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SHG-44胶质瘤干细胞球的表型特点及其移植瘤病理特征

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中华肿瘤杂志 2013年第10期35卷 726-731页

作者：吴庭枫陈金明陈三送陈桂林韦永新谢学顺杜子威周幽心苏州大学附属第一医院神经外科 215006

目的研究SHG-44胶质瘤干细胞球的分子表型、致瘤能力及其移植瘤的病理学特征.方法应用神经干细胞培养基（NSCM）培养SHG-44胶质瘤细胞株,获取其胶质瘤干细胞球,纯化培养后行细胞免疫（ICC）荧光染色检测CD133、兔抗人巢蛋白（nestin）... 详细信息

目的研究SHG-44胶质瘤干细胞球的分子表型、致瘤能力及其移植瘤的病理学特征.方法应用神经干细胞培养基（NSCM）培养SHG-44胶质瘤细胞株,获取其胶质瘤干细胞球,纯化培养后行细胞免疫（ICC）荧光染色检测CD133、兔抗人巢蛋白（nestin）、A2B5、小鼠抗人波形蛋白（vimentin）、血管内皮细胞生长因子受体2（VEGFR-2）和IDH R132H的表达；含血清培养基诱导其分化,ICC检测CD133、nestin、vimentin、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、β-Ⅲ tubulin和半乳糖神经鞘氨醇酶（GalC）的表达情况；建立SHG-44胶质瘤干细胞球原位移植瘤模型,免疫组织化学检测CD133、nestin、VEGFR-2、GFAP、S-100和CD34的表达；比较SHG-44细胞原位模型和SHG-44干细胞球移植瘤的病理学特征.结果应用神经干细胞培养法能成功获取SHG-44胶质瘤干细胞球.第10代SHG-44胶质瘤干细胞球和SHG-44胶质瘤细胞的CD133阳性细胞比例分别为（71.63±5.92）％和（1.95±1.45）％.SHG-44胶质瘤干细胞球的nestin、vimentin、VEGFR-2和A2B5阳性细胞比例分别为（84.06±7.58）％、（29.11 ±3.44）％、（64.44±3.69）％和（14.08 ±2.19）％.SHG-44胶质瘤干细胞球中可见IDH R132H突变的细胞群.含血清培养基诱导分化后,CD133、nestin、vimentin、GFAP、β-Ⅲ tubulin和GalC阳性细胞比例分别为（1.89±1.27）％、（6.67±2.75）％、（93.75±2.95）％、（91.33±4.75）％、（82.36±4.02）％和（8.92±3.19）％.原位移植瘤组织中GFAP、S-100和VEGFR-2蛋白表达呈阳性,CD133和nestin蛋白表达呈阴性.极少量特异抗人CD34阳性细胞围绕成管状.SHG-44胶质瘤干细胞球颅内原位移植瘤局部浸润能力高于SHG-44胶质瘤细胞颅内原位移植瘤.结论神经干细胞培养法可成功从SHG-44胶质瘤细胞株中获取胶质瘤干细胞,属于CD133＋ A2B5-亚群,高表达VEGFR-2,具备自我更新及多向分化能力,可参与血管拟态的形成.

关键词：神经胶质瘤肿瘤干细胞细胞,培养的肿瘤移植裸鼠

功能性电刺激辅助步行设备对脑卒中足下垂患者步态时空参数的影响

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中国康复医学杂志 2013年第10期28卷 923-928页

作者：孟殿怀伊文超顾昭华王翔罗予励建安南京医科大学第一附属医院 210029

目的:观察应用功能性电刺激辅助步行设备(FES-AWD)对脑卒中足下垂患者步态时空参数的影响,为临床治疗提供理论依据。方法:9例脑卒中足下垂患者在常规康复治疗基础上,增加步态训练矫正仪辅助下的步行训练,每天2次,每次20min,每周5d,共4周... 详细信息

