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马铃薯Y病毒组两病毒辅助成分的纯化及其传毒专化性的研究

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中国病毒学 1995年第3期10卷 269-270页

作者：吴云峰魏宁生植物病虫害生物学国家重点实验室中国农业科学院植保所西北农业大学植物保护系西北农业大学植保系

马铃薯Ｙ病毒组两病毒辅助成分的纯化及其传毒专化性的研究吴云峰（植物病虫害生物学国家重点实验室，中国农业科学院植保所，北京１０００９４）魏宁生（西北农业大学植物保护系，陕西杨陵７１２１００）关键词马铃薯Ｙ病毒组，辅助成... 详细信息

马铃薯Ｙ病毒组两病毒辅助成分的纯化及其传毒专化性的研究吴云峰（植物病虫害生物学国家重点实验室，中国农业科学院植保所，北京１０００９４）魏宁生（西北农业大学植物保护系，陕西杨陵７１２１００）关键词马铃薯Ｙ病毒组，辅助成分，蚜虫传毒专化性自从１９７１年Ｋ...

关键词：马铃薯Y病毒组辅助成分蚜虫传毒专化性

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水稻与病原物互作中植物激素功能的研究进展

生物技术通报 2018年第2期34卷 74-86页

作者：旷永洁柳浪严芳任斌闫大琦张大伟林宏辉周焕斌中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室北京100193 四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室成都610065

水稻是我国最主要的粮食作物,在国民经济和生活中占据重要地位。在水稻的周年生产中,病虫害的控制最为关键。因此,了解水稻与病虫害的互作机理,对水稻的育种和生产具有重要指导意义。植物激素是在植物生命活动中必不可少,调控植物生长... 详细信息

水稻是我国最主要的粮食作物,在国民经济和生活中占据重要地位。在水稻的周年生产中,病虫害的控制最为关键。因此,了解水稻与病虫害的互作机理,对水稻的育种和生产具有重要指导意义。植物激素是在植物生命活动中必不可少,调控植物生长、发育、衰老等主要生理过程的一类有机分子。近年来,大量实验证据表明,在植物与病原物互作过程中,植物内源激素也发挥着重要作用。随着水稻抗病和感病的机理解析越来越多,有关植物激素所扮演的重要功能角色也愈发清晰。其中,水杨酸、茉莉酸和乙烯研究最为广泛,它们之间的相互拮抗或协同效应决定了植物对病原物的防御反应强度。其它激素如:油菜素内酯、赤霉素、生长素、细胞分裂素、脱落酸等,单独或者通过调控水杨酸、茉莉酸和乙烯信号分子转导网络也参与植物与病原物互作过程。本研究综述了各大植物激素在水稻抗病或感病中作用,并对其未来研究进行展望,以便为水稻病害的防治提供理论依据。

关键词：水稻植物激素抗病反应调控机制相互作用

D151阳离子交换树脂吸附Zwittermicin A的热力学

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应用化学 2012年第10期29卷 1177-1181页

作者：王苗苗刘峥赖丽燕郝再彬桂林理工大学化学与生物工程学院桂林541004 植物病虫害生物学国家重点实验室北京100193

采用静态吸附法研究了D151阳离子交换树脂对Zwittermicin A的吸附过程的热力学性质。结果表明,在温度288、298和318 K和研究的浓度范围内,Zwittermicin A在D151阳离子交换树脂上吸附等温线均符合Freundlich吸附等温线方程。热力学参数表... 详细信息

采用静态吸附法研究了D151阳离子交换树脂对Zwittermicin A的吸附过程的热力学性质。结果表明,在温度288、298和318 K和研究的浓度范围内,Zwittermicin A在D151阳离子交换树脂上吸附等温线均符合Freundlich吸附等温线方程。热力学参数表明,吸附过程是自发的、放热的优惠型吸附。

关键词： Zwittermicin A,阳离子交换树脂,热力学特性

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棉铃虫普通气味结合蛋白Ⅱ基因的表达及鉴定

昆虫学报 2002年第3期45卷 285-289页

作者：王桂荣郭予元吴孔明中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室北京100094

通过PCR扩增的方法获得了棉铃虫普通气味结合蛋白Ⅱ (GOBP2 Harm)基因成熟蛋白阅读框序列 ,构建了GOBP2 Harm原核表达载体pGEX GOBP2 Harm ,并成功地在大肠杆菌中进行了表达。SDS PAGE分析表明 :大部分GOBP2 Harm重组蛋白形成不溶... 详细信息

