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HPLC同时测定无梗五加果实中金丝桃苷和槲皮素-4'-O-β-D-半乳糖苷的含量

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药物分析杂志 2013年第2期33卷 206-209页

作者：刘玉强才谦辽宁中医药大学大连116600

目的:建立HPLC同时测定无梗五加[Acanthopanax sessiliflorus(*** Maxim.)Seem.]果实中金丝桃苷和槲皮素-4'-O-β-D-半乳糖苷含量的方法。方法:采用TopsilTM(拓谱)C18(5μm,4.6 mm×250 mm)色谱柱,流动相为乙腈-0.2%乙酸水溶液(体积比为17.5∶82.5),流速1.0 ***-1,检测波长360 nm。结果:金丝桃苷的线性范围为0.036～0.356μg(r=0.9998),平均回收率为98.5%(RSD=2.1%),最低检测限为0.053μ***-1,最低定量限为0.178μ***-1;槲皮素-4'-O-β-D-半乳糖苷的线性范围为0.846～8.456μg(r=0.9995),平均回收率为99.5%(RSD=1.9%),最低检测限为0.126μ***-1,最低定量限为0.423μ***-1。供试品溶液48 h内稳定,金丝桃苷和槲皮素-4'-O-β-D-半乳糖苷峰面积的RSD分别为2.4%和2.6%。结论:方法可用于无梗五加果实的质量控制。

关键词：高效液相色谱法无梗五加金丝桃苷槲皮素-4'-O-β-D-半乳糖苷含量测定质量控制药膳两用植物

左、右归丸对去卵巢大鼠骨髓单核/巨噬细胞破骨分化的影响

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中华中医药学刊 2023年第4期41卷 72-76,I0014页

作者：冯秀芝吴继雷药晓雨贾连群任艳玲辽宁中医药大学辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学附属医院辽宁沈阳110032

目的基于AMPK/mTOR信号通路研究左、右归丸对去卵巢大鼠骨髓单核/巨噬细胞(bone marrow-derived macrophage,BMMs)破骨分化的作用及机制。方法将60只雌性大鼠随机分为6组,分别为空白组(KB)、假手术组(SHAM)、模型组(OVX)、补佳乐组(BJL... 详细信息

目的基于AMPK/mTOR信号通路研究左、右归丸对去卵巢大鼠骨髓单核/巨噬细胞(bone marrow-derived macrophage,BMMs)破骨分化的作用及机制。方法将60只雌性大鼠随机分为6组,分别为空白组(KB)、假手术组(SHAM)、模型组(OVX)、补佳乐组(BJL)、右归丸组(YGW)和左归丸组(ZGW)。KB组不做处置,SHAM组模拟卵巢切除手术过程,后4组均将双侧卵巢切除。各组分别灌胃蒸馏水(SHAM、OVX)、补佳乐(BJL)、右归丸(YGW)和左归丸(ZGW)。12周后取大鼠股骨和胫骨骨髓,用差时贴壁法获得大鼠BMMs并进行破骨分化诱导。用抗酒石酸酸性磷酸酶活性检测试剂盒检测TRAP活性;qrt-PCR法检测TRAP基因的表达;Western blotting法检测TRAP、RANKL、AMPKɑ、p-AMPKɑ、mTORC1、p-mTORC1蛋白的表达。结果左、右归丸能显著降低去卵巢大鼠BMMs破骨诱导后TRAP活性,降低TRAP基因和蛋白的表达,降低与RANK结合的RANKL蛋白的表达。与KB组比较,OVX组AMPKɑ蛋白磷酸化水平降低,mTORC1蛋白磷酸化水平升高;3个用药组皆能对抗上述改变,其中左归丸优于右归丸。结论左、右归丸均能通过AMPK/mTOR信号通路抑制去卵巢大鼠BMMs的破骨分化。

