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基于气血理论探讨囊性变在激素性股骨头坏死塌陷和修复中的意义

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辽宁中医杂志 2024年第10期51卷 54-58页

作者：魏腾飞肖方骏何晓铭何宪顺田佳庆韦雨柔何敏聪何伟魏秋实广州中医药大学广东广州510405 广东省中医骨伤研究院广东广州510378 中国证候全国重点实验室/骨科广州中医药大学第三附属医院广东广州510378

激素性股骨头坏死(SIONFH)是目前骨科领域的疑难病,“坏死-修复-塌陷-骨关节炎”是SIONFH患者逐步演变的自然病理过程,其中修复、塌陷对预后的影响至关重要,团队前期研究发现囊性变具有修复能力,可形成新骨阻止塌陷的发生,可能是激素性... 详细信息

激素性股骨头坏死(SIONFH)是目前骨科领域的疑难病,“坏死-修复-塌陷-骨关节炎”是SIONFH患者逐步演变的自然病理过程,其中修复、塌陷对预后的影响至关重要,团队前期研究发现囊性变具有修复能力,可形成新骨阻止塌陷的发生,可能是激素性股骨头坏死修复的核心反应区。目前,中医药早期治疗在临床中具有良好疗效,在SIONFH保髋的价值越来越受到重视。前期研究发现血瘀是贯穿激素性股骨头坏死发病过程的重要病机,《素问·评热病论篇》言:“邪之所凑,其气必虚”,激素性股骨头坏死亦与气虚有着密切的联系,本文结合气血理论,拟探讨囊性变在激素性股骨头坏死塌陷和修复中的重要意义,以期为中医药早期治疗激素性股骨头坏死提供参考。

关键词：激素性股骨头坏死血瘀气虚囊性变塌陷修复

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慢病毒沉默Piezo1蛋白与人骨髓间充质干细胞成骨分化及TAZ的表达

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中国组织工程研究 2024年第1期28卷 12-19页

作者：韦雨柔田佳庆何宪顺詹芝玮魏腾飞林天烨何伟魏秋实广州中医药大学第三临床医学院广东省广州市510378 广东省中医骨伤研究院广东省广州市510378 广州中医药大学第三附属医院关节中心广东省广州市510378

背景:Piezo1作为机械敏感蛋白与成骨分化密切相关,TAZ也被证明参与调节成骨分化,但Piezo1调控人骨髓间充质干细胞成骨分化时TAZ是否参与其中目前尚不明确,故研究其具体机制对防治股骨头坏死具有重要意义。目的:探讨Piezo1对人骨髓间充... 详细信息

背景:Piezo1作为机械敏感蛋白与成骨分化密切相关,TAZ也被证明参与调节成骨分化,但Piezo1调控人骨髓间充质干细胞成骨分化时TAZ是否参与其中目前尚不明确,故研究其具体机制对防治股骨头坏死具有重要意义。目的:探讨Piezo1对人骨髓间充质干细胞成骨分化及TAZ表达的影响。方法:构建靶向Piezo1的siRNA,转染至293T细胞,通过RT-qPCR检测其沉默效率并筛选出Piezo1-Homo-2337进行包装,使用荧光染色检测其最佳感染复数值。Piezo1沉默重组慢病毒进一步被转染至人骨髓间充质干细胞中,通过RT-qPCR、Western blot检测其沉默效果;通过茜素红染色、碱性磷酸酶活性分析、免疫荧光染色、RT-qPCR及Western blot检测分析沉默Piezo1对人骨髓间充质干细胞成骨分化能力及TAZ表达的影响。结果与结论:①与正常组、阴性对照组比较,转染si-Piezo1后人骨髓间充质干细胞中Piezo1的mRNA及蛋白水平明显降低;②与阴性对照组比较,si-Piezo1组碱性磷酸酶活性明显降低,钙沉积明显减少;③与阴性对照组比较,si-Piezo1组成骨相关基因Runx2、OPN、DLX5、osteocalcin、β-catenin及TAZ的mRNA水平明显降低。si-Piezo1组TAZ、β-catenin的蛋白表达明显降低;相反,si-Piezo1组p-TAZ、p-β-catenin的蛋白表达明显增加;④与阴性对照组比较,免疫荧光染色结果提示si-Piezo1组人骨髓间充质干细胞中TAZ、β-catenin的表达较少;⑤结果表明Piezo1可促进人骨髓间充质干细胞的成骨分化,沉默Piezo1后人骨髓间充质干细胞的成骨能力明显降低,同时TAZ的表达也同样降低。

