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长链非编码RNA ZFAS1通过miR-193b-3p影响胶质瘤顺铂敏感性研究

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中国临床药理学杂志 2024年第12期40卷 1774-1778页

作者：张慧郑款云齐丽娜薛子娇唐山市工人医院检验科河北唐山063000 华北理工大学护理与康复学院河北唐山063000 华北理工大学附属医院康复医学科河北唐山063000

目的研究长链非编码RNA锌指结构反义转录本1(ZFAS1)在胶质瘤细胞中对顺铂敏感性的作用及其潜在机制。方法通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)实验分析敲低ZFAS1对胶质瘤细胞顺铂敏感性,分为sh-NC组(转染sh-NC慢病毒质粒)、sh#1组... 详细信息

目的研究长链非编码RNA锌指结构反义转录本1(ZFAS1)在胶质瘤细胞中对顺铂敏感性的作用及其潜在机制。方法通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)实验分析敲低ZFAS1对胶质瘤细胞顺铂敏感性,分为sh-NC组(转染sh-NC慢病毒质粒)、sh#1组(转染sh-ZFAS1-1慢病毒质粒)、sh#2组(转染sh-ZFAS1-2慢病毒质粒)。双荧光素酶实验验证ZFAS1与miR-193b-3p之间的相互作用,分为ZFAS1-WT+NC inhibitor组(转染ZFAS1野生型质粒和NC inhibitor)、ZFAS1-WT+miR-193b-3p inhibitor组(转染ZFAS1野生型质粒和miR-193b-3p inhibitor)、ZFAS1-Mut+NC inhibitor组(转染ZFAS1突变型质粒和NC inhibitor)、ZFAS1-Mut+miR-193b-3p inhibitor组(转染ZFAS1突变型质粒和miR-193b-3p inhibitor)。用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)和原位末端标记(TUNEL)实验分析ZFAS1/miR-193b-3p影响胶质瘤细胞对顺铂敏感性,分为空白对照组(0μg·mL^(-1)顺铂处理U251细胞)、0.5μg·mL^(-1)顺铂+sh-NC+NC inhibitor组(0.5μg·mL^(-1)顺铂处理共转染sh-NC慢病毒质粒和NC inhibitor的U251细胞)、0.5μg·mL^(-1)顺铂+sh#1+NC inhibitor组(0.5μg·mL^(-1)顺铂处理共转染sh-NC慢病毒质粒和NC inhibitor的U251细胞)和0.5μg·mL^(-1)顺铂+sh#1+miR-193b-3p inhibitor组(0.5μg·mL^(-1)顺铂处理共转染sh-ZFAS1-1慢病毒质粒和miR-193b-3p inhibitor的U251细胞)。结果 sh-NC组、sh#1组和sh#2组的ZFAS1的表达水平分别为1.00±0.17、0.48±0.06和0.68±0.08。ZFAS1-WT+NC inhibitor组、ZFAS1-WT+miR-193b-3p inhibitor组、ZFAS1-Mut+NC inhibitor组、ZFAS1-Mut+miR-193b-3p inhibitor组的荧光活性分别为1.00±0.10、1.45±0.11、1.02±0.09和0.97±0.13。空白对照组、0.5μg·mL^(-1)顺铂+sh-NC+NC inhibitor组、0.5μg·mL^(-1)顺铂+sh#1+NC inhibitor组、0.5μg·mL^(-1)顺铂+sh#1+miR-193b-3p inhibitor组的72 h增殖率分别为(100.00±14.13)%、(96.62±9.82)%、(60.56±6.08)%和(78.64±7.22)%;72 h凋亡率分别为(9.52±1.11)%、(10.12±1.34)%、(16.08±1.52)%和(12.22±1.19)%。空白对照组与0.5μg·mL^(-1)顺铂+sh-NC+NC inhibitor组比较,0.5μg·mL^(-1)顺铂+sh#1+NC inhibitor组与0.5μg·mL^(-1)顺铂+sh#1+miR-193b-3p inhibitor组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P研究揭示了ZFAS1在胶质瘤中对顺铂敏感性的重要作用,并阐明了其通过调控miR-193b-3p影响药物敏感性的机制。