关键词：左归丸右归丸骨髓单核/巨噬细胞破骨分化 AMPK/mTOR信号通路

老年重症肌无力患者浆细胞样树突细胞与调节性T细胞的变化与临床意义

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中国老年学杂志 2022年第2期42卷 328-331页

作者：王思微牛韵婷张婷婷辽宁中医药大学附属医院临床检验中心辽宁沈阳110032 沈阳医学院

目的研究老年重症肌无力(MG)患者淋巴细胞浆细胞样树突细胞(pDC)、调节性T细胞(Treg)、血清白细胞介素(IL)-4、γ-干扰素(IFN)-γ的含量变化及临床意义。方法老年MG患者112例按照影像学及病理学诊断划分为无胸腺受累组60例与胸腺受累组5... 详细信息

目的研究老年重症肌无力(MG)患者淋巴细胞浆细胞样树突细胞(pDC)、调节性T细胞(Treg)、血清白细胞介素(IL)-4、γ-干扰素(IFN)-γ的含量变化及临床意义。方法老年MG患者112例按照影像学及病理学诊断划分为无胸腺受累组60例与胸腺受累组52例,同期健康体检人员68例为对照组。上述3组应用流式细胞术检测其外周血淋巴细胞pDC、Treg细胞含量,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测其血清IL-4、IFN-γ与人乙酰胆碱受体抗体(AChR-Ab)含量,对比3组对象的年龄、病程、QMG评分与血清AChR-Ab含量,并比较上述指标之间的相关性。结果与对照组相比,胸腺受累组与无胸腺受累组AChR-Ab含量明显升高(P0.05)。结论老年MG患者pDC、Treg细胞、血清IL-4含量减低、IFN-γ含量升高,且在合并胸腺异常的患者中更为明显,不同指标之间存在相关性,提示老年MG患者存在免疫失衡状态,在合并胸腺异常的患者中更为严重。

关键词：重症肌无力浆细胞样树突细胞调节性T细胞白细胞介素(IL)-4 γ-干扰素(IFN-γ)

基于“脾虚生痰”探讨糖代谢重编程驱动巨噬细胞炎症反应在动脉粥样硬化中的作用

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中华中医药杂志 2022年第10期37卷 5865-5868页

作者：高晓宇杨关林张哲王洋刘悦孔德昭李勇王文萍辽宁中医药大学沈阳110847 辽宁中医药大学附属医院沈阳110032

中医认为脾为“气血生化之源”,能量代谢与脾主运化的功能密切相关。在动脉粥样硬化(AS)病变过程中,巨噬细胞糖代谢以瓦博格效应为主,即发生糖代谢重编程,而糖代谢重编程被视为“脾虚”的生物学基础。巨噬细胞糖代谢重编程驱动炎症反应... 详细信息

中医认为脾为“气血生化之源”,能量代谢与脾主运化的功能密切相关。在动脉粥样硬化(AS)病变过程中,巨噬细胞糖代谢以瓦博格效应为主,即发生糖代谢重编程,而糖代谢重编程被视为“脾虚”的生物学基础。巨噬细胞糖代谢重编程驱动炎症反应是AS的核心事件,炎症反应导致的白细胞介素(IL)-1β释放可与胆固醇竞争获得从巨噬细胞输出的三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1),抑制胆固醇逆转运,促进泡沫细胞形成,导致AS斑块的形成,该病变过程又与“脾为生痰之源”的病变过程相契合。文章旨在聚焦糖代谢重编程驱动巨噬细胞炎症反应,探讨“脾虚生痰”所致AS病变过程中,“脾虚”与“痰浊”之间的机制联系。

关键词：脾虚生痰动脉粥样硬化糖代谢重编程炎症巨噬细胞

枸杞多糖对去卵巢大鼠心脏结构及心脏功能的影响

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辽宁中医杂志 2016年第8期43卷 1745-1747,I0005页

作者：马艺鑫程岩岩冷雪吕美君张妮宋囡辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室辽宁沈阳110847 辽宁省中医转化医学研究中心辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学附属第一医院辽宁沈阳110032

