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益生菌结合蒙脱石散对轮状病毒感染乳鼠肠道黏膜、肠道微生物功能相关基因表达的影响

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中国临床药理学杂志 2024年第13期40卷 1903-1907页

作者：赵林徐沙沙郭伟胜刘鹏席作武河南省中医院、河南中医药大学第二附属医院普外二科河南郑州450002 河南省中医院、河南中医药大学第二附属医院肛肠科河南郑州450002 河南省儿童医院呼吸内科河南郑州450018

目的分析益生菌结合蒙脱石散对轮状病毒(RV)感染乳鼠肠道黏膜、肠道微生物功能相关基因表达的影响。方法用灌胃SA11株轮状病毒构建RV感染模型。将48只乳鼠随机分为正常组(0.9%NaCl)、模型组(0.9%NaCl)、实验组(0.06 g·mL^(-1)蒙脱石散... 详细信息

目的分析益生菌结合蒙脱石散对轮状病毒(RV)感染乳鼠肠道黏膜、肠道微生物功能相关基因表达的影响。方法用灌胃SA11株轮状病毒构建RV感染模型。将48只乳鼠随机分为正常组(0.9%NaCl)、模型组(0.9%NaCl)、实验组(0.06 g·mL^(-1)蒙脱石散)和联合组(0.06 g·mL^(-1)蒙脱石散+6.5×10~7 CFU·mL^(-1)布拉氏酵母菌散),每组12只。4组乳鼠每天给药1次,连续给药5 d。收集粪便进行评价,用酶联免疫吸附试验法检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-17水平,用实时荧光定量聚合酶链反应法检测肠道组织中水通道蛋白(AQP)水平,用细菌16srDNA荧光定量聚合酶链反应法检测粪便中双歧杆菌和大肠埃希菌含量。结果正常组、模型组、实验组和联合组的粪便评分分别为(1.01±0.10)、(2.97±0.08)、(2.84±0.03)和(2.77±0.03)分,TNF-α水平分别为(132.54±14.63)、(185.66±19.64)、(165.25±17.63)和(149.95±15.76)pg·mL^(-1),IL-1β水平分别为(172.32±18.68)、(265.34±27.72)、(202.34±21.34)和(186.24±19.46)pg·mL^(-1),IL-17水平分别为(118.62±12.44)、(173.24±18.25)、(152.32±16.72)和(122.54±13.58)pg·mL^(-1),AQP2 mRNA表达水平分别为1.02±0.05、0.72±0.07、0.89±0.08和1.21±0.12,AQP4 mRNA表达水平分别为1.04±0.07、0.42±0.05、0.78±0.08和1.19±0.12,AQP8 mRNA表达水平分别为1.00±0.06、0.63±0.06、0.91±0.09和1.30±0.13,双歧杆菌含量分别为(6.35±0.64)、(4.31±0.44)、(4.93±0.50)和(5.34±0.54)CFU·g^(-1),大肠埃希菌含量分别为(6.14±0.62)、(8.78±0.88)、(8.46±0.85)和(8.12±0.83)CFU·g^(-1)。模型组的上述指标和实验组、联合组、正常组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论蒙脱石散联合益生菌干预RV感染乳鼠可改善粪便性状,降低血清炎症因子水平,纠正肠道菌群紊乱,其可能是通过改善肠道AQP2、AQP4和AQP8表达实现的。

关键词：益生菌蒙脱石散轮状病毒肠道黏膜肠道微生物

车前草黄酮提取优化及其对过氧化氢损伤肝细胞的保护作用

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中药新药与临床药理 2024年第5期35卷 656-666页

作者：吴敬嫦李艺萌邓长生梅漫雪南方医科大学第三附属医院广东广州510630 华南理工大学广东广州510641 广州中医药大学青蒿研究中心广东广州510405 广州中医药大学科技产业园广东广州510540 广州中医药大学中药学院广东广州510405

目的通过响应面法优化富含车前子苷的车前草黄酮提取工艺,并探究车前草黄酮对过氧化氢(H_(2)O_(2))损伤的L02细胞的保护作用及其作用机制。方法通过单因素研究乙醇浓度、提取温度、液料比对车前草黄酮得率及其中车前子苷转移率的影响,... 详细信息

