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柴胡三参胶囊对阿霉素心血管毒性小鼠PI3K-Akt通路表达及相关凋亡蛋白的影响

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中国老年学杂志 2024年第10期44卷 2471-2477页

作者：谭彩刘建和袁恒佑刘芳湖南中医药大学第一附属医院

目的探讨柴胡三参胶囊治疗阿霉素心血管毒性的可能作用机制。方法用阿霉素诱导生成新生大鼠心肌细胞(NRVM)损伤模型和小鼠急性心力衰竭模型，小鼠模型随机分为对照(NT)组、模型(Model)组、柴胡三参胶囊预处理(CHSSC)组。将细胞模型分... 详细信息

目的探讨柴胡三参胶囊治疗阿霉素心血管毒性的可能作用机制。方法用阿霉素诱导生成新生大鼠心肌细胞(NRVM)损伤模型和小鼠急性心力衰竭模型，小鼠模型随机分为对照(NT)组、模型(Model)组、柴胡三参胶囊预处理(CHSSC)组。将细胞模型分为对照组[磷酸盐缓冲液(PBS)无胎牛血清(FBS) DMEM]、阿霉素(1μmol/L)处理组和联合组(柴胡三参胶囊预处理+阿霉素处理)采用多普勒超声心动图测定小鼠心功能，采用CCK8法检测细胞活力，苏木素-伊红(HE)染色法观察小鼠心肌组织病理形态学变化，免疫荧光检测活性氧(ROS)水平，Western印迹检测NRVM及心肌组织中磷酸化(p)-磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、p-蛋白激酶B(Akt)、裂解的半胱氨酸天冬酶(c-Caspase)3、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达。结果与NT组比较，Model组ROS荧光强度明显增强，p-PI3K、c-Caspase3、Bax表达明显升高，p-Akt、Bcl-2明显下降(P<0.01);与Model组比较，CHSSC组中ROS荧光强度明显减弱(P<0.05),p-PI3K、c-Caspase3、Bax表达显著降低，Bcl-2、p-Akt明显升高(P<0.01),细胞实验与动物实验中数据趋势一致。结论柴胡三参胶囊可能通过影响阿霉素诱导的ROS生成，调控PI3K-Akt信号通路及相关凋亡蛋白表达，从而在体内和体外发挥保护心肌的作用。

关键词：柴胡三参胶囊阿霉素心力衰竭磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt) 细胞凋亡

盐酸青藤碱诱导黏连性膝关节强直家兔成纤维细胞凋亡的机制研究

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生物化学与生物物理进展 2024年第4期51卷 959-968页

作者：侯新聚雷洪峰陈勇黎芙希孙敬宁刘佳铭马红梅南昌市洪都中医院南昌330008 广州中医药大学第四临床医学院广州510006 广州中医药大学第二临床医学院广州510006

目的观察盐酸青藤碱对膝关节黏连强直的家兔成纤维细胞增殖和相关基因表达的影响,并进一步尝试探讨其对抗膝关节黏连强直的作用机制。方法以体外培养法培养成纤维细胞,并设对照组、盐酸青藤碱低中高浓度实验组。CCK-8法检测成纤维细胞... 详细信息

目的观察盐酸青藤碱对膝关节黏连强直的家兔成纤维细胞增殖和相关基因表达的影响,并进一步尝试探讨其对抗膝关节黏连强直的作用机制。方法以体外培养法培养成纤维细胞,并设对照组、盐酸青藤碱低中高浓度实验组。CCK-8法检测成纤维细胞增殖的情况;实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)法检测经过盐酸青藤碱处理后,成纤维细胞相关基因mRNA表达的改变,用ELISA法检测药物的作用对血清中炎症因子等水平的影响,蛋白质印迹法(Western blot)检测相关蛋白质的表达。结果盐酸青藤碱能降低成纤维细胞存活率,且随浓度升高存活率逐渐降低。盐酸青藤碱中各个组的效果均十分明显(P<0.05)。在相关基因的mRNA表达层面,与对照组比较,盐酸青藤碱各组炎症因子均显著下调(P<0.05),凋亡蛋白的表达量显著上升、Bcl-2的mRNA表达量下降(P<0.05),而PI3K/mTOR/AKT3信号通路分子的mRNA表达量均下降(P<0.05)。在蛋白质表达层面,与对照组相比较,中、高剂量盐酸青藤碱组血清中炎症因子IL-6、IL-8、IL-1β、TGF-β的水平均明显下调(P<0.05),凋亡蛋白cleaved-PARP、cleaved caspase-3/7及Bax的表达量均上调,并且与给药剂量成正相关,而抗凋亡蛋白Bcl-2、PI3K/AKT3/mTOR信号通路的表达量则与给药剂量成负相关。盐酸青藤碱对家兔膝关节成纤维细胞的存活表现为显著的抑制作用,作用机制或与下调炎症因子IL-6、IL-8、IL-1β的表达,并促进凋亡蛋白cleaved-PARP、cleaved caspase-3/7及Bax的表达,抑制Bcl-2的表达,抑制其下游PI3K/AKT3/mTOR信号通路的基因表达有关。结论盐酸青藤碱可抑制黏连性膝关节强直家兔膝关节成纤维细胞的炎症反应和加速成纤维细胞的凋亡,或可通过该机制为改善和治疗黏连性膝关节强直提供新的方法。