关键词：长链非编码RNA 锌指结构反义转录本1 微小RNA-193b-3p 胶质瘤顺铂敏感性

复发性流产生殖道感染病原学和蜕膜组织TLR4、MIF、bax/bcl-2表达水平及其临床意义

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中华医院感染学杂志 2024年 2192-2196页

作者：李素叶王娇焦艳郭丹冀雪霞衡水市人民医院生殖医学科

目的探讨复发性流产(RSA)生殖道感染病原学和蜕膜组织中Toll样受体4(TLR4)、巨噬细胞移动抑制因子(MIF)、细胞淋巴瘤基因-2(bcl-2)和Bcl-2相关蛋白(bax)表达水平及其临床意义。方法选取2022年4月—2023年7月衡水市人民医院RSA再次妊... 详细信息

目的探讨复发性流产(RSA)生殖道感染病原学和蜕膜组织中Toll样受体4(TLR4)、巨噬细胞移动抑制因子(MIF)、细胞淋巴瘤基因-2(bcl-2)和Bcl-2相关蛋白(bax)表达水平及其临床意义。方法选取2022年4月—2023年7月衡水市人民医院RSA再次妊娠出现先兆流产患者103例为RSA组,根据生殖道感染情况分为感染组与未感染组,另选取正常早孕人流要求终止患者101例为对照组,实时荧光定量聚合酶链式反应测定蜕膜组织TLR4、MIF、bax/bcl-2 mRNA水平,Logistic回归分析RSA发生影响因素。结果 103例RSA患者共有52例发生生殖道感染,感染发生率为50.49%;RSA组蜕膜组织TLR4 mRNA、bax mRNA水平高于对照组,MIF mRNA、bcl-2 mRNA水平低于对照组,bax/bcl-2值高于对照组(P<0.05);Logisitic回归分析显示生殖系统感染、内分泌异常、TLR4高表达、高bax/bcl2值是RSA发生的危险因素,MIF高表达是防止RSA发生的保护因素;感染组蜕膜组织TLR4 mRNA、MIF mRNA、bax mRNA表达水平高于未感染组,bc/-2 mRNA表达水平低于未感染组,bax/bcl-2值高于未感染组(P<0.05)。结论 RSA患者蜕膜组织TLR4高表达,MIF低表达,bax/bcl2值升高,生殖道感染可增加RSA发生风险,使患者TLR4、bax/bcl-2水平进一步升高。

关键词：复发性流产病原菌生殖道感染 Toll样受体4 巨噬细胞移动抑制因子细胞淋巴瘤基因-2

用同位素稀释-HPLC-MS/MS法同时检测儿童微量血浆中4种抗菌药物的浓度

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中国临床药理学杂志 2024年第10期40卷 1507-1511页

作者：杨志梅秦亚彬韩雨姜锡娟河北医科大学第四医院急诊科河北石家庄050011 河北医科大学研究生学院河北石家庄050017 河北省儿童医院药学部河北石家庄050031

目的建立同时测定微量血浆中美罗培南、利奈唑胺、伏立康唑和泊沙康唑4种抗菌药物浓度的高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)法,并用于儿童患者治疗药物监测(TDM)。方法血浆样本经甲醇沉淀蛋白前处理,分别以美罗培南-d6、利奈唑胺-d3、伏... 详细信息

