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人参醇溶蛋白提取工艺优化、结构表征及体外抗氧化活性分析

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食品工业科技 2024年第8期45卷 1-10页

作者：郭浩白雪媛陈宇宋文博刘那王思明长春中医药大学东北亚中医药研究院吉林长春130117

为探讨人参中醇溶蛋白提取工艺,结构表征及体外抗氧化活性,本文以人参为研究对象,采用单因素实验和响应面试验探索人参醇溶蛋白的最佳提取工艺,以紫外吸收光谱法、红外分光光度分析法、氨基酸组成、微观结构观察等方法对人参醇溶蛋白进... 详细信息

为探讨人参中醇溶蛋白提取工艺,结构表征及体外抗氧化活性,本文以人参为研究对象,采用单因素实验和响应面试验探索人参醇溶蛋白的最佳提取工艺,以紫外吸收光谱法、红外分光光度分析法、氨基酸组成、微观结构观察等方法对人参醇溶蛋白进行结构表征,并对其在不同pH条件下的体外抗氧化活性开展一系列研究。通过测定DPPH自由基清除能力、羟基自由基清除能力、铁离子还原能力,评价人参醇溶蛋白的体外抗氧化活性。结果表明,人参中醇溶蛋白最佳提取工艺为:提取时间2 h、提取料液比1:10 g/mL、提取pH为7,此时人参醇溶蛋白得率为0.319%,蛋白含量为75%。通过紫外吸收光谱法、红外分光光度分析法、氨基酸组成成分分析试验结果表明,人参醇溶蛋白氨基酸总量为82.3 g/100 g,其中人体必需氨基酸含量为26.46 g/100 g,药用氨基酸含量为30.51 g/100 g,验证了该人参醇提物主要成分确为蛋白质,分子量约为3.3 kDa,SEM扫描电镜结果显示,该人参醇溶蛋白结构完整,表面稀疏且有不规则的脊形凸起以及少量孔隙,蛋白质颗粒呈现蜂窝聚集状态,具有稳定有序的网状结构。体外抗氧化试验结果表明,该蛋白在强酸性条件下具有较强的体外抗氧化活性,当pH=1时,人参醇溶蛋白对DPPH自由基的清除率为96%,对羟基自由基的清除率为79%,对铁离子的还原能力为0.86。

关键词：人参醇溶蛋白响应面结构表征抗氧化活性

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灵芝孢子粉多糖对APAP肝损伤的保护作用研究

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食品工业科技 2024年第11期45卷 289-295页

作者：刘洋韩忠明刘琳玲李金涛张楠闫梅霞中国农业科学院特产研究所吉林长春130112 吉林农业大学中药材学院吉林长春130118

目的:探讨灵芝孢子粉多糖(Ganoderma lucidum spore polysaccharide,GLSP)在对乙酰氨基酚(Aceta-minophen,APAP)肝损伤中的保护作用。方法:将50只小鼠随机分为五组,分别为空白组、模型组、阳性药物组、GLSP低剂量组和GLSP高剂量组,每组1... 详细信息

目的:探讨灵芝孢子粉多糖(Ganoderma lucidum spore polysaccharide,GLSP)在对乙酰氨基酚(Aceta-minophen,APAP)肝损伤中的保护作用。方法:将50只小鼠随机分为五组,分别为空白组、模型组、阳性药物组、GLSP低剂量组和GLSP高剂量组,每组10只,各组按相应剂量连续14 d预给药后,使用APAP造模、取材,测定肝脏指数、血清指标(谷草转氨酶(glutamic oxalacetic transaminase,AST)、谷丙转氨酶(glutamic-pyruvic transaminase,ALT))及肝组织匀浆指标(谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malonaldehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、Caspase-3、Bax和Bcl-xl)。结果:与空白组相比,模型组中ALT、AST、MDA及促凋亡基因Caspase-3、Bax均极显著升高(P<0.01),SOD、GSH含量极显著降低(P<0.01),HE染色结果显示APAP处理的小鼠肝脏出现典型的小叶中心性坏死;多糖剂量组与模型组相比ALT、AST极显著降低(P<0.01),多糖低剂量组SOD、GSH显著升高(P<0.05),MDA显著降低(P<0.05),在多糖高剂量组中,SOD、GSH极显著升高(P<0.01),MDA极显著降低(P<0.01),多糖组促凋亡基因Caspase-3、Bax极显著降低(P<0.01),且肝组织病理学观察中可见肝组织坏死面积减小。结论:灵芝孢子粉多糖对APAP肝损伤能够起到预保护作用,其作用机制可能与提高肝脏的抗氧化能力和抑制凋亡的发生有关。

