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普鲁卡因与5′-氮杂-2′-脱氧胞苷对人肝肿瘤细胞株HepG_2中Wif-1基因启动子甲基化影响的比较研究

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四川大学学报（医学版） 2013年第1期44卷 27-30,41页

作者：胡曼戴立里曾维政重庆医科大学附属第二医院消化内科重庆400010 成都军区总医院消化内科成都610083

目的探讨普鲁卡因与5′-氮杂-2′-脱氧胞苷(5′-Aza-2′-deoxycycytidine,5-aza-dc)对人肝肿瘤细胞株HepG2经典Wnt信号通路抑制因子-1(Wif-1)基因启动子脱甲基化作用的影响。方法以普鲁卡因或5-aza-dc干预HepG2细胞,采用RT-PCR及Western blot检测干预前后Wif-1基因mRNA及蛋白的表达;甲基化特异性聚合酶链反应(methylation-specific polymerase chain reaction,MSP)检测干预前后HepG2细胞中Wif-1甲基化变化。结果 RT-PCR和Western blot结果显示经普鲁卡因或5-aza-dc作用前HepG2细胞Wif-1基因mRNA与蛋白呈低表达或缺失,经普鲁卡因或5-aza-dc作用后HepG2细胞Wif-1基因mRNA与蛋白呈高表达,各组间比较差异有统计学意义,且普鲁卡因实验组表达高于5-aza-dc实验组(P<0.05)。MSP结果显示,经普鲁卡因或5-aza-dc干预后HepG2细胞与干预前HepG2细胞比较均呈部分脱甲基化状态,对应的甲基化率分别为(14.41±3.37)%和(29.29±1.84)%(P<0.05)。结论普鲁卡因及5-aza-dc均可影响Wif-1基因启动子CpG岛的甲基化状态。普鲁卡因可以作为一种新的去甲基化药物且效果优于常规药物5-aza-dc。

关键词：经典Wnt通路Wif-1 5'-氮杂-2’-脱氧胞苷普鲁卡因甲基化

阿魏酸钠对NALP3炎性复合体的调节及在肺纤维化中的作用

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四川大学学报（医学版） 2017年第4期48卷 503-508页

作者：况菊魏小林谢敏四川大学华西医院呼吸与危重症医学科成都610041

目的探讨NALP3炎性复合体在肺纤维化过程中的活化情况,并观察阿魏酸钠(sodium ferulate,SF)在肺纤维化过程中对炎性复合体的影响。方法体内实验以博莱霉素(BLM)气管滴注构建小鼠肺纤维化模型(BLM组),治疗组在用BLM建模后第2天以SF(100mg... 详细信息

目的探讨NALP3炎性复合体在肺纤维化过程中的活化情况,并观察阿魏酸钠(sodium ferulate,SF)在肺纤维化过程中对炎性复合体的影响。方法体内实验以博莱霉素(BLM)气管滴注构建小鼠肺纤维化模型(BLM组),治疗组在用BLM建模后第2天以SF(100mg/kg)每日1次腹腔注射(SF组),对照组(不建模)和BLM组注射等量磷酸盐缓充液,建模后第21天取肺组织行Masson染色,观察肺组织胶原沉积(Ashcroft评分)情况;以碱水解法测定肺组织羟脯氨酸(HYP)含量;体外实验以H_2O_2刺激小鼠胚胎成纤维细胞NIH-3T3以构建成纤维细胞氧化应激模型,干预组以SF 400μg/mL预处理2h,再用H_2O_2培养细胞,采用Real time-PCR检测小鼠肺组织及体外实验分组处理细胞相关炎性细胞因子NALP3、caspase-1、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、collagen-1、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA,Western blot检测小鼠肺组织NALP3蛋白,分组处理细胞NALP3、collagen-1、α-SMA蛋白的表达;ELISA测定肺组织上清及细胞上清中IL-1β质量浓度。结果体内实验SF处理后,肺纤维化模型小鼠Ashcroft评分及HYP含量较BLM组有所减少(P<0.05);肺组织NALP3炎性复合体NALP3、ASC、caspase-1mRNA,NALP3蛋白的表达和IL-1β的合成较BLM组均有减少(P<0.05)。体外实验显示H_2O_2能有效刺激NALP3炎性复合体NALP3、ASC、caspase-1mRNA的表达(P<0.05)与IL-1β的分泌(P<0.05),并且能有效促进成纤维细胞NALP3蛋白、collagen-1和α-SMA的表达(P<0.05);SF预处理能在基因水平抑制NALP3、ASC、caspase-1、collagen-1和α-SMA的表达(P<0.05),且在蛋白水平减少NALP3、collagen-1、α-SMA的表达(P<0.05),降低IL-1β水平(P<0.05)。结论阿魏酸钠可能通过抑制氧化应激诱导的NALP3炎症复合体活化,从而抑制成纤维细胞活化,展现其抗纤维化作用。

