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巨噬细胞极化在肝纤维化中的作用和调控机制以及中国传统医药的干预

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中国新药杂志 2024年第10期33卷 1021-1031页

作者：彭望霞陆华冠谢新刘建军湖南中医药大学科技创新中心/中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地长沙410208

肝巨噬细胞是肝脏中重要的免疫细胞,具有显著的异质性和可塑性。在肝脏慢性损伤条件下,驻留的肝巨噬细胞和被招募到损伤部位的外周单核细胞在肝微环境中各种因素的刺激下,被激活并极化为多种巨噬细胞表型,发挥不同的功能。近年来的研究... 详细信息

肝巨噬细胞是肝脏中重要的免疫细胞,具有显著的异质性和可塑性。在肝脏慢性损伤条件下,驻留的肝巨噬细胞和被招募到损伤部位的外周单核细胞在肝微环境中各种因素的刺激下,被激活并极化为多种巨噬细胞表型,发挥不同的功能。近年来的研究表明,肝巨噬细胞极化对肝纤维化进程起关键的调节作用,但机制尚不完全清楚。本文综述了Notch、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)/Smads、Janus激酶/信号传导及转录激活因子(JAK/STAT)和Toll样受体4(TLR4)/核转录因子κB(NF-κB)等信号通路调节巨噬细胞极化参与肝纤维化进程的分子机制。此外,中国传统医药具有多成分、多靶点的优势,对慢性肝病和肝纤维化具有良好的疗效,本文也综述了近年来中药方剂和单体化合物靶向肝巨噬细胞的抗纤维化作用机制,并为临床应用提出新的见解。

关键词：肝纤维化巨噬细胞极化中药复方单体化合物

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加味香薷口服液抗流感的药效学及作用机制

中国现代应用药学 2024年第7期41卷 927-938页

作者：李薇杜青陈丹王小青李小兰李柯湖南中医药大学长沙410208 湖南省中医药研究院长沙410013 湖南省药物安全评价研究中心&新药药效与安全性评价湖南省重点实验室长沙410331

目的通过狗肾细胞(MDCK细胞)与小鼠观察加味香薷口服液的抗流感作用,并结合网络药理学预测其治疗流感的作用机制。方法观察不同浓度加味香薷口服液对甲型流感病毒3型致MDCK细胞病变的影响,以及对流感病毒感染小鼠的保护作用。通过中药... 详细信息

目的通过狗肾细胞(MDCK细胞)与小鼠观察加味香薷口服液的抗流感作用,并结合网络药理学预测其治疗流感的作用机制。方法观察不同浓度加味香薷口服液对甲型流感病毒3型致MDCK细胞病变的影响,以及对流感病毒感染小鼠的保护作用。通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)收集各味药的有效成分及作用靶点。采用GeneCards5.14数据库、OMMI等数据库收集流感疾病相关靶点,构建网络图。借助STRING数据库及Metascape数据库构建PPI网络图、GO富集和KEGG通路分析。利用AutoDockTools和PyMOL软件完成分子对接及三维可视化展示。结果体外实验表明加味香薷口服液对流感病毒引起的MDCK细胞病变及血凝现象有明显的抑制作用;体内实验表明其可延长甲型流感病毒感染小鼠存活时间,提高病毒感染小鼠的死亡保护率、降低小鼠肺指数及肺组织病毒滴度。筛选出82个活性成分和168个共有靶点,其中胡萝卜苷、叶酸、3`-甲氧基大豆黄素、柯伊利素、山柰酚为关键成分;TNF、AKT1、EGFR、STAT3、SRC、MMP9、PTGS2为核心靶点;KEGG通路富集分析显示其主要作用机制可能为通过TNF信号通路、趋化因子信号通路、PI3K/Akt信号通路、VEGF信号通路发挥抗流感病毒作用。结论药效学结果表明加味香薷口服液可有效治疗流感疾病,其机制可能与“多成分-多靶点-多通路”协同调节有关。

