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雷公藤内酯三醇通过Nrf2/Keap1信号通路抑制氧化应激和炎症减轻雷公藤甲素诱导的肝损伤

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中药新药与临床药理 2023年第4期34卷 509-519页

作者：郑碧丹王晓婉王思玉杨祎琦王凯徐鹏刘博广州中医药大学第二临床医学院广东广州510006 广州市中药活性成分手性研究重点实验室广东广州510006 省部共建中医湿证国家重点实验室广东广州510006

目的基于Nrf2/Keap1信号通路探讨雷公藤内酯三醇对雷公藤甲素诱导小鼠肝损伤模型的肝脏氧化应激和炎症的影响。方法将SPF级Balb/c雄性小鼠随机分空白对照组、雷公藤甲素组及雷公藤甲素+雷公藤内酯三醇组。雷公藤内酯三醇(28 mg·kg^(-1)... 详细信息

目的基于Nrf2/Keap1信号通路探讨雷公藤内酯三醇对雷公藤甲素诱导小鼠肝损伤模型的肝脏氧化应激和炎症的影响。方法将SPF级Balb/c雄性小鼠随机分空白对照组、雷公藤甲素组及雷公藤甲素+雷公藤内酯三醇组。雷公藤内酯三醇(28 mg·kg^(-1))灌胃预处理7 d,最后1次灌胃后,单次腹腔注射雷公藤甲素(1 mg·kg^(-1))复制小鼠肝损伤模型。检测小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平并使用苏木素-伊红(HE)综合评估小鼠的肝损伤程度;试剂盒检测小鼠肝脏中活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和超氧化物歧化酶(SOD)含量,观察肝脏氧化应激状态;采用ELISA试剂盒检测小鼠肝脏中白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素10(IL-10)的水平,评估炎症反应;Western Blot法检测肝脏组织中细胞核因子-红细胞相关因子2(Nrf2)、KELCH样ECH关联蛋白1(KELCH-like ECH-associated protein 1,Keap1)、血红素氧合酶(HO-1)、醌氧化还原酶1(NQO1)的蛋白表达水平。细胞实验中,给予雷公藤内酯三醇(200μg·mL^(-1))及雷公藤甲素(80 ng·mL^(-1))干预小鼠正常肝细胞(alpha mouse liver 12,AML12)24 h,观察相关指标变化。CCK-8法确定雷公藤甲素的模型复制条件和雷公藤内酯三醇的给药浓度并观察AML12细胞的形态变化。ELISA及化学试剂盒检测AML12细胞中IL-10、IL-6、ROS、GSH、MDA和SOD的水平;Western Blot法检测AML12细胞核Nrf2、细胞Keap1、HO-1、NQO1的蛋白表达水平。最后,使用AutoDock Vina软件对雷公藤内酯三醇及雷公藤甲素与Keap1进行分子对接观察药物靶点。结果与雷公藤甲素组比较,雷公藤甲素+雷公藤内酯三醇组小鼠血清ALT、AST水平均明显降低(均P<0.01);肝脏病理损伤明显改善;IL-6水平明显降低(P<0.01),IL-10水平明显升高(P<0.01);ROS(P<0.05)、MDA(P<0.01)水平明显降低,GSH(P<0.05)、SOD(P<0.01)水平明显升高;小鼠肝脏组织中细胞核Nrf2、HO-1、NQO1水平均明显升高(均P<0.01)。在细胞水平上,确定雷公藤甲素复制AML12细胞损伤模型的浓度为80 ng·mL^(-1),雷公藤内酯三醇给药浓度为200μg·mL^(-1);与雷公藤甲素组比较,雷公藤内酯三醇(100~400μg·mL^(-1))明显提高了AML12细胞的活力(P<0.05,P<0.01),明显改善了AML12细胞的形态,AML12细胞IL-6水平明显降低(P<0.01),IL-10水平明显升高(P<0.05),ROS(P<0.01)、MDA(P<0.05)水平明显降低,GSH(P<0.05)、SOD(P<0.01)水平明显升高,AML12细胞中细胞核Nrf2(P<0.01)、HO-1(P<0.05)、NQO1(P<0.05)水平明显升高。雷公藤内酯三醇和雷公藤甲素与Keap1结合能相当,最小结合能分别为-9.7 kJ·mol-1和-9.4 kJ·mol-1。结论雷公藤内酯三醇可以在一定程度通过抑制氧化应激和炎症反应改善雷公藤甲素诱导的肝脏损伤,其作用机制与激活Nrf2/Keap1信号通路有关。

