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平贝母PCR-核酸试纸条快速检测方法的建立和评价

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药学学报 2024年第6期59卷 1773-1778页

作者：马玉贺商聪慧马秋贺李涛刘悦潘蓓珍高丽君李明成夏薇曲永梅北华大学医学技术学院吉林吉林132013 吉林省中药DNA指纹检测技术科技创新中心吉林吉林132013 吉林国安药业有限公司吉林吉林132013

本研究针对平贝母的ITS2序列设计特异性鉴别引物,优化反应体系及条件,构建PCR-核酸试纸条实现可视化检测平贝母。通过分子克隆及测序技术,构建平贝母DNA阳性对照品,制定质量标准。对建立的方法进行性能评价,检测其灵敏度、特异性和重复... 详细信息

本研究针对平贝母的ITS2序列设计特异性鉴别引物,优化反应体系及条件,构建PCR-核酸试纸条实现可视化检测平贝母。通过分子克隆及测序技术,构建平贝母DNA阳性对照品,制定质量标准。对建立的方法进行性能评价,检测其灵敏度、特异性和重复性,对市售样品进行真伪鉴定。结果显示,基于ITS2序列可对平贝母及其混伪品进行区分。正品平贝母PCR产物滴定于试纸条上显示T、C线两条带,伪品与阴性对照只显示C线一条带,与琼脂糖凝胶电泳结果吻合。特异性为100%,PCR-核酸试纸条灵敏度可达0.1 ng·μL^(-1),高于凝胶电泳检测10倍。16个平贝母市售样品中11个合格,5个不合格。综上,本研究建立的平贝母PCR-核酸试纸条检测方法特异、快速、精准、可视化,可为平贝母检测提供新的技术思路。

关键词：平贝母分子克隆 ITS2序列核酸试纸条可视化

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基于酶促恒温扩增技术快速鉴别天麻真伪检测方法的建立与应用

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药物分析杂志 2024年第4期44卷 729-736页

作者：马秋贺马玉贺李涛刘悦柴金军徐子强刘昂高丽君夏薇李明成曲永梅北华大学医学技术学院吉林132013 吉林省中药DNA指纹检测技术科技创新中心吉林132013 吉林国安药业有限公司吉林132013

目的:基于酶促恒温扩增(enzymatic recombinase amplification, ERA)技术建立一种可快速定性鉴别道地药材天麻真伪的方法。方法:遵循ERA引物设计原则,应用Oligo 7.0软件根据天麻及其常见伪品的ITS2基因组序列,筛选优化天麻ERA特异性引物... 详细信息

目的:基于酶促恒温扩增(enzymatic recombinase amplification, ERA)技术建立一种可快速定性鉴别道地药材天麻真伪的方法。方法:遵循ERA引物设计原则,应用Oligo 7.0软件根据天麻及其常见伪品的ITS2基因组序列,筛选优化天麻ERA特异性引物,应用Primer Premier 5.0软件设计天麻特异性PCR鉴别引物,通过对ERA、PCR反应体系的优化,最终确定ERA最佳反应时间为17 min,最适反应温度为40℃;PCR最优退火温度为57℃,循环为32次,对所建立的方法进行灵敏度、特异性验证,并选取中药市场市售天麻样品进行检测。结果:所设计的天麻ERA鉴别引物与其常见伪品间无交叉反应,特异性良好;重复性结果显示,3次重复性检测结果一致,未出现假阳性与假阴性;该方法对天麻基因组DNA的灵敏度为1 pg·μL^(-1),比传统PCR灵敏性高;ERA技术能够用于天麻市售样品的快速鉴定,且检测结果与PCR方法相同。结论:所建立的检测方法操作简单、快速,具有较高的特异性和灵敏度,为道地药材天麻的真伪鉴别提供了一种新手段。

关键词：酶促恒温扩增聚合酶链式反应天麻定性真伪鉴定快速检测

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一种可供踝关节康复训练的智能轮椅设计

中国医疗设备 2024年第3期39卷 38-45,62页

作者：褚天月王景炎潘黎明陈晋市马东梅黄蕾殷宝月徐昕吉林大学第一医院手足外科护理平台吉林长春130021 吉林大学机械与航空航天工程学院吉林长春130025

目的针对目前下肢康复训练设备适配性、训练效果不佳的现状,设计一种可供手术患者、脑血栓患者及下肢残疾人士踝关节康复的智能辅助轮椅。方法通过对人体踝关节结构和运动特性进行分析,设计踝关节康复机构的整体结构,搭配STM32F103单... 详细信息