关键词：加味香薷口服液流感网络药理学药效学

基于匹配频数统计矩法的六味地黄浓缩丸谱量学质量控制与评价研究

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中草药 2024年第3期55卷 757-769页

作者：王玉钗刘湘田丽李文姣谯茹张伟龙潘雪唐昱贺福元湖南中医药大学药学院湖南长沙410208 中药成药性与制剂制备湖南省重点实验室湖南长沙410208 湖南中医药大学中医药超分子机理与数理特征化实验室湖南长沙410208 中药药性与药效国家中医药管理局重点实验室湖南长沙410208

目的基于超分子“印迹模板”理论,划分、整合六味地黄浓缩丸(Liuwei Dihuang Concentrated Pills,LDCP)指纹图谱,将其表征为物质单元并进行谱量学质量控制与评价研究。方法采用匹配频数统计矩法划分、整合与表征50批LDCP指纹图谱物质单... 详细信息

目的基于超分子“印迹模板”理论,划分、整合六味地黄浓缩丸(Liuwei Dihuang Concentrated Pills,LDCP)指纹图谱,将其表征为物质单元并进行谱量学质量控制与评价研究。方法采用匹配频数统计矩法划分、整合与表征50批LDCP指纹图谱物质单元,根据朗伯-比尔定律将各物质单元总峰面积与出膏率进行多元线性回归建立谱量学方程,进行谱量学研究。结果50批LDCP的UPLC指纹图谱被划分为35个物质单元(A1~A35),经多元线性回归得到35个物质单元(A1~A35)总峰面积与出膏率的谱量学方程:PT=23.390+0.04106 A1-9.100×10^(−3)A2+0.01468 A3+0.02798 A4-0.03361 A5-0.04225 A6-6.608×10^(−3)A7-0.02590 A8-0.14560 A9+0.16500 A10-0.02750 A11+3.408×10^(−3)A12-0.02103 A13-1.070×10^(−3)A14+2.833×10^(−5)A15-8.774×10^(−3)A16+0.01852 A17-1.8829×10^(−3)A18+0.02361 A19+8.566×10^(−3)A20+0.01394 A21-5.894×10^(−3)A22-0.01227 A23-0.01491 A24+1.792×10^(−3)A25-1.571×10^(−4)A26-3.942×10^(−3)A27-0.05480 A28+0.08315 A29+0.11930 A30-0.06071 A31-0.08342 A32+0.01496 A33-2.989×10^(−3)A34+0.06317 A35(r=0.915)。结论该方法能以较高准确度划分、整合并表征LDCP指纹图谱物质单元,且保留原指纹图谱整的总量统计矩特性,其谱量学方程能较好的预测LDCP的出膏率与平均出膏率,可为LDCP的质量控制提供新思路与新方法。

关键词：匹配频数统计矩法谱量学六味地黄浓缩丸超分子“印迹模板” 物质单元莫诺苷马钱苷丹皮酚

柴胡-白芍含药血浆通过miR-1297/PTEN信号轴对HepG2肝癌细胞的影响及机制研究

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中国中药杂志 2024年第4期49卷 1073-1081页

作者：丁琳王若宇张帆伍梦思陈斌孙克伟湖南中医药大学第一中医临床学院湖南长沙410007 湖南中医药大学第一附属医院湖南中医药大学中医学国内一流建设学科湖南长沙410007 南方科技大学附属第二医院广东深圳518112

