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基于T7 RNA聚合酶的犬瘟热病毒微型基因组构建与拯救

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中国动物传染病学报 2024年

作者：王慧孙艺洋王哲赵建军黑龙江八一农垦大学动物科技学院

为建立基于T7 RNA聚合酶的CDV反向遗传操作平台，以犬瘟热活疫苗CDV3弱毒株基因组序列为基础，人工合成CDV3株基因组3’-leader、5’-tailer序列和增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因序列，反向克隆入T7启动子调控的表达质粒pCRscript，同... 详细信息

为建立基于T7 RNA聚合酶的CDV反向遗传操作平台，以犬瘟热活疫苗CDV3弱毒株基因组序列为基础，人工合成CDV3株基因组3’-leader、5’-tailer序列和增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因序列，反向克隆入T7启动子调控的表达质粒pCRscript，同时在微型基因组5’端和3’末端分别引入锤状核酶和丁肝核酶序列，构建犬瘟热病毒CDV3株微型基因组质粒pCR-mCDV3-EGFP。将pCR-mCDV3-EGFP质粒和表达麻疹病毒（MeV）N、P和L蛋白的3个辅助质粒共转染表达T7 RNA聚合酶BSR细胞后，通过荧光显微镜观察EGFP荧光。质粒共转染BSR细胞48 h后，在BSR细胞内可观察到特异绿色荧光成功拯救CDV微型基因组。本研究成功建立了基于CDV微型基因组的反向遗传操作平台，有望后期进行CDV的病毒拯救，为CDV新型疫苗研制和致病机理研究奠定基础。

关键词：犬瘟热病毒微型基因组病毒反向遗传技术

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南方医科大学学报 2024年第10期44卷 1839-1849页

作者：赵文阮何静汪思远程羽哲雷淼赵久法刘传苗蚌埠医科大学第一附属医院传染性疾病科安徽蚌埠233000

目的探索Yes相关蛋白(YAP)可否通过调控上皮间质转化影响肝纤维化的发生发展。方法将8周龄C57BL/6小鼠18只随机分为对照组、肝纤维化模型组和YAP抑制剂维替泊芬干预组,6只/组。肝纤维化模型采用四氯化碳(CCl_(4))溶液腹腔注射8周造模;... 详细信息

目的探索Yes相关蛋白(YAP)可否通过调控上皮间质转化影响肝纤维化的发生发展。方法将8周龄C57BL/6小鼠18只随机分为对照组、肝纤维化模型组和YAP抑制剂维替泊芬干预组,6只/组。肝纤维化模型采用四氯化碳(CCl_(4))溶液腹腔注射8周造模;维替泊芬干预组在CCl_(4)基础上第7~9周采用维替泊芬腹腔注射干预。HE染色、Masson染色、肝脏生化学检测观察小鼠肝脏纤维化程度;转录组、蛋白组学测序及联合生信分析探明肝纤维化过程中上皮间质转化通路是否受YAP调控;免疫组化染色和Western blotting检测YAP及上皮间质转化关键基因E-cadherin、N-cadherin、Twist等表达变化。采集健康体检、慢性乙型肝炎、乙肝肝硬化患者血清各60例,酶联免疫吸附法检测其中YAP、N-cadherin、Vimentin、Twist血清表达水平。C57BL/6小鼠24只随机分为对照组、肝纤维化模型组、Twist抑制剂干预组和Twist抑制剂与YAP激动剂共同干预组,6只/组。HE染色、Masson染色、网状纤维染色观察小鼠肝脏纤维化程度,Western blotting检测各组α-SMA、YAP和Twist表达变化。结果小鼠肝组织病理学结果提示肝纤维化小鼠与对照组相比肝小叶结构破坏、假小叶形成,维替泊芬干预组纤维间隔变性,部分小叶结构恢复。随肝纤维化发生,血浆ALT、AST水平显著升高(P0.5或FIB-4>1.45患者中显著升高(P<0.01)。血清YAP在健康对照、肝炎、肝硬化患者中平均水平分别为4.09、5.69和5.36 ng/mL(P<0.01),其与N-cadherin、Vimentin、Twist水平均呈显著正相关,相关系数分别为0.626、0.435、0.526。采用Harmine抑制小鼠肝组织Twist表达,并在Harmine基础上予以YAP激动剂XMU-MP-1干预,肝组织病理学结果提示抑制Twist使肝纤维化小鼠肝组织炎症及纤维化程度减轻,同时激活YAP表达可再次加重胶原纤维沉积。Western blotting检测结果提示Harmine下调肝纤维化小鼠肝组织中α-SMA、YAP及Twist蛋白表达,同时激活YAP使肝组织α-SMA和YAP表达升高(P=0.079,P<0.05)。结论上皮间质转化是肝纤维化发生的重要机制之一,抑制YAP可通过减少上皮间质转化发生减轻肝纤维化。

