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副溶血性弧菌LUX^TM荧光PCR快速检测方法的建立

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中国兽医科学 2008年第12期38卷 1075-1079页

作者：许如苏陈茹林彩华杨梓坚陈冠武汕头出入境检验检疫局广东汕头515031 广东局出入境检验检疫局广东广州510623

根据LUXTM荧光PCR技术原理,针对副溶血性弧菌toxR基因的保守序列,设计了特异的LUXTM荧光标记引物,通过优化反应条件与参数,建立了可快速检测副溶血性弧菌的LUXTM荧光PCR方法。结果显示,该方法高度敏感,对纯菌的检测低限达到每个反应体系... 详细信息

根据LUXTM荧光PCR技术原理,针对副溶血性弧菌toxR基因的保守序列,设计了特异的LUXTM荧光标记引物,通过优化反应条件与参数,建立了可快速检测副溶血性弧菌的LUXTM荧光PCR方法。结果显示,该方法高度敏感,对纯菌的检测低限达到每个反应体系7个菌(CFU),经6 h增菌培养后检测,对样品的检测低限(CFU)达到100/25 g;特异性强,对副溶血性弧菌2株标准菌株和10株参考菌株的检验均呈阳性,而对霍乱弧菌等28株非目标菌的检测均呈阴性;重复性好,定量检测的批内和批间变异系数均小于1%。应用此方法检测水产样品103份,检出阳性样品6份,与TaqMan荧光PCR和SN标准的检测结果完全一致。用此方法可在8 h内完成对样品中副溶血性弧菌的检测,其检测的快速性、敏感性和特异性与TaqMan荧光PCR技术相当,但检测成本更低。

关键词：副溶血性弧菌 LUX^TM荧光PCR TaqMan荧光PCR

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食品中腐败酵母的实时荧光PCR鉴定

食品与发酵工业 2013年第7期39卷 185-187页

作者：陈世琼逄波蔡雪凤伊鋆郭铮蕾付浦博饶红国家食品质量安全监督检验中心北京100094 中国疾病预防控制中心北京1022062 北京市出入境检验检疫局北京100026

为研究食品中腐败酵母实时荧光PCR快速鉴定方法,设计和筛选出了可用于腐败酵母鉴定的多条探针和引物,并建立了针对酿酒酵母、鲁氏接合酵母、斯巴达克毕赤酵母和布鲁塞尔德克酵母等4种腐败酵母菌的实时荧光PCR鉴定方法。用文中建立的方... 详细信息

为研究食品中腐败酵母实时荧光PCR快速鉴定方法,设计和筛选出了可用于腐败酵母鉴定的多条探针和引物,并建立了针对酿酒酵母、鲁氏接合酵母、斯巴达克毕赤酵母和布鲁塞尔德克酵母等4种腐败酵母菌的实时荧光PCR鉴定方法。用文中建立的方法对从糕点、蜂蜜、饮料等市售食品中分离出的60余株酵母菌进行了鉴定,发现其中4株为酿酒酵母,21株为鲁氏酵母,其他为与上述4种不同的酵母。以实时荧光PCR方法鉴定酵母,全过程仅需约3 h,与常用的生化鉴定方法相比,简化了鉴定步骤,提高了鉴定准确性,缩短了鉴定时间。

关键词：食品腐败酵母实时荧光PCR 鉴定

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黑色圆珠笔油墨的高效液相色谱法分析

分析测试学报 2008年第10期27卷 1103-1105,1109页

作者：王炳娟王志勇邹洪首都师范大学化学系北京100048

建立了黑色圆珠笔油墨字迹色痕的高效液相色谱法的分析条件和实验方法,采用乙腈-NH4HCO3溶液(10 mmol/L)(体积60∶40)为流动相,检测波长580 nm,同时利用质谱法作为佐证。在此条件下对市售的51支不同生产厂家和品牌黑色圆珠笔油墨的字迹... 详细信息

建立了黑色圆珠笔油墨字迹色痕的高效液相色谱法的分析条件和实验方法,采用乙腈-NH4HCO3溶液(10 mmol/L)(体积60∶40)为流动相,检测波长580 nm,同时利用质谱法作为佐证。在此条件下对市售的51支不同生产厂家和品牌黑色圆珠笔油墨的字迹色痕进行了分析,根据油墨中所含染料成分的差异将其分为6大类,考察了纸张的影响及在该分析条件下结果的精密度和重复性。

