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转拟南芥CAO基因烟草的构建及弱光耐受性分析

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南方农业学报 2015年第6期46卷 951-957页

作者：张伟李翠萍张兴国张煜新乡医学院生物化学与分子生物学教研室河南新乡453003 西南大学园艺园林学院/南方山地园艺学教育部重点实验室重庆400715

【目的】探讨转拟南芥叶绿素酸酯a加氧酶（Chlorophyllide a oxygenase,At CAO）基因烟草的耐弱光性,以明确At CAO基因能否提高烟草对弱光的捕获能力,为其他作物的耐弱光性改良提供参考。【方法】将At CAO基因克隆、构建表达载体后,通... 详细信息

【目的】探讨转拟南芥叶绿素酸酯a加氧酶（Chlorophyllide a oxygenase,At CAO）基因烟草的耐弱光性,以明确At CAO基因能否提高烟草对弱光的捕获能力,为其他作物的耐弱光性改良提供参考。【方法】将At CAO基因克隆、构建表达载体后,通过农杆菌介导法导入烟草（Nicotiana tabacum *** 38）,弱光处理后,测定叶绿素、光合速率、株高等相关指标。【结果】农杆菌介导法转化烟草后,提取抗卡那霉素（Kan）烟草与野生烟草基因组DNA,PCR检测证明抗Kan烟草含有At CAO基因,且无农杆菌污染,说明获得了整合有At CAO基因的烟草植株;弱光处理后,发现转At CAO基因烟草的叶绿素a含量增加23.5%-38.1%,叶绿素b含量增加40.0%-54.3%,叶绿素总量增加26.7%-41.3%,叶绿素a/b比值降低9.3%-11.7%,光合作用增强38.8%-44.6%,除株系TC3的叶绿素a含量、叶绿素总量增加不显著（P〉0.05,下同）外,其余指标均达差异显著水平（P〈0.05）,且株高比野生烟草增加7.8%-24.5%,但差异不显著。【结论】At CAO基因显著增加了弱光下烟草的叶绿素a、b含量,增强了光合作用,且一定程度上促进了烟草植株的生长,推测其可在其他作物的耐弱光性改良上发挥作用。

关键词：烟草 AtCAO基因光合作用耐弱光性

拉曼光谱在多组分定量分析中方法学验证的探讨

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光谱学与光谱分析 2017年第1期37卷 120-123页

作者：薛金涛李春燕吴纯洁叶利明新乡医学院药学院河南新乡453002 四川大学华西药学院四川成都610041 新乡医学院三全学院药学院河南新乡453003 成都中医药大学药学院四川成都611137

拉曼光谱在中国药典2010版第一次被收录于"附录XIX L拉曼光谱法指导原则"中,但该原则对拉曼多组分定量分析的方法学验证未作论述,对多组分复杂体系中采用拉曼数学模型定量分析时的方法学验证进行独创性的探索和研究,分别从仪器性能测试... 详细信息

拉曼光谱在中国药典2010版第一次被收录于"附录XIX L拉曼光谱法指导原则"中,但该原则对拉曼多组分定量分析的方法学验证未作论述,对多组分复杂体系中采用拉曼数学模型定量分析时的方法学验证进行独创性的探索和研究,分别从仪器性能测试、线性、定量限、准确度等方面进行方法学验证研究;另外由于拉曼光谱定量数学模型样品为复杂成分样品,无须像传统方法提供空白样品和进行破坏实验等专属性实验验证。通过研究探讨,提出了拉曼多组分定量分析的方法学验证内容,为方法学验证的完善和标准的制定提供了基础和依据。

关键词：方法学验证拉曼光谱法多组分定量数学模型验证与评价

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脂质运载蛋白-2在肿瘤进展中的作用

中国生物化学与分子生物学报 2020年第3期36卷 252-258页

作者：李翠萍周贝仝李丹新乡医学院基础医学院生物化学与分子生物学教研室河南新乡453000 新乡医学院河南新乡453000

铁元素通过参与氧化损伤、分泌炎性因子、改变信号通路、影响免疫系统等过程,在肿瘤的发生发展中发挥重要的促进作用。靶向铁的治疗是肿瘤治疗的重要策略之一。转铁蛋白参与肿瘤细胞铁的运输,是肿瘤治疗的重要靶标。脂质运载蛋白-2(lipo... 详细信息