目的针对目前下肢康复训练设备适配性、训练效果不佳的现状,设计一种可供手术患者、脑血栓患者及下肢残疾人士踝关节康复的智能辅助轮椅。方法通过对人体踝关节结构和运动特性进行分析,设计踝关节康复机构的整体结构,搭配STM32F103单片机设计控制电路;基于CATIA软件建立三维模型,结合Adams仿真软件搭建平台进行动力学分析;利用ANSYS软件,对辅助轮椅核心零件进行静力学分析,验证结构设计的可行性;选型、装配并搭建实物样机,对实体样机的各项功能与实际性能进行测试。结果通过仿真分析,踝关节康复机构符合设计标准。实际踝关节纵向可翻转角度为-24.6°~13.5°,横向翻转角度为-19.6°~19.5°,踝关节翻折速度为5.8~6.7°/s,踝关节扭动速度约为7.6°/s,踝关节翻折运动扭矩约为20 N·m,外展运动所需扭矩约为17.2 N·m。结论该踝关节康复智能辅助轮椅可实现行走、升降、智能辅助等功能。通过仿真分析及实验测试,轮椅的各项功能均可实现,各项参数指标均符合设计标准,验证了多功能踝关节康复轮椅设计的安全性与合理性。

关键词：踝关节康复智能轮椅结构优化动力学分析静力学分析

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人参田间杂草及除草剂研究进展

人参研究 2024年第1期36卷 47-49页

作者：董兴敏曹中秋黄殿杰杨朔张京楼李永哲梁志齐吉林农业大学中药材学院长春130118 吉林省集安益盛药业股份有限公司集安134200

人参(Panax ***.)有“百草之王”的美誉,为多年生五加科人参属药用植物。人参,别名棒槌、地精等,具有大补元气,补脾益肺,抗休克,调节消化系统,改善造血功能等多种作用,被广泛应用在各种疾病的治疗过程中,并且疗效显著。正因其具有极高... 详细信息

人参(Panax ***.)有“百草之王”的美誉,为多年生五加科人参属药用植物。人参,别名棒槌、地精等,具有大补元气,补脾益肺,抗休克,调节消化系统,改善造血功能等多种作用,被广泛应用在各种疾病的治疗过程中,并且疗效显著。正因其具有极高的药用价值和经济价值,在国内、国际市场和研究领域具有极其重要的地位。

关键词：五加科人参补脾益肺造血功能抗休克药用植物消化系统

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便携式膝关节康复智能轮椅结构设计与分析

中国医疗器械杂志 2024年第4期48卷 445-450页

作者：马东梅王景炎潘黎明陈晋市褚天月黄蕾殷宝月徐昕吉林大学第一医院长春市130021 吉林大学机械与航空航天工程学院长春市130025

目的为解决目前膝关节康复设备便捷性差、医疗成本高、普适性不强等问题,该文设计了一种便携式膝关节康复智能轮椅。方法通过对膝关节结构与康复机理分析,设计电推杆驱动式康复机构,采用模块化思想设计多功能模块,搭配STM32单片机,实... 详细信息

目的为解决目前膝关节康复设备便捷性差、医疗成本高、普适性不强等问题,该文设计了一种便携式膝关节康复智能轮椅。方法通过对膝关节结构与康复机理分析,设计电推杆驱动式康复机构,采用模块化思想设计多功能模块,搭配STM32单片机,实现车体与各功能模块的控制,利用SolidWorks软件建立三维模型,结合Adams和Ansys仿真软件对膝关节康复机构及核心零部件进行运动学与静力学分析。最后,搭建实物样机对实际使用性能进行验证。结果经实物样机测试得出,膝关节摆杆实际角度为15.1°~88.9°,摆杆角速度为-7.9~8.1°/s,摆杆角加速度为-4.2~1.6°/s~2,电动推杆推力范围为-82.6~153.1 N,载荷踏板最大形变量约为1.7 mm,腿托最大形变约为1.5 mm。结论膝关节康复式智能轮椅能够满足各项设计功能,实际性能符合设计准则,验证了结构设计的合理性与可行性。

