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车前草中桃叶珊瑚苷的提取、分离纯化工艺研究

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中药材 2021年第4期44卷 928-932页

作者：黄健军谢冬养梁爽唐冬伟韦朝红广西中医药大学广西南宁530001 广西民族大学广西南宁530006 桂林纽泰生物科技有限公司广西桂林541004

目的:优化车前草中桃叶珊瑚苷的提取工艺,并确定大孔树脂分离纯化桃叶珊瑚苷的工艺。方法:以桃叶珊瑚苷含量和干膏率的综合评分为评价指标,乙醇浓度、溶剂倍数、提取时间为考察因素,正交试验法优化提取工艺;然后以桃叶珊瑚苷含量为指标... 详细信息

目的:优化车前草中桃叶珊瑚苷的提取工艺,并确定大孔树脂分离纯化桃叶珊瑚苷的工艺。方法:以桃叶珊瑚苷含量和干膏率的综合评分为评价指标,乙醇浓度、溶剂倍数、提取时间为考察因素,正交试验法优化提取工艺;然后以桃叶珊瑚苷含量为指标,考察大孔树脂种类、树脂用量、水洗脱剂用量,洗脱液乙醇浓度、乙醇用量对分离纯化工艺的影响,优选分离纯化工艺并通过中试验证。结果:提取工艺为:加入12倍量70%乙醇,回流提取90 min,提取2次;然后采用S-8大孔树脂对提取物进行分离纯化,加入2倍量大孔树脂,4倍量水洗脱除杂后,再用5倍量65%乙醇洗脱,收集乙醇洗脱液。结论:该提取、分离和纯化工艺简单、可行,产品纯度高,得率可观,适合于车前草中桃叶珊瑚苷的提取、分离纯化工业化生产。

关键词：车前草桃叶珊瑚苷提取分离纯化

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虎杖苷药理作用及机制研究进展

中国实验方剂学杂志 2021年第22期27卷 241-250页

作者：林思秦慧真邓玲玉张淼谢凤凤朱华广西中医药大学南宁530200 广西中医药大学壮瑶药重点实验室南宁530200

虎杖苷是从传统中药虎杖中分离出的一种多酚类单体化合物,是虎杖的主要有效成分,具有多种药理活性。近年来,有关虎杖苷药理作用及机制的研究日益增多。现代药理学研究表明,虎杖苷对神经系统,心脑血管系统,呼吸系统等均有保护作用,对肝... 详细信息

虎杖苷是从传统中药虎杖中分离出的一种多酚类单体化合物,是虎杖的主要有效成分,具有多种药理活性。近年来,有关虎杖苷药理作用及机制的研究日益增多。现代药理学研究表明,虎杖苷对神经系统,心脑血管系统,呼吸系统等均有保护作用,对肝、肾、肺等器官亦作用明显,其调节血糖血脂的作用对抗动脉粥样硬化效果显著;其抗纤维化的作用对肝、肾保护效果明显。虎杖苷对多种肿瘤细胞均有抑制作用,可抑制肿瘤细胞增殖并诱导肿瘤细胞凋亡。虎杖苷还具有抗炎,保护骨髓,促进创面愈合,抗辐射等药理活性。笔者查阅有关虎杖苷的药理作用文献发现其单个药理作用机制往往受多靶点蛋白、多条通路调控,但大多还未明确其作用靶点,有待深入研究。该文就近5年来有关虎杖苷的药理作用及机制研究进展进行归纳总结,并对其研究现状及未来研究方向提出相关建议,以期拓宽科研者的研究思路,加快明确其发挥药效作用的靶点,为虎杖苷的进一步开发利用提供科学的理论依据。

关键词：虎杖苷药理作用作用靶点机制研究进展

超快速液相色谱-三重四极杆-线性离子阱质谱法同时测定桑寄生中多元活性成分

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分析测试学报 2022年第8期41卷 1153-1162页

作者：吴楠袁嘉欢王文辛刘训红黎理殷圣鑫陈海杰薛佳周永逸杨薇南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏省经典名方工程研究中心江苏南京210023 广西中医药大学药学院广西南宁530200