关键词：盐酸青藤碱黏连性膝关节强直家兔成纤维细胞

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加味香薷口服液抗流感的药效学及作用机制

中国现代应用药学 2024年第7期41卷 927-938页

作者：李薇杜青陈丹王小青李小兰李柯湖南中医药大学长沙410208 湖南省中医药研究院长沙410013 湖南省药物安全评价研究中心&新药药效与安全性评价湖南省重点实验室长沙410331

目的通过狗肾细胞(MDCK细胞)与小鼠观察加味香薷口服液的抗流感作用,并结合网络药理学预测其治疗流感的作用机制。方法观察不同浓度加味香薷口服液对甲型流感病毒3型致MDCK细胞病变的影响,以及对流感病毒感染小鼠的保护作用。通过中药... 详细信息

目的通过狗肾细胞(MDCK细胞)与小鼠观察加味香薷口服液的抗流感作用,并结合网络药理学预测其治疗流感的作用机制。方法观察不同浓度加味香薷口服液对甲型流感病毒3型致MDCK细胞病变的影响,以及对流感病毒感染小鼠的保护作用。通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)收集各味药的有效成分及作用靶点。采用GeneCards5.14数据库、OMMI等数据库收集流感疾病相关靶点,构建网络图。借助STRING数据库及Metascape数据库构建PPI网络图、GO富集和KEGG通路分析。利用AutoDockTools和PyMOL软件完成分子对接及三维可视化展示。结果体外实验表明加味香薷口服液对流感病毒引起的MDCK细胞病变及血凝现象有明显的抑制作用;体内实验表明其可延长甲型流感病毒感染小鼠存活时间,提高病毒感染小鼠的死亡保护率、降低小鼠肺指数及肺组织病毒滴度。筛选出82个活性成分和168个共有靶点,其中胡萝卜苷、叶酸、3`-甲氧基大豆黄素、柯伊利素、山柰酚为关键成分;TNF、AKT1、EGFR、STAT3、SRC、MMP9、PTGS2为核心靶点;KEGG通路富集分析显示其主要作用机制可能为通过TNF信号通路、趋化因子信号通路、PI3K/Akt信号通路、VEGF信号通路发挥抗流感病毒作用。结论药效学结果表明加味香薷口服液可有效治疗流感疾病,其机制可能与“多成分-多靶点-多通路”协同调节有关。

关键词：加味香薷口服液流感网络药理学药效学

基于网络药理学探讨沙棘治疗酒精性肝损伤的作用机制

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食品工业科技 2024年第14期45卷 25-33页

作者：邓斌陈洁李想娄可轩周立权周一苗肖作为湖南中医药大学药食同源创新实验室湖南长沙410208 湖南省健康产品与生命科技工程技术研究中心湖南长沙410208 湖南中医药大学湘杏学院湘阴校区湖南岳阳414615

目的:基于网络药理学预测沙棘治疗酒精性肝损伤(Alcohol Liver Injury)的作用机制,并通过建立斑马鱼酒精性肝损伤动物模型来验证沙棘治疗酒精性肝损伤的功效。方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台(Traditional Chinese Medicine Sy... 详细信息

