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电针对多囊卵巢综合征小鼠机械痛阈及TRPV1和CGRP表达的影响

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中国疼痛医学杂志 2023年第1期29卷 12-19页

作者：徐晨曦胡瑞斌高昕妍乔海法袁伟陕西中医药大学针灸推拿学院咸阳712046 陕西省针药结合重点实验室咸阳712046 咸阳市神经生物学(针灸)重点实验室咸阳712046 中国中医科学院针灸研究所北京100700

目的:观察电针关元及敏化点对多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)小鼠关元穴、敏化点机械痛阈值及T13-L2节段脊髓、背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)中瞬时受体电位香草酸亚型1(transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1)、降钙素基因相关肽(calcitonin gene related peptide,CGRP)表达的影响,探讨PCOS小鼠模型体表敏化的部分机制。方法:32只雌性ICR小鼠,随机分为对照组、模型组、电针关元组、电针敏化点组,每组8只。采用双酚A灌胃的方式制备PCOS模型,对照组用玉米油灌胃;电针关元及敏化点,每日20 min,连续5天,共4周。电针结束后第3天,用von Frey测量小鼠体表敏化点及关元穴机械痛阈值;HE染色法观察卵巢组织病理形态;蛋白印迹法、免疫荧光法检测脊髓、DRG中TRPV1及CGRP表达水平。结果:与对照组比较,模型组卵巢组织囊性扩张、闭锁卵泡增加,关元穴、敏化点痛阈值下降,脊髓及DRG中TRPV1、CGRP蛋白表达上升,脊髓中TRPV1/CGRP共表达光密度升高、DRG中TRPV1/CGRP共表达细胞增加;与模型组比较,电针关元组及电针敏化点组卵泡及黄体发育良好,关元穴及敏化点痛阈值升高,脊髓、DRG中TRPV1及CGRP蛋白表达降低、脊髓中TRPV1/CGRP共表达光密度降低、DRG中TRPV1/CGRP共表达细胞减少。结论:电针敏化点与关元可提高PCOS小鼠关元穴及敏化点机械痛阈值,调节PCOS小鼠体表敏化现象,其作用机制可能与下调TRPV1、CGRP的异常高表达有关。

关键词：多囊卵巢综合征穴位敏化机械痛阈瞬时受体电位香草酸亚型1 降钙素基因相关肽

基于Wnt/β-catenin信号通路以半夏泻心汤治疗慢性萎缩性胃炎探究寒热错杂证病机本质

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中华中医药杂志 2022年第5期37卷 2947-2951页

作者：李灵陈健张梁坤李亚星祖国秀孙克允黄海量韩涛山东中医药大学济南250355

目的:以半夏泻心汤治疗慢性萎缩性胃炎(CAG)为例,提出“Wnt/β-catenin信号通路-寒热错杂-CAG”的相关关系理论,通过Wnt/β-catenin信号通路研究寒热错杂的病机本质。方法:采用MNNG灌胃结合饥饱失常进行CAG模型制备,给予不同剂量的半夏... 详细信息

目的:以半夏泻心汤治疗慢性萎缩性胃炎(CAG)为例,提出“Wnt/β-catenin信号通路-寒热错杂-CAG”的相关关系理论,通过Wnt/β-catenin信号通路研究寒热错杂的病机本质。方法:采用MNNG灌胃结合饥饱失常进行CAG模型制备,给予不同剂量的半夏泻心汤,给药4周后,HE染色观察各组大鼠胃黏膜变化,ELISA法检测炎症因子IL-1β和胃肠激素MTL、GAS的表达,PCR法检测信号通路相关因子Wnt2、Dvl、APC、β-catenin、CyclinD1、c-myc mRNA的表达情况。结果:与空白组比较,模型组胃黏膜萎缩明显,IL-1β、MTL表达显著上升,GAS表达显著下降(P<0.01),Wnt通路相关因子子Wnt2、Dvl、β-catenin、CyclinD1、c-myc mRNA表达量显著上升(P<0.05,P<0.01),APC mRNA表达量显著下降(P<0.05);与模型组比较,半夏泻心汤高、低剂量组胃黏膜萎缩情况有所改善,IL-1β、MTL表达均显著减少,GAS表达显著上升(P<0.01)。半夏泻心汤高剂量组Wnt2、Dvl、β-catenin、CyclinD1、c-myc mRNA表达量与半夏泻心汤低剂量组Dvl、β-catenin mRNA表达量均显著下降(P<0.05,P<0.01),两组APC mRNA表达量均显著上升(P<0.05)。结论:Wnt/β-catenin信号通路异常与寒热错杂有着相关性,该信号通路异常是寒热错杂病机本质的微观体现。