铁元素通过参与氧化损伤、分泌炎性因子、改变信号通路、影响免疫系统等过程,在肿瘤的发生发展中发挥重要的促进作用。靶向铁的治疗是肿瘤治疗的重要策略之一。转铁蛋白参与肿瘤细胞铁的运输,是肿瘤治疗的重要靶标。脂质运载蛋白-2(lipocalin-2,LCN2)是由肿瘤微环境中的肿瘤相关巨噬细胞分泌的胞内可运输铁离子的蛋白质。LCN2在多种类型的肿瘤中表达均明显升高,有望成为相关癌症不良预后的标志物,是近年来研究的热点。LCN2主要通过结合不同的配体与受体参与铁的运输,保护基质金属蛋白酶-9活性,分泌细胞因子等机制,参与肿瘤细胞的增殖与凋亡、肿瘤细胞的侵袭与转移,以及肿瘤血管生成过程而影响肿瘤的治疗与预后。其中,LCN2的存在形式不同,对铁的运输方式不同,决定其对肿瘤细胞增殖与凋亡的调控作用不同,以及LCN2对信号通路影响的差异,造成LCN2在不同肿瘤,甚至相同肿瘤的研究中获得不一致结果,具体机制尚待进一步研究。本文就LCN2蛋白的结构特征、LCN2蛋白与肿瘤进展的关系,及其在肿瘤进展中可能的作用机制进行综述,为进一步的药物开发与临床研究提供理论参考。

关键词：脂质运载蛋白-2 肿瘤微环境转铁蛋白基质金属蛋白酶-9

基于PEST分析的共享智能药柜发展对策研究

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现代商贸工业 2024年第18期45卷 94-96页

作者：李洁付圳涛孙成丽谭明亮川北医学院管理学院四川南充637100

随着互联网经济不断发展和生活节奏的加快,公众对购买药品有了更多需求,不再满足于只在传统药店的购药这一单一方式,为给公众提供更便捷且安全的购药环境,共享智能药柜应运而生。本文运用PEST分析框架,对共享智能药柜进行了全面的宏观... 详细信息

随着互联网经济不断发展和生活节奏的加快,公众对购买药品有了更多需求,不再满足于只在传统药店的购药这一单一方式,为给公众提供更便捷且安全的购药环境,共享智能药柜应运而生。本文运用PEST分析框架,对共享智能药柜进行了全面的宏观环境分析。在政治层面,本文探讨了政府政策、法律法规对共享智能药柜发展的影响;在经济层面,分析了经济增长、居民收入与消费环境对共享智能药柜的作用;在社会层面,关注了人口老龄化、居民健康意识以及产品知名度对共享智能药柜的塑造;在技术层面,评估了科技创新和人才引进对共享智能药柜的推动。本文通过PEST方法分析共享智能药柜面临的挑战和机遇,并为其发展提供策略建议。

关键词：共享智能药柜 PEST分析发展对策

良性前列腺增生合并前列腺炎症患者前列腺液IL-8、IL-6与血清前列腺特异抗原的相关性

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南方医科大学学报 2016年第1期36卷 135-139页

作者：任行飞吴春磊余沁楠朱峰刘沛张会清新乡医学院第一附属医院泌尿外科河南卫辉453100

目的探讨良性前列腺增生（BPH）伴前列腺炎症患者前列腺液IL-8、IL-6与血清前列腺特异性抗原（PSA）的相关性。方法选取2013年9月~2015年10月于我院行前列腺手术的BPH患者211例,根据前列腺液白细胞计数分为单纯组（n=75）和合并前列腺... 详细信息

目的探讨良性前列腺增生（BPH）伴前列腺炎症患者前列腺液IL-8、IL-6与血清前列腺特异性抗原（PSA）的相关性。方法选取2013年9月~2015年10月于我院行前列腺手术的BPH患者211例,根据前列腺液白细胞计数分为单纯组（n=75）和合并前列腺炎组（n=136）。两组临床观察指标间差异比较采用Mann-Whitney U检验,相关性分析采用调整年龄变量下的偏相关性分析,再进一步多元逐步回归分析。结果单纯组与合并前列腺炎组患者年龄、体质量指数（BMI）、血压、血糖、血脂、国际前列腺症状评分（IPSS）评分、PSA-Ratio及前列腺体积比较差异均无统计学意义（P〉0.05）。合并前列腺炎组患者血清PSA及前列腺液IL-8、IL-6水平升高,与单纯组差异具有统计学意义（P〈0.001）。多元线性回归分析显示：前列腺液中IL-8、IL-6、前列腺液白细胞数（EPWBC）与血清PSA依次呈显著独立正相关性。结论前列腺炎症是BPH患者血清PSA升高的重要危险因素。前列腺液IL-8、IL-6与血清PSA存在良好独立相关性。

关键词：良性前列腺增生前列腺炎症前列腺特异性抗原白介素-8 白介素-6

5-氮杂胞苷诱导大鼠心脏成纤维细胞向心肌样细胞分化进程相关基因的表达差异

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解剖学报 2020年第6期51卷 861-867页

作者：常玉巧贾阳阳韩贝郭志坤新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003

目的探讨5-氮杂胞苷(5-aza)诱导心脏成纤维细胞(CFs)向心肌样细胞分化5 d、7 d、14 d、21 d和28 d相关基因的表达差异。方法新生1~3 d SD大鼠12只,胰蛋白酶/胶原酶联合消化法分离培养新生大鼠CFs,采用CFs分子标记盘状结构域受体2(DDR2)... 详细信息

