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不同ZEA水平对驴肠道微生物、卵巢发育以及粪便移植后小鼠卵巢细胞凋亡的影响研究

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中国畜牧杂志 2024年第1期60卷 323-330页

作者：官民凯商昊苟春阳孙玉江张国梁青岛农业大学动物科技学院山东青岛266109

试验旨在研究玉米赤霉烯酮(ZEA)对驴肠道微生态的重塑及肠道微生物结构对其卵泡发育的影响。选取24头母驴,随机分成3组,对照组和试验组分别灌服100μL浓度为0、500、1 000μg/(kg·d)的ZEA溶液,连续40 d。饲喂结束后,分别采集驴盲肠内... 详细信息

试验旨在研究玉米赤霉烯酮(ZEA)对驴肠道微生态的重塑及肠道微生物结构对其卵泡发育的影响。选取24头母驴,随机分成3组,对照组和试验组分别灌服100μL浓度为0、500、1 000μg/(kg·d)的ZEA溶液,连续40 d。饲喂结束后,分别采集驴盲肠内容物以及驴卵巢用于16S rRNA测序及Tunel检测。利用小鼠模型进行驴盲肠内容物对卵巢发育的验证试验,选取30只昆明母鼠,随机分成3组,将饲喂试验中的驴盲肠内容物制成菌液,每天200μL灌胃移植给小鼠,连续40 d,试验结束后采集小鼠卵巢进行卵巢中相关基因和蛋白表达检测及Tunel检测。结果表明:与对照组相比,500μg/(kg·d)和1 000μg/(kg·d)组驴盲肠中厚壁菌门和拟杆菌门菌群丰度降低(P<0.05),螺旋体门菌群丰度升高(P<0.05),且卵巢细胞凋亡数量增加(P<0.05);在小鼠模型中,与对照组相比,驴盲肠内容物灌胃处理组的小鼠其卵巢中炎症反应相关蛋白和凋亡相关蛋白表达量升高(P<0.05),且卵巢细胞凋亡数量升高(P<0.05),小鼠卵巢中抗氧化酶蛋白、趋化因子蛋白表达量降低(P<0.05),与对照组相比试验组小鼠日增重下降。由此可见,ZEA可通过改变驴肠道微生物结构的途径损害母驴卵泡发育及粪便移植后小鼠卵巢卵泡的发育。

关键词：玉米赤霉烯酮肠道微生态驴卵泡发育凋亡

优化HS-SPME-GC-MS方法表征香菇不同成熟阶段的关键挥发性化合物

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食品科学 2024年

作者：侯振山许贺然夏榕嵘李昀婷王娅飞潘松辛广沈阳农业大学食品学院

香菇香气随子实体成熟而变化。本研究通过优化的顶空固相微萃取（Headspace Solid-phase Microextraction，HS-SPME）结合气相色谱-质谱联用（Gas Chromatography-Mass Spectrometry，GC-MS）技术鉴定香菇不同成熟阶段挥发性化合物，并... 详细信息

香菇香气随子实体成熟而变化。本研究通过优化的顶空固相微萃取（Headspace Solid-phase Microextraction，HS-SPME）结合气相色谱-质谱联用（Gas Chromatography-Mass Spectrometry，GC-MS）技术鉴定香菇不同成熟阶段挥发性化合物，并采用气味活性值（Odor Activity Value，OAV）和偏最小二乘判别分析（Partial least squares discriminant analysis， PLS-DA）进行分析。结果表明，最佳提取条件为：1.0 g香菇样品在50 ℃下提取25 min，解析3 min。在香菇不同成熟阶段共鉴定出71种挥发性化合物，M5阶段的挥发性化合物数量和含量均最高。通过PLS-DA和变量投影重要性（Variable Importance Projection，VIP）筛选出18种挥发性化合物，可作为区分香菇不同成熟阶段的挥发性生物标志物。OAV结果表明有16种挥发性化合物为香气活性化合物。其中，1-辛烯-3-醇、3-辛醇、1-辛烯-3-酮、3-辛酮、苯乙醛、二甲基二硫醚、二甲基三硫醚、2，3，5-三硫杂己烷和1，2，4-三硫杂环戊烷同时满足VIP > 1和OAV ≥ 1，是香菇不同成熟阶段最重要的差异挥发性化合物。本研究为香菇成熟过程中香气形成机制提供理论依据。

