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白菜型油菜-黑芥单体附加系的创制及遗传研究

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中国油料作物学报 2024年

作者：王顺林武海燕程靖雯彭梓然杨芩芩张密密谭晨吴增祥葛贤宏李再云李鹏飞贵州中医药大学中药民族药资源研究院赣南师范大学生命科学学院广东省农业科学院蔬菜研究所/广东省蔬菜新技术研究重点实验室华中农业大学植物科学技术学院

为利用芸薹属B基因组及其可能的优良性状，以黑芥为芸薹属B基因组供体，将白菜型油菜与黑芥远缘杂交获得的三倍体杂种作为母本，与白菜型油菜亲本不断回交，利用分子标记、细胞学、形态学手段鉴定出附加黑芥B7和B8染色体的单体附加系，... 详细信息

为利用芸薹属B基因组及其可能的优良性状，以黑芥为芸薹属B基因组供体，将白菜型油菜与黑芥远缘杂交获得的三倍体杂种作为母本，与白菜型油菜亲本不断回交，利用分子标记、细胞学、形态学手段鉴定出附加黑芥B7和B8染色体的单体附加系，并对2个单体附加系进行表型考察和染色体行为观察。结果表明，白菜型油菜-黑芥B7和B8染色体单体附加系表现出一些特殊的表型，B7单体附加系雌不育严重，种子种皮颜色表现为淡黄色，叶片表现出亲本黑芥的毛刺表型；B8单体附加系表现出亲本黑芥植株高大、一次分枝数多的表型。细胞学分析表明黑芥B7和B8染色体在减数分裂过程中多以单价体形式存在，黑芥B7染色体上存在45S rDNA位点。雌雄配子传递率分析发现B7和B8染色体的传递率均较低，分别为B7染色体雌配子传递率9.14%、雄配子传递率6.58%,B8染色体雌配子传递率20.17%、雄配子传递率9.05%。本研究创制的白菜型油菜-黑芥B7和B8单体附加系将有利于深入解析黑芥基因组信息及利用其优良性状。

关键词：白菜型油菜黑芥单体附加系细胞学表型

淫羊藿苷调控LAP自噬促进酒精抑制的MC3T3-E1细胞成骨分化

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中国中药杂志 2024年

作者：曾麒陈跃平宋世雷赖渝吴华华广西中医药大学研究生院广西中医药大学附属瑞康医院创伤骨科与手外科

研究细胞自噬在MC3T3-E1细胞成骨诱导（生理）、酒精（alcohol，AL）干预（病理）分化过程中的影响机制，以及淫羊藿苷（icariin，ICA）对AL干预病理状态下MC3T3-E1细胞成骨分化的作用机制。成骨矿化结节染色鉴定该细胞可分化为成骨细胞... 详细信息

研究细胞自噬在MC3T3-E1细胞成骨诱导（生理）、酒精（alcohol，AL）干预（病理）分化过程中的影响机制，以及淫羊藿苷（icariin，ICA）对AL干预病理状态下MC3T3-E1细胞成骨分化的作用机制。成骨矿化结节染色鉴定该细胞可分化为成骨细胞。CCK-8实验筛选合适的AL和ICA浓度后，实验分为7组：完全培养基（complete medium，CM）组，成骨诱导培养基（osteogenic induction medium，OIM）组，OIM+0.25 mol·L-1AL组，OIM+0.25 mol·L-1AL+1×10-8mol·L-1ICA组，OIM+0.25 mol·L-1AL+1×10-7mol·L-1ICA组，OIM+0.25 mol·L-1AL+1×10-6mol·L-1ICA组，OIM+0.25 mol·L-1AL+1×10-5mol·L-1ICA组，培养7 d。碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）染色检测ALP相对面积，Western blot、RT-qPCR检测成骨、自噬相关蛋白及mRNA表达情况，活性氧（reactive oxygen species，ROS）染色检测ROS水平，细胞凋亡线粒体膜电位实验检测细胞凋亡情况。结果显示，ICA可上调AL干预后下调的ALP相对面积；AL下调成骨相关蛋白Wnt家族成员1（Wnt family member 1 gene，Wnt1）及成骨相关基因Wnt1、β-连环蛋白（β-catenin）、核心结合因子2（Runt related transcriptionfactor 2，Runx2）、骨保护素（osteoprotegerin，OPG）、ALP的表达水平，抑制细胞成骨分化，ICA可上调AL抑制的成骨相关蛋白及mRNA的表达水平，促进细胞成骨分化；AL抑制典型自噬，ICA调控Rubicon抑制LC3相关吞噬作用（LC3-associated phagocytosis，LAP）促进典型自噬；ICA下调AL诱导后上升的ROS水平；ICA下调AL干预后导致的成骨细胞凋亡。综上，ICA可调控Rubicon抑制LAP促进典型自噬，清除ROS减少细胞凋亡，最终通过调控Wnt/β-catenin信号通道促进AL干预病理状态下MC3T3-E1细胞的成骨分化。

