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LPS对大鼠骨髓MSC NF-κB p65及抗炎性细胞因子mRNA表达的影响

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青海医学院学报 2013年第3期34卷 182-185页

作者：王刚王海燕梁宏吉利宾青海大学医学院

目的观察LPS模拟的炎性刺激对体外培养大鼠BM-MSC细胞的NF-κB活化与抗炎性因子IL-10、TGF-β3及IDO mRNA表达的影响。方法以体外培养P2代大鼠BM-MSC为受试细胞,按空白对照、PDTC(100μmol/L)、PDTC(100μmol/L)﹢LPS(5μg/mL)、LPS(1μ... 详细信息

目的观察LPS模拟的炎性刺激对体外培养大鼠BM-MSC细胞的NF-κB活化与抗炎性因子IL-10、TGF-β3及IDO mRNA表达的影响。方法以体外培养P2代大鼠BM-MSC为受试细胞,按空白对照、PDTC(100μmol/L)、PDTC(100μmol/L)﹢LPS(5μg/mL)、LPS(1μg/mL)、LPS(5μg/mL)、LPS(10μg/mL)分组处理4 h。提取细胞总RNA,RT-PCR两步法测定NF-κB亚基p65与抗炎性因子IL-10、TGF-β3及IDO的mRNA表达。结果与对照组及PDTC﹢LPS组相比,LPS处理组NF-κB p65亚基、抗炎因子IL-10和TGF-β3 mRNA表达升高(P<0.05),而LPS处理组中IDO的mRNA表达降低(P<0.05);抗炎因子IL-10、TGF-β3表达变化与NF-κB p65亚基表达变化间呈正相关,相关系数分别为0.844(P<0.05)、0.837(P<0.05);而IDO与NF-κB p65亚基在表达变化上呈高度负相关,相关系数为-0.942(P<0.05)。结论 (1)LPS作用于MSC,可通过活化NF-κB而诱导抗炎性细胞因子IL-10、TGF-β3的mRNA表达;(2)正常培养的MSC组成性表达IDO,LPS模拟的炎性刺激对IDO表达具有抑制作用。提示在炎性和非炎性微环境下,MSC发挥负性免疫调节的机制有所不同。

关键词：大鼠脂多糖间充质干细胞核因子κB白细胞介素10 转化生长因子β3 吲哚胺2,3-二氧化酶

唐古红景天干预肺动脉高压作用机制的网络药理学研究

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中国高原医学与生物学杂志 2020年第4期41卷 266-274页

作者：华玉美多南星梅杨占婷苏姗姗李占强芦殿香青海大学生态环境工程学院青海西宁810016 青海大学高原医学研究中心高原医学教育部重点实验室青海省高原医学应用基础重点实验室(青海-犹他高原医学联合重点实验室)青海西宁810001 青海大学医学院青海西宁810001 西宁海关技术中心青海省食品安全研究重点实验室青海西宁810003

目的采用网络药理学方法探讨唐古红景天干预肺动脉高压的作用机制。方法以唐古红景天主要化学成分为研究对象,借助Swiss Target Prediction网络服务器预测各化合物作用靶点,结合GeneCards数据库获取的肺动脉高压相关靶点,获取各化合物... 详细信息

目的采用网络药理学方法探讨唐古红景天干预肺动脉高压的作用机制。方法以唐古红景天主要化学成分为研究对象,借助Swiss Target Prediction网络服务器预测各化合物作用靶点,结合GeneCards数据库获取的肺动脉高压相关靶点,获取各化合物的作用靶点;利用STRING数据库构建对应靶标蛋白的互作网络;借助R语言进行CO功能和KECG通路富集分析,并利用Cytoscape 3.6.1软件构建化合物-靶点-通路网络图。结果﹑本研究共筛选获得唐古红景天的有效化学成分14个,肺动脉高压潜在作用靶点38个,并建立了靶点蛋白的互作网络。GO、KECG通路富集分析结果显示,唐古红景天可能主要通过山奈酚、咖啡酸、檞皮素、红景天苷等活性成分,作用于TNF、AKT1、ECFR、PTGS2、SRC、MMP9、MAPK14、ESR1、HRAS等靶点,调节ErbB、AMPK、HIF-1、PI3K-Akt、JAK-STAT等信号通路发挥有效作用。并构建了化合物-靶点-通路网络图。结论筛选出唐古红景天干预肺动脉高压的具体化学成分有14个并具有明显的多靶点/多通路的作用特征;推测唐古红景天干预肺动脉高压的具体作用机制可能涉及到ErbB、AMPK、HIF-1、PI3K-Akt、JAK-STAT、IL-17、FoxO、Ras等信号通路。