目的探讨5-氮杂胞苷(5-aza)诱导心脏成纤维细胞(CFs)向心肌样细胞分化5 d、7 d、14 d、21 d和28 d相关基因的表达差异。方法新生1~3 d SD大鼠12只,胰蛋白酶/胶原酶联合消化法分离培养新生大鼠CFs,采用CFs分子标记盘状结构域受体2(DDR2)并行细胞免疫荧光染色。含15μmol/L 5-aza心肌细胞诱导液培养第3代CFs,Real-time PCR检测心肌化诱导不同时间点相关基因vimentin、DDR2、Nanog、sox2、c-kit、sca-1、Tbx5、CD73、CD34、c Myc、klf4、Gata4、Oct4、Mef2c和心肌肌钙蛋白T(c Tn T)的表达差异,细胞免疫荧光检测心肌化诱导后5 d、7 d、14 d、21 d和28 d肌钙蛋白T(c Tn T)的表达。透射电子显微镜观察心肌化诱导28 d CFs的超微结构变化。结果 5-aza诱导CFs后3 d细胞生长速率减慢,部分细胞由三角形、梭形向圆形和杆状转变。诱导后7 d、14 d、21 d和28 d,与诱导前相比,DDR2表达稳定,vimentin在14 d表达下降,Nanog、c-kit、sox2和Tbx5伴随着心肌化进程呈现表达下降趋势,而CD73、Mef2c、CD34、Gata4、Oct4和c Tn T表达逐步增加,sca-1在7 d表达上升又下降,c Myc和klf4在14 d表达上升又下降。诱导后5 d少量细胞表达c Tn T,14~21 d c Tn T阳性细胞数明显增高,28 d表达c Tn T较多且趋于稳定。透射电子显微镜显示,CFs心肌化诱导28 d,细胞与细胞间出现端-端连接,细胞质内出现大量的肌原纤维,排列较为规律,但肌节不明显,H带、Z线和M线显示不清。结论 CFs经5-aza诱导,可向心肌样细胞分化,但不能形成成熟的心肌细胞。

关键词： 5-氮杂胞苷心脏成纤维细胞心肌样细胞基因表达实时定量聚合酶链反应大鼠

Zn^2＋及其谷氨酸结合位点突变对金黄色葡萄球菌肠毒素 C2超抗原活性的影响

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中华微生物学和免疫学杂志 2014年第6期34卷 442-446页

作者：刘彦礼牛荣成徐明恺李旭孙健张惠文新乡医学院生命科学技术学院 453003 中国科学院沈阳应用生态研究所 110016

目的：研究金黄色葡萄球菌（金葡菌）肠毒素C2（SEC2）中与Zn^2＋结合相关的谷氨酸残基突变及Zn^2＋自身对其超抗原活性的影响。方法应用定点突变技术将SEC2中与Zn^2＋结合相关的谷氨酸残基突变成丙氨酸残基，分离纯化后获得突变蛋白rS... 详细信息

目的：研究金黄色葡萄球菌（金葡菌）肠毒素C2（SEC2）中与Zn^2＋结合相关的谷氨酸残基突变及Zn^2＋自身对其超抗原活性的影响。方法应用定点突变技术将SEC2中与Zn^2＋结合相关的谷氨酸残基突变成丙氨酸残基，分离纯化后获得突变蛋白rSEC2（E71A）、rSEC2（E80A）及rSEC2（E71A/E80A）；突变蛋白的超抗原活性及Zn^2＋对SEC2超抗原活性的影响通过MTT法检测其刺激小鼠脾淋巴细胞的增殖来验证，而结构稳定性通过对胃蛋白酶及胰蛋白酶的抵抗能力来检测。结果蛋白酶酶切结果与脾淋巴细胞增殖实验结果表明参与第2个Zn^2＋结合的71位及80位谷氨酸残基突变对SEC2的酶解稳定性及超抗原活性没有显著影响；但微量Zn^2＋（10μmol/L）却能显著增强rSEC2的超抗原活性，并且在EDTA存在下，仅有Zn^2＋在一定浓度下才可完全恢复其超抗原活性。结论SEC2分子中的Zn^2＋结合位点的突变对其自身结构稳定性和超抗原活性无显著影响，但SEC2超抗原活性发挥过程中Zn^2＋可能通过其他途径间接影响其超抗原活性。