建立了超快速液相色谱-三重四极杆-线性离子阱质谱(UFLC-QTRAP-MS/MS)同时测定桑寄生中黄酮类、有机酸类、核苷类和氨基酸类共33种活性成分含量的方法,并对不同寄主的桑寄生茎枝和叶进行比较分析。通过Box-Behnken响应面法优化供试品制... 详细信息

建立了超快速液相色谱-三重四极杆-线性离子阱质谱(UFLC-QTRAP-MS/MS)同时测定桑寄生中黄酮类、有机酸类、核苷类和氨基酸类共33种活性成分含量的方法,并对不同寄主的桑寄生茎枝和叶进行比较分析。通过Box-Behnken响应面法优化供试品制备条件;采用XBridge®C_(18)(4.6 mm×100 mm,3.5μm)色谱柱进行分离,以0.1%甲酸水-甲醇为流动相进行梯度洗脱;质谱采用电喷雾离子源(ESI),以多反应监测(MRM)模式进行检测。结果表明,最佳制备条件为甲醇体积分数70%,液料比(mL∶g)31∶1,提取时间32 min。33种目标成分在相应质量浓度范围内的线性关系良好,相关系数(r)均不低于0.9990;检出限(LOD)和定量下限(LOQ)分别为0.13~66.85 ng/mL和0.42~222.83 ng/mL;平均加标回收率为98.0%~101%,相对标准偏差(RSD)均小于4.0%。所构建的方法准确、稳定,可为桑寄生药材质量的综合评价和全面控制提供新的方法参考,也为桑寄生的合理开发利用提供了依据。

关键词：桑寄生超快速液相色谱-三重四极杆-线性离子阱质谱独立样本t检验相关性分析 Box-Behnken响应面法活性成分

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穿心莲内酯药理作用及机制研究进展

中国实验方剂学杂志 2022年第6期28卷 272-282页

作者：秦慧真林思邓玲玉谢凤凤张淼朱华陈龙广西中医药大学南宁530200 广西中医药大学广西壮瑶药重点实验室南宁530200

穿心莲内酯是从传统中药穿心莲中提取出来的二萜内酯类化合物,是穿心莲发挥药理药效作用的重要物质基础。现代药理研究表明,穿心莲内酯具有抗炎、抑菌、抗病毒、抗肿瘤、保肝利胆、保护心血管系统与神经系统等多种药理活性。穿心莲内酯... 详细信息

穿心莲内酯是从传统中药穿心莲中提取出来的二萜内酯类化合物,是穿心莲发挥药理药效作用的重要物质基础。现代药理研究表明,穿心莲内酯具有抗炎、抑菌、抗病毒、抗肿瘤、保肝利胆、保护心血管系统与神经系统等多种药理活性。穿心莲内酯具有显著的抗炎活性,其抗炎作用涉及多个炎症相关靶点,可通过抑制核转录因子-κB(NF-κB)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)等信号通路的表达和激活,减少其下游炎症介质合成与释放、调节氧化应激和免疫反应等多种途径来实现对各种炎症性疾病的抗炎作用。同时,穿心莲内酯对多种肿瘤细胞均有抑制作用,可通过抑制肿瘤细胞增殖,阻滞细胞周期,诱导肿瘤细胞凋亡发挥抗肿瘤活性。其抗肿瘤机制涉及Notch、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)、NF-κB、分泌型糖蛋白/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)等细胞信号通路,能够通过调控不同的信号通路从而达到抑制肿瘤的效果。此外,穿心莲内酯还可通过调控糖代谢从而改善糖尿病的发展。在查阅穿心莲内酯相关文献时,笔者发现穿心莲内酯往往通过多途径,多靶点调控发挥药理作用,但大部分的研究并未明确其发挥药效的具体靶点,有待后续深入研究。本文就穿心莲内酯近3年药理作用及机制的相关研究进行归纳总结,并就其研究现状存在的不足提出相关建议,以期为其进一步深入研究及开发利用提供一定有益参考。

关键词：穿心莲内酯抗炎抗肿瘤药理作用信号通路分子机制

荔枝核总黄酮抗急性肝损伤的机制研究及其颗粒剂制备

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荔枝核总黄酮抗急性肝损伤的机制研究及其颗粒剂制备

作者：李叔惠广西中医药大学

学位级别：硕士

目的:荔枝核有抗急性肝损伤和治疗肝纤维化的作用,但其活性成分荔枝核总黄酮（Lychee Seed flavonoids,TFL）对急性肝损伤的影响尚不明确,且缺乏临床应用剂型。本研究探讨荔枝核总黄酮抗急性肝损伤的作用及与抑制NOD样受体家族3（NOD-li... 详细信息

