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沉默FOXO1基因对人主动脉血管平滑肌细胞自噬和凋亡的影响

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吉林大学学报（医学版） 2024年第2期50卷 431-441页

作者：王琳茹张晶赵冬婵王晋军胡文贤青岛大学附属青岛市海慈医院青岛市中医医院血管外科山东青岛266000

目的:探讨叉头框转录因子O1(FOXO1)基因对腹主动脉瘤(AAA)血管平滑肌细胞自噬和凋亡的影响,阐明其可能的作用机制。方法:收集19例AAA患者动脉瘤组织(AAA组)及邻近正常主动脉组织(对照组),采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测2组研究对... 详细信息

目的:探讨叉头框转录因子O1(FOXO1)基因对腹主动脉瘤(AAA)血管平滑肌细胞自噬和凋亡的影响,阐明其可能的作用机制。方法:收集19例AAA患者动脉瘤组织(AAA组)及邻近正常主动脉组织(对照组),采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测2组研究对象动脉瘤组织中FOXO1 mRNA表达水平,透射电镜观察2组研究对象动脉瘤组织中自噬溶酶体形成情况;Western blotting法检测2组研究对象动脉瘤组织中FOXO1及自噬相关蛋白卷曲螺旋肌球蛋白样B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)结合蛋白(Beclin1)、微管相关蛋白1轻链3α(LC3)和P62蛋白表达水平。体外培养人主动脉血管平滑肌细胞(hVSMCs),并采用FOXO1 siRNA(si-FOXO1)及其阴性对照(si-NC)慢病毒感染hVSMCs,10μmol·L^(-1)血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)联合自噬激活剂雷帕霉素(Rap)进行干预,将细胞分为空白对照组、AngⅡ组、AngⅡ+si-NC组、AngⅡ+si-FOXO1组、AngⅡ+si-NC+Rap组和AngⅡ+si-FOXO1+Rap组。CCK-8法检测各组细胞增殖活性,流式细胞术检测各组细胞凋亡水平,ELISA法检测各组细胞上清中基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)水平,RT-qPCR法检测各组细胞中FOXO1 mRNA表达水平,Western blotting法检测各组细胞中FOXO1、Bcl-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、剪切型含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved caspase-3)、Beclin1、LC3和P62蛋白表达水平。结果:与对照组比较,AAA组动脉瘤组织中FOXO1 mRNA表达水平升高(P<0.05),自噬溶酶体数量增多(P<0.05),Beclin1蛋白表达水平和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高(P<0.05),P62蛋白表达水平降低(P<0.05)。与空白对照组比较,AngⅡ组hVSMCs增殖活性降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05),细胞上清中MMP-2和MMP-9水平升高(P<0.05),细胞中Bax、Cleaved caspase-3和Beclin1蛋白表达水平及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高(P<0.05),Bcl-2和P62蛋白表达水平降低(P<0.05);与AngⅡ+si-NC组比较,AngⅡ+si-FOXO1组hVSMCs增殖活性升高(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05),细胞上清中MMP-2和MMP-9水平降低(P<0.05),细胞中Bax、Cleaved-caspase-3和Beclin1蛋白表达水平及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值降低(P<0.05),Bcl-2和P62蛋白表达水平升高(P<0.05)。与AngⅡ+si-FOXO1组比较,AngⅡ+si-FOXO1+Rap组细胞凋亡率升高(P<0.05),细胞上清中MMP-2和MMP-9水平升高(P<0.05),细胞中Beclin1蛋白表达水平和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值降低(P<0.05),P62蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论:FOXO1基因沉默可能通过降低自噬水平来提高AngⅡ暴露下hVSMCs增殖活性,并抑制其凋亡,从而参与AAA的发病。

关键词：腹主动脉瘤人血管平滑肌细胞叉头框转录因子O1 自噬细胞凋亡

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椎体压缩骨折不愈合治疗进展

中国中医药现代远程教育 2024年第9期22卷 163-165页

作者：刘铭周娜高山李鹏马广斌于龙潭山东中医药大学第一临床医学院山东济南250013 潍坊市中医院东医院脊柱骨科山东潍坊261000

从现代医学和中医学角度阐述椎体压缩骨折不愈合的治疗进展。分析椎体压缩骨折不愈合的临床表现、分期分型,阐述现代医学手术不同术式的应用以及保守治疗方案,探究中药方剂、中医外治法治疗此病的临床效果,进一步发掘中西医结合治疗本... 详细信息