目的:观察枸杞多糖对去卵巢大鼠心脏结构及功能的影响。方法:将30只Sprague-Dawley(SD)雌性大鼠随机分为假手术组、去卵巢组、补佳乐组、枸杞多糖高剂量组及枸杞多糖低剂量组,行超声心动图(UCG)检查,取心脏组织石蜡包埋,行HE染色。结果... 详细信息

目的:观察枸杞多糖对去卵巢大鼠心脏结构及功能的影响。方法:将30只Sprague-Dawley(SD)雌性大鼠随机分为假手术组、去卵巢组、补佳乐组、枸杞多糖高剂量组及枸杞多糖低剂量组,行超声心动图(UCG)检查,取心脏组织石蜡包埋,行HE染色。结果:与假手术组相比,去卵巢组大鼠LVID-d、LVAW-s及LVPW-s均增厚,LV Mass、LV Vol-d及LV Vol-s均增大差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),心肌细胞排列紊乱,细胞间隙增大;与去卵巢组比较,枸杞多糖高剂量组可以改善大鼠心脏LVPW-s、LV Mass及心肌形态的变化(P<0.05)。结论:枸杞多糖可以通过改善去卵巢大鼠心脏结构及功能防治绝经后心血管病变。

关键词：枸杞多糖去卵巢大鼠心血管疾病超声心动图

葛根芩连汤调控巨噬细胞极化趋势干预ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化易损斑块机制

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中国实验方剂学杂志 2022年第11期28卷 60-69页

作者：郑一郭鹤罗曦王艳杰赵丹玉张林王靖宇刘羽茜包永睿王帅李天娇于睿孟宪生辽宁中医药大学沈阳110847

目的:探究葛根芩连汤调控巨噬细胞极化趋势干预ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化(AS)易损斑块的机制。方法:12只正常C57BL/6CNC小鼠作为空白组,60只同品系的ApoE^(-/-)小鼠随机分为5组,即模型组、葛根芩连汤低、中、高剂量组(GQL-D、Z、G组,... 详细信息

目的:探究葛根芩连汤调控巨噬细胞极化趋势干预ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化(AS)易损斑块的机制。方法:12只正常C57BL/6CNC小鼠作为空白组,60只同品系的ApoE^(-/-)小鼠随机分为5组,即模型组、葛根芩连汤低、中、高剂量组(GQL-D、Z、G组,剂量3.12、6.24、12.48 g·kg·d^(-1))、阿托伐他汀组(西药组),以高脂饲料喂养造模。空白组、模型组予等体积无菌蒸馏水灌胃;GQL-D、Z、G组、西药组分别予对应浓度的药物灌胃8周。生化法检测总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,大体油红O染色、苏木素-伊红(HE)染色观测主动脉区域斑块分布情况,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中M1型促炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平和M2型抗炎性因子白细胞介素-13(IL-13)、转化生长因子-β(TGF-β)水平,免疫荧光双标检测巨噬细胞甘露糖受体(MMR/CD206)/精氨酸酶-1(Arg-1)、CD206/诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测主动脉Arg-1和iNOS mRNA表达水平。结果:与模型组相比,GQL-Z组、GQL-G注和西药组的TG、TC、LDL-C水平明显降低(P<0.05),HDL-C水平明显升高(P<0.05);随着葛根芩连汤浓度的增加,斑块富集区域逐渐缩小,颜色随之变浅,以GQL-G组和西药组染色区域分布最散;给药各组的Arg-1蛋白表达水平明显升高(P<0.05),CD206蛋白表达水平明显升高(P<0.05),iNOS蛋白表达水平明显降低(P<0.05),Arg-1 mRNA表达水平明显升高(P<0.05),iNOS mRNA表达水平明显降低(P<0.05)。结论:葛根芩连汤对AS易损斑块的干预作用可能与其改善脂质代谢,抑制巨噬细胞M1极化,促进巨噬细胞M2极化,进而改善巨噬细胞炎症微环境有关。