关键词：股骨头坏死人骨髓间充质干细胞 Piezo1 TAZ 成骨分化

基于时空分子影像学探讨膝骨关节炎和骨质疏松症异病同治的研究思路

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辽宁中医杂志 2024年

作者：何晓铭何敏聪林天烨张庆文何伟魏秋实广东省中医骨伤研究院广州中医药大学第三附属医院关节中心

时空分子影像学（Spatiotemporal molecular imaging， SMI）是分子事件在临床影像(如X线、CT、MR、超声、介入放射学和心电图)中的动力学和定位，可将“临床-影像-分子-病理”串联，解释疾病在微观层面的异质性，将疾病的临床影像和分... 详细信息

时空分子影像学（Spatiotemporal molecular imaging， SMI）是分子事件在临床影像(如X线、CT、MR、超声、介入放射学和心电图)中的动力学和定位，可将“临床-影像-分子-病理”串联，解释疾病在微观层面的异质性，将疾病的临床影像和分子表型建立紧密联系后应用于疾病的诊断和治疗。膝骨关节炎（knee osteoarthritis，KOA）和骨质疏松症（osteoporosis，OP）在流行病学、病理机制及治疗等方面具有较强的关联性，具备“异病同治”的基础。中医认为二者分别属于“骨痹”和“骨痿”范畴，均可因肾虚精亏，骨髓失养而发病，这是 “异病同治”良好的切入点。从微观角度看，同一病机的KOA和OP的临床、影像、病理、分子生物学特征可能存在时空差异，掌握两者在不同时空中动态的相似性与相关性对于提高异病同治的效率具有现实意义。本文将从时空分子影像学的角度，探讨KOA和OP的“临床-影像-分子-病理”动态时空关系，期望为二者的异病同治提供新的研究思路。

关键词：时空分子影像学膝骨关节炎骨质疏松症异病同治

活血通络胶囊通过OPG/RANKL/PDGF-BB通路对激素性股骨头坏死模型大鼠的干预作用

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中药新药与临床药理 2022年第4期33卷 433-440页

作者：乌日莎娜陈哓俊沈莹姗吴忠书何伟魏秋实广州中医药大学第三临床医学院广东广州510407 广州中医药大学第一临床医学院广东广州510405 广东省中医骨伤研究院广东广州510378

目的探讨活血通络胶囊(HXTL)对激素性股骨头坏死干预作用的具体机制,同时为防治新型冠状病毒肺炎康复患者的激素性股骨头坏死提供选择。方法将18只SPF级雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组。对照组和模型组给予生理盐水灌胃,治... 详细信息

目的探讨活血通络胶囊(HXTL)对激素性股骨头坏死干预作用的具体机制,同时为防治新型冠状病毒肺炎康复患者的激素性股骨头坏死提供选择。方法将18只SPF级雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组。对照组和模型组给予生理盐水灌胃,治疗组从第3天到第28天给予活血通络胶囊0.63 g·kg^(-1)·d^(-1)灌胃。采用20 mg·kg^(-1)·d^(-1)甲基强的松龙诱导复制激素性股骨头坏死模型,每周注射3次,连续注射3周。对照组注射等体积生理盐水。模型组股骨头骨小梁稀疏中断,间隙增大证实造模成功。第28天取材,利用Micro-CT和苏木精-伊红染色评估活血通络胶囊对股骨头骨小梁的干预作用,酶联免疫吸附测定法检测骨保护素(OPG)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、β-连环蛋白(β-catenin)、血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)的表达量。结果Micro-CT图像显示,与对照组比较,模型组大鼠股骨头骨小梁稀疏、断裂、排列紊乱,而活血通络胶囊可明显减轻激素性股骨头坏死的骨质丢失;而与模型组比较,治疗组骨体积分数、骨小梁数目和骨小梁厚度明显升高(P<0.05),骨小梁分离度明显减小(P<0.05)。苏木精-伊红染色结果显示,与对照组比较,模型组空骨陷窝明显增多,骨陷窝内骨细胞形态异常;活血通络胶囊可明显改善上述病理变化。定量分析结果显示,与对照组比较,模型组大鼠股骨头骨小梁面积明显减小(P<0.05),空骨陷窝率明显增大(P<0.01);而与模型组比较,治疗组空骨陷窝率明显减少(P<0.01),骨小梁面积明显增大(P<0.05)。酶联免疫吸附测定法结果显示,与模型组比较,活血通络胶囊可促进OPG、RANKL、β-catenin、PDGF-BB蛋白含量增加(P<0.05)。结论活血通络胶囊可改善激素性股骨头坏死的股骨头头内骨小梁结构,其机制可能与调控OPG/RANKL/PDGF-BB信号有关,这在指导新冠肺炎康复患者防治股骨头坏死方面具有重要现实意义。