从现代医学和中医学角度阐述椎体压缩骨折不愈合的治疗进展。分析椎体压缩骨折不愈合的临床表现、分期分型,阐述现代医学手术不同术式的应用以及保守治疗方案,探究中药方剂、中医外治法治疗此病的临床效果,进一步发掘中西医结合治疗本病的优势。对椎体压缩骨折不愈合的治疗方式选择做出综合评价,为治疗此病开拓思路。

关键词：痿证椎体压缩骨折 Kümmell氏病现代医学中医药综述

从“痰湿内蕴”论治冠状动脉粥样硬化性心脏病

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中医临床研究 2024年第8期16卷 82-86页

作者：王海权张磊姜枫李运伦山东中医药大学山东济南250000 山东省中医院山东济南250000

摘冠状动脉粥样硬化性心脏病(简称冠心病)是由冠状动脉粥样硬化引起血管狭窄,心肌缺血缺氧的临床常见综合征。痰湿内蕴是冠心病早期较为常见的重要病机,临床常见胸闷、心痛、肢体困乏、头重如裹、眩晕、恶心、脘腹痞闷、脉滑等表现。古... 详细信息

摘冠状动脉粥样硬化性心脏病(简称冠心病)是由冠状动脉粥样硬化引起血管狭窄,心肌缺血缺氧的临床常见综合征。痰湿内蕴是冠心病早期较为常见的重要病机,临床常见胸闷、心痛、肢体困乏、头重如裹、眩晕、恶心、脘腹痞闷、脉滑等表现。古代医家很早就对痰湿之邪与胸闷、心痛之间的关系有了深刻的认知,并各有阐释。痰湿之邪不仅作为重要的病理因素引起冠心病的发病、发展,更是作为独立的病理产物影响着本病的预后与转归,痰湿内蕴作为本病的重要病机贯穿疾病发生发展的始终,并且作为独立的病理因素引起痰气阻滞、血脉瘀阻、痰火酿毒、痰湿困脾等复杂兼证,按照中医辨证论治的基本原则,其具体治法则以燥湿化痰为要,根据其兼证的不同分别施以理气、活血、解毒、健脾等法辅之。临床诊疗案例显示,以燥湿化痰为法治疗冠心病疗效确切,在减轻患者胸闷、胸痛等不适的同时,使痰湿引起的头昏体重、乏力等症状有了明显的改善。文章梳理“痰湿内蕴”理论的起源、发展与完善,剖析“痰湿内蕴”这一重要病机在冠心病的发病、转归中的重要意义,总结燥湿化痰类药物在冠心病治疗中的相关研究与应用,以期为中医中药防治冠心病的临床应用提供更可靠的理论依据。

关键词：冠状动脉粥样硬化性心脏病痰湿内蕴证燥湿化痰法治则治法

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口腔扁平苔藓基因多态性的研究

华西口腔医学杂志 2020年第6期38卷 681-686页

作者：潘英潇郭大伟李新刘恒毅卢恕来青岛大学口腔医学院青岛大学附属青岛市市立医院口腔医疗中心青岛266000

口腔扁平苔藓(OLP)是一种常见的口腔黏膜慢性炎症性疾病,成年人患病率为0.5%~2%。OLP的病因和发病机制尚不明确,研究显示其发病可能与某些基因的遗传多态性相关,目前研究较多的有肿瘤坏死因子、干扰素、白细胞介素、酶类、受体等基因家... 详细信息

口腔扁平苔藓(OLP)是一种常见的口腔黏膜慢性炎症性疾病,成年人患病率为0.5%~2%。OLP的病因和发病机制尚不明确,研究显示其发病可能与某些基因的遗传多态性相关,目前研究较多的有肿瘤坏死因子、干扰素、白细胞介素、酶类、受体等基因家族。本文就基因多态性与口腔扁平苔藓的相关性进行综述。