目的建立同时测定微量血浆中美罗培南、利奈唑胺、伏立康唑和泊沙康唑4种抗菌药物浓度的高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)法,并用于儿童患者治疗药物监测(TDM)。方法血浆样本经甲醇沉淀蛋白前处理,分别以美罗培南-d6、利奈唑胺-d3、伏立康唑-d3和泊沙康唑-d4作为内标,用EVO-C18色谱柱分离,流动相为水(含0.1%甲酸)和乙腈(含0.1%甲酸),梯度洗脱;流速为0.5 mL·min^(-1)。质谱检测方式为电喷雾离子源正离子模式,多反应监测(MRM)扫描。结果美罗培南浓度在0.5~64.0μg·mL^(-1)线性关系良好(r=0.9992);利奈唑胺和伏立康唑浓度在0.2~25.6μg·mL^(-1)线性关系良好(r=0.9992,r=0.9999);泊沙康唑浓度在0.1~12.8μg·mL^(-1)线性关系良好(r=0.9989)。准确度、精密度、基质效应和稳定性均符合要求。本方法经过验证后成功应用于49例儿童患者的抗菌药治疗药物监测。结论本方法操作简便、快速、灵敏度高,适用于人血浆中美罗培南、利奈唑胺、伏立康唑、泊沙康唑4种抗菌药物浓度的分析,可用于儿童患者临床治疗药物监测。

关键词：美罗培南利奈唑胺伏立康唑泊沙康唑高效液相色谱串联质谱法治疗药物监测儿童

用HPLC-MS/MS法测定重症感染患儿微量血浆/血清中利奈唑胺和万古霉素浓度

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中国临床药理学杂志 2024年第7期40卷 1044-1048页

作者：姜锡娟雷蓉秦亚彬赵宜乐河北省儿童医院药学部河北石家庄050031 河北省药品医疗器械检验研究院河北省中药质量评价与标准研究重点实验室河北石家庄050227

目的建立一种高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)法快速测定重症感染患儿微量血浆/血清中利奈唑胺和万古霉素浓度。方法血浆/血清10μL经甲醇沉淀蛋白后取上清液直接进样分析,内标分别为利奈唑胺-D3和去甲万古霉素;用Kinetex^(R)EVOC18柱... 详细信息

目的建立一种高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)法快速测定重症感染患儿微量血浆/血清中利奈唑胺和万古霉素浓度。方法血浆/血清10μL经甲醇沉淀蛋白后取上清液直接进样分析,内标分别为利奈唑胺-D3和去甲万古霉素;用Kinetex^(R)EVOC18柱(30.0mm×2.1mm,2.6μm)分离,以0.1%甲酸-水和0.1%甲酸-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速:0.5mL·min^(-1),柱温:40℃,进样量:2μL,分析时长:2min。电喷雾离子源正离子扫描下,用多反应监测模式进行质谱分析。考察该方法的专属性、定量下限和标准曲线、准确度和精密度、回收率、基质效应、稳定性、血清和血浆样品的交叉验证、溶血效应和高脂效应。结果利奈唑胺、万古霉素及内标利奈唑胺-D3、去甲万古霉素的保留时间分别为1.18、1.03、1.17、1.01min。利奈唑胺在0.2~25.6μg·mL^(-1)内呈良好的线性关系,回归方程是y=8.95×10^(-1)x+3.49×10^(-3)(r=0.9971),定量下限为0.2μg·mL^(-1);万古霉素在1~128μg·mL-内呈良好的线性关系,回归方程是y=3.13×10^(-1)x+6.93×10^(-2)(r=0.9974),定量下限为1μg·mL^(-1);批内、批间精密度的相对标准偏差(RSD)均≤9.55%。2种药物的平均提取回收率均在96.24%~104.57%;内标归一化基质因子的RSD≤7.58%;血浆和血清基质样品可交叉检测,利奈唑胺和万古霉素最高可承受的溶血程度分别为2%和5%,高脂效应均不影响2种抗菌药测定结果。样品的稳定性在试验条件下均良好。该法成功用于我院28例重症感染患儿血浆样本分析。结论本方法所需样本量少,简单、快速、准确、稳定、应用范围广,可应用于利奈唑胺和万古霉素在儿童治疗药物监测及联合用药研究。

关键词：利奈唑胺万古霉素高效液相色谱-质谱联用治疗药物监测重症感染儿科患者

颅脑损伤合并肺部感染miRNA表达谱与MASP-2位点rs72550870突变的关联

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中华医院感染学杂志 2024年第4期34卷 522-526页