关键词：寒热错杂半夏泻心汤 Wnt/β-catenin 慢性萎缩性胃炎脾虚病机

基于斑马鱼模型研究闹羊花肝损效应及其作用机制

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中国中药杂志 2023年第1期48卷 140-147页

作者：陈美琳李芝奇范琦琦郭思敏蔡琼林瑞超吴嘉瑞赵崇军北京中医药大学中药学院中药品质评价北京市重点实验室北京102488

采用斑马鱼幼鱼模型探讨闹羊花对肝脏的毒性作用,根据闹羊花不同浓度暴露处理下受精后4 d斑马鱼幼鱼的存活数计算死亡率,并拟合其量毒曲线初步评估闹羊花的毒性大小,从而通过苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色法和吖啶橙(aeridine ... 详细信息

采用斑马鱼幼鱼模型探讨闹羊花对肝脏的毒性作用,根据闹羊花不同浓度暴露处理下受精后4 d斑马鱼幼鱼的存活数计算死亡率,并拟合其量毒曲线初步评估闹羊花的毒性大小,从而通过苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色法和吖啶橙(aeridine orange,AO)染色法对比观察闹羊花提取物亚致死浓度处理组和阴性对照组的肝脏表型,并测定对比不同处理组谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)和谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)的活性以确认闹羊花的肝脏毒性,进一步采用实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)及蛋白质印迹法检测斑马鱼幼鱼体内基因及蛋白的表达水平,并通过气相色谱时间飞行质谱联用(GC-TOF-MS)进行非靶向代谢组学检测,以探讨其作用机制。结果显示,闹羊花对斑马鱼幼鱼的毒性大小呈剂量依赖性,全部致死浓度为1100μg·mL^(-1),亚致死浓度为448μg·mL^(-1);在亚致死浓度下,闹羊花暴露处理能够引起斑马鱼幼鱼肝脏组织结构紊乱,肝细胞凋亡、变性;实验终点的斑马鱼幼鱼体内ALT和AST水平显著提高,且呈剂量依赖性,而闹羊花给药组的斑马鱼幼鱼体内凋亡相关基因及蛋白的表达水平与阴性对照组相比皆显著上升。通过非靶向代谢组学发现闹羊花致肝毒性相关的重要代谢物主要富集于丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢等途径。综上推测闹羊花对斑马鱼幼鱼有一定肝毒性,其作用机制或与细胞凋亡相关。

关键词：闹羊花斑马鱼肝毒性细胞凋亡

柱前衍生HPLC测定川明参中18种氨基酸含量

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中国中药杂志 2020年第6期45卷 1316-1322页

作者：杨婷杨晓阳陈文静陈碧清张国兴邓晶晶艾莉吕光华成都中医药大学药学院四川成都611137 成都中医药大学民族医药学院四川成都611137

川明参为常用的药食两用药材,含有丰富的氨基酸。而不同产地川明参因地理位置和生态环境不同,所含氨基酸的种类和含量也不同。为此,该研究首先建立了柱前衍生HPLC测定川明参中18种氨基酸含量的方法。其次从四川省川明参的主要产地采集... 详细信息

川明参为常用的药食两用药材,含有丰富的氨基酸。而不同产地川明参因地理位置和生态环境不同,所含氨基酸的种类和含量也不同。为此,该研究首先建立了柱前衍生HPLC测定川明参中18种氨基酸含量的方法。其次从四川省川明参的主要产地采集了24份川明参样品,根据地理位置将这些川明参样品的产地分为4个产区,测定不同产区样品中的18种氨基酸,并运用t检验及主成分分析法对这4个产区样品中的氨基酸进行综合分析。结果表明:川明参中18种氨基酸在70 min内分离良好;浓度与峰面积之间的线性关系良好(r≥0.9991,n=6);加样回收率为97.38%~101.3%(n=6),检测限为0.003~0.379μg·mL-1。说明建立的方法能准确测定川明参中多种氨基酸的含量。对川明参中氨基酸t检验的结果表明,组氨酸、胱氨酸、亮氨酸、缬氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸的含量在4个产区之间具有显著性差异(P<0.05),其余氨基酸的含量差异不显著。经主成分分析法,提取前5个因子计算综合得分,4个产区得分由高至低分别为B(0.603,n=10)、C(0.2058,n=3)、A(-0.2827,n=7)、D(-1.167,n=4)产区。B区川明参中氨基酸的总量最高(12.5 mg·g-1)。由此可见,川明参含有多种氨基酸。从氨基酸总量的角度,四川阆中市、苍溪县(B区)为栽培川明参的适宜区。