关键词：葛根芩连汤动脉粥样硬化巨噬细胞极化机制

基于网络药理学联合分子对接探究葛根芩连汤干预动脉粥样硬化的潜在分子机制

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中国实验方剂学杂志 2022年第11期28卷 51-59页

作者：郑一郭鹤罗曦王艳杰赵丹玉冯晓帆李宝坤王靖宇张林刘羽茜于睿孟宪生辽宁中医药大学沈阳110847

目的:基于网络药理学联合分子对接探究葛根芩连汤(GQL)干预动脉粥样硬化(AS)的潜在分子机制。方法:从中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)筛选GQL中各药材的活性成分及靶点,从7个数据库中查找AS相关基因,确定GQL治疗AS的靶基因。利用... 详细信息

目的:基于网络药理学联合分子对接探究葛根芩连汤(GQL)干预动脉粥样硬化(AS)的潜在分子机制。方法:从中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)筛选GQL中各药材的活性成分及靶点,从7个数据库中查找AS相关基因,确定GQL治疗AS的靶基因。利用Cytoscape 3.8.0构建“成分-靶点”网络。利用STRING建立蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,并通过CytoNCA拓扑分析筛选核心靶点。运用R clusterProfiler对目标基因进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析,预测其富集的信号通路并以多种图可视化展示。最后将活性强度前10位的成分作为配体,与筛选得到AS核心靶点进行分子对接分析,并与阿托伐他汀的结合度进行对比。结果:得到GQL活性成分150个,AS疾病靶点20289个,交集靶点213个。经过筛选,获取核心交集靶点48个,GO和KEGG富集分析发现其功能主要与细胞核受体活动、配体的激活、转录因子活动等有关,富集在流体剪切力与AS、晚期糖基化终产物及其受体(AGE/RAGE)、白细胞介素-17(IL-17)、肿瘤坏死因子(TNF)、Toll样受体通路等与AS关系密切的信号通路。分子对接结果显示GQL效应成分与AS核心靶点结合较好,甚至优于阿托伐他汀,结合度最好的5组关系分别是葛根素-TNF,黄芩素-诱导型一氧化氮合酶(NOS2),葛根素-NOS2,芒柄花黄素-NOS2,汉黄芩素-NOS2。结论:以上研究为该经典名方日后进一步探索提供了新思路。

关键词：葛根芩连汤动脉粥样硬化网络药理学分子对接机制

高灵敏ECL-RET传感器的构建及其用于血清前列腺特异性抗原检测的研究

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分析测试学报 2022年第8期41卷 1200-1206页

作者：孙莹莹张佳佳王丹王蔚郭胜男辽宁中医药大学医学检验学院辽宁沈阳110847

肿瘤标志物在癌症早期诊断与预后监测中具有非常重要意义。前列腺癌作为男性泌尿生殖系统中最常见的恶性肿瘤,其血清前列腺特异性抗原(PSA)是最重要的早期检测指标。该研究以制备的四元Cu-Zn-In-S纳米晶(NCs)作为发光体,金纳米星(AuNSs... 详细信息