关键词：肺纤维化成纤维细胞 NALP3炎性复合体阿魏酸钠

正相HPLC-MS/MS测定人血浆中多奈哌齐对映体浓度

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四川大学学报（医学版） 2012年第5期43卷 779-781,785页

作者：余勤向瑾石玲子梁茂植秦永平南峰四川大学华西医院临床药理研究室成都610041

目的建立正相高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定人血浆中多奈哌齐(DN)对映体的方法,并进行方法学验证。方法采用正己烷∶异丙醇(98∶2,V/V)作为萃取剂进行样品浓集,选用CHIRALCEL OJ-H手性柱(250mm×4.6mm,5μm)作分析柱,流动相... 详细信息

目的建立正相高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定人血浆中多奈哌齐(DN)对映体的方法,并进行方法学验证。方法采用正己烷∶异丙醇(98∶2,V/V)作为萃取剂进行样品浓集,选用CHIRALCEL OJ-H手性柱(250mm×4.6mm,5μm)作分析柱,流动相为正己烷∶正丙醇∶二乙胺=60∶40∶0.1(V∶V∶V),流速为0.5mL/min,柱温为38℃。以多反应监测(MRM)方式进行定量检测,利多卡因为内标,按内标法定量。结果左旋DN(S-DN)、右旋DN(R-DN)对映体的保留时间分别为15.56和18.41min。S-DN的线性范围为0.051～7.596ng/mL,R-DN的线性范围为0.049～7.404ng/mL,线性良好(r>0.99)。S-DN和R-DN的方法回收率分别为95.10%～103.70%、93.58%～98.00%;预处理回收率分别为58.42%～61.08%、53.24%～61.87%;日内精密度(RSD)分别为8.35%～11.28%、6.78%～11.58%;日间RSD分别为5.82%～9.02%、6.87%～9.19%。结论建立的正相HPLC-MS/MS测定人血浆多奈哌齐对映体血药浓度具有快速、简便、灵敏、准确等优点,适用于多奈哌齐对映体的人体药动学研究。

关键词：多奈哌齐对映体正相质谱

氨甲环酸控制老年股骨转子间骨折术后隐性失血

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中国组织工程研究 2020年第21期24卷 3353-3357页

作者：余东名胡松杨小中邹懿陈勇胡波高大新川北医学院临床医学系四川省南充市637000 :2广安市人民医院骨科四川省广安市638500

背景:老年股骨转子间骨折术后会出现大量隐性出血,减少隐性出血成为急待解决的重要问题。目的:评估股骨近端防旋髓内钉置入后隐性失血是否受术前静脉滴注氨甲环酸的影响。方法:选择2018年7月至2019年7月在广安市人民医院创伤骨科就诊的... 详细信息

