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气单胞菌属低温淀粉酶基因改造与原核表达

新疆农业科学 2024年第2期61卷 479-484页

作者：楚敏史应武顾美英杨红梅霍向东张志东新疆农业科学院微生物应用研究所/新疆特殊环境微生物实验室乌鲁木齐830091

【目的】获取低温淀粉酶基因,分析其相关功能,为工业生产上的应用提供参考。【方法】以气单胞菌(Aeromonas)LA77为出发菌株克隆低温α-淀粉酶基因,以BL-21(DE3)为宿主菌进行克隆。分析其它已知气单胞菌属低温α-淀粉酶基因同源性,设计... 详细信息

【目的】获取低温淀粉酶基因,分析其相关功能,为工业生产上的应用提供参考。【方法】以气单胞菌(Aeromonas)LA77为出发菌株克隆低温α-淀粉酶基因,以BL-21(DE3)为宿主菌进行克隆。分析其它已知气单胞菌属低温α-淀粉酶基因同源性,设计特异引物,PCR扩增获得C13片段,将其克隆到pMAL-2X,转化到BL-21(DE3)中,筛选蓝白斑,验证PCR及EcoRⅠ和HindⅢ的双酶切,获得高效表达生物工程菌株pMAL-2X-C13。设计定点突变引物,以pMAL-2X-C13为模板,获得低温淀粉酶基因突变株三株C19、C29、C43。【结果】表达蛋白的分子大小为114kD,突变菌株C19蛋白表达量均高于pMAL-2X-C13。【结论】低温淀粉酶基因突变株C19比原始菌株pMAL-2X-C13淀粉酶基因蛋白表达量更高。

关键词：气单胞菌属 α-低温淀粉酶基因改造原核表达

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原驼乳中乳酸菌的分离筛选及特性分析

新疆农业科学 2024年第4期61卷 1021-1028页

作者：孙建李雪楚敏顾美英艾尼江·尔斯满朱静何齐谭慧林张志东新疆农业科学院微生物应用研究所/新疆特殊环境微生物实验室乌鲁木齐830091 新疆农业大学食品科学与药学学院乌鲁木齐830052 阿克苏地区食品安全检测中心新疆阿克苏843006

【目的】挖掘和获得原驼乳中的乳酸菌资源。【方法】采集新疆乌鲁木齐县近效南山周边原驼乳样品,采用平板稀释法分离菌株,观察比对16S rRNA基因序列测序和菌株形态学特性,分析菌株分类学地位,并检测菌株溶血性和有害代谢物质等食用安全... 详细信息

【目的】挖掘和获得原驼乳中的乳酸菌资源。【方法】采集新疆乌鲁木齐县近效南山周边原驼乳样品,采用平板稀释法分离菌株,观察比对16S rRNA基因序列测序和菌株形态学特性,分析菌株分类学地位,并检测菌株溶血性和有害代谢物质等食用安全性。【结果】获得29株乳酸菌,经鉴定其归属于Leuconostoc、Lentilactobacillus两个属的4个种;菌株均可耐受0.5%胆盐,5%NaCl,且具有较好耐高温、牛奶胨化、抗氧化和抑制细菌等特性;所有菌株均无溶血现象,不产生硝基还原酶;除T12外,均利用氨基酸不产生物胺。【结论】从原驼乳中获得的乳酸菌具有良好的发酵特性和食品安全性。

关键词：原驼乳乳酸菌分离筛选

黑果枸杞不同组织内生真菌群落组成及生态功能分析

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菌物学报 2022年第8期41卷 1254-1267页

作者：顾美英张志东唐光木古丽尼沙·沙依木张丽娟朱静唐琦勇楚敏艾尼江·尔斯满欧提库尔·玛合木提徐万里新疆农业科学院微生物应用研究所新疆特殊环境微生物实验室新疆乌鲁木齐830091 新疆农业科学院土壤肥料与农业节水研究所新疆乌鲁木齐830091 农业农村部盐碱土改良与利用(干旱半干旱区盐碱地)重点实验室新疆乌鲁木齐830091