目的:观察应用功能性电刺激辅助步行设备(FES-AWD)对脑卒中足下垂患者步态时空参数的影响,为临床治疗提供理论依据。方法:9例脑卒中足下垂患者在常规康复治疗基础上,增加步态训练矫正仪辅助下的步行训练,每天2次,每次20min,每周5d,共4周;分别于治疗开始前、治疗1周后和治疗4周后利用三维步态分析系统分析患者佩戴步态训练矫正仪前后的步态时-空参数。结果:①与自由步行相比,佩戴步态训练矫正仪(关闭开关)对患者的步态时空参数无显著影响;②3次访视中,与自由步行相比,佩戴步态训练矫正仪(开启开关)均能显著提升足下垂患者的步态时空参数。结论:FES-AWD可以即刻改善脑卒中足下垂患者的步态,且可以排除心理影响,以及佩戴设备所产生的各种不利生理影响。

关键词：功能性电刺激辅助步行设备脑卒中足下垂步态时空参数

七氟烷后处理对大鼠离体心脏缺血／再灌注损伤心功能和线粒体的影响

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中国药理学通报 2008年第6期24卷 766-771页

作者：陈洪涛杨承祥李恒曾因明江苏省徐州医学院麻醉学重点实验室佛山市第一人民医院广东佛山528000

目的探讨七氟烷后处理对大鼠离体心脏缺血/再灌注的保护作用。方法48只SD大鼠,随机分为4组(n=12):假手术组(Sham),缺血/再灌注组(I/R)缺血后处理组(Post),七氟烷后处理组(Sevo)。采用Langendroff离体心脏灌注模型。除Sham组其余各组均... 详细信息

目的探讨七氟烷后处理对大鼠离体心脏缺血/再灌注的保护作用。方法48只SD大鼠,随机分为4组(n=12):假手术组(Sham),缺血/再灌注组(I/R)缺血后处理组(Post),七氟烷后处理组(Sevo)。采用Langendroff离体心脏灌注模型。除Sham组其余各组均平衡灌注30min,全心缺血30min,再灌注90min,Post组在再灌注即刻给予4个循环复灌20s/缺血20s,Sevo组在再灌注开始给予含1.5MAC(2.57V/V)七氟烷的K-H液灌注5min,再用K-H液冲洗10min,纪录平衡灌注末,再灌注30min、60min、90min时左室舒张末压(LVEDP)、左室发展压(LVDP)、左室内压上升最大速率(+dp/dt)、左室内压下降最大速率(-dp/dt)、心率(HR)、冠脉血流量(CF),再灌注90min时,计算心肌梗死面积百分比,电子显微镜观察线粒体的损伤程度,Westernblot半定量测定胞质和线粒体、细胞色素C的水平。结果平衡灌注末各组间心功能指标(基础值)差异未见统计学意义(P>0.05)。七氟烷后处理组和缺血后处理组可改善再灌注损伤心功能的各项指标(P<0.05)。复灌90min,Sevo组和Post组心肌梗死面积显著低于I/R组(P<0.05)。与I/R组比较,Sevo组和Post组胞质细胞色素C的含量明显减少(P<0.05),同时伴随线粒体细胞色素C的含量明显增多(P<0.05)。电子显微镜观察线粒体形态,Sevo组和Post组的损伤程度比I/R组明显减轻。结论七氟烷后处理对大鼠离体心脏再灌注损伤有明显的保护作用,其保护强度与缺血后处理相当,机制可能与减轻线粒体的损伤,抑制细胞色素C的释放有关系。

关键词：七氟烷后处理缺血/再灌注损伤线粒体细胞色素C

经颅多普勒监测评估疏血通对急性缺血性脑卒中患者颅内微栓子的干预作用

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中国临床康复 2004年第19期8卷 3806-3807页

作者：顾承志黄志东黄怀宇赵晓晖南通医学院第二附属医院神经内科江苏省南通市226001

目的:通过经颅多普勒(TCD)自动监测微栓子信号(microembolicsignal,MES),研究疏血通注射液对急性缺血性脑卒中患者颅内微栓子的干预作用。方法:入院即时予德国DWL-Embo-dop型TCD监测MES,并对MES自动分析与计数,分为阳性、阴性两大组,两... 详细信息