通过PCR扩增的方法获得了棉铃虫普通气味结合蛋白Ⅱ (GOBP2 Harm)基因成熟蛋白阅读框序列 ,构建了GOBP2 Harm原核表达载体pGEX GOBP2 Harm ,并成功地在大肠杆菌中进行了表达。SDS PAGE分析表明 :大部分GOBP2 Harm重组蛋白形成不溶性的包涵体 ,超声波破碎大肠杆菌细胞后 ,在上清液中能检测到少量的可溶性GOBP2 Harm蛋白。为了获得大量纯化的可溶性目的蛋白 ,我们对包涵体进行了溶解和重折叠 ,并通过亲合层析法进行了纯化。纯化产物能与多音天蚕(Antheraeapolyphemus)GOBP抗血清发生交叉反应 ,证实表达产物属于昆虫普通气味结合蛋白。

关键词：棉铃虫普通气味结合蛋白Ⅱ PCR扩增原核表达重组蛋白亲合层析

美国西北部59个小麦品种(系)抗条锈病基因分子检测及对中国条锈菌系抗性鉴定

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中国农业科学 2010年第6期43卷 1147-1155页

作者：白玉路孙权张春宇崔娜林凤徐世昌章振羽高阳徐晓丹沈阳农业大学生物科学技术学院中国农业科学院植物保护研究所/植物病虫害生物学国家重点实验室四川省农业科学院植物保护研究所

【目的】了解59份美国西北部小麦品种(系)对中国当前条锈菌流行小种的抗性水平,分析其抗病基因的存在情况,为培育中国抗条锈病新品种提供资源和依据。【方法】选用中国小麦条锈菌优势小种条中31号、条中32号和条中33号对大部分具有高温... 详细信息

【目的】了解59份美国西北部小麦品种(系)对中国当前条锈菌流行小种的抗性水平,分析其抗病基因的存在情况,为培育中国抗条锈病新品种提供资源和依据。【方法】选用中国小麦条锈菌优势小种条中31号、条中32号和条中33号对大部分具有高温成株抗性的美国59份小麦品种(系)苗期及成株期进行抗性接种鉴定,利用与当前有效的全生育期抗性基因Yr10、Yr15、成株抗性基因Yr18、高温成株抗性基因Yr39紧密连锁的分子标记对供试材料进行分子检测。【结果】抗性鉴定表明,Expresso、02W50076、ACS52610、WA008012、WA008018等5份材料苗期与成株期对条中31号、条中32号和条中33号混合菌均表现为抗病,属于全生育期抗病品种。33份材料苗期表现感病而成株期表现抗病,属于成株期抗病品种。分子检测发现59份材料均不含有Yr10;含有Yr15、Yr18和Yr39的材料分别为12、33和29份,占20%、56%和49%。【结论】Yr18、Yr39在美国西北部小麦品(系)中的分布较普遍,并且大部分可以抵抗中国当前流行的条锈菌生理小种,可应用这些抗性材料配制中国小麦抗条锈病新品种。

关键词：美国小麦小麦条锈病分子标记抗性鉴定

不同抗病性小麦品种上白粉菌吸器发育超微结构研究

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同方期刊数据库

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菌物系统 1997年第2期16卷 122-127页

作者：胡东维李振岐康振生浙江农业大学生物技术研究所杭州华家池310029 西北农业大学植保系陕西杨陵712100

利用电镜技术对不同抗病性小麦品种上白粉菌吸器发育及相应寄主细胞变化的超微结构进行了研究，并对吸器的Ca2+－ATP酶活性及几丁质的分布进行了细胞化学定位分析。结果表明，小麦白粉菌（***）成熟吸器在内部结构上类似一个代谢活跃的... 详细信息

利用电镜技术对不同抗病性小麦品种上白粉菌吸器发育及相应寄主细胞变化的超微结构进行了研究，并对吸器的Ca2+－ATP酶活性及几丁质的分布进行了细胞化学定位分析。结果表明，小麦白粉菌（***）成熟吸器在内部结构上类似一个代谢活跃的菌丝细胞，有大量的线粒体和多聚核糖体；Ca2+－ATP酶主要被定位在寄主质膜及病菌核膜上；随吸器的不断发育，吸器外膜厚度增加，同时Ca2+-ATP酶活性增强。几丁质均匀地分布在吸器壁上，其含量随吸器的成熟而增加。在不同抗病性小麦品种上，吸器细胞核最先退化，然后是线粒体的液泡化和多聚核糖体的解聚。中抗寄主细胞内的吸器普遍退化较早，相当一部分在吸器中心体阶段已解体。此外，高感寄主表皮细胞与叶肉细胞之间有发达的胞间连丝;而且在吸器形成后，能比中抗寄主细胞更快地增殖和聚积大量与能量代谢、物质合成及分泌活动有关的细胞器。