背景:老年股骨转子间骨折术后会出现大量隐性出血,减少隐性出血成为急待解决的重要问题。目的:评估股骨近端防旋髓内钉置入后隐性失血是否受术前静脉滴注氨甲环酸的影响。方法:选择2018年7月至2019年7月在广安市人民医院创伤骨科就诊的老年股骨转子间骨折患者82例,均行股骨近端防旋髓内钉置入内固定治疗,根据氨甲环酸使用情况分为2组,每组41例。试验组术前麻醉诱导时,缓慢静脉注射10 mg/kg氨甲环酸;对照组给予等量的生理盐水缓慢静脉输注。术前及术后第1,3,5天均复查血常规,统计血红蛋白量及红细胞压积,理论总失血量可通过Cross方程来计算,同时记录2组输血率及术后血栓并发症发生情况。结果与结论:①通过统计分析,2组显性出血量相差较小,差异无显著性意义(P>0.05);②试验组围术期实际失血总量、术后隐性出血量显著低于对照组,经统计分析差异有显著性意义(P<0.05);③术后统计试验组输血人数为3例(7%),对照组为8例(24%),2组差异有显著性意义(P<0.05);④术后2组患者均无血栓并发症发生;⑤结果表明,氨甲环酸术前静脉滴注可有效减少股骨近端防旋髓内钉置入后隐性失血,同时也不会增加术后血栓发生风险。

关键词：氨甲环酸老年股骨转子间骨折股骨近端防旋髓内钉隐性失血血栓

双脉冲多普勒成像评价二尖瓣环组织运动与瓣口血流的耦联关系

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中国医学影像技术 2015年第3期31卷 389-392页

作者：张红梅尹立雪颜华英苗俊旺谢盛华李文华孟庆国四川省医学科学院四川省人民医院超声医学研究所、超声心脏电生理学与生物力学四川省重点实验室四川成都610072

目的探讨双脉冲多普勒(DPW)技术同步评价二尖瓣环组织运动和主动脉瓣、二尖瓣血流的耦联关系。方法选取健康成年志愿者110名,采用DPW技术同步获取二尖瓣环组织运动与瓣口血流频谱图,测量峰值起始时间(Ts)和达峰时间(Tp),并进行统计学分... 详细信息

目的探讨双脉冲多普勒(DPW)技术同步评价二尖瓣环组织运动和主动脉瓣、二尖瓣血流的耦联关系。方法选取健康成年志愿者110名,采用DPW技术同步获取二尖瓣环组织运动与瓣口血流频谱图,测量峰值起始时间(Ts)和达峰时间(Tp),并进行统计学分析。结果二尖瓣瓣环收缩期Ts及Tp均早于主动脉瓣口血流速度的Ts和Tp[Ts:(42.65±9.36)ms vs(61.38±12.19)ms;Tp:(96.63±14.77)ms vs(145.88±21.50)ms,P均<0.05];在整个心动周期中,二尖瓣瓣环Ts与瓣口血流Ts均有相关性(r=0.323、0.703、0.275,P均<0.05);二尖瓣瓣环Tp与瓣口血流Tp仅在舒张早期有相关性(r=0.760,P<0.001)。结论正常成年人心肌收缩与瓣口血流形成存在机械收缩-血流形成延迟,且心肌运动与瓣口血流形成有相关性。

关键词：超声心动描记术二尖瓣环双脉冲波多普勒收缩血流

CFN-MPS-200模块自动化制备^(18)F-FLT及其质量控制与生物评价

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四川大学学报（医学版） 2017年第2期48卷 295-298页