目的通过响应面法优化富含车前子苷的车前草黄酮提取工艺,并探究车前草黄酮对过氧化氢(H_(2)O_(2))损伤的L02细胞的保护作用及其作用机制。方法通过单因素研究乙醇浓度、提取温度、液料比对车前草黄酮得率及其中车前子苷转移率的影响,在此基础上使用Central-Composite中心组合试验设计和响应面分析法筛选出车前草黄酮提取得率最高,车前子苷转移率最大的提取条件。通过测定该车前草黄酮对过氧化氢诱导的人正常肝细胞L02存活率、细胞凋亡、线粒体膜电位的影响,及其对L02细胞丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、过氧化物歧化酶(SOD)含量,HO-1、Nrf2、SOD蛋白表达量的影响来探究车前草黄酮对过氧化氢损伤的L02细胞的保护作用。结果研究结果表明,提取温度80℃、乙醇浓度65%、液料比为15∶1时,提取得到的车前草黄酮得率和车前子苷转移率均最大,分别为1.82%和35.01%。该条件下提取得到的车前草黄酮在25~100μg·mL^(-1)内可明显降低过氧化氢损伤的L02细胞的凋亡率(P<0.001),降低其线粒体膜电位损伤程度(P<0.001),增加细胞内SOD和GSH的表达量(P<0.001),降低细胞中MDA含量(P<0.01,P<0.001)。此外,该车前草黄酮可以调节过氧化氢损伤的L02细胞中HO-1、Nrf2、SOD的表达量,降低过氧化氢损伤肝细胞中HO-1、Nrf2蛋白表达水平,并增加细胞中SOD蛋白的表达量(P<0.05,P<0.01)。结论使用响应面法筛选出的车前草黄酮提取工艺操作简便,关键有效成分车前子苷的含量丰富,可为车前草黄酮的实际生产提供参考。该方法提取得到的车前草黄酮可降低过氧化氢损伤的肝细胞的氧化应激水平,对L02细胞具有一定的氧化损伤保护作用,研究结果可以为车前草黄酮作为护肝保健品的开发应用奠定基础。

关键词：车前草车前子苷黄酮过氧化氢肝损伤提取工艺人正常肝细胞L02

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恶性肿瘤中西医结合治疗模式探索

南京中医药大学学报 2024年第3期40卷 217-222页

作者：王俊壹李柳沈卫星吴勉华周仲瑛程海波南京中医药大学附属医院江苏南京210029 江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心江苏南京210023 南京中医药大学第一临床医学院江苏南京210023

恶性肿瘤是严重威胁人类健康的重大疾病,虽然目前中西医结合已成为我国恶性肿瘤治疗的专家共识,但尚未形成成熟的中西医结合治疗模式。通过探索构建恶性肿瘤中西医结合治疗模式,即中西医协同治疗、中医姑息治疗和中医防变治疗,覆盖恶性... 详细信息

恶性肿瘤是严重威胁人类健康的重大疾病,虽然目前中西医结合已成为我国恶性肿瘤治疗的专家共识,但尚未形成成熟的中西医结合治疗模式。通过探索构建恶性肿瘤中西医结合治疗模式,即中西医协同治疗、中医姑息治疗和中医防变治疗,覆盖恶性肿瘤不同阶段,以期在恶性肿瘤治疗过程中充分发挥中西医结合治疗的优势与特色。

关键词：恶性肿瘤中西医结合治疗模式协同治疗姑息治疗防变治疗

一种新型查耳酮衍生物C13通过ErbB4/PI3K/AKT信号通路抑制人胃癌细胞的生长

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药学学报 2024年第4期59卷 957-964页

作者：谭鹏张云封王龙燕黄惠铭王飞魏雪娇王柱国李军胡仲冬北京中医药大学北京中医药研究院中药现代研究中心北京100029

3ʹ-羟基-4ʹ-甲氧基-2-羟基-5-溴查耳酮(以下简称C13)是本课题组对龙血竭抗肿瘤活性化合物DHMMF进行结构修饰过程中获得的一个新型查耳酮衍生物。本研究探讨了C13对人胃癌HGC-27、AGS细胞增殖、凋亡的影响及其潜在的作用机制。首先采用... 详细信息