关键词：激素性股骨头坏死活血通络胶囊骨保护素(OPG) 核因子κB受体活化因子配体(RANKL) 血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB) 大鼠

活血通络胶囊对激素性股骨头坏死大鼠肠道菌群影响的研究

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中国全科医学 2023年第29期26卷 3674-3682页

作者：韦雨柔田佳庆肖方骏何宪顺詹芝玮魏腾飞林天烨何敏聪魏秋实广州中医药大学第三临床医学院广东省广州市.510378 广东省中医骨伤研究院广东省广州市.510378 广州中医药大学第三附属医院关节骨科广东省广州市.510378

背景激素性股骨头坏死(SONFH)是一种常见且致残性高的疾病,活血通络胶囊已被多次证明在防治股骨头坏死上疗效显著,但是治疗是否通过调节肠道菌群目前少见研究。目的建立SONFH大鼠模型并采用活血通络胶囊进行干预,分析比较各组大鼠肠道... 详细信息

背景激素性股骨头坏死(SONFH)是一种常见且致残性高的疾病,活血通络胶囊已被多次证明在防治股骨头坏死上疗效显著,但是治疗是否通过调节肠道菌群目前少见研究。目的建立SONFH大鼠模型并采用活血通络胶囊进行干预,分析比较各组大鼠肠道菌群的多样性,筛选出SONFH特异性改变的菌属并观察活血通络胶囊对肠道菌群的作用。方法2022年4—10月选取雄性SD大鼠24只,采用随机数字表法分为空白组(n=8)、模型组(n=8)、活血通络组(n=8),建造SONFH模型,活血通络组造模第3~28天给予0.63 g·kg^(-1)·d^(-1)活血通络胶囊灌胃,空白组和模型组给予等体积0.9%氯化钠溶液灌胃。药物干预结束后收集大鼠股骨进行HE染色、Micro-CT分析。收集大鼠粪便进行16S rDNA测序。采用α多样性和β多样性分析评估物种组间和组内群落的多样性及差异性,采用线性判别分析(LEfSe)比较三组大鼠肠道菌群差异。采用COG功能预测三组大鼠肠道菌群功能。结果模型组空骨陷窝率高于空白组、活血通络组(P水平升高。结论SONFH大鼠菌群多样性较正常大鼠增加,增加的菌属主要是致病菌属,而相应有益菌属则出现减少。活血通络胶囊可能通过改变肠道菌群的丰度和多样性以及调控Oxalobacteraceae、Ruminococcus_torques_group等菌属丰度而实现治疗SONFH的目的。

关键词：股骨头坏死激素性股骨头坏死活血通络活血通络胶囊肠道菌群大鼠生物多样性

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基于前外侧保留角预测股骨头坏死塌陷的有限元分析

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中国修复重建外科杂志 2023年第11期37卷 1394-1402页

作者：陆舜林天烨何敏聪何晓铭何宪顺田佳庆魏腾飞詹芝玮林锟魏秋实广州中医药大学第三临床医学院广州510405 广东省中医骨伤研究院广州510378 广州中医药大学第三附属医院关节中心广州510378