作者：江骁王潇雄陆皓陈世容肖定琼赵檬李秀丽张歌许国辉程祝忠四川省肿瘤医院影像科PET/CT中心成都610061

目的利用CFN-MPS-200型自动合成模块制备3′-脱氧-3′-[氟-18]氟胸腺嘧啶(3′-deoxy-3′-18 Ffluorothymidine,^(18)F-FLT),并对其进行质量分析,最后在Wistar大鼠体内对^(18)F-FLT进行生物评价。方法以3-N-t-叔丁氧羰基-1-[5′-O-(4,4′-二甲氧基三苯甲基)-2′-脱氧-3′-O-(4-硝基苯磺酰基)-β-D-苏型-呋喃戊糖基]胸苷(3-N-Boc-5′-O-dimethoxytrityl-3′-O-nosyl-thymidine,Boc-FLT)为原料,用CFN-MPS-200型自动合成模块合成无溶剂残留的^(18)F-FLT,通过radio-高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)和radio-薄层色谱(thin layer chromatography,TLC)进行质量控制,在健康Wistar大鼠体内进行正电子发射断层显像(PET显像)。结果基于CFN-MPS-200多功能合成模块自动化合成^(18)F-FLT的时间约为60min,合成产率约为(24±5)%(衰减校正,n=20),放化纯大于99%,放射性浓度约为1.11×109 Bq/mL。产品为无色透明溶液,pH值在7.0~8.0之间,放化纯度大于99%。^(18)F-FLT在正常Wistar大鼠体内主要浓聚在肾、膀胱、骨髓、肝,在其他部位分布较低。结论利用CFN-MPS-200多功能合成模块制备的18 F-FLT方法稳定,产率高,安全无溶剂,产品质量控制指标合格。

关键词： 18F-FLT PET分子探针放射性药物自动合成 PET扫描

同时产CTX-M-22及TEM-1型β-内酰胺酶的阴沟肠杆菌耐药性分析

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中国抗生素杂志 2006年第12期31卷 733-736页

作者：刘刚凌保东谢勇恩周岐新雷军赵廷坤川北医学院药物研究所南充637007 重庆医科大学药理教研室重庆400016

目的了解临床分离阴沟肠杆菌株EC003产β-内酰胺酶的耐药特征和基因型。方法采用琼脂二倍稀释法对阴沟肠杆菌EC003进行MIC检测,酶提取物三维实验检测AmpC酶,双纸片法筛选及确证实验检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),等电聚焦(IEF)电泳测定... 详细信息

目的了解临床分离阴沟肠杆菌株EC003产β-内酰胺酶的耐药特征和基因型。方法采用琼脂二倍稀释法对阴沟肠杆菌EC003进行MIC检测,酶提取物三维实验检测AmpC酶,双纸片法筛选及确证实验检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),等电聚焦(IEF)电泳测定其等电点。以耐药质粒为模板进行PCR扩增,将β-内酰胺酶全编码基因克隆、表达,并对其扩增产物进行DNA序列测定和同源性分析。结果阴沟肠杆菌株EC003对所试多数β-内酰胺类抗生素耐药,表型检测AmpC酶为阴性,ESBLs阳性,IEF显示该菌产两种pI分别为8.7及5.4的β-内酰胺酶。PCR扩增产物DNA测序证实为CTX-M-22、TEM-1型β-内酰胺酶全编码基因,产TEM-1的克隆菌株仅对青霉素类耐药,产CTX-M-22的克隆菌株对所试多数β-内酰胺类抗生素耐药,对头孢噻肟的水解程度明显强于头孢他啶。结论临床分离阴沟肠杆菌株EC003同时产CTX-M-22和TEM-1型两种β-内酰胺酶,可导致对多数β-内酰胺类抗生素耐药。

关键词：阴沟肠杆菌耐药性, 超广谱β-内酰胺酶表型基因型

日粮中添加小肽对育肥牦牛生产性能和消化道PepT1 mRNA表达的影响

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中国农业科学 2020年第23期53卷 4950-4960页

作者：苗建军彭忠利高彦华柏雪谢昕廷西南民族大学畜牧兽医学院/青藏高原动物遗传资源保护与利用教育部重点实验室

【目的】研究日粮中添加小肽对育肥牦牛生产性能、养分表观消化率、血液指标及消化道小肽转运载体1(PepT1)mRNA表达的影响,为小肽在牦牛日粮中的合理应用提供数据支持。【方法】选取36头体重((180.98±20.57)kg)相近,健康的麦洼公牦牛,... 详细信息