目的:通过经颅多普勒(TCD)自动监测微栓子信号(microembolicsignal,MES),研究疏血通注射液对急性缺血性脑卒中患者颅内微栓子的干预作用。方法:入院即时予德国DWL-Embo-dop型TCD监测MES,并对MES自动分析与计数,分为阳性、阴性两大组,两组再各随机分为常规治疗组、疏血通注射液治疗组,并分别于第2,5,7,10,15,20天监测TCD。结果:入院MES阳性组中,疏血通注射液治疗组20例,至第15天有19例MES消失,而对照组18例至第20天时仅有7例MES消失,两组MES消失的概率比较,差异有非常显著性意义(χ2=16.35,P<0.01);入院MES阴性组中,疏血通注射液治疗组至第20天有13例次出现MES,而对照组至第20天有32例次出现MES,两组MES出现的概率差异有显著性意义(χ2=13.08,P<0.05);疏血通注射液的抑栓作用在使用第5天即出现,于第7天达高峰,至第10,15天继续作用;但停药5d后有MES复现的现象。结论:疏血通注射液对急性缺血性脑卒中的微栓子具有预防和治疗作用;TCD栓子自动监测有助于及时发现微栓子、评估药物疗效。

关键词：经颅多普勒疏血通急性缺血性脑卒中颅内微栓子干预作用中医药疗法

p53基因治疗晚期肝癌的临床观察及生物学监测

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中华医学杂志 2010年第31期90卷 2182-2186页

作者：陈世晞徐卫东尹国文席玮陈骏徐清宇马国建江苏省肿瘤医院介入科南京210009

目的观察经皮下药盒动脉输注p53基因治疗晚期肝癌的疗效及生物学改变.方法收集2006年6月至2009年6月江苏省肿瘤医院介入科晚期肝癌患者48例,分为治疗组30例,一般化疗组（对照组）18例.经右髂外动脉人路皮下埋植药盒系统,根据造影表现... 详细信息

目的观察经皮下药盒动脉输注p53基因治疗晚期肝癌的疗效及生物学改变.方法收集2006年6月至2009年6月江苏省肿瘤医院介入科晚期肝癌患者48例,分为治疗组30例,一般化疗组（对照组）18例.经右髂外动脉人路皮下埋植药盒系统,根据造影表现决定灌注药物的靶动脉.治疗组在靶动脉注入p53基因1012VP（今又生,深圳赛百诺公司）,加羟基喜树碱20 mg,每周1次,连用3周为1疗程.对照组给予羟基喜树碱20 mg靶动脉灌注.观察治疗前后患者的甲胎蛋白（AFP）、卡氏评分、病灶的变化（RECIST标准）和生存期等,并采用流式细胞技术、人体微核实验检测治疗组患者介入治疗前后外周血中突变型p53表达及自发微核形成.结果治疗组接受1～8个疗程的治疗,AFP,KPS治疗前后比较,差异有统计学意义（P〈0.05）.而对照组治疗前后比较差异无统计学意义（P＞0.05）.1个月后,生存率为（治疗组/对照组）96.6%/94.4%,病灶变化根据RECIST标准,两组之间差异有统计学意义（P〈0.05）.3个月后,生存率为（治疗组/对照组）83.3%/55.6%,病灶变化两组之间差异有统计学意义（P〈0.05）.6个月后,生存率为50.0%/11.1%,病灶变化两组之间差异有统计学意义（P〈0.05＝.9个月后,生存率为23.3%/0%,病灶变化两组之间差异有统计学意义（P〈0.05＝.12个月后,生存率为6.67%/0%,病灶变化两组之间差异有统计学意义（P〈0.05）.p53平均表达率治疗前后比较,治疗组差异有统计学意义（P〈0.01）.结论经肝动脉序贯输注p53基因治疗晚期肝癌是安全的,可以适当延长患者生存期.生物学研究对治疗剂量选择,治疗效果的判断将起到积极的指导和监测作用.