目的:基于网络药理学预测沙棘治疗酒精性肝损伤(Alcohol Liver Injury)的作用机制,并通过建立斑马鱼酒精性肝损伤动物模型来验证沙棘治疗酒精性肝损伤的功效。方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology,TCMSP)、Uniprot数据库收集有效成分及其作用靶标,Venny2.1寻找交集靶点。通过GeneCards及OMIM数据库收集和筛选疾病靶点,STRING v12.0数据库进行PPI网络分析,PDB及PubChem进行蛋白质结构及小分子结构确认。通过Cytoscape(Version 3.9.1)软件网络图构建沙棘治疗酒精性肝损伤关联网络。利用Metascape数据库对共有靶点进行基因本体(Gene Ontology,GO)、京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Gene,KEGG)数据库通路富集分析。通过斑马鱼实验进行功能验证:选取受精后3 d(3 dpf)野生型AB品系斑马鱼,正常组喂养于正常饲养用水,其余各组饲养于2%的无水乙醇溶液中建立酒精性肝损伤模型。沙棘组给予不同浓度的沙棘溶液,28℃处理2 d后,确定沙棘对酒精性肝损伤模型斑马鱼的最大耐受浓度(MTC)剂量,并根据MTC结果进行下一步给药,测定样品肝保护功效评价表型实验结果。结果:筛选后得到沙棘活性成分33个,主要包括槲皮素、花葵素、儿茶酸等;治疗酒精性肝损伤的潜在靶点1434个,主要包括ADH1C、CTNNB1、TGFB1等。调控这些核心靶点的信号通路主要富集在Lipid and atherosclerosis、Fluid shear stress and atherosclerosis、PI3K-Akt signaling pathway等多条信号通路中。动物实验结果显示:与模型组相比,沙棘可显著降低酒精性肝损伤模型斑马鱼肝脏不透明值(P<0.01),改善肝脏和卵黄囊肿大(P<0.01),下调AST和ALT的活力值(P<0.001),改善肝细胞核肿大,减少肝组织脂肪空泡样变性的功效。结论:沙棘可改善酒精性肝损伤,其机制可能与改善脂肪酸氧化、细胞代谢和抑制细胞凋亡有关。

关键词：沙棘网络药理学酒精性肝损伤

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基于p53/SLC7A11/GPX4信号轴探讨七叶内酯诱导小鼠乳腺癌4T1细胞铁死亡的作用机制

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中国病理生理杂志 2024年第2期40卷 282-290页

作者：何丹李琳霈谭小宁郜文辉田雪飞曾普华湖南省中医药研究院湖南长沙410006 湖南省中医药研究院附属医院湖南长沙410006 湖南中医药大学湖南长沙410208 湖南中医药大学中西医结合学院湖南长沙410208

目的:探讨七叶内酯对小鼠乳腺癌4T1细胞铁死亡的影响及其作用机制。方法:对七叶内酯与p53、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)进行分子对接,并绘制Kaplan-Meier和time ROC曲线。将4T1细胞分为对照组、1/2 IC_(50... 详细信息

目的:探讨七叶内酯对小鼠乳腺癌4T1细胞铁死亡的影响及其作用机制。方法:对七叶内酯与p53、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)进行分子对接,并绘制Kaplan-Meier和time ROC曲线。将4T1细胞分为对照组、1/2 IC_(50)组、IC_(50)组、2 IC_(50)组、erastin组和卡培他滨组。采用CCK-8法观察4T1细胞活力情况,筛选药物干预浓度;电镜观察4T1细胞线粒体形态,评估线粒体损伤情况;试剂盒检测4T1细胞活性氧(ROS)、Fe2+、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和GPX4的水平;采用划痕和Transwell小室实验检测4T1细胞侵袭和迁移能力;Western blot检测p53、SLC7A11、GPX4和酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)的表达水平。结果:与对照组相比,七叶内酯1/2 IC_(50)、IC_(50)和2 IC_(50)组细胞活力,GSH和GPX4表达水平,侵袭和迁移能力,以及SLC7A11和GPX4蛋白表达水平均降低,细胞线粒体变小,膜密度增高,嵴减少(P<0.05),Fe2+、ROS和MDA水平及p53和ACSL4蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论:七叶内酯可促进4T1细胞铁死亡,其作用机制可能与p53/SLC7A11/GPX4信号通路相关。