研究柴胡-白芍含药血浆通过微小RNA-1297(microRNA-1297,miR-1297)/第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome 10,PTEN)信号轴对肝癌细胞HepG2的影响及作用机制。通过实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)检测miR-1297、PTEN mRNA在肝癌细胞株中的表达,双荧光素酶报告实验验证miR-1297与PTEN的靶向关系。将HepG2肝癌细胞分为空白血浆组、含药血浆组、miR-1297 inhibitor组、miR-NC组、miR-1297 inhibitor+含药血浆组。细胞计数试剂(CCK-8)法检测细胞增殖,筛选含药血浆最佳干预浓度及时间。细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力,碘化丙啶(PI)染色法检测细胞周期分布,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡水平。RT-qPCR检测miR-1297、PTEN、蛋白激酶B(Akt)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)基因表达。蛋白免疫印迹(Western blot,WB)检测PTEN、PI3K、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、Akt、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)、半胱氨酸蛋白酶9(caspase-9)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的蛋白表达。结果显示,miR-1297在HepG2细胞中表达水平最高,选取HepG2细胞进行后续实验。双荧光素酶报告实验显示miR-1297可与PTEN mRNA 3′-非翻译区(3′-untranslated region,3′UTR)结合。柴胡-白芍含药血浆可以抑制HepG2细胞增殖,最佳干预质量分数及时间为20%、72 h。与空白血浆组相比,含药血浆组、miR-1297 inhibitor组及miR-1297 inhibitor+含药血浆组均能抑制HepG2细胞增殖、侵袭及迁移,可以提高G_(0)/G_(1)期细胞比例,降低S期细胞比例,提高细胞凋亡率。柴胡-白芍含药血浆可以降低HepG2细胞miRNA-1297、PI3K、Akt mRNA表达,提高PTEN mRNA表达;可以下调p-PI3K、p-Akt、Bcl-2蛋白表达;上调PTEN、caspase-3、caspase-9、Bax的蛋白表达。综上,柴胡、白芍可以抑制HepG2肝癌细胞miR-1297的表达,上调PTEN表达,负调控PI3K/Akt信号通路,从而抑制HepG2细胞增殖并诱导凋亡。

关键词：柴胡白芍 miRNA-1297 PTEN PI3K/Akt 肝癌

基于HPLC指纹图谱与一测多评法结合的桑黄品质评价研究

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中国药学杂志 2024年第6期59卷 531-540页

作者：彭思源邓元辉丁婵孟俊华崔培梧湖南中医药大学药学院菌物药研究室长沙410208 国家中医药管理局中药药性与药效三级科研实验室长沙410208 长沙时代基因医学检验实验室长沙410000

目的基于HPLC特征图谱,建立同时测定桑黄中原儿茶酸、原儿茶醛、咖啡酸、紫萁酮和牛奶树碱5种成分含量的一测多评方法(quantitative analysis of multi-components with a single-marker,QAMS),对不同来源的桑黄药材进行品质评价研究。... 详细信息

目的基于HPLC特征图谱,建立同时测定桑黄中原儿茶酸、原儿茶醛、咖啡酸、紫萁酮和牛奶树碱5种成分含量的一测多评方法(quantitative analysis of multi-components with a single-marker,QAMS),对不同来源的桑黄药材进行品质评价研究。方法收集了3个种源地共10个批次的桑黄药材样品,采用Wondasil C_(18)Superb色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,体积流量1.0 mL·min^(-1),柱温25℃,进样量20μL,采用变波长程序,建立内参物原儿茶醛与原儿茶酸、咖啡酸、紫萁酮、牛奶树碱的相对校正因子并进行了相对校正因子的耐用性考察。采用外标法(external standard method,ESM)和QAMS法分别测定不同来源共10批桑黄药材中该5种成分的含量以验证QAMS法的准确性。结果采用SPSS与Origin Pro进行主成分分析、相似度分析和聚类分析。结果显示,5种成分专属性、精密度、重复性、稳定性、线性范围(r2>0.9990)均良好、平均加样回收率99.74%~102.78%,RSD 1.34%~2.92%。以原儿茶醛为内参物,原儿茶酸、咖啡酸、紫萁酮、牛奶树碱的平均相对校正因子分别为0.8519、1.4469、1.6157、0.7747;t检验结果表明,ESM法与QAMS法测定结果差异不显著。通过统计学分析实现了数据集的可视化,聚类分析发现西藏和广东产地的桑黄样品呈现一定的地域差异,但也发现了源于广东和长白山的个别桑黄样品与源于西藏的桑黄样品聚为一类的现象,意味着不能仅仅依据产地评价桑黄品质优劣,因为可能存在基源不清或品种混淆的状况。不同桑黄样品中牛奶树碱、原儿茶醛、紫萁酮的含量差异较大,且此3类成分对主成分的贡献较多,可能为桑黄的主要质量标志物。结论该研究基于HPLC指纹图谱建立的QAMS法简单、经济、实用,可以实现对桑黄中主要成分的快速、科学分析,也为其种质资源的品质评价提供了一定的科学依据。