关键词：口腔扁平苔藓基因多态性遗传病因

口腔扁平苔藓相关microRNAs的研究进展

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口腔疾病防治 2021年第3期29卷 206-210页

作者：潘英潇郭大伟李新卢恕来青岛大学口腔医学院山东青岛266011 青岛大学附属青岛市市立医院口腔医疗中心山东青岛266011

口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)是一种常见的病因不明的慢性炎症性疾病,细胞介导的局部免疫应答紊乱在其中发挥着重要作用。目前发现microRNAs(miRNAs)在炎性反应、自身免疫性疾病的发生发展中起到重要作用,已有大量研究报道显示... 详细信息

口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)是一种常见的病因不明的慢性炎症性疾病,细胞介导的局部免疫应答紊乱在其中发挥着重要作用。目前发现microRNAs(miRNAs)在炎性反应、自身免疫性疾病的发生发展中起到重要作用,已有大量研究报道显示miRNAs可能与OLP相关。文献复习结果表明,miRNA⁃19a高表达和miRNA⁃122、miRNA⁃199、miRNA⁃138、miRNA⁃635、miRNA⁃578低表达可能通过调控白介素、干扰素、肿瘤坏死因子等细胞因子而与OLP的发生相关;miRNA⁃125a低表达和miRNA⁃132、miRNA⁃146a、miRNA⁃155高表达可能通过影响CD4^+T细胞在Th1/Th2亚群上的分化过程而与OLP的严重程度相关;miRNA⁃26a、miRNA⁃29a、miRNA⁃31高表达和miRNA⁃27b、miRNA⁃200a、miRNA⁃137低表达可能通过具有功能关系的相关基因组、转录因子和miRNA协同调控网络等与OLP癌变风险相关。目前研究仍存在不足之处,许多利用基因芯片筛选差异表达miRNA的研究并没有根据OLP类型或癌变风险进一步的分组探究。

关键词：口腔扁平苔藓非编码RNA microRNAs 发病机制疾病严重程度癌变风险癌基因抑癌基因

脂联素受体激动剂AdiopRon对胶质瘤细胞生物学行为的影响及其机制

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吉林大学学报（医学版） 2022年第3期48卷 702-710页

作者：刘翠兰胡凤爱刘晶王丹邱长云柳敦江赵娣滨州医学院附属医院医学研究中心山东滨州256603

目的:探讨脂联素受体激动剂AdipoRon对胶质瘤细胞生物学行为的影响,阐明其可能的作用机制。方法:取对数生长期的神经胶质瘤U251和U87 MG细胞分为对照组(0μmol·L^(-1) AdipoRon)和20、40、60、80及100μmol·L^(-1) AdipoRon组,CCK-8... 详细信息