关键词：乳腺癌七叶内酯铁死亡 p53/SLC7A11/GPX4信号通路

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指纹图谱结合化学模式识别及网络药理学的石菖蒲质量标志物预测分析

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中国新药杂志 2024年第11期33卷 1174-1184页

作者：李鹏辉孙瑜冯小龙陶新如龚年春蔡媛彭艳梅湖南省中医药研究院长沙410006

目的:指纹图谱结合化学模式识别技术及网络药理学,分析预测不同产地野生石菖蒲(Acorus tatarinowii Schott)中潜在的差异质量标志物(quality marker,Q-marker)。方法:采用HPLC法建立石菖蒲药材指纹图谱,确认共有峰并进行指认,通过主成... 详细信息

目的:指纹图谱结合化学模式识别技术及网络药理学,分析预测不同产地野生石菖蒲(Acorus tatarinowii Schott)中潜在的差异质量标志物(quality marker,Q-marker)。方法:采用HPLC法建立石菖蒲药材指纹图谱,确认共有峰并进行指认,通过主成分分析(principal component analysis,PCA)及正交偏最小二乘-判别分析(orthogonal partial least square-discriminant analysis,OPLS-DA),筛选引起产地差异的主要特征化学成分;再运用网络药理学构建“活性成分-靶点-通路网络”图,预测Q-marker。结果:建立了4个产地18批石菖蒲药材指纹图谱,共有峰的选择显示不同产地石菖蒲药材的内在质量存在明显差异,PCA和OPLS-DA显示同一产地石菖蒲药材各自聚为一类,指认的3号峰(β-细辛醚)是引起产地差异的主要特征化学成分。网络药理学筛选出6个潜在Q-marker,结合Q-marker五要素原则,进一步明确β-细辛醚可作为石菖蒲的潜在Q-marker。结论:预测了β-细辛醚可作为不同产地石菖蒲药材的差异Q-marker,为石菖蒲质控指标的选择提供思路和参考依据。

关键词：石菖蒲指纹图谱化学模式识别网络药理学差异质量标志物 β-细辛醚

左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠肠道菌群和短链脂肪酸代谢的影响

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中国中药杂志 2024年第1期49卷 208-215页

作者：李薇雷诗卉王瑾茜刘林杨蕙湖南中医药大学第一附属医院医学创新实验中心湖南长沙410000

探讨左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠肠道菌群和短链脂肪酸的调控以及神经炎症的影响。建立糖尿病并发抑郁症大鼠模型并随机分为4组:模型组、阳性药(二甲双胍+氟西汀)组以及左归降糖解郁方低、高剂量组,另设空白组,每组8只。随后... 详细信息

探讨左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠肠道菌群和短链脂肪酸的调控以及神经炎症的影响。建立糖尿病并发抑郁症大鼠模型并随机分为4组:模型组、阳性药(二甲双胍+氟西汀)组以及左归降糖解郁方低、高剂量组,另设空白组,每组8只。随后,对大鼠进行抑郁样行为检测;采集脑脊液检测促炎性细胞因子[白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)],采集血清检测下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA轴)相关蛋白[促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质醇(CORT)]和葡萄糖代谢。收集各组肠道内容物,进行肠道菌群16S rRNA测序分析和短链脂肪酸(SCFAs)测序。结果提示,左归降糖解郁方不仅可以改善糖尿病并发抑郁症大鼠糖代谢(P<0.01),缓解抑郁样行为(P<0.05)和HPA轴亢进(P<0.05或P<0.01),还可以改善脑内炎症反应,表现为脑脊液中促炎性细胞因子显著降低(P<0.05或P<0.01);并改善肠道菌群,使糖尿病并发抑郁症大鼠肠道菌群趋于空白组发展,表现为提高糖尿病并发抑郁症大鼠肠道菌群中厚壁菌门Firmicutes的丰度;并能够显著提高SCFAs(乙酸、丁酸、戊酸和异戊酸)的含量(P<0.01)。因此推测,左归降糖解郁方可有效改善肠道菌群紊乱,并调控SCFAs,从而改善糖尿病并发抑郁症糖代谢紊乱和抑郁样行为。

关键词：糖尿病抑郁症左归降糖解郁方肠道菌群短链脂肪酸

调脾承气汤改善食积小鼠胃部消化功能的转录组学研究

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中国临床药理学与治疗学 2024年第3期29卷 252-259页