关键词：唐古红景天网络药理学活性成分肺动脉高压

多房棘球绦虫重组抗原蛋白14-3-3对小鼠继发性泡球蚴病的预防与治疗效果

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中国高原医学与生物学杂志 2020年第4期41卷 252-259页

作者：魏威王蕾周培张颖李润乐汤锋青海大学高原医学研究中心青海省高原医学应用基础重点实验室青海西宁810001 青海大学基础医学部青海西宁810001 青海大学研究生院青海西宁810016

目的评价重组抗原蛋白14-3-3的免疫原性和其在多房棘球绦虫原头节继发性感染BALB/c小鼠模型中的预防及治疗效果。方法构建多房棘球绦虫重组抗原蛋白14-3-3的原核表达系统,经IPTG诱导和Ni^2+亲和层析法得到高纯度的14-3-3重组蛋白免疫BAL... 详细信息

目的评价重组抗原蛋白14-3-3的免疫原性和其在多房棘球绦虫原头节继发性感染BALB/c小鼠模型中的预防及治疗效果。方法构建多房棘球绦虫重组抗原蛋白14-3-3的原核表达系统,经IPTG诱导和Ni^2+亲和层析法得到高纯度的14-3-3重组蛋白免疫BALB/c小鼠。用ELISA法检测免疫后小鼠血清中的抗体和细胞因子水平变化;在泡球坳小鼠继发性感染模型中观察囊泡数量和重量。结果成功表达并获取高纯度的多房棘球绦虫重组14-3-3抗原蛋白,免疫原性研究发现重组抗原蛋白14-3-3具有较好的免疫原性并激活小鼠产生Th1/Th2混合型免疫应答;在预防效果评价模型中,经14-3-3抗原免疫后,小鼠囊泡数量减少(59.84±15.09%),P=0.049,囊泡重量减轻(83.28±18.01%),P=0.049;在治疗效果评价模型中,经14-3-3抗原免疫后小鼠囊泡重量减轻(72.28±11.47%),P=0.006。结论多房棘球绦虫重组抗原蛋白14-3-3对继发性小鼠泡球坳病具有预防和治疗作用。

关键词：多房棘球绦虫原核表达 14-3-3蛋白免疫预防治疗

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藏药“棏嗒杰巴”的味功效

中国民族民间医药 2015年第4期24卷 4-5页

作者：文成当智仁增多杰才让南加青海大学藏医学院青海西宁810001

藏医药有悠久而灿烂的历史,为高原人民的健康作出了重要的贡献。藏医药理学对药物的来源、性味功效及用药原则具有独特的理论,本文以这独特的理论为依据,将其"味"功效以数值比值形式引用于"棏嗒杰巴"(八味獐芽菜)药效研究中,进一步探测... 详细信息

藏医药有悠久而灿烂的历史,为高原人民的健康作出了重要的贡献。藏医药理学对药物的来源、性味功效及用药原则具有独特的理论,本文以这独特的理论为依据,将其"味"功效以数值比值形式引用于"棏嗒杰巴"(八味獐芽菜)药效研究中,进一步探测其藏药之"味"层面的功效。

关键词：藏药棏嗒杰巴味功效

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肥大细胞脱颗粒与肺动脉高压形成

中国高原医学与生物学杂志 2019年第4期40卷 276-284页

作者：刘杰张伟青海大学高原医学研究中心高原医学教育部重点实验室青海省高原医学应用基础重点实验室青海大学医学院病理生理学教研室

PAH(pulmonary arterial hypertension,肺动脉高压)的发生机制涉及神经调控、免疫应答、生化代谢、基因表达和分子信号转导等的异常改变[1]。这些异常改变又以复杂的方式相互作用,导致肺血管发生收缩和/或重塑、肺血流动力学紊乱和/或... 详细信息