目的:探讨脂联素受体激动剂AdipoRon对胶质瘤细胞生物学行为的影响,阐明其可能的作用机制。方法:取对数生长期的神经胶质瘤U251和U87 MG细胞分为对照组(0μmol·L^(-1) AdipoRon)和20、40、60、80及100μmol·L^(-1) AdipoRon组,CCK-8法检测24、48和72 h时各组细胞增殖率。U251和U87 MG细胞分为对照组(0μmol·L^(-1))和40、60及80μmol·L^(-1) AdipoRon组,细胞克隆形成实验检测各组细胞克隆形成率,划痕愈合实验检测各组细胞划痕愈合率,流式细胞术检测各组细胞凋亡率及不同细胞周期细胞百分率,Western blotting法检测各组细胞中AMP依赖蛋白激酶(AMPK)和磷酸化AMPK(p-AMPK)蛋白表达水平。将U251细胞分为shNC对照组(未处理)、shNC组(经40μmol·L^(-1) AdipoRon处理,未敲低)、AdipoR1敲低组(经40μmol·L^(-1) AdipoRon处理,敲低AdipoR1)、AdipoR2敲低组(经40μmol·L^(-1) AdipoRon处理,敲低AdipoR2)和AdipoR1+AdipoR2共同敲低组(经40μmol·L^(-1) AdipoRon处理,敲低AdipoR1和AdipoR2)。CCK-8法检测各组U251细胞增殖率,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组U251细胞中AdiopR1和AdiopR2 mRNA表达水平。结果:与对照组比较,24、48和72 h时,不同浓度AdipoRon组U251和U87 MG细胞增殖率明显降低(P<0.05或P<0.01);与对照组比较,40、60和80μmol·L^(-1) AdipoRon组U251和U87 MG细胞克隆形成率明显降低(P<0.01);与对照组比较,作用48 h时,40、60和80μmol·L^(-1) AdipoRon组U251和U87 MG细胞划痕愈合率降低(P<0.01);与对照组比较,60和80μmol·L^(-1) AdipoRon组U251细胞及80μmol·L^(-1) AdipoRon组U87 MG细胞凋亡率升高(P<0.01),40、60和80μmol·L^(-1) AdipoRon组U251和U87 MG细胞中G0/G1期细胞百分率升高(P<0.01);与对照组比较,60和80μmol·L^(-1) AdipoRon组U251细胞中p-AMPK蛋白表达水平升高(P<0.01),40、60和80μmol·L^(-1) AdipoRon组U87 MG细胞中p-AMPK蛋白表达水平升高(P<0.05或P<0.01)。与shNC对照组比较,AdipoR1敲低组细胞中AdipoR1 mRNA表达水平降低(P<0.01),AdipoR2敲低组细胞中AdipoR2 mRNA表达水平降低(P<0.01)。与shNC对照组比较,经40μmol·L^(-1) AdipoRon作用后,敲低AdipoR1组、敲低AdipoR2组和AdipoR1+AdipoR2共同敲低组U251细胞增殖率均升高(P<0.05或P<0.01)。结论:AdipoRon可抑制神经胶质瘤细胞增殖、迁移和凋亡,并将细胞周期阻滞在G0/G1期,其作用机制可能是AdipoRon与脂联素受体AdipoR1和AdipoR2相互作用后促进AMPK磷酸化,从而影响胶质瘤细胞的生物学行为。

关键词：胶质瘤 AdipoRon 细胞增殖细胞迁移细胞凋亡细胞周期 AMP依赖蛋白激酶

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口腔扁平苔藓患者唾液中氧化应激指标与NF-κB相关炎症因子相关性的研究

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口腔医学研究 2019年第12期35卷 1187-1190页

作者：李新孙银银潘英潇王赛男张馨予卢恕来青岛大学口腔医学院山东青岛266003 大连医科大学辽宁大连116027 青岛大学附属青岛市市立医院山东青岛266011

目的:通过唾液样本评估口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)患者氧化应激状态、NF-κB相关炎症因子水平及二者之间的相关性。方法:选取30例OLP患者(OLP组)和30名健康体检者(健康组),OLP组分为非糜烂型口腔扁平苔藓(non-erosive oral l... 详细信息

目的:通过唾液样本评估口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)患者氧化应激状态、NF-κB相关炎症因子水平及二者之间的相关性。方法:选取30例OLP患者(OLP组)和30名健康体检者(健康组),OLP组分为非糜烂型口腔扁平苔藓(non-erosive oral lichen planus,NEOLP)组和糜烂型口腔扁平苔藓(erosive oral lichen planus,EOLP)组,ELISA法检测氧化应激指标MDA、8-OHDG、TOS、TAC,NF-κB相关炎症因子TNF-α、IL-6、IL-8表达水平。结果:OLP组、NEOLP组、EOLP组MDA、8-OHDG、TOS均显著高于健康组(P0.05);EOLP组TNF-α、IL-6升高,差异无统计学意义(P>0.05),IL-8显著升高(P<0.05)。OLP组、NEOLP组、EOLP组TOS与TNF-α、IL-6、IL-8呈正相关(P<0.05),TAC与TNF-α、IL-6、IL-8呈负相关(P<0.05)。结论:OLP患者存在氧化应激增加,NF-κB相关炎症因子水平增高,二者存在相关性。

关键词：口腔扁平苔藓氧化应激 NF-κB

MARCH1通过PI3K/AKT信号通路对人胃癌细胞迁移和侵袭的促进作用

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吉林大学学报（医学版） 2021年第2期47卷 352-359页