关键词：雷公藤内酯三醇雷公藤甲素肝损伤 Nrf2/Keap1信号通路氧化应激炎症小鼠小鼠正常肝细胞(AML12)

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中医专业研究生科研创新评估量表的构建

西部中医药 2015年第10期28卷 86-89页

作者：张越马媛媛梁倩君曹立幸广州中医药大学广东广州510405 广州中医药大学第二临床医学院

采用全面的文献调研法,收集相关评价指标条目,以构建具有科学性、可操作性、具有中医特色的、适用于中医专业研究生科研能力评价的专用量表。

关键词：中医研究生科研创新能力评估体系

桂枝通络片通过抑制CD72hi巨噬细胞缓解动脉粥样硬化的疗效与机制研究

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中国中药杂志 2024年

作者：何星灵李思静李姿儒刘东华张小娇何欢董晓明龙文杰张维维廖慧丽鲁路杨忠奇倪世豪广州中医药大学第一附属医院中医证候全国重点实验室广州中医药大学岭南医学研究中心广东省中医临床研究院广州中医药大学第一附属医院老年病科深圳市宝安中医院(集团)

探讨桂枝通络片（GZTL）对动脉粥样硬化（AS）小鼠的疗效及作用机制。载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠被随机分为模型组（model），GZTL高、中、低剂量组，阿托伐他汀组（ATV），取同周龄C57BL/6J小鼠为对照组（control）。除control组... 详细信息

探讨桂枝通络片（GZTL）对动脉粥样硬化（AS）小鼠的疗效及作用机制。载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠被随机分为模型组（model），GZTL高、中、低剂量组，阿托伐他汀组（ATV），取同周龄C57BL/6J小鼠为对照组（control）。除control组外，ApoE-/-小鼠通过高脂喂养建立AS模型，持续灌胃给药8周。观察小鼠一般情况及血瘀表现，记录体质量，采用苏木素-伊红（HE）、Masson和油红O染色评价主动脉斑块病变及稳定性；采用生化法检测血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平；采用酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒检测血清白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）水平；采用TUNEL法观察细胞凋亡情况；获取单细胞测序数据，分别分析CD72hi-Mφ在AS患者与小鼠主动脉中的表达差异；免疫荧光法观察小鼠主动脉斑块中CD72hi-Mφ的表达情况；实时荧光PCR法检测小鼠主动脉IL-1β、TNF-α和IL-6 mRNA表达水平。结果显示，与control组比较，model组小鼠体质量明显升高，主动脉斑块病变、坏死核心与脂质沉积的面积均明显增加，胶原纤维含量显著降低，细胞凋亡增多；血清TC、TG、LDL-C含量及炎症因子IL-1β、TNF-α、IL-6水平明显升高，主动脉组织IL-1β、TNF-α和IL-6 mRNA表达水平显著升高；与model组比较，GZTL各剂量组及ATV组体质量均有降低趋势，GZTL中、高剂量和ATV组主动脉斑块病变、坏死核心与脂质沉积的面积均显著改善，胶原纤维含量明显增加，细胞凋亡减少；血清TC、TG、LDL-C含量及炎症因子IL-1β、TNF-α、IL-6水平明显降低；单细胞数据分析结果显示，与正常动脉组织比较，AS患者颈动脉斑块病变处CD72hi-Mφ信号明显升高；动物实验进一步证实，CD72hi-Mφ和一系列促炎因子在AS小鼠主动脉中的表达显著升高，GZTL干预可使其表达量降低。综上，GZTL可能通过抑制CD72hi-Mφ缓解AS。

关键词：动脉粥样硬化瘀毒桂枝通络片 CD72hi-Mφ 单细胞测序

基于单细胞测序研究心阳片改善尿毒症心肌病心肌纤维化的分子机制

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中国中药杂志 2024年第24期 6746-6754页

作者：倪世豪李姿儒李思静何星灵李锦陈星伶龙文杰张维维廖慧丽鲁路杨忠奇中医证候全国重点实验室广州中医药大学第一附属医院广州中医药大学岭南医学研究中心广东省中医临床研究院广州中医药大学第一附属医院老年病科深圳市宝安中医院(集团)