3ʹ-羟基-4ʹ-甲氧基-2-羟基-5-溴查耳酮(以下简称C13)是本课题组对龙血竭抗肿瘤活性化合物DHMMF进行结构修饰过程中获得的一个新型查耳酮衍生物。本研究探讨了C13对人胃癌HGC-27、AGS细胞增殖、凋亡的影响及其潜在的作用机制。首先采用噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)、集落形成实验、5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(5-ethynyl-2ʹ-deoxyuridine,EdU)染色法发现C13能显著抑制人胃癌HGC-27、AGS细胞的增殖能力。采用流式细胞术和免疫印迹法检测发现C13能诱导人胃癌HGC-27、AGS细胞发生凋亡,并上调剪切的聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶(cleaved-poly ADP-ribose polymerase,cleaved-PARP)的蛋白水平。转录组测序分析结果显示C13可能通过调控人表皮生长因子受体4/磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(Erb-B2 receptor tyrosine kinase 4/phosphoinositide 3-kinase/AKT,ErbB4/PI3K/AKT)信号通路发挥抗胃癌作用。最后免疫印迹实验结果表明,C13处理后能下调人胃癌细胞中ErbB4总蛋白及磷酸化水平,并能够抑制其下游PI3K及AKT蛋白磷酸化水平,进一步验证了转录组测序结果。综上所述,新型查耳酮衍生物C13能够显著抑制人胃癌HGC-27、AGS细胞增殖并诱导其发生凋亡,其机制可能与下调ErbB4/PI3K/AKT信号通路有关。本研究能够为胃癌治疗提供一个候选研究药物。

关键词：查耳酮衍生物C13 人胃癌细胞增殖凋亡 ErbB4/PI3K/AKT信号通路

基于血清药物化学和网络药理学的知母-黄柏药对盐炙前后治疗2型糖尿病药效物质基础及作用机制分析

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南京中医药大学学报 2024年第5期40卷 479-493页

作者：孟祥祺张春玲贾耀霞雷锦杰夏阳淼谭睿余凌英成都中医药大学药学院/西南特色中药资源国家重点实验室四川成都610075 西南交通大学生命科学与工程学院四川成都610031

目的基于液质联用技术对生知母-生黄柏、盐知母-盐黄柏药对水提液灌胃给药后大鼠入血成分分析,结合网络药理学预测盐炙在知母-黄柏药对治疗2型糖尿病的影响,并通过体外实验进行初步验证。方法大鼠连续灌胃给药生知母-生黄柏药对、盐知母... 详细信息

目的基于液质联用技术对生知母-生黄柏、盐知母-盐黄柏药对水提液灌胃给药后大鼠入血成分分析,结合网络药理学预测盐炙在知母-黄柏药对治疗2型糖尿病的影响,并通过体外实验进行初步验证。方法大鼠连续灌胃给药生知母-生黄柏药对、盐知母-盐黄柏药对水提液2次,中间间隔1 h,末次给药60 min后腹主动脉取血,用甲醇沉淀蛋白法处理后复溶,采用色谱柱Shim-pack GIST C 18(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相A相为0.1%甲酸水,B相为0.1%甲酸-乙腈;梯度洗脱,正、负离子全扫描模式,质量扫描范围m/z 100~1500。结合数据库二级谱图及文献,分析鉴定生知母-生黄柏、盐知母-盐黄柏药对的入血成分。检索2型糖尿病疾病靶点,对入血成分和疾病的交集靶点进行蛋白质互作网络分析、GO、KEGG通路富集分析,构建“入血成分-靶点”网络图,运用AutoDock软件对筛选出的核心成分和核心靶点进行分子对接验证。验证实验以HepG2细胞为实验对象,胰岛素联合高糖诱导胰岛素抵抗模型,CCK8法检验盐炙前后知母-黄柏药对对细胞增殖影响,Western blot检测PI3K-AKT信号通路相关蛋白的表达情况。结果生知母-生黄柏药对水提液大鼠血清中鉴定出15种原型成分,1个芒果苷代谢成分。盐知母-盐黄柏药对水提液大鼠血清中鉴定出17个原型成分,1个芒果苷代谢成分。盐炙后入血成分中芒果苷、小檗碱、3-异丁基戊二酸等成分含量较生品高。KEGG和GO结果显示,知母-黄柏药对治疗2型糖尿病可能与RNA聚合酶的转录调控、炎症反应、AGE-RAGE、PI3K-AKT、胰岛素抵抗等通路有关。细胞实验表明盐炙前后知母-黄柏药对可以上调p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、GLUT4蛋白表达,且盐炙组效果优于生品组。结论初步阐释了知母-黄柏药对盐炙前后入血成分,阿魏酸、小檗碱、小檗红碱、芒果苷与mTOR、SIRT1、EGFR、PPARA等可能是知母-黄柏药对盐炙后增强2型糖尿病治疗效果的主要成分和靶点,其机制可能是增强了PI3K-AKT等相关通路的作用,为知母-黄柏药对盐炙前后药效物质基础研究及临床应用提供重要参考。

