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吴茱萸次碱对脑缺血再灌注小鼠的保护作用及作用机制研究

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中国实验方剂学杂志 2013年第6期19卷 264-266页

作者：严春临张季高艳青吴雪智王树薛贵平河北北方学院药学系河北张家口075000

目的:观察吴茱萸次碱(Rut)对脑缺血再灌注(I/R)损伤小鼠的学习记忆能力的保护作用及作用机制。方法:采用改进的Himori法暂时性阻断两侧颈总动脉制备小鼠脑I/R损伤模型,采用跳台实验,观察腹腔注射吴茱萸次碱(84,252,504μ***-1)对脑I/R... 详细信息

目的:观察吴茱萸次碱(Rut)对脑缺血再灌注(I/R)损伤小鼠的学习记忆能力的保护作用及作用机制。方法:采用改进的Himori法暂时性阻断两侧颈总动脉制备小鼠脑I/R损伤模型,采用跳台实验,观察腹腔注射吴茱萸次碱(84,252,504μ***-1)对脑I/R损伤小鼠的学习记忆能力的保护作用,并于缺血再灌注后48 h测定小鼠脑组织中一氧化氮(NO)的含量、一氧化氮合酶(NOS)和诱导性一氧化氮合酶(iNOS)的活性。结果:脑缺血再灌注后,小鼠学习记忆能力降低,脑组织中NO的含量,NOS和iNOS的活力升高。腹腔注射吴茱萸次碱可不同程度的改善脑I/R损伤造成的学习记忆能力障碍;吴茱萸次碱可降低NO的含量,NOS和iNOS的活力;与模型组比较,吴茱萸次碱(504μ***-1)可显著改善小鼠的学习记忆功能障碍,降低NO的含量,NOS和iNOS的活力(P<0.01)。结论:吴茱萸次碱对脑缺血再灌注(I/R)损伤小鼠的学习记忆能力具有保护作用,其机制可能与降低NO的含量,影响NOS和iNOS的活力有关。

关键词：吴茱萸次碱脑缺血-再灌注损伤学习记忆一氧化氮一氧化氮合酶

刚地弓形虫棒状体蛋白18及其作为基因工程疫苗候选分子研究进展

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动物医学进展 2017年第12期38卷 104-107页

作者：刘荣荣张晓磊张进顺河北北方学院病原生物学与免疫学研究所河北张家口075000

刚地弓形虫棒状体蛋白18(rhoptry protein18,ROP18)是由棒状体分泌的、属于棒状体蛋白2家族的一员,具有丝氨酸/苏氨酸激酶活性,在虫体入侵和毒力的发挥方面起着重要作用。论文就ROP18蛋白的结构、毒力和作用机制及其作为基因疫苗候选分... 详细信息

刚地弓形虫棒状体蛋白18(rhoptry protein18,ROP18)是由棒状体分泌的、属于棒状体蛋白2家族的一员,具有丝氨酸/苏氨酸激酶活性,在虫体入侵和毒力的发挥方面起着重要作用。论文就ROP18蛋白的结构、毒力和作用机制及其作为基因疫苗候选分子的研究现状进行综述。

关键词：刚地弓形虫棒状体蛋白18 毒力作用机制基因疫苗

Smad2/3与Smad7在大鼠化疗性卵巢早衰卵泡中的表达和意义

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解剖学报 2018年第4期49卷 497-505页

作者：丁艳陶然张静陈婧任君旭河北北方学院基础医学院组织学与胚胎学教研室河北张家口075000

目的探讨顺铂对大鼠卵巢结构和功能损伤的影响及其可能的分子机制。方法 3月龄SD雌性大鼠随机分为对照组(C组,5只)和化疗组(H组,5只)。H组给予每只大鼠腹腔注射顺铂2 mg/(kg.d),C组给予腹腔注射等体积生理盐水,连续注射7 d后检测大鼠卵... 详细信息