运用单细胞测序技术探究心阳片对尿毒症心肌病（uremic cardiomyopathy, UCM）心肌纤维化的改善作用。采用5/6肾切术（5/6 nephrectomy, NPM）建立UCM小鼠模型，并随机分为模型组、心阳片组，假手术组为对照。心阳片组术后接受心阳片(0.... 详细信息

运用单细胞测序技术探究心阳片对尿毒症心肌病（uremic cardiomyopathy, UCM）心肌纤维化的改善作用。采用5/6肾切术（5/6 nephrectomy, NPM）建立UCM小鼠模型，并随机分为模型组、心阳片组，假手术组为对照。心阳片组术后接受心阳片(0.34 g·kg-1)干预。8周后，解离各组小鼠心脏，进行10×Genomics单细胞测序。数据经过t-SNE降维、K-means聚类方法和CellMarker注释后，使用Seurat和Monocle3工具进行差异表达和细胞分化轨迹分析。CellChat工具用于解析细胞间信号通讯。结果显示，该研究共鉴定出成纤维细胞、内皮细胞、免疫细胞等9种细胞。成纤维细胞的单细胞表达结果和基因本体论（Gene Ontology, GO）富集分析显示，心阳片调节心肌纤维化因子和相关信号。拟时序分析结果鉴定出小鼠心脏成纤维细胞主要的3条分化轨迹，并识别分泌型磷酸蛋白1（secreted phosphoprotein 1,Spp1）的表达与成纤维细胞分化轨迹一致。细胞交互网络分析结果表明，与模型组相比，心阳片组小鼠心脏成纤维细胞与其他细胞之间的通讯信号减弱。配体-受体互作分析结果表明，与模型组相比，心阳片组小鼠髓系细胞来源的骨桥蛋白（osteopontin, OPN）与心脏成纤维细胞的相互作用减弱，髓系细胞Spp1配体与心脏成纤维细胞受体之间的相互作用减弱。综上所述，心阳片可能通过抑制内源性和外源性OPN,在单细胞水平上改善UCM心肌纤维化。

关键词：尿毒症心肌病心阳片骨桥蛋白心肌纤维化单细胞测序

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经阴道彩色多普勒超声联合血清β-HCG诊断子宫切口妊娠

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中国计划生育学杂志 2022年第7期30卷 1560-1563,1568页

作者：余奕黄菊霞胡金花夏群夏天吴方玲梁宇鸣安徽省安庆市第一人民医院 246000 安庆医药高等专科学校

目的:探讨经阴道彩色多普勒超声联合血清β-人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)对子宫切口妊娠的诊断价值.方法:选取2018年2月-2021年11月本院收治的90例疑似子宫切口妊娠孕妇临床资料,经手术病理检查确诊46例为正常妊娠(正常妊娠组),44例为子... 详细信息

目的:探讨经阴道彩色多普勒超声联合血清β-人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)对子宫切口妊娠的诊断价值.方法:选取2018年2月-2021年11月本院收治的90例疑似子宫切口妊娠孕妇临床资料,经手术病理检查确诊46例为正常妊娠(正常妊娠组),44例为子宫切口妊娠(子宫切口妊娠组),采用酶联免疫吸附法检测血清β-HCG水平,彩色多普勒超声诊断仪经阴道检查子宫孕囊情况;分析经阴道彩色多普勒超声、血清β-HCG检出子宫切口妊娠与临床病理诊断一致性及诊断子宫切口妊娠价值.结果:子宫切口妊娠组血清β-HCG水平(1768.24±421.74U/L)高于正常妊娠组(1020.83±302.44U/L)(P<0.05).经阴道彩色多普勒超声、血清β-HCG确诊子宫切口妊娠分别为37例、34例,与临床病理诊断的一致性均为较高(Kappa=0.710、0.598,均P<0.05),二者联合确诊子宫切口妊娠41例,与临床病理诊断一致性极好(Kappa=0.889,P<0.05).与血清β-HCG检测比较,联合经阴道彩色多普勒超声诊断子宫切口妊娠的敏感度(90.9%)、准确率(94.4%)、阴性预测值(91.8%)均升高,漏诊率(2.2%)降低(均P<0.05).结论:经阴道彩色多普勒超声联合血清β-HCG可提高检出子宫切口妊娠,减少漏诊.