关键词：黑色圆珠笔油墨高效液相色谱法字迹色痕种类

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液相色谱串联质谱法测定食品中红曲色素

食品与发酵工业 2013年第6期39卷 191-194页

作者：马书民张勋芦春梅宋翱李墨浠荣会徐立明韩大川吉林出入境检验检疫局吉林长春130062

采用液相色谱串联质谱法测定了食品中红曲红胺、红曲红素、红曲素、红曲黄素的含量,并选择离子检测进行阳性确证。液体试样用水超声提取,离心定容后,固体和半固体样品采用水溶解定容,提取液再经固相萃取柱净化,样液经洗脱定容后,供液相... 详细信息

采用液相色谱串联质谱法测定了食品中红曲红胺、红曲红素、红曲素、红曲黄素的含量,并选择离子检测进行阳性确证。液体试样用水超声提取,离心定容后,固体和半固体样品采用水溶解定容,提取液再经固相萃取柱净化,样液经洗脱定容后,供液相色谱-质谱/质谱仪测定和确证,外标法定量。该方法的最低检出限、线性范围和方法回收率分别为:1.0 mg/kg、1.0～100.0 mg/kg和89.3%～94.3%。

关键词：红曲色素固相萃取液相色谱串联质谱法

HIV多抗原位点同源序列合成基因的表达及活性鉴定

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吉林大学学报（医学版） 2008年第2期34卷 221-225页

作者：杨怀宁徐卉浦昀于湘晖张煜赵大力孙志伟吉林大学公共卫生学院卫生毒理学教研室吉林长春130021 吉林大学第一医院电诊科吉林长春130021 吉林大学生命科学学院疫苗研究中心吉林长春130012 吉林出入境检验检疫局吉林长春130062

目的:在原核表达载体系统中对HIV-1gp41/gp120和HIV-2gp125/gp36外膜蛋白多个抗原位点同源序列合成基因进行表达、纯化并鉴定其活性。方法:人工合成含HIV-1gp41的3个抗原位点、HIV-1gp120的2个抗原位点、HIV-2gp125的3个抗原位点和HIV-2... 详细信息

目的:在原核表达载体系统中对HIV-1gp41/gp120和HIV-2gp125/gp36外膜蛋白多个抗原位点同源序列合成基因进行表达、纯化并鉴定其活性。方法:人工合成含HIV-1gp41的3个抗原位点、HIV-1gp120的2个抗原位点、HIV-2gp125的3个抗原位点和HIV-2gp36的1个抗原位点的串联基因,克隆到原核表达载体pRSETB中,构建重组表达质粒pRSETB-env,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导目的基因在大肠埃希菌BL21(DE3)中高效表达,采用金属离子亲和层析技术纯化表达蛋白,逐渐降低尿素浓度使目的蛋白复性,免疫印迹和ELISA法分别对表达产物进行鉴定。结果:目的基因在BL21中有较高表达率,纯化后表达蛋白经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)可见相对分子质量约44000的蛋白带,与设计相对分子质量相符。免疫印迹、ELISA试验显示pRSETB-env质粒的HIV-1/2表达蛋白与HIV-1及HIV-2患者血清都能较好地结合,与其他患者血清无交叉反应。结论:成功构建了由HIV-1/2外膜蛋白多个抗原位点串联基因片段的表达载体pRSETB-env,并在原核细胞中高效表达,表达蛋白经纯化后纯度较高,并具有良好特异性和活性。

关键词：人免疫缺陷病毒合成基因基因表达活性鉴定

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食品接触材料中双酚类物质迁移检测方法研究

包装工程 2009年第12期30卷 40-43页

作者：陈志锋刘晓华孙利中国检验检疫科学研究院北京100123 北京市劳动保护科学研究所北京100054

选用去离子水、3%乙酸溶液、10%乙醇溶液和精制橄榄油作为4种食品模拟物,开展了食品接触材料中双酚A,双酚A二甘氨酸醚、双酚F二甘氨酸醚及其衍生物等9种双酚类物质迁移检测方法研究。目标分析物采用反相液相色谱柱分离,荧光检测器进行... 详细信息

选用去离子水、3%乙酸溶液、10%乙醇溶液和精制橄榄油作为4种食品模拟物,开展了食品接触材料中双酚A,双酚A二甘氨酸醚、双酚F二甘氨酸醚及其衍生物等9种双酚类物质迁移检测方法研究。目标分析物采用反相液相色谱柱分离,荧光检测器进行检测。水基食品模拟物(去离子水、3%乙酸溶液、10%乙醇溶液)中的目标分析物可直接进样,精制橄榄油中的目标分析物依次通过正己烷和甲醇乙腈混合液(体积比1∶1)萃取后进样。结果表明:目标分析物含量在0.008～4mg/L范围内,线性度在0.993以上,相对标准偏差小于15%,方法检测限在0.0011～0.0052mg/L之间。