目的探讨顺铂对大鼠卵巢结构和功能损伤的影响及其可能的分子机制。方法 3月龄SD雌性大鼠随机分为对照组(C组,5只)和化疗组(H组,5只)。H组给予每只大鼠腹腔注射顺铂2 mg/(kg.d),C组给予腹腔注射等体积生理盐水,连续注射7 d后检测大鼠卵巢指数(卵巢湿重/体重);酶联免疫吸附法检测血清雌二醇(E2)和促卵泡刺激素(FSH)水平;苏木素-伊红染色观察卵泡发育并计数各级卵泡;免疫组织化学和Real-time PCR法检测各组Smad2、磷酸化Smad2(p-Smad2)、Smad3、磷酸化Smad3(p-Smad3)、Smad4和Smad7的蛋白和mRNA表达。结果与C组相比,H组大鼠卵巢体积减小,生长卵泡数明显减少(P<0.05),大鼠卵巢指数下降(P<0.05),血清中E2水平降低和FSH水平上升(P<0.05)。免疫组织化学和Real-time PCR结果显示,Smad2(p-Smad2)、Smad3(p-Smad3)、Smad4和Smad7蛋白在卵巢各级卵泡均有表达,H组Smad2蛋白和mRNA表达增加(P<0.05),Smad2磷酸化水平(p-Smad2)表达增高(P<0.05);Smad3、Smad4和Smad7蛋白和mRNA表达减少(P<0.05),p-Smad3表达降低(P<0.05)。结论顺铂诱导大鼠卵泡损伤并促进卵巢早衰,引起卵泡细胞内Smad2表达增加,Smad3、Smad7表达降低,Smad细胞内信号通路参与了化疗性卵巢损伤的过程。

关键词：顺铂卵巢早衰 Smad2(p-Smad2)/Smad3(p-Smad3) Smad4 Smad7 免疫组织化学实时定量聚合酶链反应大鼠

刚地弓形虫RH株ROP18基因真核表达载体的构建

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中国病原生物学杂志 2015年第11期10卷 994-998页

作者：郭玲玲张晓磊张进顺贾晓晖姜文静王春苗刘楠河北北方学院病原生物与免疫学研究所河北张家口075000

目的 PCR扩增刚地弓形虫(Toxplasma gondii)棒状体蛋白18(ROP18)基因,构建真核表达载体pVAX1-ROP18,并检验其在真核细胞中的表达。方法 ROP18基因和质粒pVAX1分别经HindⅢ和BamHⅠ双酶切,在T4连接酶作用下连接过夜,将连接产物转化至大... 详细信息

目的 PCR扩增刚地弓形虫(Toxplasma gondii)棒状体蛋白18(ROP18)基因,构建真核表达载体pVAX1-ROP18,并检验其在真核细胞中的表达。方法 ROP18基因和质粒pVAX1分别经HindⅢ和BamHⅠ双酶切,在T4连接酶作用下连接过夜,将连接产物转化至大肠埃希菌*** XL1-Blue感受态细胞,经菌落PCR、双酶切及测序正确的重组质粒pVAX1-ROP18转染至HeLa细胞内。试验设空白对照组和pVAX1空质粒对照。提取各组HeLa细胞的总RNA并将其逆转录成cDNA,分别进行管家基因β-actin和ROP18基因的RT-PCR扩增;采用Western blot法检测转染后各组细胞ROP18蛋白的表达情况。结果经0.8%琼脂糖凝胶电泳检测,ROP18基因的RT-PCR扩增片段大小为1 665bp,与预期值相符;ROP18基因重组质粒转化菌菌落PCR产物经0.8%琼脂糖凝胶电泳鉴定,大小为1 665bp,与预期值相符;双酶切重组质粒得到预期酶切片段;重组质粒的目的基因序列与弓形虫RH株ROP18基因(登录号AM075204.1)序列比对完全一致。脂质体转染后各组β-actin的RT-PCR扩增目的片段均为613bp,与预期值相符;pVAX1-ROP18重组质粒转染组的ROP18的RT-PCR扩增目的片段大小为1 665bp,而其他组无该目的基因条带。Western blot检测重组质粒pVAX1-ROP18能够在HeLa细胞内表达ROP18蛋白。结论成功构建了真核表达载体pVAX1-ROP18,且该重组质粒能够在真核细胞内表达ROP18蛋白。