肿瘤标志物在癌症早期诊断与预后监测中具有非常重要意义。前列腺癌作为男性泌尿生殖系统中最常见的恶性肿瘤,其血清前列腺特异性抗原(PSA)是最重要的早期检测指标。该研究以制备的四元Cu-Zn-In-S纳米晶(NCs)作为发光体,金纳米星(AuNSs)作为猝灭探针,利用K2S2O8作为共反应剂,发展了一种基于量子点电化学发光共振能量转移的免疫传感器(ECL-RET)用于血清中PSA的高灵敏检测。固定在传感器上的NCs表现出极强的初始ECL信号和较低的ECL电位。作为固定基底的多壁碳纳米管(MWNTs)不仅加速了NCs与S_(2)O^(2-)_(8)之间的反应,获得了较高的ECL信号,而且作为载体可以固定大量的抗体,提高传感器检测PSA的灵敏度。采用电化学交流阻抗法(EIS)对组装过程进行跟踪,证实了该传感器组装的可行性。采用电化学发光法研究了传感器对底液中不同浓度PSA的响应,结果显示,随着体系中PSA浓度的增加,电极上结合AuNSs的标记抗体(Ab2-AuNSs)越多,触发的猝灭效果越明显,ECL信号降低越明显。因此,该传感器表现出对PSA较好的分析性能,其线性范围为0.01~150 ng/mL,检出限为0.03 ng/mL。用于血清样品的检测,该传感器的测试结果与常用的化学发光法基本吻合,相对误差仅为−7.2%~6.0%,结果准确度良好,为临床检测PSA提供了准确可靠的新方法。

关键词：电化学发光共振能量转移前列腺特异性抗原(PSA) 四元纳米晶多壁碳纳米管(MWNTs)

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基于NF-κB/NLRP3/Caspase-1通路介导的巨噬细胞焦亡探究葛根芩连汤对动脉粥样硬化易损斑块的干预机制

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中国实验方剂学杂志 2022年第11期28卷 70-78页

作者：郑一郭鹤包永睿王帅李天娇罗曦张欢倪菲段盈竹张颖于睿孟宪生辽宁中医药大学沈阳110847

目的:探究葛根芩连汤(GQL)通过调控核转录因子(NF)-κB/NOD样受体蛋白3(NLRP3)/胱天蛋白酶(Caspase)-1通路介导的巨噬细胞焦亡对动脉粥样硬化(AS)易损斑块的作用。方法:12只正常C57BL/6CNC小鼠作为空白组,60只同品系的载脂蛋白E基因敲除... 详细信息

目的:探究葛根芩连汤(GQL)通过调控核转录因子(NF)-κB/NOD样受体蛋白3(NLRP3)/胱天蛋白酶(Caspase)-1通路介导的巨噬细胞焦亡对动脉粥样硬化(AS)易损斑块的作用。方法:12只正常C57BL/6CNC小鼠作为空白组,60只同品系的载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠随机分为5组,即模型组、葛根芩连汤低、中、高剂量组(GQL-D、Z、G组)、立普妥组,以高脂饲料喂养造模。空白组、模型组予等体积无菌蒸馏水灌胃;GQL-D、Z、G、立普妥组分别予对应浓度的药物灌胃8周。苏木素-伊红(HE)染色观测主动脉区域斑块情况,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)水平,ELISA检测巨噬细胞甘露糖受体(MMR/CD206)/凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、CD206/NLRP3蛋白表达水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组小鼠gasdermin D蛋白C端(C-terminal GSDMD)、gasdermin D蛋白N端(N-terminal GSDMD)、NLRP3、含胱天蛋白酶-1前体(pro-Caspase-1)和NF-κB p65蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型小鼠AS病变程度严重,血清IL-1β、IL-18、组织ASC、NLRP3、C-terminal GSDMD、N-terminal GSDMD、pro-Caspase-1和NF-κB p65表达水平明显升高(P<0.05),CD206水平明显下降(P<0.05);与模型组比较,给药各组小鼠主动脉壁AS病变程度有所减轻,血清IL-1β、IL-18、组织ASC、NLRP3、C-terminal GSDMD、N-terminal GSDMD、pro-Caspase-1和NF-κB p65表达水平有不同程度下降,CD206水平不同程度上升,部分组结果差异有统计学意义(P<0.05)。结论:GQL对AS易损斑块的干预作用可能是通过调控NF-κB/NLRP3/Caspase-1通路,减轻其介导的巨噬细胞焦亡来实现的。

关键词：葛根芩连汤动脉粥样硬化巨噬细胞焦亡机制