目的建立股骨头坏死(osteonecrosis of the femoral head,ONFH)不同保留角有限元模型进行生物力学分析,为以股骨头前侧保留角(anterior preserved angle,APA)和外侧保留角(lateral preserved angle,LPA)预测ONFH塌陷风险提供力学依据。方法选择1名健康成人左侧股骨头为研究对象,获取CT数据导入Mimics21.0软件,重建完整股骨近端模型以及构建3个体积相等、形态不同的ONFH模型,导入Solidworks 2022软件中分别构建APA为60°且LPA分别为45°、50°、55°、60°、65°、70°、75°的21个ONFH有限元模型,以及LPA为60°且APA分别为45°、50°、55°、60°、65°、70°、75°的21个ONFH有限元模型。根据生理状态下股骨头负荷情况,股骨远端设置完全固定,在股骨头表面负重区施加与股骨干成25°夹角、方向向下且大小为受试者3.5倍体质量的合力,利用有限元分析软件Abaqus 2021计算并观察股骨头表面、坏死区最大应力及股骨头负重区最大位移情况。结果研究建立的ONFH模型基本符合ONFH力学情况。在相同载荷条件下,3个不同形态相同体积的坏死区构成的42个ONFH不同保留角模型中,坏死区周围均有应力集中现象。APA为60°时,LPA0.05)。LPA为60°时,APA0.05)。结论从生物力学角度来看,当ONFH保留角小于临界值时,股骨头应力集中现象更为明显,提示此种状态下坏死股骨头发生塌陷风险更高。

关键词：股骨头坏死前侧保留角外侧保留角股骨头塌陷生物力学分析

基于“蓄毒致毒”探讨痛风性关节炎的态靶治毒思路

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环球中医药 2023年第10期16卷 2006-2010页

作者：何宪顺田佳庆何晓铭何敏聪魏腾飞韦雨柔詹芝玮林天烨魏秋实广州中医药大学第三附属医院 510378 广州中医药大学第三附属医院关节中心关节科 510378 广东省中医骨伤研究院

痛风性关节炎是与高尿酸血症密切相关的一种反复炎症性疾病,专家团队在长期临证学习及总结古人经验的基础上,认为痛风性关节炎因湿、热相搏,郁而不解,热极成毒,蓄毒于内,阳动生风,助热毒攻注骨节而发病,疾病发展演变历经“蓄毒而发,毒... 详细信息

痛风性关节炎是与高尿酸血症密切相关的一种反复炎症性疾病,专家团队在长期临证学习及总结古人经验的基础上,认为痛风性关节炎因湿、热相搏,郁而不解,热极成毒,蓄毒于内,阳动生风,助热毒攻注骨节而发病,疾病发展演变历经“蓄毒而发,毒损骨络——湿滞难去,毒伏骨脉”过程。近年研究发现尿酸钠晶体刺激体内炎性体的激活和肠道菌群失调是痛风性关节发生的重要机制,其中炎性体激活可促进机体分泌白介素1β、肿瘤坏死因子-α等加重炎症过程,并且肠菌失调还会导致尿酸的分解、排泄减少。团队认为治疗痛风性关节炎疾病可借鉴仝小林院士的“态靶结合”辨治方略,对痛风辨毒识态定其靶,热毒为痛风急性期所处之“态”,湿毒为痛风缓解期所处之“态”,炎性体、肠菌失调为痛风治疗的重要靶点;治疗上遵循“解毒—化毒”原则,急性期以清热解毒定风为法,缓解期以除湿化毒通络为法。结合态靶辨治方略,分期辨态治毒打靶,减低疾病发病率和复发率,为治疗痛风性关节炎提供理论依据及方法。

关键词：痛风性关节炎蓄毒致毒态靶结合清热解毒定风除湿化毒通络

Piezo1在激素性和酒精性股骨头坏死骨组织中的差异表达

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中国组织工程研究 2023年第2期27卷 270-275页

作者：魏腾飞何晓铭韦雨柔詹芝玮何敏聪何伟魏秋实广州中医药大学广东省广州市510405 广东省中医骨伤研究院广东省广州市510378 广州中医药大学第三附属医院关节中心广东省广州市510378