关键词：膝关节康复智能轮椅控制系统动力学分析静力学分析

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烟草脆裂病毒介导的人参基因沉默体系的构建

中草药 2024年第1期55卷 232-239页

作者：李冉琪李雅淑汤淼淼曲正义郑培和侯微中国农业科学院特产研究所吉林长春130112 吉林农业科技学院吉林吉林132109

目的人参Panax ginseng中构建烟草脆裂病毒(tobacco rattle virus,TRV)介导的基因沉默体系,为人参中基因功能的验证提供新方法。方法通过序列比对得到人参中八氢番茄红素脱氢酶(phytoene desaturase,PDS)基因的完整序列,利用保守结构域... 详细信息

目的人参Panax ginseng中构建烟草脆裂病毒(tobacco rattle virus,TRV)介导的基因沉默体系,为人参中基因功能的验证提供新方法。方法通过序列比对得到人参中八氢番茄红素脱氢酶(phytoene desaturase,PDS)基因的完整序列,利用保守结构域预测工具得到核心片段,将其整合进pTRV2载体内。重组载体转化农杆菌后侵染人参叶片,观察表型并利用q PCR检测沉默效率。结果通过序列比对得到了2条PDS基因。PgPDS1基因c DNA序列全长1746 bp,编码581个氨基酸;PgPDS2基因c DNA序列全长1299bp,编码432个氨基酸。2个PgPDS蛋白均具有典型的PDS结构域。将重组载体通过农杆菌转化人参叶片,接种3周后叶片表型无变化,5周后叶片尖端以及边缘出现枯萎现象。经q PCR检测,接种后3周和5周人参内源PgPDS基因表达量分别下降至接种前的70.37%和37.35%,表明体系构建成功。结论人参中成功构建了TRV介导的基因沉默体系。

关键词：病毒诱导的基因沉默人参八氢番茄红素脱氢酶烟草脆裂病毒农杆菌

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人参皂苷CK美容护肤作用及机制研究进展

特产研究 2024年第3期46卷 161-167页

作者：叶萍张慧娥初孟瑶侯剑峰周蕖魏琨陈长宝李光王恩鹏长春中医药大学吉林省人参科学研究院吉林长春130117 士齐生物研发中心(苏州工业园区)有限公司江苏苏州215125 吉林紫鑫药业股份有限公司吉林长春135300 长春中医药大学附属第一医院吉林长春130117

人参(Panax ginseng ***.)具有重要的药用和保健价值,在我国已有几千年的应用历史,尤其在美容护肤方面的应用非常盛行。目前,人参已成为化妆品原料中非常重要的抗衰老、美白和嫩肤的成分之一。近年来,在一些国内和国际化妆品品牌产品中... 详细信息

人参(Panax ginseng ***.)具有重要的药用和保健价值,在我国已有几千年的应用历史,尤其在美容护肤方面的应用非常盛行。目前,人参已成为化妆品原料中非常重要的抗衰老、美白和嫩肤的成分之一。近年来,在一些国内和国际化妆品品牌产品中被广泛应用。本文总结人参中的20(S)原人参二醇-20-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Compound K,CK)这一成分在皮肤方面的应用,并综述了CK在美容护肤方面的作用及机制。CK是一种由二醇型人参皂苷生物转化而来的脱糖代谢物,比其母体人参皂苷具有更高的生物利用度及溶解性,更容易被人体吸收,近年来备受关注。研究发现,CK具有光保护、抗衰老、保湿和抗炎等多种美容护肤方面的作用。目前的研究主要集中于CK在抗癌中的应用机制,然而,在皮肤美容护肤方面的研究相对较少。本文总结了CK在护肤方面的作用,并重点阐释了CK护肤的分子机制,如抗紫外线辐射机制、抗衰老和保湿机制以及抗炎机制,可为今后CK在美容护肤领域中更深层次的研究及开发提供参考。