目的:荔枝核有抗急性肝损伤和治疗肝纤维化的作用,但其活性成分荔枝核总黄酮（Lychee Seed flavonoids,TFL）对急性肝损伤的影响尚不明确,且缺乏临床应用剂型。本研究探讨荔枝核总黄酮抗急性肝损伤的作用及与抑制NOD样受体家族3（NOD-like receptor family 3,NLRP3）炎症小体活化相关的机制,并研究制备荔枝核总黄酮颗粒的制剂工艺。方法:将昆明种小鼠随机分为空白组、模型组、联苯双酯组（150mg/kg）、MCC950组（10 mg/kg）、TFL高（360 mg/kg）、低（180 mg/kg）剂量组,连续灌胃给药10天。以腹腔注射CCl-花生油溶液诱发小鼠急性肝损伤,观察各组小鼠肝功能,肝脏组织形态,以反映TFL抗急性肝损伤的效果;此外,检测肝组织活性氧族（reactive oxygen species,ROS）水平,并以Western blot法检测肝组织中NLRP3炎症小体相关蛋白的表达变化,考察TFL的作用机制。为研究TFL颗粒的制剂工艺,采用以成型率、溶化率和休止角为评价指标,单因素试验的基础上考察制剂辅料稀释剂、过筛目数、润湿剂浓度;以成型率及水分为评价指标,通过正交设计对湿颗粒干燥工艺的优选,对TFL颗粒剂的工艺处方进行优化,形成合理的工艺。对TFL颗粒的临界相对湿度进行测定,并采用紫外可见分光光度法对TFL颗粒中总黄酮进行含量测定。结果:TFL显著降低CCl所致急性肝损伤的小鼠血清中丙氨酸转氨酶、天门冬氨酸氨基转移酶、总胆汁酸水平（P<0.05）,降低肝组织中活性氧族水平（P<0.05）,并改善肝组织结构。荔枝核总黄酮高剂量显著下调了NLRP3炎症小体相关蛋白TXNIP、NLRP3、pro-caspase-1、pro-IL-1β、IL-1β表达（P<0.05）。经工艺研究,TFL颗粒剂成型工艺为:取干膏粉与甘露醇适量,按1∶3均匀混合,75%乙醇制颗粒,平铺物料厚度为0.5 cm,60℃干燥30min,整粒即得。TFL颗粒剂的平均成型率达到94.21%（RSD为0.73%）,平均溶化率为95.34%（RSD为0.10%）,平均休止角为23.68%（RSD为0.38%）,平均水分为1.93%（RSD为2.23%）,临界相对湿度为73.5%,原花青素A2在0.0397～0.2382mg/m L范围内具有良好的线性关系（R=0.9991）,平均加样回收率分别为100.25%,TFL颗粒的总黄酮的平均含量为16.25%。结论:荔枝核总黄酮可以减轻CCl引发的小鼠急性肝损伤,其机制可能与抑制NLRP3炎症小体活化参与的炎症反应有关。荔枝核总黄酮颗粒成型工艺可行,成品成型率高、流动性好、溶化率佳,建立稳定的紫外可见分光光度法的含量测定方法,可为该制剂的生产提供数据支撑。

关键词：荔枝核总黄酮急性肝损伤 NLRP3 颗粒剂

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紫草素抗肿瘤作用研究进展

中国实验方剂学杂志 2022年第9期28卷 273-282页

作者：林思秦慧真邓玲玉张淼谢凤凤李泽宇朱华陈龙广西中医药大学南宁530200 广西中医药大学壮瑶药重点实验室南宁530200

癌症的发病率与死亡率逐年递增,严重威胁人类健康。目前,以化疗为主治疗癌症的方法虽能延长患者的生存时间,但其严重的不良反应往往使患者预后不良。故寻找高效低毒的抗癌药物已成为全世界临床共同关注的焦点。中药有效成分,具有不良反... 详细信息