作者：王小芸赵怀舟仝立国吉海杰杨钤王平卢海燕宋明锁山西省中医药研究院山西省中医院中医基础理论研究所山西太原030012 山西省中医药研究院山西省中医院中心实验室山西太原030012 山西中医药大学基础医学院山西省中医药研究院山西省中医院儿科山西太原030012

目的:基于转录组学探索调脾承气汤改善高热量和高蛋白食物导致积食小鼠的分子机制。方法:C57小鼠被随机分为正常对照组、模型组、调脾承气汤低剂量组(145 mg/mL)、调脾承气汤高剂量组(580 mg/mL)、多潘立酮组(0.15 mg/mL)。对实验小鼠... 详细信息

目的:基于转录组学探索调脾承气汤改善高热量和高蛋白食物导致积食小鼠的分子机制。方法:C57小鼠被随机分为正常对照组、模型组、调脾承气汤低剂量组(145 mg/mL)、调脾承气汤高剂量组(580 mg/mL)、多潘立酮组(0.15 mg/mL)。对实验小鼠进行一般状态观察和平均食量统计,测定各组小鼠胃排空及肠推进率。H&E染色观察胃组织病理变化;PAS染色观察胃组织糖元变化;比色法测定胃蛋白酶活力;酸碱滴定法测胃内容物的pH值。转录组测序分析胃组织差异基因,并对差异基因制作火山图和聚类热图,KEGG对差异基因进行信号通路富集分析。RT-qPCR验证筛选得到的差异基因。结果:积食小鼠在调脾承气汤治疗后小鼠体质量和平均食量增加(P<0.05),积食小鼠肠推进率和胃排空速度加快(P<0.05)。调脾承气汤能够保护胃组织结构和胃组织糖元降解,提升胃蛋白酶活力(P<0.05)和降低胃内容物pH(P<0.05)。转录组结果显示调脾承气汤可以调节Acox2和cilp2的表达,调节脂肪消化吸收、蛋白质消化吸收、胰腺分泌信号。RT-qPCR显示,相较于模型组,调脾承气汤上调Acox2(P<0.05),下调cilp2(P<0.05)的mRNA水平。结论:调脾承气汤可以改善高热量和高蛋白食物导致积食小鼠的消化功能障碍,其机制涉及到调节脂肪和糖类代谢基因Acox2和cilp2,以及胰腺分泌信号。

关键词：调脾承气汤转录组消化不良胃肠功能

甜味植物调节胰高血糖素样肽-1防治糖尿病的研究进展

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食品与发酵工业 2024年第15期50卷 372-380,397页

作者：王雅靖陈靓邹雅倩陈絮蒙湖南中医药大学药学院湖南长沙410208

由肠道L细胞生成的多肽类化合物胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)能够通过多重机制降低血糖水平,被认为是治疗糖尿病的有效靶点。现阶段,司美格鲁肽等GLP-1相关药物已经被广泛运用于临床实践中,效果显著却仍有一定局限... 详细信息

由肠道L细胞生成的多肽类化合物胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)能够通过多重机制降低血糖水平,被认为是治疗糖尿病的有效靶点。现阶段,司美格鲁肽等GLP-1相关药物已经被广泛运用于临床实践中,效果显著却仍有一定局限性。近年来,甜味植物被广泛研究应用于防治各类疾病,尤其在糖尿病防治过程中展现出巨大潜力,其中丰富的糖类、皂苷类、黄酮类及生物碱类等化合物是其呈“甜味”的主要物质基础。已有多项研究提示甜味植物及其活性成分可能通过多种途径影响GLP-1,包括直接与L细胞发生作用,激活味觉受体、胰高血糖素原多肽/前激素转化酶1/3、Wnt/β-catenin和磷酯酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B等信号通路,或者间接的通过肠道菌群/短链脂肪酸、肠道菌群/胆汁盐水解酶/法尼醇X受体、二肽基肽酶-4等途径影响GLP-1的合成或维持。该研究将对甜味植物的甜味物质基础及其作用于GLP-1的可能机制进行综述,为进一步阐明甜味植物的“滋味”与“功效”提供新的视角,并为甜味植物资源的开发利用提供新的思路。

关键词：甜味植物活性成分胰高血糖素样肽-1(GLP-1) 糖尿病

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