关键词：淫羊藿苷酒精成骨细胞 MC3T3-E1细胞 Wnt1/β-catenin通路成骨分化骨代谢失衡自噬 LAP

大补阴丸加减方治疗肾阴虚型早发性卵巢功能不全的临床观察

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世界中医药 2024年

作者：刘晓薛凯阳周意园赵轩胤王文洲高强李燕杨惠李燕周中月贵州中医药大学贵州中医药大学第一附属医院优生研究中心贵州中医药大学第一附属医院妇科

目的:探讨大补阴丸加减方对肾阴虚型早发性卵巢功能不全（POI）的治疗效果。方法:选取2021年10月至2022年6月在贵州中医药大学第一附属医院妇科就诊的60例肾阴虚型POI患者并按照随机数字表法分为观察组、对照组,每组30例,对照组采用激... 详细信息

目的:探讨大补阴丸加减方对肾阴虚型早发性卵巢功能不全（POI）的治疗效果。方法:选取2021年10月至2022年6月在贵州中医药大学第一附属医院妇科就诊的60例肾阴虚型POI患者并按照随机数字表法分为观察组、对照组,每组30例,对照组采用激素人工周期治疗,观察组在对照组基础上采用大补阴丸加减方治疗,分别干预3个月经周期,观察2组治疗前后卵巢功能变化及中医证候积分改善情况。结果:2组治疗前在雌二醇（E2）、卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）、抗米勒管激素（AMH）、窦卵泡计数（AFC）、卵巢收缩期峰值血流速度（PSV）、阻力指数（RI）、搏动指数（PI）水平及中医证候积分方面,差异无统计学意义（P>0.05）;与治疗前比较,治疗后2组在FSH、LH、RI、PI水平、中医证候方面明显减少,差异有统计学意义（P中医证候,疗效确切。

关键词：大补阴丸肾阴虚早发性卵巢功能不全克龄蒙 @刘尚义滋阴补肾中医证候临床研究

基于中医阴阳理论探讨肠道微生态对糖尿病肾脏病的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年第3期30卷 178-186页

作者：莫超黄国东史伟赵洁广西中医药大学研究生院南宁530200 广西中医药大学第一附属医院南宁530000 广西中医药大学附属国际壮医医院南宁530219 湖南中医药大学研究生院长沙410208

糖尿病肾脏病是导致终末期肾脏病的主要原因,具有患病率高、死亡率高、医疗费用高等特点,给社会、家庭带来沉重的经济负担,已成为全球当前严重的公共卫生问题之一。肠道微生态是人体最主要的、最复杂的微生态系统,参与人体物质能量代谢... 详细信息