关键词：放射学介入性肝肿瘤基因 p53

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白及多糖对人脐静脉内皮细胞黏附生长的影响

中药材 2005年第11期28卷 1006-1008页

作者：孙剑涛王春明张峻峰南京大学医学院附属鼓楼医院神经外科南京210008 南京大学生命科学院医药生物技术国家重点实验室南京210093

目的:观察白及多糖对人脐静脉内皮细胞(Human, umbilical venous endothelial cells, HUVECS)黏附生长的作用.方法:提取白及多糖制备白及多糖水溶液,用含不同浓度白及多糖的培养液培养人脐静脉内皮细胞并设置空白组对照.结果:浓度为60～... 详细信息

目的:观察白及多糖对人脐静脉内皮细胞(Human, umbilical venous endothelial cells, HUVECS)黏附生长的作用.方法:提取白及多糖制备白及多糖水溶液,用含不同浓度白及多糖的培养液培养人脐静脉内皮细胞并设置空白组对照.结果:浓度为60～120 μg/ml的白及多糖组细胞黏附速度比空白对照组快,贴壁生长的细胞数量多于空白对照.结论:白及多糖在体外具有促进内皮细胞生长的功能.

关键词：白及多糖人脐静脉内皮细胞

有效抑制小胶质细胞上TLR4表达的siRNA筛选及转染复合物细胞毒性的检测

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中国药理学通报 2010年第4期26卷 457-465页

作者：刘思兰杨建平王丽娜刘磊李彩芳任春光周静李伟江淼马珍妮邱桥成苏州大学附属第一医院麻醉科江苏苏州215006

目的筛选有效抑制小胶质细胞上TLR4(Toll-like receptor 4)表达的小干扰RNA(simall interference RNA,siR-NA)序列,并检测转染复合物的细胞毒性。方法设计并合成针对TLR4的siRNA4条(siRNA312,siRNA439,siRNA1495,siRNA2062)及1条与TLR4基因无同源性的带绿色荧光标记的阴性对照siRNA:在LipofectamineTM 2000介导下转染小胶质细胞。用RT-PCR方法测定干扰后小胶质细胞上TLR4mRNA表达,Western blot方法测定干扰后TLR4蛋白表达,比较其抑制率,筛选出有效抑制靶基因表达的siRNA。采用MTT法检测转染复合物的细胞毒性。结果①siRNA(40nmol·L-1)和LipofectamineTM 2000(1μl)有较高的转染效率;②与阴性对照组相比,TLR4 siRNA(40nmol·L-1)干扰小胶质细胞24h后TLR4 mRNA的相对表达量降低,分别为:85%(siRNA439)、73%(siRNA312)、67%(siRNA1495)和33%(siRNA2062)。③siRNA439干扰小胶质细胞48h后TLR4蛋白表达最低(P<0.01)。④LipofectamineTM 20001μl复合低于40nmol·L-1的siRNA的各组细胞存活率均在85%以上。结论①siRNA439对小胶质细胞上TLR4表达的抑制效果最大。②siRNA浓度40nmol·L-1,LipofectamineTM 2000浓度1μl,细胞毒性很低,适合转染。

关键词：小胶质细胞 Toll-like receptor 4 小干扰RNA 筛选转染复合物细胞毒性

脑梗死动脉粥样斑块及其稳定性与细胞间黏附分子-1的相关性研究

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中国临床医学 2005年第4期12卷 569-571页

作者：赵晓晖顾承志黄怀宇周永江苏省南通医学院第二附属医院神经内科南通226001

目的:探讨脑梗死动脉粥样硬化(AS)斑块及其稳定性与细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的相关性。方法:脑梗死患者87例,根据入院颈动脉彩超检查情况分为两大组:AS斑块阴性组及阳性组,后组又根据经颅多普勒超声(TCD)微栓子信号(MES)检测情况分为ME... 详细信息