关键词：川明参氨基酸 HPLC 含量测定主成分分析种植区

缺血性中风急性期证候与大小动脉病变的相关性

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中医杂志 2014年第8期55卷 673-676页

作者：张娜陈志刚蔡英丽高芳刘强北京中医药大学东方医院北京市丰台区芳星园1区6号100078 世界中医药学会联合会

目的探讨缺血性中风急性期证候与大动脉病变(LVD)、小动脉病变(SVD)的相关性。方法将207例缺血性中风急性期患者分为LVD组87例、SVD组120例,比较两组患者的中医证候、病史、并发症、血常规、颅内外血管超声学检查、美国国立卫生研究院... 详细信息

目的探讨缺血性中风急性期证候与大动脉病变(LVD)、小动脉病变(SVD)的相关性。方法将207例缺血性中风急性期患者分为LVD组87例、SVD组120例,比较两组患者的中医证候、病史、并发症、血常规、颅内外血管超声学检查、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)、改良Rankin量表(MRS)及日常生活活动能力量表(ADL)评分,并采用logistic回归对相关因素进一步分析。结果两组患者痰证单项条目评分、阴虚阳亢证发生率、房颤、冠心病、心脏病史、心律失常并发症、淋巴细胞百分比(LYM%)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、TCD血管高流速、NIHSS、MRS量表评分差异有统计学意义(P<0.05),并采用logistic回归对上述因素进一步分析得出,冠心病史、LDL、TCD血管高流速、MRS量表评分与LVD相关(P<0.05),LDL与SVD相关(P<0.05)。结论缺血性中风急性期大小动脉病变表现出不同的证候特征。

关键词：缺血性中风急性期大动脉病变小动脉病变证候

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表面活性剂辅助超声提取柿叶总黄酮工艺优化

食品工业科技 2022年第5期43卷 224-229页

作者：张富坤孙媛高艺菲王娇高世杰赵盼柯仲成赵东升山东中医药大学药学院山东济南250355 山东中医药大学实验中心山东济南250355 黄山学院化学化工学院安徽黄山245041

目的:优选表面活性剂辅助超声提取柿叶总黄酮工艺。方法:以柿叶为材料,总黄酮得率和DPPH自由基清除率为指标,分别考察表面活性剂种类、表面活性剂质量分数、液料比、超声时间及超声温度对指标的影响,并通过Box-Behnken设计-双响应面法... 详细信息

目的:优选表面活性剂辅助超声提取柿叶总黄酮工艺。方法:以柿叶为材料,总黄酮得率和DPPH自由基清除率为指标,分别考察表面活性剂种类、表面活性剂质量分数、液料比、超声时间及超声温度对指标的影响,并通过Box-Behnken设计-双响应面法优选总黄酮提取工艺。结果:最佳提取工艺:乙醇体积分数70%、十二烷基硫酸钠质量分数0.6%、液料比22:1 mL/g、超声温度30℃和超声时间7.3 min,此时柿叶总黄酮得率的实际值为(103.63±0.10)mg/g,DPPH自由基清除率为(65.35%±0.12%)。结论:优化后的提取工艺可有效地提高柿叶总黄酮得率,为柿叶黄酮类成分资源的研究开发与利用提供一定的理论基础。

关键词：柿叶总黄酮抗氧化活性表面活性剂超声提取双响应面法

减味寿胎丸对自然流产模型小鼠子宫蜕膜组织中FOXO3及PR蛋白表达的影响

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中医杂志 2021年第4期62卷 335-340页

作者：周月希余庆英罗颂平郜洁广州中医药大学广东省510405 广州中医药大学第一附属医院

目的探讨减味寿胎丸治疗自然流产的可能作用机制。方法实验分为正常妊娠组、流产模型组、地屈孕酮组、减味寿胎丸组,每组6只雌鼠。正常妊娠组交配小鼠品种为CBA/J雌性×BALB/C雄性,其余各组交配小鼠品种为CBA/J雌性×DBA/2雄性构建的小... 详细信息