关键词：肝纤维化 Yes相关蛋白上皮间质转化血清标志物

MDMB-4en-PINACA及其代谢标记物在大鼠体内降解规律及动态分布研究

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刑事技术 2024年第1期49卷 43-51页

作者：蔡玉刚吴永富杨剑峰马琦鸿代勇周晓英王燕军泸州市公安局刑事科学技术研究所四川泸州646000 宜宾市公安局刑事科学技术研究所四川宜宾644000 四川警察学院四川泸州646000 四川省公安厅刑侦局成都610015

本文旨在建立生物样品中MDMB-4en-PINACA及其代谢标记物的高效液相色谱–三重四极杆串联质谱(HPLC-MS/MS)检测方法,探索MDMB-4en-PINACA及其水解代谢物(M1)和脱烷基代谢物(M2)在大鼠体内降解规律及动态分布规律。将5只SD大鼠分为5组,一... 详细信息

本文旨在建立生物样品中MDMB-4en-PINACA及其代谢标记物的高效液相色谱–三重四极杆串联质谱(HPLC-MS/MS)检测方法,探索MDMB-4en-PINACA及其水解代谢物(M1)和脱烷基代谢物(M2)在大鼠体内降解规律及动态分布规律。将5只SD大鼠分为5组,一组为空白对照组,另外四组灌胃给药MDMB-4en-PINACA后分别置于干净代谢笼中,分别收集1~15 d的尿液;将60只SD大鼠随机分为15组,一组作为空白对照组,其余14组通过灌胃给药MDMB-4en-PINACA,分别在不同时间点(15min、30min、45min、1h、1.5h、2h、3h、4h、5h、6h、7h、8h、10h、12h)处死,立即取血、尿及组织(心、肝、脾、肺、肾、脑、肌肉)。用HPLC-MS/MS检测血液、尿液、各组织中MDMB-4en-PINACA及代谢标记物M1和M2的质量浓度。MDMB-4en-PINACA进入大鼠体内后,迅速分布代谢,各组织和血液中均在15 min内达最高浓度,MDMB-4en-PINACA在体内的分布特点为:脑>脾>血>肺>心脏>肝>肾>肌肉>尿;M1的分布特点为:血>脾>肺>脑>肝>肾>心脏>肌肉>尿;M2的分布特点为:血>肝>心脏>肺>脑>脾>肾>肌肉>尿。在0~12 h内MDMB-4en-PINACA及代谢标记物在各组织中呈不同规律的降解。在对1~15 d尿液的监控中,MDMB-4en-PINACA及其代谢标记物仅在少量样本中检出。本文建立的方法操作简单、检出限低、回收率高、重现性好,适用于生物样品中MDMB-4en-PINACA及代谢标记物的检验。经灌胃MDMB-4en-PINACA进入大鼠体内后,监测MDMB-4en-PINACA及代谢标记物在大鼠体内的动态分布及降解规律为体内MDMB-4en-PINACA检验提供科学依据。

关键词：法医毒理学 MDMB-4en-PINACA 高效液相色谱–三重四极杆串联质谱降解规律动态分布

基于创新训练项目的大学生科研团队建设研究——以杭州电子科技大学为例

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湖北函授大学学报 2016年第18期29卷 3-4页

作者：严莹杭州电子科技大学浙江杭州310018

在创新训练项目中组建大学生科研团队,是鼓励大学生参与科研、培养创新精神和实践能力的重要途径。结合高校实施创新训练项目的具体情况,发现大学生科研团队建设中,因为学生科研管理理念滞后、人才培养体制制约、团队评估有偏颇等原因,... 详细信息

