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大肠杆菌多酚氧化酶的分子克隆及异源高效表达

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中国饲料 2024年第5期 26-31页

作者：邓卉余丹邹成义范景胜李斌屈东倪青松郑钰嘉陈瑾四川省畜牧科学研究院动物遗传育种四川省重点实验室四川成都610066

菜籽粕、棉籽粕等非粮饲料资源存在的酚类化合物芥子碱、棉酚等抗营养因子,严重影响了其饲喂价值。本课题组筛选出的一株大肠杆菌属芥子碱降解菌SDB2已被证实能通过分泌多酚氧化酶来降解芥子碱和棉酚,本试验旨在运用基因工程技术克隆SDB... 详细信息

菜籽粕、棉籽粕等非粮饲料资源存在的酚类化合物芥子碱、棉酚等抗营养因子,严重影响了其饲喂价值。本课题组筛选出的一株大肠杆菌属芥子碱降解菌SDB2已被证实能通过分泌多酚氧化酶来降解芥子碱和棉酚,本试验旨在运用基因工程技术克隆SDB2多酚氧化酶基因,实现其高效表达,为SDB2多酚氧化酶在饲料工业上的规模化应用奠定基础。从大肠杆菌SDB2中克隆出多酚氧化酶基因,将其与质粒pET28a连接后转化至大肠杆菌BL21感受态细胞中培养,通过PCR鉴定及质粒酶切验证方法构建重组菌株,同时对重组克隆基因进行生物信息学分析。采用“2×2”交叉试验设计,以温度和诱导剂IPTG浓度两个影响因素诱导SDB2多酚氧化酶基因在重组菌株中高效表达,经SDS-PAGE和WB双重验证后,确立最佳诱导条件,最终纯化出目标酶蛋白。结果表明:(1)成功克隆SDB2多酚氧化酶基因,构建出异源表达重组菌株。(2)克隆出的SDB2重组多酚氧化酶基因含目标核苷酸741个,总编码氨基酸263个(含标签氨基酸20个),氨基酸组成的蛋白相对分子质量为28499.0,理论等电点为6.94,据此预测出SDB2重组多酚氧化酶三维结构模型。(3)确立SDB2多酚氧化酶异源高效表达的最佳诱导条件为温度37℃,IPTG浓度1 mmol,该条件下表达出大量可溶性酶蛋白,有利于工业化生产。本试验条件下,大肠杆菌SDB2多酚氧化酶成功实现了分子克隆及异源高效表达,为我国非粮饲料资源实现高效利用提供了技术参考。

关键词：大肠杆菌多酚氧化酶克隆高效表达

真实世界数据支持大规模简单临床试验设计应用探讨

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中国循证医学杂志 2024年第5期24卷 605-611页

作者：王鸣岐贾玉龙王雨宁李玲王雯任燕姚明宏孙鑫四川大学华西医院中国循证医学中心成都610041 国家药品监督管理局海南真实世界数据研究与评价重点实验室成都610041 四川省真实世界数据技术创新中心成都610041

高质量随机对照临床试验是评价药械有效性和安全性的金标准,但常需要花费大量的资源,难以为监管部门和医疗决策者提供即时证据,尤其是面对新发或突发的重大疾病。与此同时,随机对照试验因严格的设计限制,结果的外部效度较弱,难以提供药... 详细信息

高质量随机对照临床试验是评价药械有效性和安全性的金标准,但常需要花费大量的资源,难以为监管部门和医疗决策者提供即时证据,尤其是面对新发或突发的重大疾病。与此同时,随机对照试验因严格的设计限制,结果的外部效度较弱,难以提供药械在更广泛人群的临床疗效评价证据。相比之下,大规模简单临床试验(large simple trials,LST)可以缩短研究流程,降低研究花费,提供较好的外推性和可靠性证据。本文基于国内外有关LST的文献和监管部门的指导原则,介绍LST的发展、特点以及其与传统随机对照试验的区别,还有在进行LST时的特殊考虑。此外,本文还探讨了真实世界数据支持开展LST的前景,以期为相关研究者开展LST提供参考和借鉴。