糖尿病肾脏病是导致终末期肾脏病的主要原因,具有患病率高、死亡率高、医疗费用高等特点,给社会、家庭带来沉重的经济负担,已成为全球当前严重的公共卫生问题之一。肠道微生态是人体最主要的、最复杂的微生态系统,参与人体物质能量代谢、免疫系统调节、信号传导等重要生命活动,进而维持人体内环境动态平衡。肠道微生态之间及其与机体之间的动态平衡本质上是阴阳平衡。一旦阴阳平衡关系被打破,则出现肠道菌群失调、肠道黏膜屏障受损、免疫功能异常、代谢物短链脂肪酸减少等,他们在糖尿病肾脏病的发生进展中扮演着重要角色。在中医阴阳理论视域下,糖尿病肾脏病的肠道微生态失衡犹如中医阴阳制约太过,或制约不及,或阴损及阳,或阳损及阴,或阴消,或阳消。针对不同的病机变化,采取“阴病治阳”或“阳中求阴”或“阴中求阳”等方法,通过中医药调节肠道菌群、抑制免疫炎症反应、保护肠道黏膜屏障、提高短链脂肪酸含量,以调整阴阳,达到“阴平阳秘”状态。该文拟基于中医阴阳理论,以肠道微生态为靶标,以中医药调控肠道微生态干预糖尿病肾脏病为切入点,阐释中医药干预糖尿病肾脏病的科学内涵,以期为揭示糖尿病肾脏病的发生发展规律和中医药的效应机制提供了全新的视角。

关键词：糖尿病肾脏病肠道微生态阴阳理论中医药

石斛碱通过作用于SRC调控氧化应激干预糖尿病肾病的机制研究

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海南医学院学报 2024年

作者：李军薛铃芝马群张楠楠贵州中医药大学基础医学院

目的：探讨石斛碱通过调控氧化应激干预糖尿病肾病（DKD）的作用机制。方法：利用OMIM等数据库检索DKD靶点，使用PharmMapper、SuperPred、ChemMapper和ChEMBL数据库获得石斛碱靶点，通过GeneCards、OMIM数据库检筛选氧化应激相关靶点... 详细信息

目的：探讨石斛碱通过调控氧化应激干预糖尿病肾病（DKD）的作用机制。方法：利用OMIM等数据库检索DKD靶点，使用PharmMapper、SuperPred、ChemMapper和ChEMBL数据库获得石斛碱靶点，通过GeneCards、OMIM数据库检筛选氧化应激相关靶点，并取交集靶点。交集靶点导入STRING数据库获取靶标相互联系以构建PPI，利用MCC拓扑算法分析获取关键靶点。关键作用靶点通过DAVID平台进行基因本体论（GO）分析、京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析。通过SangerBox平台进行糖尿病肾病临床相关性分析、基因差异表达分析以及ROC分析。将筛选得到的关键靶点通过分子对接和分子动力学模拟进行验证。采用Western Blot实验进行实验验证。结果：获得DKD-石斛碱-氧化应激交集靶点102个，并筛选出15个关键基因；通过临床相关性分析筛选出11个有临床意义的关键基因；通过差异表达和ROC分析发现CASP3、CXCR4、ESR1、KDR、SRC差异表达明显，且SRC最具有诊断价值（AUC=0.86，P<0.05）；分子对接及分子动力学模拟分析结果发现SRC与石斛碱结合能力最强，且配合物较稳定。Western Blot实验结果表明，与对照组相比SRC和P-SRC在DKD中表达上调（P<0.05），石斛碱可降低其的表达。结论：石斛碱可以通过作用于SRC调控氧化应激干预糖尿病肾病。

关键词：糖尿病肾病石斛碱氧化应激网络药理学分子对接

基于PINK1/Parkin途径探究绿原酸对泡沫细胞线粒体自噬-炎症反应的作用机制

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中国药理学通报 2024年第5期40卷 914-920页

作者：于红红杨韵琪罗培俞琦马玉玲田维毅贵州中医药大学贵州贵阳550025 牛津大学中医药研究中心英国牛津OX12JD 澳门科技大学中国澳门999078

目的探讨绿原酸(chlorogenic acid,CGA)通过同源性磷酸酶张力蛋白诱导激酶1(PINK1)/帕金森蛋白(Parkin)信号通路对ox-LDL诱导的泡沫细胞线粒体自噬及炎症反应的调控作用。方法将RAW264.7巨噬细胞分为正常(Control)组、模型(Model)组、CG... 详细信息