背景:据报道,激素、酒精均可抑制骨髓间充质干细胞从而影响骨的形成与修复,而股骨头塌陷的发生与机械应力刺激、坏死组织修复能力相关,推测Piezo1可能是感应股骨头坏死塌陷的力学敏感蛋白。目的:观察力学感应蛋白Piezo1在激素性和酒精... 详细信息

背景:据报道,激素、酒精均可抑制骨髓间充质干细胞从而影响骨的形成与修复,而股骨头塌陷的发生与机械应力刺激、坏死组织修复能力相关,推测Piezo1可能是感应股骨头坏死塌陷的力学敏感蛋白。目的:观察力学感应蛋白Piezo1在激素性和酒精性股骨头坏死患者骨组织中的差异表达。方法:选取30例在2020年8月至2021年4月因股骨头坏死行人工全髋关节置换的患者,收集其股骨头标本及临床、影像资料。股骨头标本均为ARCOⅢ期;其中男20例,女10例;分为激素组15例,酒精组15例。苏木精-伊红染色观察股骨头标本骨组织形态结构变化;Westernblot检测骨组织中Piezo1蛋白的半定量表达;免疫组化检测Piezo1蛋白在骨组织中的定位表达。结果与结论:①苏木精-伊红染色结果发现激素及酒精组坏死区骨质结构紊乱、骨髓坏死,均有大量空虚的骨陷窝;②Western blot结果提示激素组患者股骨头骨组织的坏死区、硬化区和正常区Piezo1蛋白的表达均高于酒精组患者(P<0.05);③免疫组化结果提示激素性股骨头坏死组坏死区、硬化区和正常区阳性表达较酒精组更明显;④结果提示,Piezo1可能是感应股骨头坏死塌陷的力学敏感蛋白,并参与成骨的过程;激素性与酒精性股骨头坏死骨组织中Piezo1的差异表达可能与两者不同的骨形成修复特点有关。

关键词：股骨头坏死激素酒精 Piezo1 机械敏感性离子通道塌陷骨修复成骨破骨

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激素性股骨头坏死囊性变分布规律及病理特点

中国组织工程研究 2023年第31期27卷 4996-5001页

作者：田佳庆何敏聪韦雨柔何宪顺钟原江禹来詹芝玮魏腾飞何晓铭魏秋实广州中医药大学第三临床医学院广东省广州市510405 广州中医药大学第三附属医院关节中心广东省广州市510000 广东省中医骨伤研究院广东省广州市510000

背景:股骨头力学承载能力下降是引起股骨头塌陷的主要原因,而囊性变的产生影响了髋关节正常的力学传导途径,但目前很少有文献对股骨头坏死发展过程中二者的关系进行探索。目的:结合热力图模型和激素性股骨头坏死病理结果探讨激素性股骨... 详细信息

背景:股骨头力学承载能力下降是引起股骨头塌陷的主要原因,而囊性变的产生影响了髋关节正常的力学传导途径,但目前很少有文献对股骨头坏死发展过程中二者的关系进行探索。目的:结合热力图模型和激素性股骨头坏死病理结果探讨激素性股骨头坏死囊性变的分布规律及病理特点。方法:以2021年6-12月于广州中医药大学第三附属医院被诊断为激素性股骨头坏死的30例(30髋)患者为研究对象,提取激素性股骨头坏死囊性变轮廓线,将轮廓线匹配至标准股骨头模型上,对轮廓线进行热图呈现;统计股骨头坏死位置与坏死面积,研究二者之间的关系;苏木精-伊红染色观察股骨头标本骨组织形态结构变化。结果与结论:①通过构建激素性股骨头坏死囊性变热力图及结合股骨头病理结果发现,激素性股骨头坏死囊性变好发于股骨头中外侧柱,相较于内侧柱囊性变的面积而言,外侧柱囊性变面积最大,且随着囊性变发生位置的内移,其面积也会随着减小;②并且囊性变周围散在分布微小骨折线,它可能是影响股骨头力学承载能力和头内稳定性的重要因素之一。

关键词：激素性股骨头坏死囊性变热力图微骨折力学承载分布规律病理特点