PAH(pulmonary arterial hypertension,肺动脉高压)的发生机制涉及神经调控、免疫应答、生化代谢、基因表达和分子信号转导等的异常改变[1]。这些异常改变又以复杂的方式相互作用,导致肺血管发生收缩和/或重塑、肺血流动力学紊乱和/或血管闭塞。MCs(Mast cells,肥大细胞)脱颗粒与PAH形成的研究是近期研究热点,现对相关机制进行综述。

关键词：肥大细胞脱颗粒血管闭塞血流动力学紊乱神经调控异常改变 arterial 生化代谢肺动脉高压

多房棘球蚴抗原亮氨酸氨基肽酶的原核表达纯化及酶活性分析

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中国高原医学与生物学杂志 2020年第4期41卷 260-265页

作者：王蕾杨宝良魏威周培刘海生李润乐汤锋青海大学高原医学研究中心青海省高原医学应用基础重点实验室青海西宁810001 青海省红十字医院青海西宁810001 青海大学基础医学部青海西宁810001 青海大学研究生院青海西宁810001

目的构建多房棘球坳抗原亮氨酸氨基肽酶(Leucine aminopeptidase,LAP)原核表达系统,并做纯化及最佳酶活性条件分析,为后续作用机制研究奠定基础。方法利用Optimum^TM Codon软件对LAP编码序列进行优化后合成目的基因,连接入表达载体pCzn... 详细信息

目的构建多房棘球坳抗原亮氨酸氨基肽酶(Leucine aminopeptidase,LAP)原核表达系统,并做纯化及最佳酶活性条件分析,为后续作用机制研究奠定基础。方法利用Optimum^TM Codon软件对LAP编码序列进行优化后合成目的基因,连接入表达载体pCzn1后转化入大肠杆菌BL-21菌株,在发酵过程中加入IPTG诱导目的蛋白表达后,通过Ni柱亲和纯化获得高纯度重组目的蛋白LAP。以亮氨酸对硝基苯胺(Leu-pNA)为底物测定LAP酶活性,观察酶活性的最适pH和温度,以及不同金属离子对其酶活性的影响。结果﹐基因测序和酶切鉴定显示pCzn1-LAP质粒构建成功,通过Ni柱亲和纯化得到一个大小约为57KD的蛋白。当pH为9.0、温度为60℃时LAP酶活性最强;金属离子对LAP酶活性影响的小大顺序为Co^2+>Zn^2+>Ca^2+>Mn^2+>Mg^2+>Ba>K^+。结论本研究成功构建LAP原核表达系统,表达和纯化了LAP蛋白,获得了酶活性最强时的基础条件,为研发抗寄生虫药物及探究LAP在多房棘球坳感染过程的作用机制奠定了基础。

关键词：多房棘球蚴 LAP 原核表达 Leu-pNA 酶活性

用中医活血化瘀法改善肿瘤物理微环境的机制探讨

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当代医药论丛 2022年第7期20卷 32-35页

作者：高祎马雪曼青海大学医学院青海西宁810000 青海省糖脂代谢疾病防控中医药重点实验室青海西宁810000

文章从肿瘤微环境理化特性及其在肿瘤发生发展中的作用、现代医学改善肿瘤微环境方法的作用机制、中医血瘀证与肿瘤微环境的关系、中医活血化瘀法改善肿瘤微环境的理论依据四个方面对中医活血化瘀法在改善肿瘤微环境方面的作用机制进行... 详细信息

文章从肿瘤微环境理化特性及其在肿瘤发生发展中的作用、现代医学改善肿瘤微环境方法的作用机制、中医血瘀证与肿瘤微环境的关系、中医活血化瘀法改善肿瘤微环境的理论依据四个方面对中医活血化瘀法在改善肿瘤微环境方面的作用机制进行文献梳理及探讨,以期从改善肿瘤微环境这一角度阐明活血化瘀法这一中医药抗肿瘤治疗方法的作用机制,进而为活血化瘀法在抗肿瘤中应用的深入研究和中医药抗肿瘤相关药物的研发提供参考依据。