目的探讨减味寿胎丸治疗自然流产的可能作用机制。方法实验分为正常妊娠组、流产模型组、地屈孕酮组、减味寿胎丸组,每组6只雌鼠。正常妊娠组交配小鼠品种为CBA/J雌性×BALB/C雄性,其余各组交配小鼠品种为CBA/J雌性×DBA/2雄性构建的小鼠自然流产模型。将小鼠雌、雄按1∶1比例进行配种,次日早上查看雌鼠阴栓,看到阴栓或涂片见精子的雌鼠定为妊娠0天。妊娠0~9天,正常妊娠组和流产模型组小鼠予纯水0.01ml/g灌胃,减味寿胎丸组小鼠予减味寿胎丸2.72g/(kg·d)灌胃,地屈孕酮组小鼠给予地屈孕酮片12.3mg/(kg·d)灌胃。9天后取材,观察小鼠的体质量变化、胚胎淤血及吸收胎个数,测量胚胎直径;HE染色观察子宫蜕膜的形态变化;免疫组化染色法观察蜕膜组织叉头框转录因子3(FOXO3)阳性表达情况;Western blot法检测子宫蜕膜组织FOXO3、孕激素受体(PR)蛋白表达。结果各组小鼠体重及胚胎直径比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。流产模型组流产率(60.98%)明显高于正常妊娠组(8.89%,P0.05)。结论减味寿胎丸可以降低小鼠流产率,其机制可能与上调子宫蜕膜组织中FOXO3和PR蛋白表达有关。

关键词：减味寿胎丸自然流产子宫蜕膜叉头框转录因子3 孕激素受体

基于整合网络毒理学和分子对接的补骨脂酚致肝毒性机制探讨

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药物评价研究 2022年第2期45卷 251-258页

作者：陈成龙姜欣洋刘兰玲史继童朱振龙赵东升山东中医药大学药学院山东济南250355

目的基于网络毒理学和分子对接技术探究补骨脂酚致肝毒性的潜在机制。方法通过TCM-BATMAN挖掘补骨脂酚靶点,DisGeNET挖掘肝毒性基因;Cytoscape 3.7.0分别构建补骨脂酚靶点和肝毒性基因蛋白互作关系(PPI)网络,并Merge取交集,运用软件中... 详细信息

目的基于网络毒理学和分子对接技术探究补骨脂酚致肝毒性的潜在机制。方法通过TCM-BATMAN挖掘补骨脂酚靶点,DisGeNET挖掘肝毒性基因;Cytoscape 3.7.0分别构建补骨脂酚靶点和肝毒性基因蛋白互作关系(PPI)网络,并Merge取交集,运用软件中插件分析获得关键靶点,构建生物学总调控网络,并对其进行基因本体论(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)富集分析;分子对接评价补骨脂酚与潜在关键靶点结合的亲和力。结果共获得补骨脂酚靶点3952个,肝毒性基因6025个和交集基因2221个。经分析,补骨脂酚主要作用于TP53、HSP90AA1、EP300等关键靶点,参与氧化应激反应与细胞增殖、分化、凋亡过程的调控,涉及多种酶调控等生物过程,主要通过PI3K-Akt、MAPK、细胞周期等信号通路引起肝毒性。补骨脂酚与EP300、HSP90AA1靶点的亲和力最强,能够与二者的结合口袋形成较强的疏水作用,total score值为8.8582、7.2178。结论补骨脂酚致肝毒性具有多靶点、多途径的作用规律,主要通过PI3K-Akt、MAPK、细胞周期等信号通路引起肝毒性。

关键词：补骨脂酚肝毒性网络毒理学分子对接 PI3K-Akt通路

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辛味药药性理论及归经应用

山东中医药大学学报 2021年第4期45卷 458-461页

作者：孙坤坤王加锋山东中医药大学山东济南250355

辛味作为五味之一,其药物作用及主治病证多样,辛能散、能行、能通、能温、能升、能润、能化。通过查阅文献,归纳出辛味药不仅归于经典所说的肺经,大部分辛味中药还归于肝经、脾胃经,亦有归入心经、肾经。在脏腑经络的基础上,探究辛味药... 详细信息

辛味作为五味之一,其药物作用及主治病证多样,辛能散、能行、能通、能温、能升、能润、能化。通过查阅文献,归纳出辛味药不仅归于经典所说的肺经,大部分辛味中药还归于肝经、脾胃经,亦有归入心经、肾经。在脏腑经络的基础上,探究辛味药于脏腑归经的应用。辛味药入肺经可散表邪、行气行水行血、化痰饮、通鼻窍;辛味药入脾胃经可助脾胃之气左升右降,辛化脾胃湿浊及助脾胃祛除阴寒,恢复脾胃正常功能;辛味药入肝经则可条达肝气、疏肝解郁;辛味药入心经可开心窍、行心血;辛味药入肾经可润肾,苦燥能助肾行津液。辛味药无论入何脏腑,都是以脏腑经络学说为基础,以药物所治疗的具体病证为依据。

关键词：五味辛味散表邪散结润燥行气利水祛寒温经解郁活血脏腑经络学说