癌症的发病率与死亡率逐年递增,严重威胁人类健康。目前,以化疗为主治疗癌症的方法虽能延长患者的生存时间,但其严重的不良反应往往使患者预后不良。故寻找高效低毒的抗癌药物已成为全世界临床共同关注的焦点。中药有效成分,具有不良反应小、多靶点调控等优势,其抗肿瘤活性受到广大科研者的热爱。紫草素为萘醌类化合物,是紫草的主要有效成分之一,具有抗肿瘤、抗炎、抗氧化等药理作用。研究表明,紫草素对多种肿瘤细胞显示出显著的抗肿瘤活性,能够抑制乳腺癌、肺癌、肝癌、宫颈癌、卵巢癌、结肠癌、前列腺癌等多种癌症的发生发展。紫草素抗肿瘤机制主要是通过多途径、多靶点抑制肿瘤细胞增殖,促进活性氧(ROS)生成,诱导肿瘤细胞发生凋亡,阻滞细胞周期,诱导肿瘤细胞自噬,抑制肿瘤细胞迁移与侵袭等。此外,紫草素还能增加肿瘤细胞对抗肿瘤药物的敏感性,逆转肿瘤细胞耐药性。紫草素抗肿瘤作用涉及的信号通路有磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt),PI3K/Akt/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR),丝裂原活化蛋白激酶(MAPK),丙酮酸激酶同工酶M2/信号传导与转录激活因子3(PKM2/STAT3),Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1/核因子E2相关因子2(Keap1/Nrf2)等,但主要通过调控PI3K/Akt信号通路发挥抗肿瘤作用。笔者查阅国内外关于紫草素抗肿瘤作用及机制的相关文献,对其近3年的相关研究进行归纳总结,为紫草素的抗肿瘤作用进一步深入研究及抗肿瘤药物的新药研发提供相应参考。

关键词：紫草素抗肿瘤机制信号通路研究进展

对叶百部总生物碱对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及Bcl-2,Bax和cleaved Caspase-3蛋白表达的影响

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中国实验方剂学杂志 2021年第19期27卷 73-79页

作者：林思朱华秦慧真王孝勋许立拔邓玲玉广西中医药大学南宁530200 广西中医药大学壮瑶药重点实验室南宁530200

目的:研究对叶百部总生物碱对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax和切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved Caspase-3)蛋白表达的影响。方法:选择人肝癌SMMC-7721细胞,常规培养及传代,对叶百部总... 详细信息

目的:研究对叶百部总生物碱对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax和切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved Caspase-3)蛋白表达的影响。方法:选择人肝癌SMMC-7721细胞,常规培养及传代,对叶百部总生物碱设置添加干预的质量浓度为50,75,112,167,250 mg·L^(-1),另设置仅添加10%胎牛血清作为空白组。采用噻唑蓝(MTT)比色法和细胞克隆实验观察细胞增殖的作用,Hoechst 33258染色法观察细胞凋亡,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测3种凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax和cleaved Caspase-3的表达。结果:对叶百部总生物碱可抑制SMMC-7721细胞增殖,与空白组比较,细胞增殖抑制率显著升高(P<0.01),作用24,48,72 h的50%细胞抑制浓度(IC_(50))分别为(173.36±8.75),(112.14±16.50),(96.41±2.60)mg·L^(-1),细胞集落形成抑制率显著升高(P<0.01),存在浓度依赖性。与空白组比较,对叶百部总生物碱可促进细胞凋亡,SMMC-7721细胞凋亡数目和凋亡率显著增加(P<0.01),在荧光正置显微镜下可观察到典型细胞凋亡形态,如亮蓝色细胞核染色,细胞质浓缩和细胞核固缩等。与空白组比较,抑凋亡蛋白Bcl-2表达显著下调(P<0.01);与空白组比较,对叶百部总生物碱75,112,167,250 mg·L^(-1)促凋亡蛋白Bax,cleaved Caspase-3蛋白表达显著上调(P<0.01)。结论:对叶百部总生物碱有很好的抑制SMMC-7721细胞增殖和促进凋亡的作用,其机制可能与抑制Bcl-2蛋白表达和促进Bax,cleaved Caspase-3蛋白表达有关。