关键词：肿瘤微环境中医药活血化瘀抗肿瘤

中药复方基于PI3K/Akt信号通路治疗乳腺癌的研究进展

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中外医学研究 2022年第2期20卷 181-184页

作者：赵玉荣吴如孟马雪曼青海大学青海大学医学院青海省糖脂代谢疾病防控中医药重点实验室青海西宁810001

中药复方治疗乳腺癌具有多成分、多靶点、多信号通路等优势,本综述重点从PI3K/Akt信号通路出发,总结了近五年来中药复方联合化疗药物、内分泌治疗药物、靶向治疗药物、PI3K抑制剂及纯中药治疗等手段逆转乳腺癌细胞耐药、细胞增殖、诱导... 详细信息

中药复方治疗乳腺癌具有多成分、多靶点、多信号通路等优势,本综述重点从PI3K/Akt信号通路出发,总结了近五年来中药复方联合化疗药物、内分泌治疗药物、靶向治疗药物、PI3K抑制剂及纯中药治疗等手段逆转乳腺癌细胞耐药、细胞增殖、诱导细胞凋亡等的作用机制研究。为中医治疗乳腺癌提供实验依据,同时为后续的临床和基础实验研究奠定基础。

关键词：中药复方 PI3K/Akt信号通路乳腺癌作用机制

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不同急性低氧条件下SD大鼠肺肥大细胞的变化趋势

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中国高原医学与生物学杂志 2020年第1期41卷 24-32页

作者：刘杰曹成珠纪巧荣周义玲韩莹袁周阳张伟青海大学高原医学研究中心高原医学教育部重点实验室青海省高原医学应用基础重点实验室青海大学医学院病理生理学教研室青海西宁810001

目的旨在研究不同急性低压低氧条件(低压舱不同海拔高度、不同低氧刺激时间)下SD大鼠肺水肿发生情况;肺肥大细胞的变化趋势。方法将72只SD大鼠随机分成三个大组(N=24):NC组(常氧对照组,海拔2260m)、H5K组(低压舱,模拟海拔5000m)、H7K组... 详细信息

目的旨在研究不同急性低压低氧条件(低压舱不同海拔高度、不同低氧刺激时间)下SD大鼠肺水肿发生情况;肺肥大细胞的变化趋势。方法将72只SD大鼠随机分成三个大组(N=24):NC组(常氧对照组,海拔2260m)、H5K组(低压舱,模拟海拔5000m)、H7K组(低压舱,模拟海拔7000m)。每大组分别分成四组(每组n=6):12、24、48、72 h组。观察不同急性低压低氧条件下肺组织和MCs的显微结构,计数TB阳性细胞;用IHC法观测类胰蛋白酶、类糜蛋白酶阳性细胞的分布和数量变化情况。结果 (1)H5K-12、24 h组肺组织未发现明显改变,H5K-48、72 h组肺泡间隔增宽,但未发现肺泡内有渗出;H7K各组中均可见肺泡间隔增宽、肺泡壁肿胀,肺间质水肿程度重于H5K各组和NC各组,并发现H7K-48、72 h组中血管内皮细胞明显肿胀、肺泡内有水肿液及RBC渗出。(2)低氧各组MCs数量明显增多,且H7K各组多于H5K各组,各低氧组中MCs在肺微小血管旁、气管粘膜下间质、肺被膜上均有分布,其形状、大小不一,部分有明显的脱颗粒情况。通过TB阳性细胞计数并经统计学分析:TB阳性细胞数量呈现H7K组>H5K组>NC组的趋势,差异有统计学意义,H7K12 h组TB阳性细胞数量最多,差异具有统计学意义。(3)H5K、H7K各组Tryptase、Chymase阳性细胞明显增多,Tryptase、Chymase阳性细胞数量变化趋势一致,均呈现H7K组>H5K组>NC组的趋势,尤以H7k 12 h组数目最多,差异具有统计学意义。结论模拟海拔7 km高度复制急性低氧性肺水肿效果优于5 km。7Km-48、72 h水肿效果优于12、24 h。7Km-12 h时MCs数量最多、活性最强。

关键词：急性低氧肺水肿肥大细胞趋势