目的探讨绿原酸(chlorogenic acid,CGA)通过同源性磷酸酶张力蛋白诱导激酶1(PINK1)/帕金森蛋白(Parkin)信号通路对ox-LDL诱导的泡沫细胞线粒体自噬及炎症反应的调控作用。方法将RAW264.7巨噬细胞分为正常(Control)组、模型(Model)组、CGA低剂量(CGA-L)组、中剂量(CGA-M)组、高剂量(CGA-H)组、CGA-H+Mdivi-1(CGA-H+Mdi)组。油红O法鉴定细胞泡沫化;CCK-8法确定CGA干预浓度;透射电镜观察细胞线粒体结构改变;ELISA检测IL-1β、IL-18、IFN-γ表达;qRT-PCR及免疫荧光标记法检测PINK1/Parkin线粒体自噬通路相关基因及蛋白表达。结果油红O染色显示泡沫细胞模型制备成功。与Model组相比,不同浓度CGA干预后细胞线粒体损伤明显减轻,诱导了PINK1、Parkin、p-Parkin、PHB2、LC3Ⅱ表达,抑制了TOMM20表达,以及降低了IL-1β、IL-18、IFN-γ的表达(P<0.05或P<0.01);与CGA-H组相比,CGA-H+Mdi组细胞线粒体损伤明显加重,抑制了PINK1、Parkin、p-Parkin、PHB2、LC3Ⅱ表达,诱导了TOMM20表达,以及增强了IL-1β、IL-18、IFN-γ表达(P<0.01)。结论CGA可通过调控PINK1/Parkin通路诱导泡沫细胞线粒体自噬以及抑制了促炎因子IL-1β、IL-18、IFN-γ过表达,这可能是CGA抗动脉粥样硬化机制之一。

关键词：绿原酸泡沫细胞 PINK1/Parkin 线粒体自噬炎症反应动脉粥样硬化

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基于B7-1/2/CD28/CTLA-4通路探讨扶正祛毒汤干预急性髓系白血病完全缓解患者CD34~+细胞诱导成树突细胞激发T细胞的影响

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时珍国医国药 2024年第3期35卷 669-673页

作者：彭名行黄礼明朱国庆张常芬尹尚瑾左乐陈孟豪贵州中医药大学贵州贵阳550025 贵州中医药大学第二附属医院贵州贵阳550003

目的探讨扶正祛毒汤治疗急性髓系白血病完全缓解的可能作用机制。方法12只新西兰大白兔随机分为正常组以及扶正祛毒汤低、中、高剂量组,每组3只。扶正祛毒汤低、中、高剂量组兔分别给予扶正祛毒汤浓缩煎剂5、10、20g/(kg·d)灌胃3d,正... 详细信息

目的探讨扶正祛毒汤治疗急性髓系白血病完全缓解的可能作用机制。方法12只新西兰大白兔随机分为正常组以及扶正祛毒汤低、中、高剂量组,每组3只。扶正祛毒汤低、中、高剂量组兔分别给予扶正祛毒汤浓缩煎剂5、10、20g/(kg·d)灌胃3d,正常组兔给予等体积蒸馏水灌胃,末次灌胃后心脏取血获得正常血清和扶正祛毒汤低、中、高剂量血清。将急性髓系白血病完全缓解患者骨髓稀释后分离提纯CD34~+细胞,将扩增后的CD34^(+)细胞分为空白组、细胞因子组、正常血清组和扶正祛毒汤低、中、高剂量血清组。除空白组外,其余各组均添加细胞因子诱导9d成为树突细胞。流式细胞术(FCM)检测各组树突细胞表面抗原分子CD83、CD1a、HLA-DR的表达,以及共刺激分子B7-1、B7-2的表达。诱导成熟后的树突细胞分别激发自体和异体T细胞,免疫印迹试验(WB)和RT-qPCR法检测T细胞中特异性表面糖蛋白CD28(CD28)和细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(CTLA-4)蛋白和mRNA的表达。MTT比色法检测激发后的T细胞在不同效靶比时对人髓系白血病细胞株K562的杀伤作用。结果与空白组相比较,细胞因子组、正常血清组和扶正祛毒汤低、中、高剂量血清组树突细胞表面抗原分子CD83、CD1a、HLA-DR的表达明显升高(P0.05)。结论扶正祛毒汤治疗急性髓系白血病完全缓解的机制可能与该方能够有效促进急性髓系白血病完全缓解患者骨髓CD34^(+)细胞源树突细胞的成熟,从而抑制共刺激分子B7-1、B7-2与CTLA-4结合,且促进B7-1、B7-2与CD28结合,调控B7-1/2/CD28/CTLA-4信号通路有关。