关键词：刚地弓形虫棒状体蛋白18 重组质粒真核表达

日粮铬对热应激种公兔肝脏组织结构及血清抗氧化功能的影响

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中国兽医学报 2014年第3期34卷 517-520页

作者：程玉芳李海峰邢立强张晓丽张盼盼王鹏欢张学栋霍雪河北北方学院河北张家口075000

选用成年健康公獭兔72只，随机分为6组，每组12只，空白对照纽饲喂基础日粮，分别在基础日粮中添加0．2、0．4、0．6、0．8、1．0mg／kg铬量的酵母铬，作为试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组日粮，在热应激条件下（獭兔饲养于人工气候仓内，气... 详细信息

选用成年健康公獭兔72只，随机分为6组，每组12只，空白对照纽饲喂基础日粮，分别在基础日粮中添加0．2、0．4、0．6、0．8、1．0mg／kg铬量的酵母铬，作为试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组日粮，在热应激条件下（獭兔饲养于人工气候仓内，气温设定为29～33℃，24h循环变温，33℃维持4h）饲养60d。结果显示，热应激条件下，在獭兔基础日粮中添加一定量的酵母铬不仅能有效降低热应激对种公兔肝脏组织的损伤，还可显著提高血清中GSH—Px和SOD活性，降低MDA含量（P〈0．05或P〈0．01）。结果表明，夏季高温环境下，在种公兔基础日粮中添加0．6～1．0mg／kg铬量的酵母铬可通过增强机体的抗氧化功能，抑制机体内自由基和脂质过氧化物的产生，保护机体肝脏组织结构完整，维持机体正常生理功能。

关键词：铬热应激公兔肝脏组织抗氧化功能

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平欧杂种榛榛果发育动态及营养成分变化规律

江苏农业科学 2022年第5期50卷 135-141页

作者：张丽安文雅贾志国河北北方学院河北张家口075000

为明确榛果生长发育动态及营养价值,以生产上大范围推广的平欧杂种榛达维为试验材料,研究了平欧杂种榛果实发育动态及榛果营养成分的变化规律。结果表明,平欧杂种榛果实的纵径及侧径的生长发育显示为慢—快—慢的单“S”形的动态曲线;... 详细信息

为明确榛果生长发育动态及营养价值,以生产上大范围推广的平欧杂种榛达维为试验材料,研究了平欧杂种榛果实发育动态及榛果营养成分的变化规律。结果表明,平欧杂种榛果实的纵径及侧径的生长发育显示为慢—快—慢的单“S”形的动态曲线;带苞鲜质量、单果干质量、鲜质量及榛仁干质量、鲜质量均随榛果发育呈现出“S”形的生长发育曲线;榛果随采收期的延后,其可溶性蛋白含量呈现先增加再减少的趋势,可溶性糖含量表现连续下降趋势,淀粉含量则出现持续增加的变化规律;常见的天冬氨酸、甘氨酸、谷氨酸及非必需氨基酸总量随榛果发育出现先增加后下降的趋势,17种氨基酸总量表现出一直增加的趋势;含量较高的非必需氨基酸为谷氨酸、天冬氨酸、甘氨酸、丙氨酸和精氨酸;7月27日7种必需氨基酸含量从高到低依次为苯丙氨酸>缬氨酸>亮氨酸>赖氨酸>甲硫氨酸>异亮氨酸>苏氨酸;鲜味、甜味氨基酸含量随榛果发育呈现出先增加再下降的变化规律,转折点出现在7月27日至8月6日。结果表明,平欧杂种榛达维榛果生长发育规律为单“S”形动态曲线,榛果发育期内,在7月27日至8月6日期间,榛果可溶性蛋白含量较高,可溶性糖及淀粉含量适中,鲜味、甜味氨基酸含量最高,综合考虑此时期为鲜食榛果口感及营养价值最优的时期,正值榛子干果采收前15~20 d,因此,确定冀西北地区鲜食榛果最佳采摘时期为7月底至8月初,为平欧杂种榛在冀西北地区的栽培和鲜食榛子的开发利用奠定了理论基础。