探究了新疆盐生植物黑果枸杞不同组织中内生真菌群落的组成及多样性,为深入研究盐碱、干旱等环境下内生真菌与宿主的互作机制,筛选和开发促生、防病和抗逆等功能的有益内生真菌资源提供科学依据。利用ITS高通量测序技术比较黑果枸杞不... 详细信息

探究了新疆盐生植物黑果枸杞不同组织中内生真菌群落的组成及多样性,为深入研究盐碱、干旱等环境下内生真菌与宿主的互作机制,筛选和开发促生、防病和抗逆等功能的有益内生真菌资源提供科学依据。利用ITS高通量测序技术比较黑果枸杞不同组织真菌群落组成及差异,并采用FUNGuild数据库预测真菌群落生态功能。测序共获得高质量内生真菌序列354058条,涉及291个OTUs,分属于9门、19纲、34目、50科、60属。α多样性指数分析表明,根、果中真菌群落多样性和丰富度程度较高,叶居中,花的多样性最低,茎的丰富度最低。对黑果枸杞内生真菌群落组成和优势菌群的分析表明,子囊菌门为优势菌门,花、叶、果、茎和根中相对丰度分别为86.85%、72.36%、75.97%、84.44%和85.02%。链格孢属为黑果枸杞植株中的核心属,不同组织中均有分布,在花、叶、果、茎和根中占比分别为85.41%、69.79%、47.07%、79.94%和36.97%。较优势的菌尚有枝孢属、枝顶孢属、新凸轮孢菌属、茎点霉属和楔孢黑粉菌属等真菌。这些菌多具有促生、抗逆等特性,在宿主对盐碱、干旱等极端环境的适应性方面有着潜在功能。各组织独有属的相对丰度均未超过1%。共有菌和独有菌在不同组织中的组成和相对丰度差异较大。经FUNGuild软件平台解析显示,黑果枸杞中病理-腐生-共生营养型的相对丰度最高,在花、叶、果、茎和根中分别为85.41%、69.84%、47.24%、79.98%和37.09%。果和叶中含多种相对丰度≥1%的条件致病菌,而根中腐生真菌种类较多。黑果枸杞中蕴含着功能丰富的内生真菌菌群,在不同组织中的组成及其生态功能差异较大,同时还含有大量未鉴定出种属和未定义的功能菌群,这些可为黑果枸杞功能菌群发掘提供数据参考。

关键词：植物内生真菌生态位群落多样性 ITS rDNA FUNGuild

覆膜年限棉田土壤邻苯二甲酸酯含量分布及其对土壤细菌群落结构的影响--以准噶尔盆地荒漠-绿洲交错带为例

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干旱区资源与环境 2023年第8期37卷 128-136页

作者：易鸳鸯刘婉琴张志东李雪王慧楠张伟新疆师范大学生命科学学院乌鲁木齐830054 新疆农业科学院微生物应用研究所/新疆特殊环境微生物重点实验室乌鲁木齐830091 新疆大学生命科学与技术学院乌鲁木齐830047 新疆农业大学食品科学与药学学院乌鲁木齐830052

为探究长期覆膜棉田土壤邻苯二甲酸酯(Phthalic Acid Esters,PAEs)含量及其对土壤微生物群落多样性的影响,以新疆准噶尔盆地南缘荒漠-绿洲交错带五家渠蔡家湖垦区0、5、10、15、20、25、30年覆膜年限棉田土壤为研究对象,分别采用GC-MS和... 详细信息