关键词：灵芝孢子粉多糖 APAP 抗氧因子凋亡基因

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基于超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱和靶向网络药理学技术结合分子对接研究薤白治疗高血脂症的药效成分

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分析化学 2024年第4期52卷 578-586页

作者：王一凯董金旭白玉涛王瑞黄鑫陈长宝越皓刘侗杨德辉长春中医药大学薤白研究所吉林省东方制药有限公司

采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF-MS）技术快速分析了薤白中主要化学成分及入血成分，并根据相对分子质量、碎片离子以及色谱峰保留时间等信息对成分进行归属鉴定。在薤白药材中共鉴定出36种化学成分，包括28种皂苷... 详细信息

采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF-MS）技术快速分析了薤白中主要化学成分及入血成分，并根据相对分子质量、碎片离子以及色谱峰保留时间等信息对成分进行归属鉴定。在薤白药材中共鉴定出36种化学成分，包括28种皂苷类化合物、3种氨基酸类化合物、2种黄酮类化合物、1种有机硫化合物、1种核苷类化合物、1种类激素脂质化合物以及8种以原型入血的成分。基于入血成分与TCMSP平台数据库筛选交集成分，应用靶向网络药理学及分子对接技术，构建了“药物-成分-靶点-通路”关联网络，筛选出槲皮素、柚皮素、薤白苷E和25(R)-26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-22-羟基-5β-呋甾3-O-β-D-吡喃葡萄糖基（1→2）-β-D-吡喃半乳糖苷为薤白药材治疗高血脂症的主要药效成分，磷酸腺苷活化蛋白激酶（AMPK）、肿瘤坏死因子（TNF）、血管内皮生长因子A(VEGFA)和基质金属蛋白酶9(MMP9)为薤白发挥降血脂药效的关键作用靶点。将主要药效成分与关键作用靶点进行分子对接，结果表明，4种药效成分均与AMPK结合较强，推测调节脂质代谢可能是薤白发挥降血脂作用的关键机制。本研究为研究薤白药效成分提供了数据参考，也为薤白药材质量标准的提升提供了依据。

关键词：超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱靶向网络药理学分子对接薤白药效成分

来源：博看期刊

UPLC-PDA波长切换法同时测定红参和黑参中麦芽酚及17种皂苷的含量

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中国中药杂志 2024年第11期49卷 2965-2972页

作者：吴雨桐许煊炜王艳红赵丹刘刚刘育辰贵州中医药大学药学院贵州贵阳550025 吉林农业大学农业农村部参茸产品质量检验测试中心吉林长春130118

建立了UPLC-PDA波长切换法同时测定红参和黑参中麦芽酚及17种皂苷含量的方法,并比较红参和黑参2种不同人参加工品之间的质量差异。采用Waters HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),以乙腈(A)-0.1%磷酸水(B)为流动相进行梯度洗脱,流速0.... 详细信息

建立了UPLC-PDA波长切换法同时测定红参和黑参中麦芽酚及17种皂苷含量的方法,并比较红参和黑参2种不同人参加工品之间的质量差异。采用Waters HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),以乙腈(A)-0.1%磷酸水(B)为流动相进行梯度洗脱,流速0.3 m L·min^(-1),柱温30℃,进样量2μL,波长切换方式0~11 min为273 nm,11~60 min为203 nm。对多批次红参和黑参样品含量测定结果进行聚类分析(HCA)和主成分分析(PCA),评价其质量差异性。结果显示,18种目标成分在一定质量浓度范围内均呈良好的线性关系,相关系数(r)均大于0.999 1;精密度、重复性和稳定性的相对标准偏差(RSD)均小于5.0%;平均加样回收率为95.93%~104.2%,RSD为1.8%~4.2%。定量测定结果显示红参和黑参样品间存在一定差异,并且HCA和PCA这2种分析方式均可直观区分红参和黑参2类人参加工品。该方法准确、可靠、重复性好,可用于红参和黑参中麦芽酚及17种皂苷成分的含量测定,同时为红参和黑参的质量评价和综合利用提供基础资料。

关键词：红参黑参超高效液相色谱-二极管阵列检测器波长切换法麦芽酚皂苷

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新型复合保鲜贮藏方法对鲜参切片品质的影响及货架期预测

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食品工业科技 2024年第4期45卷 282-289页

作者：鲁海玲徐艳阳吉林大学食品科学与工程学院吉林长春130062

目的:探究一种新型复合保鲜贮藏方法,预测鲜参切片的货架期。方法:应用酸性氧化电位水杀菌、真空包装、低温等离子体杀菌等技术复合处理鲜参切片,然后分别在-2、4、25和36℃进行贮藏,每隔15 d测定鲜参切片的色泽、水分含量、人参皂苷Rg1... 详细信息