关键词：香菇成熟阶段顶空固相微萃取优化香气偏最小二乘判别分析

基于转录组测序筛选新疆野苹果种子休眠解除过程中植物激素相关基因

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果树学报 2024年

作者：房震李静马娟张凯叶春秀新疆农业大学林学与风景园林学院

【目的】研究新疆野苹果（Malus sieversii）种子不同贮藏阶段转录组差异和激素含量变化，筛选新疆野苹果种子休眠解除过程中植物激素相关基因，为后续新疆野苹果种子休眠解除激素调控机制研究提供依据。【方法】以新疆野苹果种子为材... 详细信息

【目的】研究新疆野苹果（Malus sieversii）种子不同贮藏阶段转录组差异和激素含量变化，筛选新疆野苹果种子休眠解除过程中植物激素相关基因，为后续新疆野苹果种子休眠解除激素调控机制研究提供依据。【方法】以新疆野苹果种子为材料，对照未层积种子和经4 ℃低温沙藏层积处理（30、60、90、120 d）后种子进行转录组测序，采用酶联免疫吸附法测定种子中的脱落酸（abscisic acid，ABA）、赤霉素（gibberellin，GA）、生长素（auxin，IAA）、细胞分裂素（cytokinin，CTK）含量以及乙烯氨基环丙烷羧酸氧化酶（1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid oxidase，ACO）和氨基环丙烷羧酸合成酶（1-aminocyclopropane-1- carboxylic acid oxidase synthase，ACS）的活性。【结果】新疆野苹果种子GA、IAA、CTK含量随贮藏时间的增加呈上升趋势，而ABA含量呈下降趋势。乙烯（ethylene，ETH）合成途径ACO和ACS活性随贮藏时间的增加呈增加趋势。GO富集分析筛选出85个差异基因调控种子萌发（GO:0010029），114个GA相关差异基因，313个ABA相关差异基因和156个ETH相关差异基因。KEGG通路富集分析显示，主要富集通路有植物激素信号转导、MAPK信号通路-植物、内质网中的蛋白加工、淀粉和蔗糖代谢、糖酵解/糖原生成等。ABA信号传导通路中有3个PYR/PYL基因表达下调，2个蛋白磷酸酶2C（PP2C-type protein phosphatases，PP2C）、3个蔗糖非发酵相关的蛋白激酶（sucrose non-fermenting-1-related protein kinase 2，SnRK2）上调表达和2个ABA分解代谢8'-羟化酶（8'-hydroxylases）基因表达显著上调。GA信号转导途径中2个受体GID1（gibberellin insensitive dwarf 1）和6个负调控因子DELLA蛋白上调表达；ETH受体ETR（Ethylene receptor）的直接前体1-氨基环丙烷-1-羧酸（1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid，ACC）和ACO基因上调表达。【结论】新疆野苹果种子经低温沙藏层积处理，ERF2-like表达量与ACO、ACS活性变化呈相反趋势，PYR1-like、WRKY33基因表达量与ABA含量变化均下降，说明以上基因可能参与ABA信号通路调控新疆野苹果种子休眠解除过程。

关键词：新疆野苹果转录组内源激素差异表达基因种子休眠

氧化葡萄糖酸杆菌通过降低pH值损害斑翅果蝇及益生菌

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微生物学报 2024年第3期64卷 795-808页

作者：杨维康张晟王子光何娜娜周传明周少杰刘安琪纪晓雯刘威安徽农业大学植物保护学院安徽合肥230036

【目的】分离斑翅果蝇病原性细菌并解析其致病机理,以期应用于生物防治斑翅果蝇。【方法】利用平板划线的方法,从已发生褐变的斑翅果蝇培养物中分离引起褐变的细菌,并通过16S rRNA基因序列进行鉴定;使用酸化乙醇法测定褐变物质,检测细... 详细信息