关键词： Zn^2+ 金黄色葡萄球菌肠毒素C2 超抗原 T淋巴细胞

丹参多酚酸对急性大动脉粥样硬化型脑卒中的临床治疗效果

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新乡医学院学报 2020年第7期37卷 681-686页

作者：党樊聘陈萌珂张黎军王园春袁彬新乡医学院第一附属医院神经内科河南卫辉453100

目的观察丹参多酚酸对急性大动脉粥样硬化(LAA)型脑卒中患者的临床治疗效果及其作用机制。方法选择2018年11月至2019年11月新乡医学院第一附属医院收治的200例急性LAA型脑卒中患者为观察对象,使用随机数字表法将患者分为对照组和干预组... 详细信息

目的观察丹参多酚酸对急性大动脉粥样硬化(LAA)型脑卒中患者的临床治疗效果及其作用机制。方法选择2018年11月至2019年11月新乡医学院第一附属医院收治的200例急性LAA型脑卒中患者为观察对象,使用随机数字表法将患者分为对照组和干预组,并根据入院时美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分将各组患者分为轻、中、重度卒中组。所有患者给予常规治疗,干预组在常规治疗基础上给予注射用丹参多酚酸静脉滴注,连用14 d;对照组患者在常规治疗基础上给予等量生理盐水静脉滴注。分别于治疗前及治疗14 d后采用NIHSS、改良Barthel指数量表(MBI)评估患者的神经功能缺损和日常生活能力,并根据NIHSS评分变化程度比较对照组与干预组患者的治疗效果;采用酶联免疫吸附试验检测2组患者治疗前后血清细胞间黏附分子-1(ICAM-1)水平;观察2组患者不良事件发生情况。结果干预组患者中途自动退出8例,对照组患者中途自动退出7例,干预组和对照组最终纳入患者分别为92例、93例。2组患者治疗前NIHSS、MBI评分比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗14 d后,2组患者的NIHSS评分与治疗前比较均显著降低(P0.05),干预组中、重度卒中患者的有效率显著高于对照组(χ^2=12.752、8.713,P0.05);治疗后2组患者血清ICAM-1水平与治疗前比较均显著降低(Z=-5.238、-7.969,P<0.05),且干预组患者血清ICAM-1水平显著低于对照组(Z=-6.644,P<0.05)。治疗期间,干预组2例(2.2%)患者出现头晕、血压下降,对照组患者未发生类似不良反应;2组患者均未发生过敏反应。结论丹参多酚酸可有效改善急性LAA型脑卒中患者的神经功能,提高日常生活能力,其机制可能是通过降低血清中ICAM-1水平、阻断缺血脑组织炎症级联反应而发挥治疗作用。

关键词：急性大动脉粥样硬化型脑卒中丹参多酚酸美国国立卫生研究院卒中量表改良Barthel指数量表细胞间黏附分子-1

N-cadherin通过β-catenin调控鸡胚脊髓连合纤维向对侧的投射

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中国免疫学杂志 2015年第10期31卷 1357-1360,1374页

作者：杨慈清李小英王聪睿张必超李晗林俊堂河南省医用组织再生重点实验室新乡453003 新乡医学院生命科学技术学院新乡453003

目的:阐明鸡胚发育过程中神经钙黏蛋白(N-cadherin)和β-连环蛋白(β-catenin)在脊髓连合纤维发育中的作用。方法:在鸡胚发育第3天(stage22),将N-cadherin和β-catenin干扰载体通过活体电转基因技术导入脊髓,电转后继续培养3 d(stage29)... 详细信息

目的:阐明鸡胚发育过程中神经钙黏蛋白(N-cadherin)和β-连环蛋白(β-catenin)在脊髓连合纤维发育中的作用。方法:在鸡胚发育第3天(stage22),将N-cadherin和β-catenin干扰载体通过活体电转基因技术导入脊髓,电转后继续培养3 d(stage29),取材、固定、包埋和切片。分为N-cadherin干扰组、β-catenin干扰组,β-catenin和N-cadherin共同干扰组以及转染p GU6-GFP-neo表达质粒对照组;采用荧光免疫组织化学法检测N-cadherin和β-catenin蛋白表达变化;根据GFP表达结果,观察脊髓连合纤维的投射情况。结果:在鸡胚发育过程中,在脊髓抑制N-cadherin的表达会降低β-catenin的表达;在Ncadherin抑制表达72 h后观察到脊髓连合纤维向对侧的投射产生被抑制;抑制β-catenin表达出现类似向对侧投射障碍;Ncadherin和β-catenin同时被干扰时,连合纤维投射的抑制效果相似。结论:N-cadherin参与调控脊髓连合纤维的发育过程,其部分作用机制可能是通过下调β-catenin的表达实现的。

关键词：鸡胚神经钙黏蛋白 β-连环蛋白神经纤维