目的:探究一种新型复合保鲜贮藏方法,预测鲜参切片的货架期。方法:应用酸性氧化电位水杀菌、真空包装、低温等离子体杀菌等技术复合处理鲜参切片,然后分别在-2、4、25和36℃进行贮藏,每隔15 d测定鲜参切片的色泽、水分含量、人参皂苷Rg1、Re、Rb1含量和菌落总数等指标,建立贮藏期间鲜参切片的菌落总数变化动力学模型。结果:确定鲜参切片的复合保鲜工艺为:酸性氧化电位水处理→真空包装→低温等离子体处理→低温贮藏。在-2和4℃贮藏有效地抑制鲜参切片菌落总数的增长、水分含量的下降,延缓鲜参切片颜色的变化。贮保藏60 d后,鲜参切片中人参皂苷Rg1、Re和Rb1的含量上升。通过基于菌落总数变化的一级反应动力学模型和Arrhenius方程,建立鲜参切片的货架期预测模型。结论:建立了鲜参切片的最佳复合保鲜贮藏方式,这种复合保鲜贮藏方法可有效抑制鲜参切片的品质劣化,延长其货架期。

关键词：鲜参切片酸性氧化电位水低温等离子体近冰温贮藏货架期预测模型

基于指纹图谱的加味葛根颗粒6种指标成分含量测定及多元统计分析

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中国新药杂志 2024年第9期33卷 934-941页

作者：李文莉李军鸽朱凯王永春楚云杰长春中医药大学附属医院长春130117 长春中医药大学长春130117

目的:建立加味葛根颗粒的指纹图谱,测定其中6种成分的含量,并进行正交偏最小二乘判别法分析(OPLS-DA)。方法:采用HPLC法,色谱柱为Tech Mate-C18柱,流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液(梯度洗脱),检测波长为254 nm,柱温为35℃,流速为1 mL·min^(... 详细信息

目的:建立加味葛根颗粒的指纹图谱,测定其中6种成分的含量,并进行正交偏最小二乘判别法分析(OPLS-DA)。方法:采用HPLC法,色谱柱为Tech Mate-C18柱,流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液(梯度洗脱),检测波长为254 nm,柱温为35℃,流速为1 mL·min^(-1)。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》2012年版进行相似度评价,确定共有峰,并测定其中6种成分的含量;采用SIMCA 14.0软件进行OPLS-DA分析,并利用分析变量重要性投影值(VIP)筛选影响其质量的标志物。结果:10批加味葛根颗粒共有14个共有峰,相似度均>0.9;共指认了6个色谱峰并分别测定了含量,各成分在考察范围内线性良好,r值在0.999 0~0.999 9之间。OPLS-DA筛选得到了6个VIP>1的共有峰(峰13、峰7、峰12、峰2、峰8、峰9),经对照品指认了其中3个差异性标志物(肉桂酸、原儿茶酸、芍药苷)。结论:结合多元统计分析,建立的指纹图谱和含量测定方法准确、稳定、可行,可用于加味葛根颗粒的质量控制。

关键词：加味葛根颗粒指纹图谱含量测定聚类分析

冻干与生晒西洋参饮片差异皂苷含量及促斑马鱼血管生成活性比较

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中国实验方剂学杂志 2024年第17期30卷 185-192页

作者：邵娟徐梦丹张雪晶郭云龙蔡广知贡济宇长春中医药大学药学院长春130117 长春中医药大学吉林省人参科学研究院长春130117

目的:分析和测定冻干与生晒西洋参饮片中的差异成分,并比较二者促血管生成活性的差异。方法:基于超高效液相色谱法(UPLC)建立冻干和生晒西洋参饮片的指纹图谱,结合主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘法-判别分析(OPLSDA)等化学计量学方法... 详细信息