为探究长期覆膜棉田土壤邻苯二甲酸酯(Phthalic Acid Esters,PAEs)含量及其对土壤微生物群落多样性的影响,以新疆准噶尔盆地南缘荒漠-绿洲交错带五家渠蔡家湖垦区0、5、10、15、20、25、30年覆膜年限棉田土壤为研究对象,分别采用GC-MS和Illumina-MiSeq高通量测序技术,对不同覆膜年限棉田土壤PAEs含量分布和土壤细菌群落组成及多样性进行分析。结果表明,长期覆膜棉田土壤中PAEs的分布随着覆膜年限的增加呈现先增长后降低的趋势。不同覆膜年限棉田土壤中微生物群落多样性存在明显差异,其中,覆膜棉田土壤中微生物多样性明显高于未覆膜对照样本,覆膜棉田土壤中15年地块最低。各覆膜年限棉田土壤中优势菌门均为放线菌门(Actinobacteriota)、变形菌门(Proteobacteria)。目水平上,微球菌目(Micrococcales)、假诺卡氏菌目(Pseudonocardiales)、土壤红杆菌目(Solirubrobacterales)是各样品中的优势目,其结构形成主要驱动因子是DnOP和土壤有机质。各覆膜样本中优势属为Gitt-GS-137、鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas)、KD4-96、Bacillus和Devosia,相对丰度之和分别占细菌总量的90.58%、91.06%、93.50%、91.24%、96.18%,有10个属的群落丰度与总PAEs或各单体存在明显相关,其中,剑菌属(Ensifer)、Pedosphaeraceae属、Devosia属与总PAEs或各单体存在着显著正相关性(P<0.05)。以上结果表明,各覆膜棉田土壤已受到PAEs污染,土壤PAEs污染对土壤微生物群落存在一定程度影响。

关键词：邻苯二甲酸酯覆膜年限高通量测序群落组成与分布

硫红霉素菌渣有机肥对大豆土壤中耐药菌及相关抗性基因的影响

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新疆农业科学 2023年第2期60卷 424-431页

作者：易鸳鸯谢芳田世英张志东顾美英彭小武新疆环境保护科学研究院乌鲁木齐830011 新疆环境污染监控与风险预警重点实验室/新疆清洁生产工程技术研究中心/国家环境保护准噶尔荒漠绿洲交错区科学观测研究站乌鲁木齐830011 新疆农业科学院微生物应用研究所/新疆特殊环境微生物实验室乌鲁木齐830091

【目的】研究硫红霉素菌渣有机肥施用后对大豆农田土壤中耐药菌及相关抗性基因丰度的影响,为硫红霉素菌渣有机肥施用生物安全性评价提供科学依据。【方法】检测不同菌渣有机肥施用量下,大豆不同生长时期土壤中耐药细菌的数量和种类,并... 详细信息

【目的】研究硫红霉素菌渣有机肥施用后对大豆农田土壤中耐药菌及相关抗性基因丰度的影响,为硫红霉素菌渣有机肥施用生物安全性评价提供科学依据。【方法】检测不同菌渣有机肥施用量下,大豆不同生长时期土壤中耐药细菌的数量和种类,并采用荧光定量PCR方法检测相关抗性基因(ARGs)污染水平,分析菌渣有机肥施用对耐药菌及相关抗性基因的影响。【结果】大豆苗期土壤中各类细菌数量大于结果期,苗期样品中土壤细菌总数、硫红霉素抗性菌数显著高于对照组,而青霉素、头孢拉定抗性菌株数与对照组差异不显著。在结果期样品中,施加了硫红霉素药渣有机肥的土壤中各类菌落总数与对照组差异不显著。所获得14株硫红霉素耐药菌菌株分布于11个菌属,其中假节杆菌属、芽胞杆菌属、类谷氨酸杆菌属菌株数占总菌株数的比例最高,25株青霉素耐药菌菌株分布于7个菌属,其中链霉菌属菌株数最高。12株头孢拉定耐药菌分布于5个菌属,其中假单胞菌属菌株数占比例达到50.00%。施用硫红霉素菌渣有机肥对土壤中常见ARGs的绝对丰度和相对丰度有一定的影响,但影响不显著。【结论】硫红霉素菌渣有机肥施用后对作物土壤中ARGs水平没有显著影响。

关键词：硫红霉素菌渣大豆土壤耐药菌 ARGs q-PCR

种植模式与灌溉定额对机采长绒棉产量及纤维品质形成的影响

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新疆农业科学 2023年第8期60卷 1821-1829页

作者：王心林涛崔建平吴凤全唐志轩崔来园郭仁松王亮郑子漂新疆农业科学院经济作物研究所乌鲁木齐830091 新疆农业大学农学院/棉花教育部工程研究中心乌鲁木齐830052 农业农村部荒漠绿洲作物生理生态与耕作重点实验室乌鲁木齐830091