关键词：人参皂苷CK 光保护抗衰老护肤机制研究进展

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重组人干扰素α2b单克隆抗体亲和层析介质的制备及其纯化效果评价

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中国生物制品学杂志 2022年第7期35卷 844-847,852页

作者：顾建阳王宇孙子琪张雯雯常军亮长春生物制品研究所有限责任公司吉林长春130012

目的制备重组人干扰素α2b(recombinant human interferonα2b,rhIFNα2b)单克隆抗体的亲和层析介质,并评价其纯化效果。方法采用小鼠杂交瘤细胞融合技术及小鼠体内诱生法筛选并制备rhIFNα2b单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb),经AT... 详细信息

目的制备重组人干扰素α2b(recombinant human interferonα2b,rhIFNα2b)单克隆抗体的亲和层析介质,并评价其纯化效果。方法采用小鼠杂交瘤细胞融合技术及小鼠体内诱生法筛选并制备rhIFNα2b单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb),经AT Protein A亲和层析纯化,12%还原型SDS-PAGE鉴定纯度,Western blot法鉴定McAb与rhIFNα2b原液及其聚合蛋白(rhIFNα2b原液于56℃热加速处理)的特异性反应。用筛选的McAb与CNBr-activated Bestarose^(TM) 4FF偶联1~4 h,紫外-可见分光光度法监测偶联液上清McAb蛋白浓度,12%还原型SDS-PAGE验证偶联介质抗体蛋白饱和程度,确定最佳偶联时间。将制备的McAb亲和层析介质装柱后,上样rhIFNα2b原液及经56℃热加速24 h的样品,15%非还原SDS-PAGE验证其纯化效果。结果经杂交瘤制备和筛选,确定以4E2抗体作为偶联McAb,纯度>95%。McAb 4E2与CNBr-activated Bestarose^(TM) 4FF偶联3 h后抗体蛋白浓度趋于平稳,预活化凝胶介质抗体蛋白吸附率约为30 mg/mL,凝胶介质偶联抗体蛋白量趋于饱和,为使偶联更加充分,确定最佳偶联时间为4 h。rhIFNα2b原液及其56℃热加速24 h样品可由McAb亲和柱层析有效吸附洗脱,并保持与McAb的结合活性。结论本实验制备的rhIFNα2b单克隆抗体亲和层析介质,具有良好的纯化效果,为rhIFNα2b不同剂型比对样品的前处理提供了高效方法。

关键词：重组人干扰素α2b 单克隆抗体亲和层析纯化

基于COI条形码序列的梅花鹿鹿皮及其伪品的DNA分子鉴定

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吉林农业大学学报 2022年第5期44卷 595-600页

作者：都帅王琦常天赢嵩之松张辉李庆杰王全凯吉林农业大学中药材学院长春130118 长春中医药大学附属医院中医药研究中心长春130021 长春世鹿鹿业集团有限公司长春130606 长春中医药大学长春130117

基于COI条形码序列对满族医药鹿皮胶的正品原料梅花鹿鹿皮及其伪品(将马鹿,赤鹿,黇鹿等与梅花鹿相近鹿种作为伪品)进行DNA分子鉴定,建立NJ树分析梅花鹿鹿皮正品与伪品的区别,以期建立一种快速有效的真伪鉴别方法。结果显示:NJ树中,正品... 详细信息

基于COI条形码序列对满族医药鹿皮胶的正品原料梅花鹿鹿皮及其伪品(将马鹿,赤鹿,黇鹿等与梅花鹿相近鹿种作为伪品)进行DNA分子鉴定,建立NJ树分析梅花鹿鹿皮正品与伪品的区别,以期建立一种快速有效的真伪鉴别方法。结果显示:NJ树中,正品梅花鹿鹿皮样品全部聚集为独立的一支,支持率为100%,有明显的单系性;伪品样品也分别聚集为单独的一支,支持率为100%。基于COI序列的DNA条形码技术,对比基因库,可以有效鉴别梅花鹿鹿皮的真伪,为满族医药传统药材梅花鹿鹿皮的真伪鉴别提供了新的科学方法。

关键词：梅花鹿鹿皮满族医药 COI序列伪品