关键词：知母-黄柏药对盐炙血清药物化学 2型糖尿病网络药理学分子对接细胞验证

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苦木内生真菌的分离鉴定及生物活性研究

北方园艺 2024年第12期 102-108页

作者：徐芷晴李洁林莹徐凌川山东中医药大学药学院山东济南250355

以苦木的根、茎、叶为试材,采用组织分离法从苦木的根、茎、叶中分离得到内生真菌,通过ITS序列分析,对其进行鉴定。采用K-B纸片法和最小抑制浓度法,研究了内生真菌发酵液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制效果,以期为苦木内生真菌在抗... 详细信息

以苦木的根、茎、叶为试材,采用组织分离法从苦木的根、茎、叶中分离得到内生真菌,通过ITS序列分析,对其进行鉴定。采用K-B纸片法和最小抑制浓度法,研究了内生真菌发酵液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制效果,以期为苦木内生真菌在抗菌方面的研究价值提供参考依据,为寻找新型绿色高效的抗菌活性物质提供新思路。结果表明:苦木植物中蕴含丰富的内生真菌资源,从苦木根、枝、叶中分离得到16株内生真菌,分属于4门6纲8目8科8属,链格孢属(Ilternarsa)和葡萄座腔菌属(Botryosphaeria)为优势菌属。13株苦木内生真菌的发酵液提取物对2株指示菌表现出不同强度的抑菌作用,其中3株内生真菌的发酵液粗提物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌有较强抗菌活性,MIC值介于0.024~3.120μg·mL^(-1)。综合抑菌的广谱性和效能而言,G1菌株的抗菌效果最好。

关键词：苦木内生真菌分离鉴定抑菌活性

药用植物生物信息数据库及生产布局可视化分析平台(以川产道地药材为例)

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中国中药杂志 2024年第8期49卷 1989-1995页

作者：华桦田韦韦马炅妤王云峰王亚强严志祥赵军宁四川省中医药转化医学中心四川省中医药科学院国家中医药管理局中药质量生物学评价重点研究室中医药转化医学四川省重点实验室四川省道地药材系统开发工程技术研究中心四川省道地药材形成原理与品质评价工程研究中心四川成都610041 自然资源部第三地理信息制图院数字城市工程中心四川成都610100 中国科学院微电子研究所数字健康芯片与系统实验室北京100029 成都信息工程大学软件工程学院四川成都610225 国家药品监督管理局药品监管科学全国重点实验室北京100037

目前对药用植物的研究和认识已进入到跨组学、跨学科智能新阶段,迫切需要将这些大数据进行整合并交互应用,形成统一、多层次的研究体系和大数据平台。道地药材作为一类重要的药用植物来源,是中医药特有的品质优劣概念和综合判别标准。... 详细信息

目前对药用植物的研究和认识已进入到跨组学、跨学科智能新阶段,迫切需要将这些大数据进行整合并交互应用,形成统一、多层次的研究体系和大数据平台。道地药材作为一类重要的药用植物来源,是中医药特有的品质优劣概念和综合判别标准。国内外已建立中医药百科全书数据库(ETCM)、全球药典基因组数据库(GPGD)等为代表的数据库平台,但未能及时反映新近的大量地理资源、表型、化学成分和遗传信息等多维度数据。四川省是著名的“中医之乡,中药之库”,据四川省第四次全国中药资源普最新统计中药品种数超过8000种,川产道地药材品种86种,是我国药用植物多样性最具代表性的地区。该文基于四川省第四次全国中药资源普查最新数据及相关成果,以川产道地药材为例构建药用植物生物信息数据库及生产布局可视化分析平台,涵盖了地理资源数据、表型数据、化学成分数据和遗传资源数据等,有效地将川产道地药材多维度数据统一整合,并提供不同层面的数据交互应用。该平台不仅是首个针对川产道地药材的大型多维数据库和可视化平台,可为川产道地药材种质资源鉴定、药效成分生物合成途径解析、优良品种分子育种等奠定基础。该平台提供的以川产道地药材为代表的药用植物资源基础信息和数据支撑,对我国及全球药用植物开发利用也不无裨益。