关键词：对叶百部总生物碱人肝癌 SMMC-7721细胞凋亡 B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2) Bcl-2相关X蛋白(Bax) 切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved Caspase-3)

广西桑寄生中多元活性成分动态积累的分析与评价

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中国中药杂志 2022年第13期47卷 3452-3462页

作者：吴楠袁嘉欢王文辛殷圣鑫刘训红黎理蔡芷辰陈翠花李洁南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏省经典名方工程研究中心江苏南京210023 广西中医药大学药学院广西南宁530200

建立超高效液相色谱-三重四极杆/线性离子阱质谱(UHPLC-QTRAP-MS/MS)同时测定桑寄生中黄酮、有机酸、核苷和氨基酸共33种活性成分含量的方法,并对其多元活性成分的动态积累进行分析与评价。采用XBridge C_(18)色谱柱(4.6 mm×100 mm,3.5... 详细信息

建立超高效液相色谱-三重四极杆/线性离子阱质谱(UHPLC-QTRAP-MS/MS)同时测定桑寄生中黄酮、有机酸、核苷和氨基酸共33种活性成分含量的方法,并对其多元活性成分的动态积累进行分析与评价。采用XBridge C_(18)色谱柱(4.6 mm×100 mm,3.5μm),以0.1%甲酸水-甲醇为流动相进行梯度洗脱,流速0.5 mL·min^(-1),柱温30℃,进样量为2μL;质谱采用电喷雾离子源(ESI),多反应离子监测(MRM)模式测定;采用熵权TOPSIS法对各项指标成分客观赋权,根据相对贴近度(C_(i))进行综合排序,构建桑寄生多指标综合评价模型。结果表明,33种目标成分的浓度和峰面积在各自线性范围内具有良好的线性关系,相关系数(r)均不小于0.9990;精密度、重复性、稳定性RSD≤4.7%;平均加样回收率为98.03%~101.3%,RSD均小于4.0%。桑寄生中各成分的积累动态不一,2月中旬至3月初采收的桑寄生药材综合质量较好,与当地传统采收期相符。该研究为揭示桑寄生中多元活性成分的动态积累规律及确定其药材的适宜采收期提供基础资料,同时为桑寄生药材内在质量的综合评价提供新的方法参考。

关键词：桑寄生动态积累超高效液相色谱-三重四极杆线性离子阱质谱多元活性成分熵权TOPSIS分析

星点设计-效应面法优化复方二甲双胍缓释片的制备工艺

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中国新药杂志 2019年第12期28卷 1490-1499页

作者：谭栀恩曾佩琴陀海燕罗春花韦艳萍覃柳馨刘雅婷陈卫卫李媛广西中医药大学南宁530001 广西中药制剂共性技术研发重点实验室南宁530001 广西壮瑶药重点实验室南宁530001 南京本末生物科技有限公司南京210000 广西科学技术出版社有限公司南宁530022

目的:优化复方二甲双胍缓释片的制备工艺。方法:在单因素考察的基础上以释放度为考察指标,采用星点设计-效应面法,考察骨架材料羟丙甲纤维素K4M(hydroxypropyl methyl cellulose K4M,HPMCK4M)、黏合剂卡波姆(carbopol)、助漂剂十八醇的... 详细信息

目的:优化复方二甲双胍缓释片的制备工艺。方法:在单因素考察的基础上以释放度为考察指标,采用星点设计-效应面法,考察骨架材料羟丙甲纤维素K4M(hydroxypropyl methyl cellulose K4M,HPMCK4M)、黏合剂卡波姆(carbopol)、助漂剂十八醇的用量对释放度的影响,筛选复方二甲双胍缓释片最优处方。结果:最佳制备工艺是以23%羟丙甲纤维素K4M和16. 5%卡波姆为亲水凝胶骨架材料,8. 2%十八醇为助漂剂,5%碳酸氢钠为发泡剂,10%乳糖为填充剂,5%聚乙烯吡咯烷酮的75%乙醇溶液为黏合剂,湿法制粒压片制备复方二甲双胍胃滞留缓释片。结论:复方二甲双胍缓释片成型工艺安全可靠,重复性良好。

关键词：盐酸二甲双胍维生素B12 胃漂浮缓释片星点设计-效应面法