【目的】研究种植模式与灌溉定额对机采长绒棉产量及纤维品质形成的影响,为促进机采长绒棉产量与品质协同提供理论依据。【方法】试验在田间微区控制条件下进行,采用裂区试验设计,选择同一最适密度,以机采种植模式为主区:1膜3行(S_(3))... 详细信息

【目的】研究种植模式与灌溉定额对机采长绒棉产量及纤维品质形成的影响,为促进机采长绒棉产量与品质协同提供理论依据。【方法】试验在田间微区控制条件下进行,采用裂区试验设计,选择同一最适密度,以机采种植模式为主区:1膜3行(S_(3))、1膜4行(S_(4))和1膜6行(S_(6));灌溉定额为副区:3150 m^(3)/hm^(2)[W_(1),重度亏缺(田间持水量50%)]、4050 m^(3)/hm^(2)[W_(2),轻度亏缺(田间持水量75%)]和4980 m^(3)/hm^(2)[W_(3),充分灌溉(田间持水量100%)],分析种植模式与灌溉定额对机采长绒棉干物质积累、产量构成及机采品质的影响。【结果】棉花干物质的积累符合Logistic生长函数模型。同一灌溉定额下,随平均行距的扩大可提早进入干物质快速积累时期,S_(3)处理最大干物质积累速率平均分别比S_(4)和S_(6)处理增加0.62和0.77 g/(株·d)。在同一种植模式下,干物质积累速度和持续时长随着灌溉定额的增加而增加。平均行距和灌溉定额的增加,显著提高了单株结铃数与单铃质量及产量。同一灌溉定额下,随平均行距的扩大,化学脱叶效率显著提高,挂枝率显著降低,棉纤维半均长、整齐度和纺织参数得到显著改善;同一种植模式下,随着灌溉定额的增加,产量与纤维品质指标同样显著提高,但对纤维品质的影响未达到显著水平。【结论】等行距处理和轻度亏缺灌溉组合(S_(3)W_(2)),有利于干物质积累量向生殖器官的转移,单株结铃数和单铃重显著提高,且机采品质较好。

关键词：种植模式灌溉定额机采长绒棉产量机采品质

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苹果中克百威残留快检测定及方法评估

新疆农业科学 2023年第3期60卷 683-688页

作者：田锋包东东徐智明杨婧李娟刘晓红谭慧林张志东新疆农业科学院微生物应用研究所/新疆特殊环境微生物实验室乌鲁木齐830091 阿克苏地区食品安全检测中心新疆阿克苏843000

【目的】提高苹果中克百威残留快速检测方法的灵敏度与准确度,确保苹果产品中克百威农药残留抽查的高效和准确性。【方法】以新疆阿克苏当地6个点位市售苹果为检测样品,采用行业标准NY/T 761-2008第3部分的液相色谱法为参比方法,分别选... 详细信息

【目的】提高苹果中克百威残留快速检测方法的灵敏度与准确度,确保苹果产品中克百威农药残留抽查的高效和准确性。【方法】以新疆阿克苏当地6个点位市售苹果为检测样品,采用行业标准NY/T 761-2008第3部分的液相色谱法为参比方法,分别选择3家快检试剂盒,根据《食品快速检测方法评价技术规范》对其快检适应性进行评估。【结果】利用参比方法和快检试剂盒均未从苹果样品中检出克百威残留。3家快检试剂盒可在0.01 mg/kg以上呈阳性显色反应,低于GB/T 2763-2019《食品安全国家标准食品中农药最大残留限量》中的限量要求;试剂盒灵敏度均为100%、特异性均为50%、假阴性率均为0、假阳性率均为50%、相对准确度均为90%。【结论】所测试剂盒适用于苹果中克百威残留量的快速筛查。

关键词：苹果克百威快检试剂盒评估

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三色藜麦抗氧化活性及体外消化特性

新疆农业科学 2023年第10期60卷 2461-2469页

作者：祖力皮牙·买买提毛红艳岳丽王佳敏于明新疆农业科学院粮食作物研究所乌鲁木齐830091

【目的】分析不同粒色藜麦营养成分、抗氧化能力以及体外消化和血糖生成指数差异,为提供藜麦加工品质及功能活性开发提供理论依据。【方法】以白色、红色、黑色藜麦为研究对象,比较不同粒色藜麦营养成分、糊化特性、抗氧化能力,并通过口... 详细信息