作者：秦帅鑫高磊磊翟娟曹卫青甄朝建王军邢台市人民医院神经外科河北邢台054000 石家庄金域医学检测实验室河北石家庄050035

目的探讨颅脑损伤合并肺部感染miRNA表达图谱及凝集素相关丝氨酸蛋白酶2(MASP-2)位点rs72550870突变的关联.方法前瞻性纳入2019年3月—2020年8月邢台市人民医院急诊收治的95例颅脑损伤患者为研究对象,根据其术后是否发生肺部感染分为... 详细信息

目的探讨颅脑损伤合并肺部感染miRNA表达图谱及凝集素相关丝氨酸蛋白酶2(MASP-2)位点rs72550870突变的关联.方法前瞻性纳入2019年3月—2020年8月邢台市人民医院急诊收治的95例颅脑损伤患者为研究对象,根据其术后是否发生肺部感染分为感染组23例和非感染组72例;收集两组患者临床资料,检测其外周血中单个核细胞miRNAs表达谱,MASP-2基因多态性及MASP-2基因位点rs72550870检测,并利用Logistic回归模型进行相关性分析.结果两组患者入院时格拉斯哥昏迷(GCS)评分≥8分、术后卧床时间≥4周、术前血清白蛋白水平及外周血单个核细胞miRNAs表达水平对比,均存在统计学差异(P<0.05);改变倍数≥2倍的miRNA总数为42,其中24个表达下调、18个表达上调;感染组患者外周血miR-146a、miR-155、miR-125b及miR-22-3p水平均高于未感染组(P<0.05);miR-146a、miR-155、miR-125b及miR-22-3p水平检测的曲线下面积(AUC)分别为0.759、0.866、0.746、0.784(P<0.05);感染组MASP-2基因位点rs72550870基因型AA分布频率及等位基因A分布频率均较非感染组偏高(P<0.05);MASP-2基因位点rs72550870的等位基因A及基因型AA与颅脑损伤患者术后并发肺部感染相关(P<0.05).结论检测颅脑损伤患者的miRNA表达图谱可辅助临床评估其继发颅脑损伤的风险,其中MASP-2的位点rs72550870等位基因A和基因型AA突变是高危因素.

关键词：颅脑损伤肺部感染 miRNA表达图谱凝集素相关丝氨酸蛋白酶2 rs72550870突变评估价值

基于PI3K/Akt信号通路研究灯盏花乙素对子宫内膜癌Ishikawa细胞的影响

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中国临床药理学杂志 2024年第1期40卷 27-31页

作者：代丽丽王景魏许瑞马庆亚王娜都治香河北医科大学第一医院产科河北石家庄050000 河北医科大学第一医院妇科河北石家庄050000

目的研究灯盏花乙素对子宫内膜癌Ishikawa细胞的影响,并分析与磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的相关性。方法将Ishikawa细胞分为空白组及低、中、高剂量实验组,分别用含0、5、10及20μmol·L-1的灯盏花乙素的完全培养基... 详细信息

目的研究灯盏花乙素对子宫内膜癌Ishikawa细胞的影响,并分析与磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的相关性。方法将Ishikawa细胞分为空白组及低、中、高剂量实验组,分别用含0、5、10及20μmol·L-1的灯盏花乙素的完全培养基处理。用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验检测细胞活力;用平板克隆实验检克隆形成能力;用划痕及Transwell实验检测转移及侵袭能力;用流式细胞术检测凋亡;用蛋白质印迹法检测蛋白表达情况。结果空白组和低、中、高剂量实验组48 h的细胞活力分别为(100.00±0.00)%、(78.51±7.54)%、(52.93±4.91)%和(41.62±5.33)%;克隆形成率分别为(100.00±0.00)%、(56.59±6.34)%、(35.23±4.62)%和(10.66±1.91)%;划痕愈合率分别为(53.70±6.19)%、(40.59±4.75)%、(34.25±4.40)%和(15.78±2.14)%;侵袭细胞数分别为(189.70±14.06)、(106.82±12.67)、(84.37±8.13)和(53.74±6.78)个;基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白相对表达水平分别为0.96±0.10、0.73±0.06、0.68±0.08和0.42±0.05;MMP抑制药-1(TIMP-1)蛋白相对表达水平分别为0.35±0.04、0.51±0.05、0.74±0.08和1.20±0.14;细胞凋亡率分别为(4.21±0.53)%、(15.83±2.42)%、(22.72±3.85)%和(34.41±4.67)%;B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白表达水平分别为1.38±0.15、0.90±0.10、0.56±0.06和0.24±0.03;Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达水平分别为0.31±0.02、0.44±0.04、0.93±0.11和1.26±0.14;PI3Kp85蛋白表达水平分别为0.67±0.05、0.42±0.04、0.36±0.02和0.28±0.03;磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达水平分别为0.78±0.06、0.53±0.04、0.46±0.05和0.42±0.03;低、中、高剂量实验组上述指标与空白组比较,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论灯盏花乙素可以通过调控PI3K/Akt信号通路抑制Ishikawa细胞增殖、转移及侵袭,并诱导其凋亡。