关键词：随机对照试验大规模简单临床试验真实世界数据真实世界证据

浒苔生物炭/氮化碳复合材料对三嗪类除草剂的可见光催化降解性能与机制

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环境化学 2024年

作者：刘杨罗万麟雷晓张启莉余佳敏孙惠青孔凡玉刘雪中国烟草总公司四川省公司四川省烟草公司凉山州公司四川省烟草公司泸州市公司四川省烟草公司广元市公司中国农业科学院烟草研究所

针对聚合氮化碳（CN）材料比表面积小，光致电子-空穴重组率高的问题，本研究利用废弃浒苔，结合原位煅烧法，制备了浒苔生物炭/氮化碳复合材料（BCE/CN），用于三嗪类除草剂的催化降解.浒苔中富含的铁元素可有效提高CN对可见光的吸收... 详细信息

针对聚合氮化碳（CN）材料比表面积小，光致电子-空穴重组率高的问题，本研究利用废弃浒苔，结合原位煅烧法，制备了浒苔生物炭/氮化碳复合材料（BCE/CN），用于三嗪类除草剂的催化降解.浒苔中富含的铁元素可有效提高CN对可见光的吸收利用性能，BCE/CN对西玛津、莠去津、西草净和莠灭净4种三嗪除草剂的1 h降解率分别提升43.0%、22.5%、31.0%和66.7%.高角环形暗场-扫描透射电子显微镜结果表明，Fe在复合材料中以单原子和团簇形式分布，并与CN中的N以配位键形式结合.活性物种捕获实验证明，光致空穴在除草剂降解过程中发挥决定性作用，单线态氧以及羟基自由基也一定程度参与反应.此外，系统研究了催化剂用量、除草剂初始浓度、反应温度和pH值对降解过程的影响，并在实际环境水样中评价BCE/CN的催化活性.本研究为三嗪类除草剂的高效降解提供了新方法，也为废弃生物质再利用提供了新思路.

关键词：氮化碳除草剂光催化降解机制浒苔

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南华北盆地典型走滑断裂第四纪活动特征

大地测量与地球动力学 2024年

作者：王帅张扬赵显刚花鑫升河南省地震局河南省城市地震地质安全工程技术研究中心中国地震局地质研究所中国地震局地球物理勘探中心

综合分析南华北盆地沈丘凹陷2条浅层地震剖面、VSP实测纵波速度数据和1条钻孔联合地质剖面，研究沈丘凹陷走滑断裂带浅部一系列负花状构造的几何学特征和可分辨的上断点深度。结果表明，该断裂向上错断第四纪地层，浅层地震勘探剖面上... 详细信息

综合分析南华北盆地沈丘凹陷2条浅层地震剖面、VSP实测纵波速度数据和1条钻孔联合地质剖面，研究沈丘凹陷走滑断裂带浅部一系列负花状构造的几何学特征和可分辨的上断点深度。结果表明，该断裂向上错断第四纪地层，浅层地震勘探剖面上可分辨的上断点埋深为60 m左右，钻孔联合地质剖面可分辨的上断点埋深为38.6～40.1 m，推断该断裂错断中更新世地层。探测结果揭示该断裂为一组呈NWW向排列的雁列状左旋走滑断裂，说明南华北盆地第四纪具有NW向的走滑剪切作用，表明受秦岭造山控制的北西向构造体系在第四纪以来仍有活动，对分析华北板块东部平原区盆地演化具有重要意义。

关键词：南华北盆地沈丘凹陷浅层地震勘探钻孔联合地质剖面走滑断裂

邛崃产区中高温大曲性能及微生物动态变化研究

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食品与发酵工业 2024年第19期50卷 117-126页

作者：林涵瑞刘林培黄蜀生王峰唐文博陈勇王轩吴波谢鸿观何明雄成都理工大学生态环境学院四川成都610059 生物质能技术研究中心农业农村部农村可再生能源开发利用重点实验室农业农村部成都沼气科学研究所四川成都610041 四川省文君井酒业集团有限公司四川邛崃611500 泸州老窖股份有限公司四川泸州646000

大曲被誉为“酒之骨”,其品质对于白酒发酵至关重要。通过Illumina高通量测序分析邛崃产区中高温大曲微生物结构的组成以及变化规律;利用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术研究了挥发性风味物质成分;使用冗余分析与热图分析,将微生... 详细信息