关键词：桑黄指纹图谱一测多评法外标法相对校正因子质量评价

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链霉菌次级代谢产物生物合成的调控研究进展

中草药 2024年第14期55卷 4917-4929页

作者：孟俊华张少航鲁曼霞厉晓龚婕王炜崔培梧湖南中医药大学药学院菌物药研究室湖南长沙410208 国家中医药管理局中药药性与药效三级科研实验室湖南长沙410208 湖南中医药大学药学院中药民族药物创新发展国际实验室湖南长沙410208 河北省平山县农业农村局河北石家庄050400

链霉菌属微生物是生产抗生素的优势菌群,也是一些维生素和酶的重要来源,具有广阔的开发前景;然而,链霉菌代谢网络和调控机制的复杂性,及大量基因簇的沉默限制了其次级代谢产物的高效合成。快速发展的代谢工程技术为人为干预、调控链霉... 详细信息

链霉菌属微生物是生产抗生素的优势菌群,也是一些维生素和酶的重要来源,具有广阔的开发前景;然而,链霉菌代谢网络和调控机制的复杂性,及大量基因簇的沉默限制了其次级代谢产物的高效合成。快速发展的代谢工程技术为人为干预、调控链霉菌代谢途径或代谢通量提供了新的手段,并已成为实现链霉菌源目标产物高产和成药性天然产物挖掘的重要途径。通过对以强化链霉菌次级代谢产物合成为目标的非靶向和靶向调控技术的相关研究进展进行综述,为链霉菌次级代谢产物的高效挖掘及生物合成过程强化提供参考。

关键词：链霉菌次级代谢产物代谢调控生物合成基因簇非靶向调控靶向调控

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锥属植物化学成分及药理作用研究进展

中成药 2024年第3期46卷 899-913页

作者：倪晓婷张云坤唐敏李娟李顺祥湖南中医药大学药学院湖南省中药活性物质筛选工程技术研究中心湖南长沙410208 湖南省中美老年性退行性疾病治疗药物国际联合研究中心湖南长沙410208 益阳医学高等专科学校湖南益阳413002

锥属植物资源丰富,广泛分布于长江以南各地,多为经济植物及药食两用植物,槠子、锥栗、白猪栗根等皆来源于该属植物,入药部位有壳斗、种仁、皮叶、嫩芽,根等。其次生代谢成分主要有三萜类、鞣花单宁类、没食子酰基类、黄酮类、酚酸、苯... 详细信息

锥属植物资源丰富,广泛分布于长江以南各地,多为经济植物及药食两用植物,槠子、锥栗、白猪栗根等皆来源于该属植物,入药部位有壳斗、种仁、皮叶、嫩芽,根等。其次生代谢成分主要有三萜类、鞣花单宁类、没食子酰基类、黄酮类、酚酸、苯酚类等。现代药理研究表明,锥属植物具有抗氧化、降糖降脂、抗肿瘤、抗菌、抗炎等多种作用。本文通过对近年来锥属植物的化学成分、药理活性作用进行综述,以期为锥属植物的药理药效研究、新药开发研究提供参考依据。

关键词：壳斗科锥属化学成分药理作用

MUC1介导三阴性乳腺癌细胞铁稳态失衡及槲皮素的干预作用

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湖南师范大学自然科学学报 2024年

作者：王海娇谢伍星徐蓉梅志刚刘永平陈懿湖南中医药大学中西医结合学院湖南中医药大学医学院

为了研究人粘液蛋白1（MUC1）对三阴性乳腺癌（TNBC）铁稳态的影响，探讨槲皮素抗TNBC增殖的新机制。本研究采用生物信息学方法分析人正常乳腺组织和乳腺癌组织MUC1的表达及与预后的相关性；采用慢病毒转染构建MUC1过表达细胞模型，同... 详细信息