关键词：药用植物川产道地药材生产布局生物信息数据化可视化

白附子标准汤剂的物性参数与化学成分相关性研究

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中华中医药学刊 2024年第6期42卷 146-153页

作者：史可王春燕位玉蝶马彦江陈天朝河南中医药大学药学院河南郑州450008 河南中医药大学第一附属医院河南郑州450000

目的探究白附子标准汤剂的物性参数与其化学成分之间的相关性并建立模型,以期用物性参数指征内在化学成分,为实现标准汤剂的快速质量评价提供参考。方法制备白附子生品及炮制品的标准汤剂,测定其物性参数(相对密度、pH值、氧化值),紫... 详细信息

目的探究白附子标准汤剂的物性参数与其化学成分之间的相关性并建立模型,以期用物性参数指征内在化学成分,为实现标准汤剂的快速质量评价提供参考。方法制备白附子生品及炮制品的标准汤剂,测定其物性参数(相对密度、pH值、氧化值),紫外分光光度法测定淀粉、总多糖、总黄酮的含量,高效液相色谱法测定核苷类成分及有机酸类成分的含量,采用熵权TOPSIS客观赋权法建立多指标综合评分,利用SPSS 21.0软件对白附子标准汤剂的物性参数、化学成分及综合评分进行相关性分析,并建立相应的回归模型。结果相关性分析显示白附子标准汤剂物性参数与化学成分呈显著相关,其中pH值和相对密度是与内在化学成分最为关联的两个物性参数;综合评分与相对密度呈显著负相关,与pH值、氧化值均呈显著正相关;回归分析所建立的模型,拟合度均较高,模型有效。结论研究对白附子标准汤剂的物性参数和大、小分子成分含量进行综合考察,其物性参数与化学成分呈显著相关,建立的回归模型拟合度均较高,表明以物性参数指征内在化学成分具有可行性,可为实现白附子标准汤剂的快速质量评价与控制提供一定的参考依据。

关键词：白附子标准汤剂物性参数化学成分熵权TOPSIS法相关性

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焦琳经筋手法松解术治疗膝关节骨关节炎临床经验

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中国针灸 2024年第6期44卷 689-693页

作者：朱泳森欧阳希林钟根平余一佳陈诗乐柯姚焦琳江西中医药大学针灸推拿学院南昌330004 江西中医药大学附属医院针灸三科南昌330006

总结焦琳教授采用经筋手法松解术治疗膝关节骨关节炎的临床经验。焦琳教授认为膝关节骨关节炎发生发展的关键在于经筋病变,病变经筋在膝关节骨关节炎“筋急期、筋结期、筋挛期、筋痿期”4个阶段的病理表现各不相同,具有多层次、多维度... 详细信息

总结焦琳教授采用经筋手法松解术治疗膝关节骨关节炎的临床经验。焦琳教授认为膝关节骨关节炎发生发展的关键在于经筋病变,病变经筋在膝关节骨关节炎“筋急期、筋结期、筋挛期、筋痿期”4个阶段的病理表现各不相同,具有多层次、多维度、多形态的病理分布特点。治疗上本着经筋病“以痛为输”的选穴原则,将痛阈降低的病变经筋作为“腧穴”进行干预,运用经筋手法松解术为主要治疗手段,并结合不同阶段证候特征及经络表现适时配合针刺、热敏灸、拔罐、刺络放血等其他手段杂合以治,以恢复与重建膝关节局部经筋“主束骨利关节”的生理功能。

关键词：膝关节骨关节炎经筋手法松解术经络诊察名医经验焦琳