大曲被誉为“酒之骨”,其品质对于白酒发酵至关重要。通过Illumina高通量测序分析邛崃产区中高温大曲微生物结构的组成以及变化规律;利用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术研究了挥发性风味物质成分;使用冗余分析与热图分析,将微生物群落结合大曲理化性质与挥发性物质综合分析其相关性。结果表明,大曲在制备过程中,性能与储存时间基本呈负相关。入库后风味物质含量与储存时间基本呈正相关。酯类与醇类是挥发性物质的主要成分,酯类以十六烷酸甲酯、9-十八碳烯酸甲酯、9,12-十八碳二烯酸甲酯为主,醇类物质基本以苯乙醇为主。优势细菌属为Staphylococcus、Escherichia-Shigella和Pediococcus。真菌分别以Thermoascus、Aspergillus和Pichia为优势真菌属。相关性分析显示,细菌优势菌属Pseudomonas与酯化力呈正相关,与十五烷酸甲酯的含量具有显著性正相关(P性负相关(P性能及挥发性物质与微生物结构的动态变化显著相关。文章研究了邛崃产区中高温大曲制备过程中的性能及微生物动态变化,为邛崃产区中高温大曲的品控提供一定的理论依据。

关键词：邛崃产区中高温大曲性能品质微生物群落挥发性物质

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鲜花椒膏的开发及其杀菌工艺研究

食品与发酵科技 2024年第1期60卷 99-104页

作者：张艳吴银明盛家武温铿王海峰何飞曾攀李佩洪钟珉菡四川省农业特色植物研究院资中641200

以鲜花椒为原料制备半固态调味料鲜花椒膏,进行配方优化、杀菌工艺研究。通过感官评分,确定最佳配方为增稠剂(结冷胶与CMC以3∶7复配)质量分数1.0%、γ-环糊精质量分数0.8%、食用盐质量分数5.0%。以菌落总数、感官评分、麻味物质含量、... 详细信息

以鲜花椒为原料制备半固态调味料鲜花椒膏,进行配方优化、杀菌工艺研究。通过感官评分,确定最佳配方为增稠剂(结冷胶与CMC以3∶7复配)质量分数1.0%、γ-环糊精质量分数0.8%、食用盐质量分数5.0%。以菌落总数、感官评分、麻味物质含量、香味物质含量为指标,确定超高压杀菌500 MPa保压15~20 min为鲜花椒膏的最佳杀菌方式。对花椒膏进行高温保藏试验,确定鲜花椒膏在(37±1)℃条件下储藏20 d时品质好。

关键词：鲜花椒调味料配方杀菌货架期

多源中高分辨率影像协同下时间合成窗口对农作物识别的影响

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中国农业科学 2024年第2期57卷 250-263页

作者：童婉婷魏浩东杨靖雅金文捷宋茜胡琼尹高飞徐保东华中农业大学资源与环境学院/宏观农业研究院华中农业大学植物科学技术学院中国农业科学院农业资源与农业区划研究所/北方干旱半干旱耕地高效利用全国重点实验室华中师范大学城市与环境科学学院西南交通大学地球科学与环境工程学院

【背景】中高空间分辨率（≤30 m）影像是在耕地破碎、种植结构复杂的中国南方开展农作物遥感识别研究的重要数据。然而，要克服中高分辨率传感器重访周期较长以及南方多云雨天气的影响，对影像进行时间窗口合成以协同使用多源中高分辨... 详细信息