【目的】研究日粮中添加小肽对育肥牦牛生产性能、养分表观消化率、血液指标及消化道小肽转运载体1(PepT1)mRNA表达的影响,为小肽在牦牛日粮中的合理应用提供数据支持。【方法】选取36头体重((180.98±20.57)kg)相近,健康的麦洼公牦牛,按照随机区组试验设计分为4组,每组9个重复,每个重复1头牛。分别饲喂小肽添加水平为0、0.75%、1.50%、2.25%的全混合日粮。预饲期30 d,正试期80 d。试验开始和结束时记录体重,每日饲喂时记录每头牦牛的喂料量及剩料量。试验最后一周,连续3 d收集每头牦牛的饲料及粪便样品,进行常规营养分析;同时,每组选取5头牦牛采集颈静脉血并制备血清,测定血清生化及免疫指标。试验结束后,将每组采血的5头牦牛屠宰,立即取瘤胃、网胃、瓣胃、皱胃及十二指肠、空肠、回肠组织,通过实时荧光定量PCR法测定各组织中PepT1 mRNA的表达量。【结果】(1)平均日增重(ADG)、干物质采食量(DMI)和料重比(F/G)随小肽添加水平的升高均呈二次曲线变化(P0.05)。(3)随小肽添加水平的升高,血清中谷丙转氨酶(ALT)含量线性降低(P0.05);日粮中添加不同水平小肽对牦牛血清中IgG、IgA和IgM三种免疫球蛋白的含量均无显著影响(P>0.05)。(4)牦牛消化道中PepT1 mRNA表达量由高到低依次为空肠、回肠、十二指肠、网胃、瓣胃、瘤胃、皱胃,且空肠PepT1 mRNA的表达量显著高于其他消化道部位(P0.05)。随小肽添加水平的升高,瘤胃、网胃和空肠的PepT1 mRNA表达量均呈线性升高变化(P0.05)。【结论】日粮中添加小肽能够提高育肥牦牛的生产性能和养分表观消化率,改善肝功能,促进小肽在消化道中的转运吸收。在本试验条件下,日粮小肽添加水平为2.25%时饲喂效果最佳。

关键词：小肽育肥牦牛生产性能养分表观消化率血液指标 PepT1 mRNA表达

单克隆免疫球蛋白血症患者肾脏损害的临床病理特征

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中华病理学杂志 2020年第4期49卷 348-350页

作者：张萍汪伟姚琪金毅邹玉蓉李贵森四川省医学科学院四川省人民医院肾内科成都610072

目的:探讨单克隆性免疫球蛋白血症患者肾脏损害的临床病理学特征。方法:回顾性分析67例单克隆性免疫球蛋白血症患者肾脏损害的临床及病理资料。按照临床及病理检查结果将患者分为3组:具有肾脏意义的单克隆丙种球蛋白病(MGRS)组(46例),... 详细信息

目的:探讨单克隆性免疫球蛋白血症患者肾脏损害的临床病理学特征。方法:回顾性分析67例单克隆性免疫球蛋白血症患者肾脏损害的临床及病理资料。按照临床及病理检查结果将患者分为3组:具有肾脏意义的单克隆丙种球蛋白病(MGRS)组(46例),意义未明的M蛋白血症(MGUS)组(8例)和多发性骨髓瘤(MM)组(13例)。分析各组患者临床及病理学特征。结果:67例患者平均年龄为(59±10)岁,男女比为37︰30。MM组血肌酐高于MGRS组及MGUS组(P<0.05),MGRS组血清白蛋白及IgG低于MM组、EGFR高于MM组(P<0.05),MGRS组的肾病综合征发生率及大量蛋白尿发生率高于MM组及MGUS组(P<0.05)。MGRS组、MGUS组及MM组的主要病理类型分别为轻链型肾淀粉样变(42例)、膜性肾病(4例)、轻链管型肾病(7例)。结论:单克隆性免疫球蛋白血症患者肾脏损害的临床表现及病理类型多样,MGRS患者常表现肾病综合征,以轻链型肾淀粉样变多见,而MM患者常表现肾功能不全,以轻链管型肾病多见。此类患者需结合临床资料及肾脏病理改变作出诊断,以指导制定治疗计划及判断患者预后。

关键词：肾淀粉样变轻链型肾脏损害膜性肾病肾脏病理改变临床病理学特征肾病综合征肾功能不全