关键词：急性髓系白血病完全缓解扶正祛毒汤 B7-1/2/CD28/CTLA-4信号通路树突细胞 T细胞 K562细胞

精索静脉曲张合并勃起功能障碍动物模型的构建和评价

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中国比较医学杂志 2024年第3期34卷 18-26页

作者：陆杰李群生周磊李东润申振南李凝华陈冬唐文平朱璠宇杨文涛广西中医药大学附属瑞康医院南宁530011 广西中医药大学南宁530200 广西壮族自治区南溪山医院广西桂林541000

目的通过手术诱导SD大鼠精索静脉曲张(VC),阿扑吗啡试验(APO试验)筛选VC后勃起功能障碍(ED)的大鼠,探讨建立VC合并ED模型的方法。方法将60只大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组,每组20只;参照Turner法,部分结扎左侧肾静脉,诱导左侧VC... 详细信息

目的通过手术诱导SD大鼠精索静脉曲张(VC),阿扑吗啡试验(APO试验)筛选VC后勃起功能障碍(ED)的大鼠,探讨建立VC合并ED模型的方法。方法将60只大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组,每组20只;参照Turner法,部分结扎左侧肾静脉,诱导左侧VC;并进行3次APO试验,筛选诱导VC后出现ED的大鼠,观察并记录勃起次数、生殖器梳理次数、打哈欠次数;测量双侧精索静脉直径;对双侧睾丸和肾称重;HE染色观察阴茎和左睾的病理改变;统计模型组大鼠的成模率。结果模型组20只大鼠中有15只成功进行VC合并ED造模,成模率75%;造模后,模型组左侧精索静脉直径显著增加(P生殖器梳理次数显著减少(P<0.01),且随造模时间递减;模型组左侧睾丸和阴茎病理改变显著。结论Turner法可以诱导大鼠精索静脉直径增加,引起睾丸损伤和重量下降,APO试验可以筛选诱导VC后出现ED的大鼠,二者相结合适用于构建与人类VC合并ED状态较相似的动物模型。

关键词：精索静脉曲张勃起功能障碍造模阿扑吗啡试验

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感音神经性耳聋从肝脾肾瘀论治辨析

中华中医药杂志 2024年第3期39卷 1333-1336页

作者：潘旭宣伟军唐俊波广西中医药大学南宁530200 广西中医药大学第一临床医学院耳鼻咽喉头颈外科南宁530022

感音神经性耳聋(SNHL)为临床常见慢性病,以听力减退为主要症状,属于中医“耳聋”范畴。宣伟军教授认为本病病机为本虚标实,虚实夹杂,肝失疏泄是发病的始动因素,脾失健运是发病的重要原因,肾精亏虚是发病的根本所在,瘀血滞留是贯穿疾病... 详细信息

感音神经性耳聋(SNHL)为临床常见慢性病,以听力减退为主要症状,属于中医“耳聋”范畴。宣伟军教授认为本病病机为本虚标实,虚实夹杂,肝失疏泄是发病的始动因素,脾失健运是发病的重要原因,肾精亏虚是发病的根本所在,瘀血滞留是贯穿疾病发展的重要病理过程。突发性SNHL治疗以疏肝理气、活血通窍为主,健脾补肾为佐。远期SNHL治疗以健脾补肾、活血通窍为主,疏肝理气为佐。立足于肝脾肾瘀,标本兼施,疗效显著。

关键词：感音神经性耳聋肝脾肾瘀辨证论治理论探讨现代医学