【背景】中高空间分辨率（≤30 m）影像是在耕地破碎、种植结构复杂的中国南方开展农作物遥感识别研究的重要数据。然而，要克服中高分辨率传感器重访周期较长以及南方多云雨天气的影响，对影像进行时间窗口合成以协同使用多源中高分辨率遥感数据，是获取时空连续农作物制图结果的必要保障。由于不同卫星影像获取的周期不同，且不同农作物物候季相节律存在较大差异，如何选择影像合成时间窗口是农作物准确识别的关键前提。【目的】通过探究影像合成时间窗口对于农作物识别的影响机制，为大尺度复杂农作物种植结构制图提供重要参考依据。【方法】以农作物类型多样且云雨天气频繁的湖北省江汉平原为研究区，通过协同Landsat-8和Sentinel-2A/2B卫星影像，设置7种时间合成窗口（15、20、25、30、40、50和60 d）情景，分别从影像的覆盖度、不同农作物时序光谱特征以及不同农作物分类精度等角度，深入分析影像时间合成窗口对农作物遥感识别的影响。【结果】在影像20 d时间合成窗口的情景下，江汉平原农作物（冬油菜、冬小麦、水稻、稻虾田和其他作物）的总体分类精度最高，为93.13%。对比而言，在影像较短时间合成窗口（如15 d）的情景下，时间序列密集但高质量影像覆盖度较低，农作物总体分类精度较低（90.91%）；而在影像较长时间合成窗口（如60 d）的情景下，影像覆盖度高但时间序列稀疏，导致农作物识别的关键物候信息丢失，降低了总体分类精度（86.06%）。此外，不同农作物的识别效果受影像时间合成窗口的影响程度不同，依次为其他作物>冬油菜>水稻>冬小麦>稻虾田。其他作物类内时序光谱特征变异性较大，因此对时间窗口极其敏感。油菜准确识别的关键物候期为开花期，该时期长度较短，影像合成时间超过30 d会极大降低其识别效果，主要体现为与小麦的混淆。区分稻虾田与单季稻的关键物候期为稻虾田的稻闲季淹水期，其持续时间较长，受时间合成窗口影响较小。【结论】影像时间合成窗口20 d时可兼顾高质量影像覆盖度和捕获农作物识别的关键物候特征，但不同作物识别的最优时间合成窗口受到作物关键物候期影响。研究结果可为多源中高分辨率影像协同下时间合成窗口的选择提供理论参考和方法支撑，进而有效服务于宏观尺度农作物高精度遥感制图研究。

关键词：农作物遥感识别时间合成窗口随机森林 Sentinel-2 Landsat-8

四川省大豆主要病虫害防控现状及绿色防控对策

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四川农业科技 2024年第4期 51-53页

作者：向运佳余垚颖刘勇蔡伟莉张鸿杨恩年张蕾四川省农业科学院植物保护研究所成都610066 四川省农业科学院成都610066

大豆是四川省重要的粮油作物,巩固提升四川大豆产业,稳定提高大豆的自给率是保障“天府饭碗”的重要举措。文章阐述了四川省大豆主要病虫害种类、病虫害发生特点以及目前防控取得的成效,分析了病虫害防控尤其是绿色防控方面存在的主要问... 详细信息

大豆是四川省重要的粮油作物,巩固提升四川大豆产业,稳定提高大豆的自给率是保障“天府饭碗”的重要举措。文章阐述了四川省大豆主要病虫害种类、病虫害发生特点以及目前防控取得的成效,分析了病虫害防控尤其是绿色防控方面存在的主要问题,并重点提出了选育抗病虫品种、做好病虫监测预警、生态调控、理化诱控、生物防治、科学精准使用化学农药等绿色防控技术对策,以期为我省大豆产业绿色发展提供技术支撑。

关键词：大豆四川病虫害绿色防控

炮制方法对黄精化学成分与药理作用影响研究进展

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中国民族民间医药 2024年第16期33卷 67-73页

作者：黄文娟杨马进彭腾王辉李臻肖特叶昌华四川省农业特色植物研究院四川内江641200 成都中医药大学药学院四川成都610500 四川省中医药科学院四川成都610041

黄精为百合科黄精属植物滇黄精、黄精、或多花黄精3种黄精的干燥根茎,其炮制品为药用中药,具补气养阴、补脾润肺、滋肾等功效。目前黄精的炮制方式多样繁杂,缺乏炮制后黄精化学物质及药效变化的系统性融合整理研究。通过对近十年来黄精... 详细信息

黄精为百合科黄精属植物滇黄精、黄精、或多花黄精3种黄精的干燥根茎,其炮制品为药用中药,具补气养阴、补脾润肺、滋肾等功效。目前黄精的炮制方式多样繁杂,缺乏炮制后黄精化学物质及药效变化的系统性融合整理研究。通过对近十年来黄精炮制方法及其化学、药效变化进行分类、归纳,发现黄精常用炮制方法有清蒸、酒制、九蒸九制等,黄精炮制后多糖、皂苷及挥发性物质均发生显著变化,其药效增强,刺激性毒性降低,更适合人食用。文章为黄精工艺优化、对“症”炮制等提供参考。

关键词：黄精多糖炮制化学成分九蒸九制