关键词：灯盏花乙素子宫内膜癌转移侵袭凋亡

miR-135a/MYC介导维奈克拉治疗骨髓增生异常综合征与急性髓系白血病的耐药机制研究

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中国临床药理学杂志 2024年第13期 1855-1859页

作者：郭素青石锐吴燕李英华衡水市人民医院血液内科

目的探讨miR-135a/MYC介导维奈克拉治疗骨髓增生异常综合征（MDS）与急性髓系白血病（AML）的耐药机制。方法选取病例86例，其中健康供者23例（对照组）,MDS维奈克拉耐药患者47例（MDS组）,由骨髓增生异常综合征转化的AML维奈克拉耐... 详细信息

目的探讨miR-135a/MYC介导维奈克拉治疗骨髓增生异常综合征（MDS）与急性髓系白血病（AML）的耐药机制。方法选取病例86例，其中健康供者23例（对照组）,MDS维奈克拉耐药患者47例（MDS组）,由骨髓增生异常综合征转化的AML维奈克拉耐药患者16例（AML组）,检测3组miR-135a和MYC的表达水平。将THP1细胞分为miR-NC组（转染无义序列）和miR-135a minics组（转染miR-135a minics）,用含0、0.01、1、100μmol·L-1的维奈克拉处理细胞24 h,检测各组细胞活力和凋亡率。结果对照组、MDS组和AML组患者miR-135a的表达水平分别为1.00±0.14、0.21±0.04和0.25±0.08,MYC的蛋白表达水平分别为1.00±0.15、1.31±0.12和1.49±0.16（P<0.05）。在细胞水平方面，BMSCs组、MUTZ-1组、THP1组MYC mRNA表达水平分别为1.00±0.11、1.31±0.15和1.93±0.23,MYC蛋白表达水平分别为1.00±0.15、1.57±0.22和1.97±0.31,在统计学上差异均有统计学意义（均P<0.05）。细胞活力检测结果显示，在0、0.01、1、100μmol·L-1维奈克拉药物浓度下，miR-NC组细胞活力分别为（100.00±13.26）%、（92.33±10.28）%、（85.41±11.37）%和（28.24±6.02）%,miR-135a mimics组细胞活力分别为（105.12±12.35）%、（82.11±12.07）%、（46.13±8.06）%和（18.20±5.03）%,仅在1μmol·L-1维奈克拉药物浓度中2组在统计学上差异有统计学意义（P<0.05）。细胞凋亡检测结果显示：在0、0.01、1、100μmol·L-1维奈克拉药物浓度下，miR-NC组凋亡率分别为（100.00±11.45）%、（92.48±12.04）%、（108.72±9.63）%和（207.15±21.49）%,miR-135a mimics组的细胞凋亡率分别为（106.34±16.21）%、（117.26±10.13）%、（269.41±23.59）%和（184.33±19.28）%,仅在1μmol·L-1维奈克拉药物浓度中2组差异在统计学上有统计学意义（P<0.05）。结论 miR-135a/MYC介导维奈克拉治疗MDS和AML的耐药机制。