作者：王暖杨丽娟代娟娟王爱丽武艳刘成霞滨州医学院附属医院消化内科山东滨州256600 滨州医学院附属医院肿瘤研究实验室山东滨州256600

目的:探讨膜相关环状蛋白1(MARCH1)对胃癌细胞迁移和侵袭的影响,并阐明其可能的分子机制。方法:收集胃癌手术切除的20例胃癌组织和癌旁组织,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法和Western blotting法检测不同组织中MARCH1 mRNA和蛋... 详细信息

目的:探讨膜相关环状蛋白1(MARCH1)对胃癌细胞迁移和侵袭的影响,并阐明其可能的分子机制。方法:收集胃癌手术切除的20例胃癌组织和癌旁组织,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法和Western blotting法检测不同组织中MARCH1 mRNA和蛋白表达水平。选择人胃黏膜正常上皮细胞GES-1和人胃癌细胞BGC-823、BGC-803、AGS及SGC-7901,RT-qPCR法检测不同细胞中MARCH1 mRNA表达水平。取对数生长期的SGC-7901细胞系分为siNC(转染siNC)、siMARCH1-1组(转染siMARCH1-1)和siMARCH1-2组(转染siMARCH1-2),RT-qPCR法和Western blotting法检测各组细胞中MARCH1 mRNA和蛋白表达水平,CCK-8法检测各组细胞增殖活性,细胞划痕实验检测各组细胞划痕愈合率,Transwell小室实验检测各组细胞侵袭能力,Western blotting法检测各组细胞中磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)和蛋白激酶B(AKT)蛋白表达水平。结果:与癌旁组织比较,胃癌组织中MARCH1 mRNA和蛋白表达水平明显升高(P0.05),细胞划痕愈合率和侵袭数均明显降低(P0.05)。结论:MARCH1能够促进胃癌细胞的迁移和侵袭,其机制可能与调控PI3K/AKT信号通路有关。

关键词：胃肿瘤膜相关环状蛋白1 细胞迁移细胞侵袭磷脂酰肌醇3-激酶蛋白激酶B

桃红四物汤对骨搬移过程中骨质矿化影响的临床观察

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上海中医药杂志 2018年第8期52卷 50-53页

作者：闫秀中王燕秦泗河马海波刘锋姜娥先徐德龙房经武王金国山东省日照市中医医院四肢矫形与功能重建科山东日照276800 国家辅具研究中心附属康复医院骨科北京100176

目的观察桃红四物汤对骨搬移过程中骨质矿化的影响。方法将40例需要行骨搬移术的外伤性四肢骨缺损或四肢骨髓炎术后患者随机分为治疗组和对照组,每组各20例。两组均行骨搬移术,对照组予常规对症措施,治疗组在常规对症措施基础上加服桃... 详细信息

目的观察桃红四物汤对骨搬移过程中骨质矿化的影响。方法将40例需要行骨搬移术的外伤性四肢骨缺损或四肢骨髓炎术后患者随机分为治疗组和对照组,每组各20例。两组均行骨搬移术,对照组予常规对症措施,治疗组在常规对症措施基础上加服桃红四物汤。两组疗程均为3个月,观察骨折临床愈合与骨质矿化所需时间,比较延长骨段的骨密度、患肢疼痛VAS评分的情况。结果 (1)搬移1个月与其后各时点组内比较,两组延长骨段BMD水平差异均有统计学意义,均明显升高(P<0.05);组间搬移4个月、骨搬移结束及骨质矿化结束时比较,延长骨段BMD水平差异有统计学意义,治疗组明显高于对照组(P<0.05)。(2)搬移第1天与其后各时点组内比较,两组疼痛VAS评分差异均有统计学意义,均明显降低(P<0.05);组间搬移1周、搬移1个月、骨搬移结束及骨质矿化结束时比较,疼痛VAS评分差异有统计学意义,治疗组明显低于对照组(P<0.05)。(3)两组骨折临床愈合时间、骨质矿化所需时间比较,差异有统计学意义,治疗组明显少于对照组(P<0.05)。结论桃红四物汤可明显提高骨搬移过程中延长骨段的骨密度,减轻骨搬移及骨折愈合过程中的患肢疼痛症状,缩短骨折愈合及骨质矿化所需时间。

关键词：骨缺损骨折骨搬移骨质矿化愈合桃红四物汤活血化瘀