关键词：小麦白粉菌吸器超微结构

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新疆棉花枯萎病菌群体结构的研究

植物病理学报 2001年第2期31卷 102-109页

作者：王雪薇侯峰孙文姬冯洁牟永柯新疆农业大学农学院中国农科院植保所北京100094 新疆巴州农科所库尔勒841000

采自新疆 2 4个不同植棉县 (市或团场 )的 37株棉花枯萎病菌代表菌株 ,经人工接种于国际通用鉴别寄主 ,致病性反应均表现为典型的 7号生理小种特征。RAPD分析结果也显示出这 37个供试菌株与 7号小种各对照菌株间基因组 DNA的指纹图谱高... 详细信息

采自新疆 2 4个不同植棉县 (市或团场 )的 37株棉花枯萎病菌代表菌株 ,经人工接种于国际通用鉴别寄主 ,致病性反应均表现为典型的 7号生理小种特征。RAPD分析结果也显示出这 37个供试菌株与 7号小种各对照菌株间基因组 DNA的指纹图谱高度相似 ,属同一遗传相似组 ,而与 3号和 8号小种的对照菌株间遗传差异较大 ,亲缘关系较远 ,即 7号生理小种是组成目前新疆棉花枯萎病菌群体的优势小种 ,而原分布于新疆吐鲁番等地的 3号小种在本研究中未被发现。结合部分自选辅助鉴别寄主对其中 18个菌株进行的致病力分化研究表明 ,在 7号小种内部还存在着侵染力的分化。

关键词：棉花枯萎病菌群体结构生理小种随机扩增多态性DNA

光照等条件对G03菌株繁殖及其ZwA合成的影响

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桂林理工大学学报 2018年第3期38卷 537-541页

作者：陈圣怡李霞刘建国温心遥程桂阳郝再彬桂林理工大学广西高校食品安全与检测重点实验室广西桂林541004 桂林理工大学化学与生物工程学院广西桂林541004

以苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt) G03菌株为对象,研究光照、碳源、氮源、无机盐、培养基初始pH和培养温度等条件对该菌株繁殖及其代谢产物杀虫晶体蛋白和Zwittermicin A(ZwA)活性的影响。结果表明,G03菌株发酵培养基的最... 详细信息

以苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt) G03菌株为对象,研究光照、碳源、氮源、无机盐、培养基初始pH和培养温度等条件对该菌株繁殖及其代谢产物杀虫晶体蛋白和Zwittermicin A(ZwA)活性的影响。结果表明,G03菌株发酵培养基的最适碳源为葡萄糖,最适氮源为酵母粉,最适无机盐为氯化钠,最适培养温度为30℃,最适的初始pH为7～7. 5; ZwA的最适合成条件与之相同,但是其最适初始pH为8. 0;菌株在4 000lux下发酵40 h时繁殖量最大;杀虫晶体蛋白积累量在4 000 lux下发酵55 h时最大;黑暗条件下ZwA的积累量较2 000 lux光强下的大。

关键词：苏云金芽胞杆菌(Bt) G03菌株光照强度杀虫晶体蛋白 ZwittermicinA(ZwA)

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表面展示棉铃虫钙粘蛋白基因细胞系的建立

农业生物技术学报 2016年第5期24卷 755-763页

作者：颜晓苏蕊郑桂玲梁革梅张杰万方浩李长友青岛农业大学农学与植物保护学院/山东省植物病虫害综合防控重点实验室中国农业科学院植物保护研究所/植物病虫害生物学国家重点实验室

为研究苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)杀虫晶体蛋白与其受体钙粘蛋白的相互作用,本研究利用苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus,Ac MNPV)囊膜蛋白GP64细胞膜锚定的特点,将172 bp的N端信号肽(GP64 signal peptide,gp64sp)和135 bp的C端膜锚定区域(GP64 C-terminal transmembrane domain,gp64ctd)连接,并在中间添加了一段含有6个酶切位点的序列,再连接到表达载体p IZ/V5-His,成功构建了一个使外源基因在细胞膜上表达的重组载体p IZ/V5-gp64。将扩增的3 882 bp的棉铃虫钙粘蛋白(Helicoverpa armigera cadherin,HaCAD)基因重复区和近膜区片段与重组载体p IZ/V5-gp64进行酶切和连接,构建重组载体p IZ/V5-gp64-HaCAD,将其转染棉铃虫细胞系Ha-E-1,通过筛选、细胞克隆和PCR验证,获得了重组钙粘蛋白基因的转基因细胞系Ha-T-CAD。免疫荧光法检测证实,钙粘蛋白在转基因细胞系Ha-T-CAD中成功表达。Western blot检测发现,在Ha-T-CAD细胞的膜蛋白中有140 k D大小的钙粘蛋白。转基因细胞系Ha-T-CAD的构建将为Bt杀虫晶体蛋白作用机理以及昆虫对Bt毒素的抗性机制研究提供基础资料。

关键词：钙粘蛋白棉铃虫转基因细胞系 GP64蛋白蛋白表达