为了研究人粘液蛋白1（MUC1）对三阴性乳腺癌（TNBC）铁稳态的影响，探讨槲皮素抗TNBC增殖的新机制。本研究采用生物信息学方法分析人正常乳腺组织和乳腺癌组织MUC1的表达及与预后的相关性；采用慢病毒转染构建MUC1过表达细胞模型，同时将三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞分成对照组、不同浓度槲皮素组、GO203（MUC1抑制剂）组。通过CCK-8法检测细胞活力，亚铁离子荧光探针检测细胞内游离Fe2+水平，qPCR方法检测MUC1基因表达，Western Blot方法检测MUC1及铁代谢相关蛋白表达。研究结果表明，MUC1在乳腺癌组织的表达远高于正常乳腺组织（P＜0.05），TNBC患者预后与MUC1高表达密切相关（P＜0.01）；与对照组相比，MUC1过表达模型细胞增殖明显加快（P＜0.01），细胞内Fe2+水平增加（P＜0.01），铁输入蛋白TFR1、FTH1表达增加（P＜0.05，P＜0.05），但铁输出蛋白SLC40A1、铁自噬调节因子NCOA4及上游调节因子NRF2表达无统计学变化（P＞0.05）；槲皮素可降低MUC1基因和蛋白表达（P＜0.01，P＜0.01），槲皮素和MUC1抑制剂G0203均可显著抑制TNBC细胞增殖（P＜0.05），减少细胞内铁含量（P＜0.01），降低铁输入蛋白TRF1和FTH1表达（P＜0.05，P＜0.05），增加铁输出蛋白SLC40A1表达（P＜0.05）。综上可得，高表达MUC1可影响铁代谢相关蛋白表达，导致铁稳态失衡致铁积累促进细胞增殖；槲皮素可显著抑制MDA-MB-468细胞增殖，其机制可能通过下调MUC1调节铁稳态，降低细胞内铁水平。

关键词：槲皮素三阴性乳腺癌 MUC1 铁稳态抗肿瘤

基于调控METTL3介导的m^(6)A修饰探讨鳖龙软肝汤抑制HBV原发性肝癌细胞增殖、迁移的作用机理

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时珍国医国药 2024年第6期35卷 1370-1374页

作者：刘彬彬姜佳呈周意王若宇彭建平陈斌孙克伟伍玉南湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007

目的鳖龙软肝汤是临床中治疗慢性肝炎肝纤维化的重要中药方剂,通过多年临床的实践和诸多的临床研究报道,鳖龙软肝汤临床治疗乙肝相关性肝癌的疗效较确切。该试验通过研究鳖龙软肝汤对METTL3介导m^(6)A修饰的调控,探索其对HBV相关原发性... 详细信息

目的鳖龙软肝汤是临床中治疗慢性肝炎肝纤维化的重要中药方剂,通过多年临床的实践和诸多的临床研究报道,鳖龙软肝汤临床治疗乙肝相关性肝癌的疗效较确切。该试验通过研究鳖龙软肝汤对METTL3介导m^(6)A修饰的调控,探索其对HBV相关原发性肝癌细胞增殖、迁移的影响。方法将15只SPF级健康的成年SD大鼠分成空白血清组、鳖龙软肝汤含药血清低剂量组、鳖龙软肝汤含药血清中剂量组,根据人与动物体表面积-等效剂量换算方法,空白组按照剂量灌胃生理盐水,鳖龙软肝汤组按照剂量灌胃鳖龙软肝汤,制备含药血清。分别用CCK-8法、细胞划痕试验检测含药血清对HepG2.2.15细胞增殖、迁移能力的影响,用qPCR检测METTL3、SOCS2 mRNA的表达水平,用m^(6)A RNA甲基化试剂盒检测其m^(6)A修饰水平。结果鳖龙软肝汤含药血清能抑制HBV相关原发性肝癌细胞的增殖、迁移,下调HBV相关肝癌细胞中METTL3表达,上调SOCS2的表达水平,降低m^(6)A修饰水平。结论鳖龙软肝汤含药血清对HBV相关原发性肝癌细胞增殖、迁移的抑制作用可能与METTL3介导的m^(6)A修饰水平下降有关,其过程可能与SOCS2的表达上升密切相关。

关键词：鳖龙软肝汤肝细胞癌乙型肝炎病毒 METTL3 SOCS2 m^(6)A甲基化