关键词：子宫切口妊娠经阴道彩色多普勒超声 β-人绒毛膜促性腺激素诊断价值

基于数据挖掘技术探讨针灸古籍中针刺治疗颈肩臂痛的选穴规律

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中医正骨 2023年第9期35卷 24-29页

作者：林锦浩陈树东侯宇林方政林定坤广州市从化区中医医院广东广州510999 广东省中医院广东广州510120 广州中医药大学第二临床医学院广东广州510405

目的:探讨针灸古籍中针刺治疗颈肩臂痛的选穴规律。方法:采用数据挖掘技术,在《中华医典》光盘和中国中医药数据库收录的针灸古籍中检索1911年之前的有关针刺治疗颈肩臂痛的文献。提取文献中的针刺处方,统计腧穴的分布和归经情况。采用M... 详细信息

目的:探讨针灸古籍中针刺治疗颈肩臂痛的选穴规律。方法:采用数据挖掘技术,在《中华医典》光盘和中国中医药数据库收录的针灸古籍中检索1911年之前的有关针刺治疗颈肩臂痛的文献。提取文献中的针刺处方,统计腧穴的分布和归经情况。采用Microsoft Excel 2020软件建立数据库,采用SPSS Clementine12.0软件对筛选出的高频腧穴和经络进行关联规则分析。结果:共收集92部针灸古籍,包含188首治疗颈肩臂痛针刺处方,涉及115个腧穴。针刺处方中的腧穴数目为1~14个,其中以1个腧穴的出现频次最高(146次)。在115个腧穴中,出现频次较高的为承浆(23次)、风府(17次)、后溪(17次)。对115个腧穴进行关联规则分析,得到22条关联规则,其中前3位依次为少商→委中、承浆+少商→委中、肩井+中渚→百会。利用规则涵盖关系和规则相似关系对22条关联规则进行规则简约,得到6条关联规则,其中前3位依次为承浆+少商→委中、承浆+肩井+中渚→百会、风府+哑门→风池。188首针刺处方共涉及16条经络,针刺处方中的经络数目为1~6条,其中以1条经络的出现频次最高(146次)。在16条经络中,出现频次较高的为足太阳膀胱经(44次)、手太阳小肠经(41次)、足少阳胆经(39次)。对16条经络进行关联规则分析,得到22条关联规则,其中前3位依次为任脉+手太阳小肠经+足太阳膀胱经→手太阴肺经、手太阴肺经+足太阳膀胱经→任脉、手阳明大肠经+足少阳胆经→任脉。利用规则涵盖关系和规则相似关系对22条关联规则进行规则简约,得到7条关联规则,其中前3位依次为任脉+手太阳小肠经+足太阳膀胱经→手太阴肺经、督脉+手阳明大肠经+足少阳胆经→任脉、手少阳三焦经+足少阳胆经→督脉。结论:针灸古籍中针刺治疗颈肩臂痛的选穴规律为,根据病因取穴,以局部取穴为主,重视交会穴,强调经络辨证和阴阳平衡,注重上下配穴和应用特定穴。

关键词：颈痛肩痛臂痛数据挖掘中医药学文献针刺疗法针灸处方选穴法

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植物铜胁迫响应的生理与分子机制研究进展

中国农学通报 2023年第11期39卷 18-28页

作者：李佳杜瑞英王旭陈光广东省农业科学院农业质量标准与监测技术研究所广州510640 广东省农产品质量安全风险评估重点实验室广州510640 农业农村部农产品质量安全检测与评价重点实验室广州510640

铜(Cu)是人体和动植物必需的金属,参与多种形态、生理和生化过程;铜是多种酶的辅因子,在光合、呼吸作用和电子传递链中起重要作用,也是防御基因的结构组成部分。为了给今后植物铜胁迫的研究提供更系统的理论参考,基于前期研究的过量铜... 详细信息

铜(Cu)是人体和动植物必需的金属,参与多种形态、生理和生化过程;铜是多种酶的辅因子,在光合、呼吸作用和电子传递链中起重要作用,也是防御基因的结构组成部分。为了给今后植物铜胁迫的研究提供更系统的理论参考,基于前期研究的过量铜对植物萌发、生长、光合作用和抗氧化等生理过程的不利影响的基础上,综述了铜的生物学功能;过量铜对植物生长发育的毒害;铜转运、伴侣蛋白的作用以及植物对铜胁迫的耐受机制。展望了未来的研究方向,为制定合理维持铜稳态的有效策略提供依据。