在创新训练项目中组建大学生科研团队,是鼓励大学生参与科研、培养创新精神和实践能力的重要途径。结合高校实施创新训练项目的具体情况,发现大学生科研团队建设中,因为学生科研管理理念滞后、人才培养体制制约、团队评估有偏颇等原因,存在内部管理活力不足、学术产出数量不多、质量不高等现象。从规范大学生科研团队管理理念、改革人才培养体制、完善团队考核评估等方面提出对策,将有助于促进大学生科研团队的建设,提高创新人才培养水平。

关键词：创新训练项目大学生科研团队建设

20MnCrS5真空低压渗碳气淬多场耦合模拟分析

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表面技术 2024年第15期53卷 194-205页

作者：张泽宇邓小虎凡园园王会珍周乐育徐跃明巨东英天津职业技术师范大学机械工程学院天津300222 宁波天安(集团)股份有限公司浙江宁波315700 北京机电研究所有限公司北京100083 埼玉工业大学日本深谷3690293

目的采用试验研究、模拟计算和理论分析相结合的手段,对20MnCrS5齿轮钢真空低压渗碳过程的组织性能演变机理进行研究。方法引入符合真空渗碳强渗、扩散交替进行的扩散边界条件,并修正硬度计算方程,开发真空低压渗碳高压气淬过程仿真模... 详细信息

目的采用试验研究、模拟计算和理论分析相结合的手段,对20MnCrS5齿轮钢真空低压渗碳过程的组织性能演变机理进行研究。方法引入符合真空渗碳强渗、扩散交替进行的扩散边界条件,并修正硬度计算方程,开发真空低压渗碳高压气淬过程仿真模型。分别建立ϕ15mm×100mm圆棒试样二维轴对称和三维实体有限元模型,对20MnCrS5圆棒试样不同工艺参数下真空渗碳过程进行模拟仿真,开展真空渗碳试验与仿真分析化研究。结果二维轴对称模型和三维实体模型计算精度接近,可以代替三维模型,提高计算效率。不同工艺参数真空渗碳过程得到的模拟和试验结果吻合较好,验证了改进模型和方程的可用性,并对不同工艺条件下碳浓度、组织和性能演变规律进行了研究。而后将模型应用到德国FZG(Forschungsstelle für Zahnräder und Getriebebau)标准齿轮样件,对其真空渗碳过程进行了模拟,结果可较好地反映齿轮不同位置碳浓度分布的特点,进一步验证了模型的准确性。结论通过本研究,揭示了20MnCrS5齿轮钢真空低压渗碳过程的组织性能演变机理,并为复杂零部件真空渗碳过程工艺开发提供了新的思路。

关键词：真空渗碳数值仿真 COSMAP 碳含量硬度 20MnCrS5齿轮钢

绿豆蛋白对魔芋葡甘聚糖基山茶油乳液膜结构和性能的影响

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食品科学技术学报 2024年

作者：江军刘思佳李志雄朴建航王月荷许文琳陈凯湖北工业大学生命科学与健康工程学院

为改善魔芋葡甘聚糖（konjac glucomannan，KGM）基山茶油乳液膜的结构和性能，添加绿豆蛋白（mung bean protein，MBP）构建KGM/可得然胶（curdlan，Cur）/MBP-山茶油（camellia oil，CO）乳液体系（KCM-CO）。KCM-CO乳液的粒径分布结... 详细信息