关键词：食品接触材料双酚类物质迁移检测

QuEChERS法提取-气相色谱-串联质谱法测定生态纺织品中31种农药残留

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理化检验（化学分册） 2015年第10期51卷 1386-1392页

作者：冯伟张代辉张勋杨璐赵韫慧滕国生长春工业大学化学与生命科学学院长春130012 吉林出入境检验检疫局长春130062

采用QuEChERS法提取-气相色谱-串联质谱法同时测定生态纺织品中31种农药残留。样品粉碎后用乙腈萃取,提取液经无水硫酸镁和氯化钠除水后,用乙二胺-N-丙基硅烷和C18吸附剂净化,离心后过膜。待测物在Thermo TR-RESTICIDE石英毛细管色谱柱... 详细信息

采用QuEChERS法提取-气相色谱-串联质谱法同时测定生态纺织品中31种农药残留。样品粉碎后用乙腈萃取,提取液经无水硫酸镁和氯化钠除水后,用乙二胺-N-丙基硅烷和C18吸附剂净化,离心后过膜。待测物在Thermo TR-RESTICIDE石英毛细管色谱柱上分离,采用电子轰击离子源和选择反应监测模式进行质谱测定。31种农药的线性范围均为0.01~1.00mg·L-1,检出限(3S/N)在0.005~0.007mg·kg-1之间。加标回收率在80.3%~99.9%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)小于7.0%。

关键词：气相色谱-串联质谱法 QuEChERS方法农药残留生态纺织品

液相色谱-串联质谱法测定化妆品中22种激素

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理化检验（化学分册） 2013年第4期49卷 468-472,476页

作者：陈溪张晓林刘莹崔晗黄大亮林维宣大连出入境检验检疫局庄河办事处庄河116400 辽宁出入境检验检疫局大连116000

提出了采用液相色谱-串联质谱法测定化妆品中22种激素残留量的方法。样品经乙腈超声提取,分别采用Oasis HLB固相萃取柱(方法一)和凝胶渗透色谱(方法二)两种方法净化。经净化的试液用ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱(100mm×2.1mm,1.8μm)... 详细信息

提出了采用液相色谱-串联质谱法测定化妆品中22种激素残留量的方法。样品经乙腈超声提取,分别采用Oasis HLB固相萃取柱(方法一)和凝胶渗透色谱(方法二)两种方法净化。经净化的试液用ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱(100mm×2.1mm,1.8μm)分离,15种激素用不同比例配成的含0.1%(体积分数)甲酸的水溶液和乙腈组成的流动相梯度洗脱。质谱测定中采用正离子电离方式多反应监测模式;另7种激素用不同比例配成的水和乙腈组成的流动相梯度洗脱,质谱测定中采用负离子电离方式多反应监测模式。方法一的检出限为0.01～***-1;回收率在61.5%～111%之间;方法二的检出限在0.1～***-1之间,回收率在60.8%～113%之间。

关键词：液相色谱-串联质谱法凝胶渗透色谱化妆品激素

纳米SnO_2材料催化发光传感器的研制及其在测定汽油中MTBE的应用

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石油学报（石油加工） 2012年第1期28卷 27-32页

作者：刘名扬李百舸赵景红杨波牟明仁辽宁出入境检验检疫局技术中心辽宁大连116001 大连交通大学环境与化工学院辽宁大连116028 钦州出入境检验检疫局石油检测实验室广西钦州535000

以碳纳米管(CNT)为模板,采用液相沉积法,通过改变煅烧温度可控合成了SnO2-CNT复合纳米材料、SnO2纳米棒2种形貌的纳米材料,研究了该2种纳米SnO2材料对甲基叔丁基醚(MTBE)的催化发光(CTL)特性,由此制备了基于SnO2纳米材料的气-固表面催... 详细信息

以碳纳米管(CNT)为模板,采用液相沉积法,通过改变煅烧温度可控合成了SnO2-CNT复合纳米材料、SnO2纳米棒2种形貌的纳米材料,研究了该2种纳米SnO2材料对甲基叔丁基醚(MTBE)的催化发光(CTL)特性,由此制备了基于SnO2纳米材料的气-固表面催化发光传感器,并利用SnO2纳米棒催化发光传感器测定了汽油中MTBE的体积分数。结果表明,SnO2纳米棒催化发光传感器测得的汽油样品的MTBE体积分数与采用气相色谱法测得结果的相对误差小于5%,但它具有快速、方便、运行成本低的优点。

关键词： SnO2-CNT复合纳米材料 SnO2纳米棒催化发光传感器 MTBE