关键词：铜毒害铜稳态吸收转运耐受机制

从炎症免疫角度探究心阳片改善尿毒症心肌病的作用和机制

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环球中医药 2024年第7期17卷 1267-1273页

作者：倪世豪刘东华何星灵欧阳小露张小娇李锦陈星伶陈梓欣王陵军冼绍祥汪朝晖廖慧丽鲁路杨忠奇中医证候全国重点实验室、广州中医药大学第一附属医院 510405

目的从炎症免疫角度探究心阳片对尿毒症心肌病的治疗作用及其机制。方法采用5/6肾切除术建立尿毒症心肌病小鼠模型,随机分为模型组和心阳片组,每组15只;另设15只假手术小鼠作为假手术组。心阳片组术后给予心阳片0.34 g/(kg·d)灌胃8周,... 详细信息

目的从炎症免疫角度探究心阳片对尿毒症心肌病的治疗作用及其机制。方法采用5/6肾切除术建立尿毒症心肌病小鼠模型,随机分为模型组和心阳片组,每组15只;另设15只假手术小鼠作为假手术组。心阳片组术后给予心阳片0.34 g/(kg·d)灌胃8周,假手术组和模型组给予等量0.9%氯化钠溶液灌胃8周。通过心脏转录组数据结合生物信息学手段分析尿毒症心肌病小鼠的心脏炎症免疫状态及心阳片的调节效果和作用机制。通过实时荧光定量PCR(Real-time Quantitative PCR,qPCR)法检测各组小鼠心脏中炎症因子和炎症免疫细胞相关标记物的mRNA表达水平。通过免疫荧光法观察各组小鼠心脏中炎症免疫细胞的浸润情况。结果心脏转录组GO富集分析结果显示,心阳片可能参与抑制尿毒症心肌病的多个炎症免疫相关生物过程。心脏转录组分析结果显示,心阳片抑制了心脏炎症因子(白细胞介素-1β、白细胞介素-6、白细胞介素-18、肿瘤坏死因子)和炎症免疫细胞相关标记物(CD_(86)、CD_(72)、淋巴细胞抗原6c1、整合素β2)水平,且减少了炎症免疫细胞(中性粒细胞、单核细胞、CD_(86)+巨噬细胞、CD_(72)hi巨噬细胞)的浸润。qPCR结果显示,与模型组相比,心阳片组小鼠心脏中白细胞介素-1β、白细胞介素-6、白细胞介素-18、肿瘤坏死因子mRNA水平均显著下调(P<0.05)。免疫荧光结果显示,与模型组相比,心阳片组中心脏中性粒细胞、单核细胞、CD_(72)hi巨噬细胞的浸润均显著减少。此外,基因集富集分析结果显示,心阳片组核因子-κB、c-Jun氨基末端激酶、细胞外调节蛋白激酶1/2和p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路被明显抑制(富集评分分别为-0.55、-0.54、-0.43、-0.50)。结论心阳片可能通过抑制心脏的炎症免疫反应以改善尿毒症心肌病。

关键词：尿毒症心肌病心阳片炎症免疫反应免疫细胞

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为人才培养插上翅膀：“双高”职业本科“飞翔计划”拔尖人才培养模式的创新与实践——以深圳职业技术大学为例

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公关世界 2024年第24期 63-65页

作者：李馥芬周睿曾文俊深圳职业技术大学

新职教法对新时代职业教育发展改革起到强有力的助推作用。本文立足于个体访谈法和问卷调查法，以深圳职业技术大学“飞翔计划”拔尖创新人才培养模式为例，探索实施全程导师制、建设全人发展课程、加强全球视野教育、实行全方位评价体... 详细信息

新职教法对新时代职业教育发展改革起到强有力的助推作用。本文立足于个体访谈法和问卷调查法，以深圳职业技术大学“飞翔计划”拔尖创新人才培养模式为例，探索实施全程导师制、建设全人发展课程、加强全球视野教育、实行全方位评价体系等“四全”培养举措，分析目前面临的问题，并提出将导师引导与机制保障相结合；通识课程与专业课程相结合；全球视野与全球治理相结合；优质选拔与动态评价相结合等优化路径，从而推进产教融合、打造优质教育、提升全球胜任力、实现以评育人，以期为我国“双高”职业本科拔尖创新人才自主培养的理论和实践研究提供借鉴。

关键词：职业本科拔尖创新人才培养模式