目的:探讨脑梗死动脉粥样硬化(AS)斑块及其稳定性与细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的相关性。方法:脑梗死患者87例,根据入院颈动脉彩超检查情况分为两大组:AS斑块阴性组及阳性组,后组又根据经颅多普勒超声(TCD)微栓子信号(MES)检测情况分为MES阴性组和MES阳性组。比较3组入院时可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)水平,并对MES阳性组予低分子肝素钠(LWMH)等干预治疗,分别于治疗前,治疗后1周、2周、4周检测血清sICAM-1浓度,结果:各组sICAM-1人院时均偏高,AS斑块阳性的两组明显高于阴性组(P<0.01),且MES阳性组较阴性组也有明显增高(P<0.05);MES阳性组干预治疗后sICAM-1呈下降趋势,于第2周达低峰,但第4周又有上升。结论:AS斑块的形成及破裂与ICAM-1密切相关,sICAM-1可作为脑梗死病情变化的监测指标,在老年人群中尝试常规抗炎治疗为防治脑梗死拓宽了思路。

关键词：脑梗死动脉粥样硬化斑块微栓子信号细胞间黏附分子-1

江苏省成年人代谢综合征流行特征及其不同诊断标准的对比研究

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吉林大学学报（医学版） 2015年第1期41卷 181-189页

作者：陶然武鸣覃玉苏健张永青吕淑荣潘晓群杨婕周金意江苏省疾病预防控制中心慢性非传染病防制所江苏南京210009

目的：了解江苏省成年人代谢综合征（MS）的流行特征,比较5种不同MS诊断标准应用的一致性和差异,探讨适宜成年人预测MS其他组分及危险因素聚集能力相对最好的最佳腰围或体质量指数（BMI）切点。方法：2010年在江苏省采用多阶段整群随机... 详细信息

目的：了解江苏省成年人代谢综合征（MS）的流行特征,比较5种不同MS诊断标准应用的一致性和差异,探讨适宜成年人预测MS其他组分及危险因素聚集能力相对最好的最佳腰围或体质量指数（BMI）切点。方法：2010年在江苏省采用多阶段整群随机抽样方法抽取18岁及以上常住居民8400人,对调查对象进行体检和面对面问卷调查获取健康信息,分别采用2004年中华医学会糖尿病学分会（CDS）、2005年美国胆固醇教育计划成人治疗方案第三次报告（NCEP-ATPⅢ）、2005年国际糖尿病联盟（IDF）、2007年中国成人血脂异常防治指南制订联合委员会（JCDCG）和2009年国际联合暂定声明（JIS）标准诊断MS,描述各种标准MS的流行特征。分析不同标准对MS异常组分及危险因素聚集的检出情况,计算不同标准的符合率和Kappa值,比较MS不同诊断标准的一致性和差异。用受试者工作特征曲线（ROC）分析腰围及BMI切点预测MS各异常组分及危险因素聚集情况。结果：调查对象中CDS、ATPⅢ、IDF、JCDCG和JIS标准诊断的MS粗患病率（标化患病率）分别为18.4%（15.1%）、37.3%（31.0%）、29.5%（24.6%）、22.8%（19.4%）和38.9%（32.7%）。各种标准诊断的MS患病率在不同性别、年龄、文化程度、职业和父母是否患病高血压及糖尿病组中的分布比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。采用CDS、ATPⅢ、IDF、JCDCG和JIS标准诊断为MS者中存在3种及3种以上危险因素聚集的比例分别为97.2%、96.7%、97.2%、98.7%和100.0%。ATPⅢ与JIS、ATPⅢ与IDF和IDF与JIS的符合率（Kappa值）分别为95.93%（0.91）、91.91%（0.82）和88.89%（0.76）,其他诊断标准的两两符合率为78%-82%,Kappa值为0.40-0.74。腰围切点男/女为85/80cm时,预测危险因素聚集的灵敏度、特异度和ROC曲线距离分别为88.29%、74.54%、0.28和85.97%、70.07%、0.33。结论：江苏省成年人MS患病率水平较高。CDS、ATPⅢ、IDF、JCDCG和JIS诊断标准在江苏省成年人群的适用性存在较大差异,ATPⅢ与JIS标准的一致性最好。适宜江苏省成年人群的最佳腰围切点男/女为85/80cm。

关键词：代谢综合征诊断标准患病率一致性监测