床癌症的应用提供参考。

关键词： β-谷甾醇癌症分子机制线粒体凋亡途径

β-谷甾醇对肿瘤的防治作用及其机制研究进展

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医药导报 2024年第5期43卷 757-761页

作者：张文文向施陈慧杨潮江西中医药大学癌症研究中心南昌330004

β-谷甾醇是一种天然的甾体类化合物,因其特有的生物学活性和理化特性广泛应用于医药和食品行业。β-谷甾醇作为真核生物细胞膜的重要组成成分,不仅具有良好的自由基清除作用,还具有化学预防高血脂、动脉硬化和炎症等疾病的作用。近年来... 详细信息

β-谷甾醇是一种天然的甾体类化合物,因其特有的生物学活性和理化特性广泛应用于医药和食品行业。β-谷甾醇作为真核生物细胞膜的重要组成成分,不仅具有良好的自由基清除作用,还具有化学预防高血脂、动脉硬化和炎症等疾病的作用。近年来,β-谷甾醇对肝癌、胃癌、结直肠癌、肺癌和乳腺癌等癌症均表现出极佳的抑制作用,在癌症的预防与治疗方面具有很好的应用前景。该文对β-谷甾醇的抗癌作用及分子机制进行总结,以期为深入了解β-谷甾醇的抗癌作用以及未来在临床癌症的应用提供参考。

关键词： β-谷甾醇癌症分子机制线粒体凋亡途径

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β-谷甾醇改善绝经后骨质疏松的实验研究

浙江中医药大学学报 2024年第2期48卷 131-137,146页

作者：姜耘宙汪正明王瑞项思成金钊锴童培建吕帅洁浙江中医药大学附属金华中医院浙江金华321017 上海中医药大学附属曙光医院浙江中医药大学浙江中医药大学附属第一医院(浙江省中医院)

[目的]探究杜仲有效单体成分β-谷甾醇对小鼠绝经后骨质疏松的疗效及其潜在作用机制。[方法]将24只12周龄雌性C57BL/6J小鼠随机分为假手术组、模型组及β-谷甾醇干预组,每组8只,采用双侧卵巢切除术建立绝经后骨质疏松模型,术后假手术组... 详细信息

[目的]探究杜仲有效单体成分β-谷甾醇对小鼠绝经后骨质疏松的疗效及其潜在作用机制。[方法]将24只12周龄雌性C57BL/6J小鼠随机分为假手术组、模型组及β-谷甾醇干预组,每组8只,采用双侧卵巢切除术建立绝经后骨质疏松模型,术后假手术组及模型组给予0.9%氯化钠溶液灌胃,β-谷甾醇干预组给予β-谷甾醇灌胃,术后8周将各组小鼠处死取材,借助显微计算机断层扫描(micro-computed tomography,Micro-CT)观察β-谷甾醇干预对绝经后骨量丢失及骨小梁破坏的保护作用,并采用苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色对小鼠股骨远端区域进行组织形态学分析,同时通过抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色及碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色评估小鼠骨吸收与骨形成情况,并通过免疫组化检测各组样本的β-catenin表达水平。[结果]Micro-CT扫描结果显示,β-谷甾醇干预可减少绝经后骨量丢失及骨微结构破坏,HE染色证实β-谷甾醇可有效维持骨小梁数目及组织形态,并在一定程度上抑制雌激素缺乏引起的异常脂肪堆积现象。TRAP染色结果表明,β-谷甾醇并不影响破骨细胞形成,而免疫组化结果表明β-谷甾醇可显著促进成骨标志物ALP的表达。与此同时,β-谷甾醇可增加β-catenin在股骨远端区域的表达,提示β-谷甾醇促进骨形成,可能与其上调β-catenin信号通路有关。[结论]β-谷甾醇体内干预可上调β-catenin信号通路,增强成骨分化,促进机体骨形成,从而改善绝经后骨质疏松。

关键词：绝经后骨质疏松症 β-谷甾醇杜仲骨形成成骨细胞 β-catenin