目的:分析和测定冻干与生晒西洋参饮片中的差异成分,并比较二者促血管生成活性的差异。方法:基于超高效液相色谱法(UPLC)建立冻干和生晒西洋参饮片的指纹图谱,结合主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘法-判别分析(OPLSDA)等化学计量学方法确定2种饮片的差异皂苷成分,采用UPLC测定其中6种代表性成分在冻干与生晒西洋参饮片中的含量;选取受精24 h的转基因斑马鱼品系Tg(fli1a∶EGFP)胚胎,分别使用不同剂量的冻干与生晒西洋参70%甲醇提取物(10、30 mg·L^(-1))干预正常斑马鱼和血管内皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂Ⅱ(PTK787)诱导的节间血管(ISV)损伤斑马鱼模型,观察斑马鱼肠下静脉(SIV)和ISV发育情况,测定SIV直径、平均交叉数和平均发芽数,计算ISV血管指数,比较2种饮片的促血管生成活性。结果:冻干与生晒西洋参饮片指纹图谱相似度均>0.950,分别确定了17个共有峰,指认了其中6个共有峰分别为峰6(人参皂苷Rg_(1))、峰7(人参皂苷Re)、峰8(人参皂苷Rb_(1))、峰11(人参皂苷Rc)、峰13(人参皂苷Rb_(2))、峰16(人参皂苷Rd);PCA及OPLS-DA筛选出11种差异性皂苷成分,表明2种饮片的成分含量存在一定差异;含量测定结果显示,冻干西洋参饮片中人参皂苷Rg_(1)、Re、Rb_(1)、Rb_(2)含量高于生晒西洋参饮片,而人参皂苷Rc、Rd含量低于生晒西洋参饮片(P<0.05,P<0.01)。在对正常斑马鱼胚胎促血管生成作用研究中,与空白组比较,冻干及生晒西洋参高剂量组SIV血管直径、平均发芽率及平均交叉率均显著升高(P<0.01),且冻干西洋参组血管直径、平均交叉数及平均发芽数均高于生晒西洋参组(P<0.05)。对ISV损伤的斑马鱼胚胎促血管生成作用研究显示,与空白组比较,模型组斑马鱼ISV发育受到抑制;与模型组比较,冻干及生晒西洋参各剂量组均可促进ISV的生长与萌发,相同剂量下,冻干西洋参组的正常血管数目明显高于生晒西洋参组(P<0.05)。结论:冻干处理西洋参饮片可有效避免其中人参皂苷类成分的流失与二次转化,其促斑马鱼血管生成活性优于生晒西洋参饮片,可为优质西洋参饮片的生产与开发提供参考。

关键词：西洋参饮片冻干生晒指纹图谱含量测定化学计量法促血管生成

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纳米抗体偶联药物的研究进展

药学学报 2024年第5期59卷 1210-1217页

作者：张雪嫣周柏松刘玉林长春生物制品研究所有限责任公司吉林长春130012

抗体偶联药物(antibody-drug conjugate,ADC)因其具有靶点清晰、特异性强等优点已成为临床上治疗多种疾病尤其是癌症的有效手段。但传统ADC中的单克隆抗体组织渗透能力差,存在免疫原性和免疫毒性等风险,且改造成本高。由驼科动物血液中... 详细信息

抗体偶联药物(antibody-drug conjugate,ADC)因其具有靶点清晰、特异性强等优点已成为临床上治疗多种疾病尤其是癌症的有效手段。但传统ADC中的单克隆抗体组织渗透能力差,存在免疫原性和免疫毒性等风险,且改造成本高。由驼科动物血液中提取的纳米抗体(nanobody,Nb)是目前已知具有完整抗原结合能力的最小抗体片段,具有组织渗透能力强、免疫原性低、特异性强、稳定性高等优势,可以代替传统单克隆抗体参与构建纳米抗体偶联药物(nanobody-drug conjugate,NDC)。本文从纳米抗体结构优势、NDC的构建、纳米抗体偶联物的应用三个方面进行综述与讨论,以期为NDC的研究与发展提供思路。

关键词：纳米抗体抗体偶联药物纳米抗体偶联药物

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肝移植术后脾动脉盗血综合征的诊疗策略

中华肝胆外科杂志 2024年第4期30卷 308-312页

作者：于家傲寇凯吕行李婷吕国悦孙晓东吉林大学第一医院普通外科中心肝胆胰外科长春130021

脾动脉盗血综合征(SASS)是肝移植术后的一种动脉相关并发症。目前对SASS的发生机制尚不清楚,而且其早期临床表现缺乏特异性,若未及时治疗可能会导致患者预后严重恶化。目前处理SASS主要依赖于外科医师术中的针对性预防措施,以及术后及... 详细信息

脾动脉盗血综合征(SASS)是肝移植术后的一种动脉相关并发症。目前对SASS的发生机制尚不清楚,而且其早期临床表现缺乏特异性,若未及时治疗可能会导致患者预后严重恶化。目前处理SASS主要依赖于外科医师术中的针对性预防措施,以及术后及时的诊断和治疗措施。笔者总结了SASS的国内外相关研究成果,探讨了未来的研究方向,以期为SASS的防治提供帮助。

关键词：肝移植脾动脉盗血综合征发病机制诊断治疗