【目的】分析不同粒色藜麦营养成分、抗氧化能力以及体外消化和血糖生成指数差异,为提供藜麦加工品质及功能活性开发提供理论依据。【方法】以白色、红色、黑色藜麦为研究对象,比较不同粒色藜麦营养成分、糊化特性、抗氧化能力,并通过口腔-胃-小肠三段式体外模拟消化评价3种藜麦的体外消化速率和预估血糖指数(eGI)差异性。【结果】3种藜麦灰分、淀粉、直链淀粉、支链淀粉、水溶性蛋白含量存在显著性差异(P<0.05),糊化特性中低谷黏度、最终黏度、稀懈值和回生值,黄酮含量等指标之间均存在显著差异(P<0.05)。三色藜麦中黄酮提取液和水溶蛋白提取液具有较好的抗氧化活性。红色藜麦黄酮和水溶性蛋白提取液对DPPH·和ABTS^(+)·的清除抗氧化能力高于其他藜麦提取液。黑色藜麦体外消化率曲线增速比白色藜麦慢。预估血糖指数(eGI)为(48.32~54.21)<55,藜麦是低eGI食物。藜麦eGI值排序为:红色藜麦(48.32)<黑色藜麦(48.99)<白色藜麦。【结论】不同颜色藜麦的营养特性,糊化特性、抗氧化活性、抗消化特性以及血糖生成指数存在显著性差异,其中白色藜麦的糊化特性比黑、红色藜麦好。红色藜麦的抗氧化和抗消化特性强于白、黑色藜麦,血糖生成指数最低。

关键词：三色藜麦营养成分抗氧化活性体外消化预估血糖指数

不同大豆品种在新疆生态区主要农艺性状表现及产量的相关分析

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新疆农业科学 2023年第7期60卷 1663-1670页

作者：赵连佳李淦徐麟颜国荣刘宁王帆邓超宏阿布都克尤木·阿不都热孜克王聪王威新疆农业科学院农作物品种资源研究所/农业农村部植物新品种测试(乌鲁木齐)分中心乌鲁木齐830091 新疆心连心能源化工有限公司新疆昌吉832200 新疆农业大学农学院乌鲁木齐830052

【目的】评价不同大豆种质资源在新疆生态区的表现。【方法】以27份国内大豆种质资源为材料,测定11个主要农艺性状并进行变异系数、相关性、主成分、通径及聚类分析,综合评价其在新疆生态区的表现及产量。【结果】大豆主要数量性状具有... 详细信息

【目的】评价不同大豆种质资源在新疆生态区的表现。【方法】以27份国内大豆种质资源为材料,测定11个主要农艺性状并进行变异系数、相关性、主成分、通径及聚类分析,综合评价其在新疆生态区的表现及产量。【结果】大豆主要数量性状具有丰富的变异,其变异系数达8.3%~78.8%。有效分枝数变异系数最大,百粒重变异系数最小。产量与有效分枝数、单株荚数、单株粒数和单株粒重呈显著或极显著正相关,与底荚高度呈极显著负相关,而底荚高度与单株粒数和单株粒重呈极显著负相关。总共提取了3个主成分,累积贡献率达75.98%,影响产量的主要性状有单株粒数、单株粒重和百粒重。建立产量与单株粒数、百粒重、单株粒重之间的线性回归方程Y=-1989.985+39.429X 8+150.432X 10+23.137X 9,决定系数为R 2=0.887。单株粒数(0.863)和单株粒重(0.739)在决定大豆产量中较百粒重(0.155)更为重要。系统聚类分析在欧氏距离为15水平上将供试材料划分为七大类群,第Ⅰ、Ⅲ和Ⅵ类群株高83 cm左右、生育期117 d左右,分枝少,产量高,属于中熟类型。【结论】适宜在新疆生态区种植,垦丰14、绥农29、合农62、黑农52、黑农61。中黄30、新丰1号、中黄54、黑农51、黑农55、黑农63生育期普遍在140 d左右,偏晚熟,不宜在新疆生态区种植。

关键词：大豆相关分析主成分分析通径分析聚类分析