关键词： miR-135a/MYC 维奈克拉骨髓增生异常综合征急性髓系白血病耐药机制

制霉素片联合康复新液预防阻生智齿拔除术后口腔感染的临床效果及对Th17/Treg细胞免疫的影响

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中华医院感染学杂志 2024年 2022-2026页

作者：闫娜张玲玲胡志伟王彭议张中月衡水市人民医院口腔科

目的探讨制霉素片联合康复新液预防阻生智齿拔除术后口腔感染的临床效果及对辅助性T细胞17/调节性T细胞(Th17/Treg)细胞免疫的影响。方法选取2022年8月-2023年8月衡水市人民医院收治的200例阻生智齿患者为研究对象,根据随机数表法分... 详细信息

目的探讨制霉素片联合康复新液预防阻生智齿拔除术后口腔感染的临床效果及对辅助性T细胞17/调节性T细胞(Th17/Treg)细胞免疫的影响。方法选取2022年8月-2023年8月衡水市人民医院收治的200例阻生智齿患者为研究对象,根据随机数表法分为研究组100例和对照组100例。比较两组基本资料、口腔感染发生率、口腔菌群变化、Th17/Treg及叉头翼状螺旋转录因子(Foxp3)、维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)、白细胞介素-17 (IL-17)、转化生长因子β(TGF-β)水平。结果研究组感染发生率为1.63%,低于对照组的9.09%(P研究组革兰阴性菌、螺旋体数量低于对照组,革兰阳性菌数量高于对照组(P研究组Th17、Th17/Treg、RORγt、IL-17、TGF-β水平低于对照组,Treg、Foxp3水平高于对照组(P<0.05)。结论制霉素片联合康复新液可以减少阻生智齿拔除术后患者口腔感染发生率,维持口腔菌群稳态,调节Th17/Treg细胞免疫平衡,提高患者抗菌抗感染能力。

关键词：制霉素片康复新液阻生智齿口腔感染辅助性T细胞17/调节性T细胞口腔菌群

用HPLC-MS/MS法测定儿童微量血浆中地高辛浓度

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中国临床药理学杂志 2024年第9期40卷 1331-1335页

作者：杨志梅冯章英秦亚彬河北医科大学第四医院急诊科河北石家庄050011 河北医科大学第四医院临床药理研究部河北石家庄050011 河北省儿童医院药学部河北石家庄050031

目的建立液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法检测血浆中地高辛含量,并用于患儿治疗药物监测(TDM)。方法取血浆样本10μL经乙腈沉淀蛋白,用Phenomenex Kinetex EVO C18(30.0 mm×2.1 mm,2.6μm)色谱柱分离,流动相为水(含0.05%甲酸和2 mmol... 详细信息

目的建立液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法检测血浆中地高辛含量,并用于患儿治疗药物监测(TDM)。方法取血浆样本10μL经乙腈沉淀蛋白,用Phenomenex Kinetex EVO C18(30.0 mm×2.1 mm,2.6μm)色谱柱分离,流动相为水(含0.05%甲酸和2 mmol·L^(-1)乙酸铵)和甲醇,梯度洗脱,流速:0.55 mL·min^(-1),进样体积:30μL,柱温:45℃。电喷雾离子源正离子模式,动态多反应监测(dMRM)扫描分析,离子通道分别选择为m/z 798.3→651.3(地高辛)和m/z 801.3→654.3(地高辛-d3)。考察该方法的专属性、标准曲线与定量下限、准确度和精密度、提取回收率、基质效应以及稳定性。结果地高辛及内标的保留时间均为1.39 min,地高辛在0.25~8.00 ng·mL^(-1)线性良好,代表性的标准曲线方程为y=18.08×10^(-2)x+29.71×10^(-4)(r^(2)=0.99577),批内和批间精密度相对标准偏差均小于15%,提取回收率为91.00%~99.50%,稳定性良好,基质效应符合规定。本方法成功用于65例患儿的地高辛血药浓度测定。结论本方法操作简便、快速、准确、专属性强,可用于患儿临床治疗药物监测。

关键词：地高辛液相色谱-串联质谱法儿童治疗药物监测蛋白沉淀