【目的】分离斑翅果蝇病原性细菌并解析其致病机理,以期应用于生物防治斑翅果蝇。【方法】利用平板划线的方法,从已发生褐变的斑翅果蝇培养物中分离引起褐变的细菌,并通过16S rRNA基因序列进行鉴定;使用酸化乙醇法测定褐变物质,检测细菌的褐变能力;在致病性检测实验中,利用菌液饲喂法检测病原菌对果蝇存活率的影响,使用二氢乙锭(dihydroethidium,DHE)染色法检测肠道活性氧(reactive oxygen species,ROS)活性,用亮蓝染色检测肠道通透性。【结果】从斑翅果蝇培养物中分离出褐变性细菌氧化葡萄糖酸杆菌(Gluconobacter oxydans)。该菌株显著地降低斑翅果蝇存活率,第8天时存活率下降到49.41%(P<0.001);同时,该菌株显著地降低斑翅果蝇对缺水和饥饿等胁迫耐受性(P<0.001),分别在第24小时和第32小时存活率降到58%和50.9%。***感染损伤果蝇肠道通透性并显著地增高ROS水平(P<0.001)。***强烈地降低斑翅果蝇培养基pH值(pH2.0),进而降低果蝇存活率、抑制和灭杀益生菌植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。【结论】***通过强烈降低培养基pH而降低斑翅果蝇存活率,同时可抑制益生菌生长,表明该菌具有较好的防治斑翅果蝇等害虫的潜能。

关键词：斑翅果蝇氧化葡萄糖酸杆菌致病性生物防治 pH值

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大蒜E素调控斑翅果蝇产卵选择及适合度

昆虫学报 2024年第3期67卷 374-383页

作者：李一璇李隆琦张晟鲍悦月刘安琪庄晶晶姜标刘威安徽农业大学植物保护学院合肥230036 中国科学院上海有机化学研究所上海200032

【目的】研究大蒜E素(allicin E, ALE)对斑翅果蝇Drosophila suzukii产卵行为的影响,为利用ALE生物防治斑翅果蝇提供参考依据。【方法】采用产卵双向选择模型检测0.01%, 0.015%和0.02%ALE对斑翅果蝇雌成虫产卵驱避作用。利用暗盒实验、... 详细信息

【目的】研究大蒜E素(allicin E, ALE)对斑翅果蝇Drosophila suzukii产卵行为的影响,为利用ALE生物防治斑翅果蝇提供参考依据。【方法】采用产卵双向选择模型检测0.01%, 0.015%和0.02%ALE对斑翅果蝇雌成虫产卵驱避作用。利用暗盒实验、摘除前足、摘除触角等方式检测视觉、味觉和嗅觉感觉系统对斑翅果蝇雌成虫产卵偏嗜行为的影响。利用Y生物迷宫试验检测0.015%ALE对斑翅果蝇雌成虫的产卵行为驱避作用。通过检测存活率和发育历期研究ALE对斑翅果蝇适合度的影响。利用荧光染色法检测ALE处理后斑翅果蝇成虫肠道中活性氧水平。【结果】ALE驱避斑翅果蝇雌成虫产卵,对0.01%, 0.015%和0.02%ALE的产卵指数分别为-0.30,-0.44和-0.51。在黑暗和摘除前足条件下,斑翅果蝇雌成虫存在对ALE的显著的产卵避性反应,而摘除触角的斑翅果蝇对ALE的产卵避性显著降低,对0.01%, 0.015%和0.02%ALE的产卵指数分别降低为-0.10,-0.11和-0.12。斑翅果蝇雌成虫所产卵暴露于0.02%ALE后,后代蛹和成虫的存活率分别降低了69.23%和69.70%,后代成蛹和羽化时间分别延长5.88和4.75 d。ALE缩短斑翅果蝇成虫寿命,雌性和雄性在0.02%ALE处理下LT_(50)值分别由39 d降低为18和15 d。0.02%ALE处理72 h后斑翅果蝇成虫奔跑和攀爬速度显著降低。0.02%和0.05%ALE处理3 d后斑翅果蝇成虫肠道中的活性氧水平上升。【结论】ALE引起斑翅果蝇雌成虫产卵避性,主要通过嗅觉介导此种产卵避性;ALE延缓了斑翅果蝇后代的生长发育,降低了亲代成虫的运动活力和存活率,并引起肠道损伤,因此具有潜在的生物防治斑翅果蝇价值。