为改善魔芋葡甘聚糖（konjac glucomannan，KGM）基山茶油乳液膜的结构和性能，添加绿豆蛋白（mung bean protein，MBP）构建KGM/可得然胶（curdlan，Cur）/MBP-山茶油（camellia oil，CO）乳液体系（KCM-CO）。KCM-CO乳液的粒径分布结果表明，MBP与KC-CO体系相容性良好，乳化液滴平均粒径下降约35.1%，K54C40M6-CO的平均粒径最小，达32.73 μm，分布均匀；扫描电镜和红外光谱分析表明，KCM-CO乳液膜的微观结构连续且致密，MBP乳化液滴均匀分布于KGM/Cur （KC）多糖网络中，以氢键相结合；MBP的添加导致乳液膜的断裂伸长率提升了27%，但拉伸强度显著下降；乳液膜表面疏水性液滴的分散性以及粗糙度的增大，导致水接触角的显著提高，最高为101.4°，表现为强疏水性。随着MBP的添加，KCM-CO乳液膜的水蒸气和氧气阻隔性能显著提升，水蒸气透过系数（water vapor permeability，WVP）和过氧化值分别下降43%和52.9%，这有利于抑制果蔬贮运期间的呼吸代谢。KCM-CO乳液膜的透光率下降，有利于提升食品包装的阻光性能。KCM-CO乳液膜在食品保鲜领域有一定的应用潜力。

关键词：魔芋葡甘聚糖可得然胶绿豆蛋白山茶油乳液膜阻隔性能保鲜

基于网络药理学、分子对接和实验验证探讨苹果对溶血致高胆红素血症的影响

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食品科学 2024年第9期45卷 144-152页

作者：安琼魏媛李倩王江文岳国仁王贞香河西学院医学院甘肃省河西走廊特色资源利用重点实验室甘肃张掖734000

采用网络药理学方法,预测苹果治疗溶血所致高胆红素血症的可能活性成分、潜在靶点及其富集的通路和作用过程,构建苹果的“疾病-通路-活性成分-靶标”;采用Autodock软件对关键活性成分和潜在靶标进行分子对接,验证网络分析结果的可靠性;... 详细信息

采用网络药理学方法,预测苹果治疗溶血所致高胆红素血症的可能活性成分、潜在靶点及其富集的通路和作用过程,构建苹果的“疾病-通路-活性成分-靶标”;采用Autodock软件对关键活性成分和潜在靶标进行分子对接,验证网络分析结果的可靠性;并构建溶血所致高胆红素血症大鼠实验模型,探讨苹果对溶血性所致高胆红素血症的作用。结果表明,搜集整理符合胃肠吸收度高、类药性优的苹果活性成分有17个,其中槲皮素、2α-羟基熊果酸、β-谷甾醇、根皮素、表儿茶素对治疗溶血所致高胆红素血症有重要的贡献。网络中度值排名前5的靶标丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1、血管内皮生长因子A、表皮生长因子受体、酪氨酸激酶、信号传导及转录激活因子3通过胆汁分泌、缺氧诱导因子信号通路、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)信号通路、核因子-κB信号通路等发挥治疗作用;对网络筛选的主要活性成分和核心靶标进行分子对接,结果显示苹果筛选的活性成分和获得的治疗溶血所致高胆红素血症潜在靶标有较强的亲和能力,网络分析结果可靠;动物实验结果显示,与空白组比较,模型组血液中血红蛋白(hemoglobin,HB)的水平明显降低,总胆红素(total bilirubin,TB)、间接胆红素(indirect bilirubin,IB)、谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST)、TNF-α、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)水平明显升高(P<0.01);与模型组相比,苹果醇提物干预组、阳性对照组的HB水平升高,TB、IB、ALT、AST、TNF-α、IL-6水平明显下降(P<0.05或P<0.01)。综上,苹果可以减轻溶血所致高胆红素血症,本研究可为新生儿黄疸无损伤疗法的研究奠定基础。

关键词：苹果溶血致高胆红素血症网络药理学机制

大兴安岭北部主要乔木树种叶片-土壤碳氮磷生态化学计量特征

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森林工程 2024年第3期40卷 1-10页

作者：景继鑫陈灿阳满秀玲韩昭郅东北林业大学林学院哈尔滨150040

以大兴安岭北部多年冻土区典型森林群落主要乔木为研究对象,分析叶片和土壤碳(C)、氮(N)、磷(P)含量及生态化学计量特征,探讨叶片和土壤C、N、P生态化学计量之间的关系,为该地区森林生态系统养分循环研究提供理论依据。结果表明,4种乔... 详细信息