关键词：平欧杂种榛生长发育动态曲线营养成分必需氨基酸

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标准化病人在中医内科学教学中的应用初探

河北北方学院学报（自然科学版） 2020年第10期36卷 51-52页

作者：朱峰张静张春晖张永鹏杨洁李仲平河北北方学院中医学院河北张家口075000

在中医内科学教学中应用标准化病人有利于解决理论课程与实践脱节的问题,可更好的培养学生临床实践能力,调动学习积极性,提高教学效果,增进学生医患沟通能力。

关键词：标准化病人中医内科学教学

刚地弓形虫ROP10-ROP18真核表达载体的构建与鉴定

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中国病原生物学杂志 2018年第6期13卷 612-616页

作者：刘荣荣张晓磊张进顺贾晓晖刘楠河北北方学院病原生物学与免疫学研究所河北张家口075000

目的构建刚地弓形虫棒状体蛋白10(ROP10)、棒状体蛋白18(ROP18)复合基因真核表达载体pVAXDROP10-ROP18,并在HeLa细胞内表达目的蛋白。方法设计ROP10、ROP18基因特异引物,采用RT-PCR扩增ROP10、ROP18基因并测序,将ROP10和ROP18基因分别... 详细信息

目的构建刚地弓形虫棒状体蛋白10(ROP10)、棒状体蛋白18(ROP18)复合基因真核表达载体pVAXDROP10-ROP18,并在HeLa细胞内表达目的蛋白。方法设计ROP10、ROP18基因特异引物,采用RT-PCR扩增ROP10、ROP18基因并测序,将ROP10和ROP18基因分别定向插入双启动子真核表达载体pVAXD的多克隆位点中,构建单价质粒pVAXD-ROP10和pVAXD-ROP18,然后将ROP18基因插入pVAXD-ROP10中构建双启动子真核表达载体pVAXD-ROP10-ROP18。经PCR和双酶切验证后将pVAXD-ROP10-ROP18转染至HeLa细胞内,提取细胞总RNA并逆转录为cDNA,以此为模板分别进行ROP10基因和ROP18基因的RT-PCR鉴定;采用间接免疫荧光试验(IFA)检验ROP10和ROP18蛋白表达情况。结果成功克隆ROP10、ROP18基因片段并构建了重组质粒pVAXDROP10-ROP18,测序、双酶切和PCR验证重组质粒构建正确。分别将3种重组质粒转染至HeLa细胞后经RT-PCR鉴定,pVAXD-ROP10-ROP18组可同时扩增出1 761bp(ROP10基因)和1 665bp(ROP18基因)2个片段,而pVAXDROP10组和pVAXD-ROP18组分别扩增出1 761bp和1 665bp的目的片段;IFA显示pVAXD-ROP10组和pVAXDROP18组均有绿色荧光,即分别表达ROP10和ROP18蛋白。结论成功构建重组质粒pVAXD-ROP10-ROP18、pVAXD-ROP10和pVAXD-ROP18质粒可在真核细胞中分别表达ROP10和ROP18两种蛋白。

关键词：刚地弓形虫棒状体蛋白10 棒状体蛋白18 重组质粒真核表达载体

基于“微课”的“翻转课堂”模式在《伤寒论》教学中的运用

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河北北方学院学报（自然科学版） 2018年第4期34卷 42-44页

作者：刘艳俊王莹李永民刘莹吴越卢年华河北北方学院河北张家口075000

在《伤寒论》教学中采用微课"翻转课堂"模式,能够更好地引导学生进行自主学习,培养浓厚的学习兴趣,增强学生在课堂教学中的参与度,提高学习效率。概述了基于微课的"翻转课堂"模式在《伤寒论》教学中的应用。

关键词：微课翻转课堂《伤寒论》教学