关键词：斑翅果蝇大蒜E素产卵避性嗅觉系统活性氧

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貉肉骨粉营养成分分析

饲料工业 2024年第11期45卷 139-144页

作者：吴瑶张博睿刘可园邢宝瑞李光玉周李生孙伟丽青岛农业大学动物科技学院山东青岛266109 中国农业科学院特产研究所吉林长春130112

为解决蛋白质饲料原料短缺和价格上涨的问题,对貉肉骨粉的营养成分、卫生与安全性进行了评估,为其作为新的动物性蛋白质饲料资源提供数据支持。试验以貉肉骨粉为材料,与狐肉骨粉、进口牛肉骨粉和进口鱼粉进行对比,测定了常规营养成分、... 详细信息

为解决蛋白质饲料原料短缺和价格上涨的问题,对貉肉骨粉的营养成分、卫生与安全性进行了评估,为其作为新的动物性蛋白质饲料资源提供数据支持。试验以貉肉骨粉为材料,与狐肉骨粉、进口牛肉骨粉和进口鱼粉进行对比,测定了常规营养成分、氨基酸含量、重金属元素含量、农药残留和微生物污染情况。结果表明:①貉肉骨粉干物质含量显著高于狐肉骨粉和进口鱼粉(P<0.05),粗脂肪含量显著高于进口牛肉骨粉和进口鱼粉(P<0.05);②貉肉骨粉的必需氨基酸含量显著高于进口牛肉骨粉(P<0.05),非必需氨基酸含量高于其他试验材料;③貉肉骨粉符合饲料卫生标准,未检出六六六和滴滴涕,重金属含量和微生物指标均符合要求。因此,貉肉骨粉具有开发成为新型蛋白质饲料原料的潜力。

关键词：蛋白质饲料貉肉骨粉营养成分饲料安全重金属含量

基于改进流变元件模型的层状深厚覆盖层流变对面板坝结构性能影响的数值分析

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工程科学与技术 2024年第4期56卷 216-228页

作者：王璠毛海涛王晓菊侍克斌山西农业大学城乡建设学院山西太原030000 新疆农业大学水利与土木工程学院新疆乌鲁木齐830052

在深厚覆盖层上建造面板堆石坝,除考虑水-土流固耦合外,还应考虑坝基流变的影响。为了更好地模拟坝基流变对大坝及渗控体系的真实受力,基于深厚覆盖层所呈现出的层状特性,首先改进新的流变元件模型H-KS以适应层状覆盖层,然后借助Comsol... 详细信息