以大兴安岭北部多年冻土区典型森林群落主要乔木为研究对象,分析叶片和土壤碳(C)、氮(N)、磷(P)含量及生态化学计量特征,探讨叶片和土壤C、N、P生态化学计量之间的关系,为该地区森林生态系统养分循环研究提供理论依据。结果表明,4种乔木叶片C∶N范围为25.66~47.92,C∶P范围为323.83~603.86,N∶P为10.21~20.59,兴安落叶松叶片C∶P和N∶P均最低,樟子松叶片C∶N和C∶P均最高,白桦C∶N最低,山杨N∶P最高;4种乔木叶片C∶N和C∶P都高于全球植物平均水平,表明这些乔木叶片具有较高的N、P利用效率,同时山杨叶片N∶P>20,其生长主要受P素限制;不同的群落土壤C∶N为13.89~18.46,C∶P为35.43~77.19,N∶P为1.96~5.26,山杨林C∶P和N∶P均为最高,而C∶N最低。白桦林C∶N最高,N∶P最低。樟子松林C∶P最低。冗余分析结果显示,4种乔木叶片C、N、P生态化学计量与土壤之间存在显著相关关系,土壤C、N、P含量及化学计量对乔木固碳及氮磷吸收具有显著影响。由此可见,我国寒温带4种乔木具有较高的N、P利用效率,但山杨生长受到P的限制,叶片C、N、P生态化学计量与土壤生态化学计量显著相关。

关键词：大兴安岭北部地区兴安落叶松樟子松生态化学计量土壤叶片

Fe_(3)O_(4)-BiOBr/Graphene磁性气凝胶的构筑与Cr(VI)污水净化

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复合材料学报 2024年第4期41卷 1987-1996页

作者：铁伟伟邱帅彪王红霞袁双义董旭何伟伟许昌学院化工与材料学院(表面微纳米材料研究所) 河南省微纳米能量储存与转换材料实验室许昌461000

为改善单一半导体粉体材料的光生电子-空穴分离和回收能力,基于功能协同效应,采用共沉淀法,将Fe^(3+)/Fe^(2+)盐在一定浓度的氨水作用下制备出纳米Fe_(3)O_(4),并分散于含有溴化十六烷基三甲铵(CTAB)的正辛烷中,提供Br-的同时,在室温下... 详细信息

为改善单一半导体粉体材料的光生电子-空穴分离和回收能力,基于功能协同效应,采用共沉淀法,将Fe^(3+)/Fe^(2+)盐在一定浓度的氨水作用下制备出纳米Fe_(3)O_(4),并分散于含有溴化十六烷基三甲铵(CTAB)的正辛烷中,提供Br-的同时,在室温下与水溶液中的硝酸铋和柠檬酸相互作用,利用非互溶体系,制备出Fe_(3)O_(4)-BiOBr;最后,将Fe_(3)O_(4)-BiOBr分散于含有赖氨酸的氧化石墨烯水溶液中,通过一步水热法合成Fe_(3)O_(4)-BiOBr协同修饰的磁性石墨烯气凝胶(Fe_(3)O_(4)-BiOBr/Graphene)。样品的晶体结构、形貌特征和催化活性通过XRD、Raman、XPS、SEM、TEM、UV-Vis光谱等综合测试技术进行了表征分析。Fe_(3)O_(4)-BiOBr/Graphene复合材料中的Fe_(3)O_(4)呈类球状,尺寸约10~25 nm,均匀镶嵌于BiOBr片层中间,并与石墨烯之间相互作用,整体呈现球-片-空洞构造。Fe_(3)O_(4)-BiOBr/Graphene复合材料显示出良好的可见光吸收性和Cr(VI)还原活性,30 min内可去除Cr(VI)至100%,高于单一组分的磁性Fe_(3)O_(4),这可能与Fe_(3)O_(4)-BiOBr异质结构、石墨烯导电材料的引入及Fe_(3)O_(4)-BiOBr/Graphene三者之间良好的界面相互作用,有效地促进了光生电子与空穴的分离效率有关。

关键词：溴氧化铋四氧化三铁石墨烯气凝胶六价铬磁性回收光催化还原