在深厚覆盖层上建造面板堆石坝,除考虑水-土流固耦合外,还应考虑坝基流变的影响。为了更好地模拟坝基流变对大坝及渗控体系的真实受力,基于深厚覆盖层所呈现出的层状特性,首先改进新的流变元件模型H-KS以适应层状覆盖层,然后借助Comsol建立流变与流固耦合模型,最后按时间顺序计算了河口村面板坝各阶段的力学指标,分析了坝基流变对大坝及防渗体系的影响。结果表明:对于各向异性明显的层状坝基,采用H-KS流变模型能较好反映大坝各阶段的应力、变形和渗流实际情况,误差均在5%以内;计算结果相比不考虑流变的DuncanE-B模型,应力和变形均增大11.8%以上,部分增量对大坝结构的安全稳定造成影响;填筑期的沉降和应力总量占比达70%以上,但单位时间增量却较小,如沉降增量仅为0.015m/月;蓄水期的岩土体流变及流固耦合作用对大坝各部位强度和刚度影响最大,应力及沉降增长率分别为0.02MPa/月、0.038m/月;运行期的各指标增长率逐渐趋缓,最终趋于稳定,但变形和应力增量可能会导致主要结构失稳或破坏。混凝土面板-趾板-连接板-防渗墙是完整、有效的渗流控制体系,坝基流变导致防渗墙上部水平位移增大,整体强度降低;趾板和面板在中部有受弯破坏的趋势。层状岩土体流变具有时效性,该层状坝基的流变在蓄水后2~3a间基本完成,相应指标也趋于稳定。研究结果对层状覆盖层上的面板坝安全稳定体系的建立提供了理论支持。

关键词：深厚覆盖层坝基流变流变模型防渗系统

中高强混凝土抗压强度与气孔分布特征关系模型研究

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长江科学院院报 2024年第4期41卷 194-202页

作者：杨帅毛海涛刘畅王晓菊山西农业大学城乡建设学院山西晋中030600 新疆农业大学水利与土木工程学院乌鲁木齐830000

为探究气孔分布特征与中高强混凝土抗压强度之间的定量关系,采用低场核磁共振成像分析系统与全自动压力试验机开展了不同气孔分布特征下的高强混凝土抗压强度试验。通过对Ryshkewitch半经验公式模型进行验证和改进,建立了中高强混凝土... 详细信息

为探究气孔分布特征与中高强混凝土抗压强度之间的定量关系,采用低场核磁共振成像分析系统与全自动压力试验机开展了不同气孔分布特征下的高强混凝土抗压强度试验。通过对Ryshkewitch半经验公式模型进行验证和改进,建立了中高强混凝土抗压强度与孔结构关系模型。结果表明:混凝土孔隙率会随着砂率和初始含气量的增加而逐渐增加,相比于提高砂率,提高初始含气量更容易得到差异性较大的孔隙率;提高砂率使非毛细孔占比增加了17.2%,毛细孔占比降低了13.0%;提高初始含气量使毛细孔占比增加了12.7%,凝胶孔占比降低了12.6%。基于Ryshkewitch半经验公式改进的模型R~2接近于1,P值<0.05,可以更准确地描述孔隙分布特征与抗压强度的定量关系。

关键词：中高强混凝土抗压强度气孔分布低频核磁共振砂率初始含气量孔隙率 Ryshkewitch半经验公式

PRRSV GP4蛋白的原核表达及单克隆抗体的制备

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中国动物传染病学报 2024年第1期32卷 150-156页

作者：郭昊乌东高娃赵洪哲刘春羽侯丽娜王凤雪温永俊内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)给养猪业带来巨大经济损失,尽快建立该病毒的快速诊断方法尤为重要。PRRSV ORF4基因编码的结构蛋白GP4为病毒感染所必须。本研究为制备GP4单克隆抗体,选取ORF4优势序列优化合成,连入pET-32a原核表达载体,... 详细信息

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)给养猪业带来巨大经济损失,尽快建立该病毒的快速诊断方法尤为重要。PRRSV ORF4基因编码的结构蛋白GP4为病毒感染所必须。本研究为制备GP4单克隆抗体,选取ORF4优势序列优化合成,连入pET-32a原核表达载体,构建重组质粒pET-32a-ORF4;经双酶切验证后,转化至BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达并纯化;经SDS-PAGE及Westernblot鉴定成功后免疫小鼠,制备筛选单克隆抗体,对制备的单克隆抗体进行验证。结果表明,GP4蛋白以可溶形式表达,大小为30 kDa;纯化蛋白免疫小鼠后,共筛选4株IgG亚型阳性杂交瘤细胞株;所制备单克隆抗体可与抗原特异性结合。本研究为PRRSV诊断方法的建立及后续研究奠定了基础。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP4蛋白原核表达单克隆抗体

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