检索结果-南通市图书馆

维普期刊数据库博看期刊

基于CRISPR/Cas9技术建立Lepr与eNos双基因敲除的糖尿病肾病小鼠模型

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

首都医科大学学报 2024年第3期45卷 392-398页

作者：赵苗妙李明嘉李小亚段蕊张静宜杨金奎首都医科大学附属北京同仁医院内分泌科、糖尿病防治研究北京市重点实验室北京市糖尿病研究所北京100730

目的基于CRISPR/Cas9基因编辑技术建立瘦素受体基因(leptin receptor,Lepr)与血管内皮一氧化氮合酶基因(endothelial nitric oxide synthase,eNos)双基因敲除(double-knockout,DKO)小鼠模型,构建晚期糖尿病肾病小鼠模型。方法根据eNos基因制备对应的gRNA,将CRISPR-Cas9体系显微注射于C57BL/Ks(BKS)背景小鼠的受精卵内。将受精卵转移至有假孕状态雌性小鼠的输卵管内部。幼鼠出生后经聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)鉴定及测序分析分选出为eNos^(+/-)基因型的F0代阳性小鼠,获得BKS背景下的Lepr基因杂合小鼠,即基因型为Lepr^(db/m)的Lepr-F0代杂合子小鼠。将eNos-F0与Lepr-F0代小鼠杂交,获得eNos^(+/-)/Lepr^(db/m)双杂合F1代小鼠,将双杂合F1代小鼠进一步交配,筛选得到Lepr与eNos双基因敲除小鼠。采用PCR法鉴定小鼠基因型,按基因鉴定结果分为野生型(wild-type,WT)组与DKO组小鼠。监测各组小鼠体质量、血糖与饮水进食量;采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测小鼠尿白蛋白与尿肌酐水平,并计算尿白蛋白排泄率;苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)与过碘酸六胺银(periodic acid-silver metheramine,PASM)染色检查各组小鼠肾组织病理改变。结果PCR检测结果显示,成功构建lepr^(db/db)/eNos^(-/-)DKO小鼠。与同窝对照组相比,DKO小鼠的体质量、血糖水平与饮水进食量均显著高于同窝对照小鼠。DKO小鼠的尿白蛋白与尿白蛋白排泄率显著高于WT小鼠。病理学结果显示,DKO小鼠的肾小球体积明显增大,系膜基质增生明显。结论基于CRISPR/Cas9基因编辑技术可成功构建lepr^(db/db)/eNos^(-/-)DKO小鼠,DKO小鼠可反映糖尿病肾病的典型表现,为深入研究糖尿病肾病的作用机制提供动物模型。

关键词：基因敲除 CRISPR/Cas9技术糖尿病肾病 eNos Lepr

早期胃印戒细胞癌内镜黏膜下剥离术后全身转移1例(含视频)

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华消化内镜杂志 2024年第5期41卷 412-414页

作者：徐桂林张观坡江传燊李达周王雯中国人民解放军联勤保障部队第900医院消化内科、厦门大学附属东方医院、福建医科大学福总临床医学院福州350025

报告1例因早期胃印戒细胞癌行内镜治疗的病例,术前完善相关检查评估考虑早期胃印戒细胞癌,术后4年后出现全身多发转移。

关键词：胃肿瘤早期胃癌内镜黏膜下剥离术印戒细胞癌预后

LncRNA-TMEM220-AS1在肝细胞癌中的表达及对细胞增殖和侵袭能力的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

武汉大学学报（医学版） 2024年第2期45卷 190-195页

作者：任超叶明亮洪莹晖刘佳良王纯康辉丁洋蓝偲瑜常莹武汉大学中南医院消化内科/湖北省肠病临床研究中心/肠病湖北省重点实验室湖北武汉430071

目的:分析lncRNA-TMEM220-AS1在肝细胞癌(HCC)中的表达和对HCC生物学表型的影响。方法:基于TCGA下载的数据,使用秩和检验分析TMEM220-AS1在配对及非配对癌和癌旁组织中的表达差异,Cox回归等分析方法分析TMEM220-AS1与预后的关系,使用KEG... 详细信息

目的:分析lncRNA-TMEM220-AS1在肝细胞癌(HCC)中的表达和对HCC生物学表型的影响。方法:基于TCGA下载的数据,使用秩和检验分析TMEM220-AS1在配对及非配对癌和癌旁组织中的表达差异,Cox回归等分析方法分析TMEM220-AS1与预后的关系,使用KEGG和GO进行富集分析并通过String数据库构建与TMEM220-AS1相关的蛋白质互作网络;构建稳定敲低TMEM220-AS1的肝癌细胞株,检测TMEM220-AS1的表达量及其对HCC细胞增殖、侵袭、转移的影响。结果:HCC中TMEM220-AS1在高表达组的总体生存率显著高于低表达组,并可能通过参与凋亡相关通路发挥抑癌作用。细胞实验表明TMEM220-AS1不仅可以抑制HCC细胞的增殖,还可以显著抑制其侵袭迁移能力。结论:TMEM220-AS1在HCC中低表达,可以抑制HCC的增殖、迁移和侵袭能力,并可作为HCC的独立预后因素。

关键词： TMEM220-AS1 肝细胞癌生物信息学腺病毒转染

肝星状细胞特异性Grk2基因敲除小鼠模型的制备及鉴定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国药理学通报 2024年第1期40卷 189-194页

作者：王语涵许雅萍李南陈婷婷李玲高萍萍王华魏伟孙妩弋安徽医科大学临床药理研究所抗炎免疫药物教育部重点实验室安徽合肥230032 安徽医科大学第一附属医院肿瘤科安徽合肥230022

目的利用Cre-loxP基因敲除技术建立肝星状细胞特异性G蛋白偶联受体激酶2(G protein-coupled receptor kinase 2,GRK2)基因敲除小鼠模型,为研究GRK2在肝星状细胞中的生物学功能提供动物模型基础。方法将loxP标记的Grk2基因小鼠(Grk2^(fl/... 详细信息

目的利用Cre-loxP基因敲除技术建立肝星状细胞特异性G蛋白偶联受体激酶2(G protein-coupled receptor kinase 2,GRK2)基因敲除小鼠模型,为研究GRK2在肝星状细胞中的生物学功能提供动物模型基础。方法将loxP标记的Grk2基因小鼠(Grk2^(fl/fl))和Lrat-Cre工具鼠进行多次繁殖,建立肝星状细胞特异性Grk2基因敲除(Grk2^(ΔHSC))小鼠模型。观察和分析小鼠的生长繁殖情况;通过PCR反应鉴定flox和Cre基因型;免疫荧光双染检测肝星状细胞中GRK2表达;Western blot检测小鼠肝星状细胞及肺、脾、肾脏、心脏组织中GRK2蛋白表达;HE染色观察肝脏及肺、脾、心脏、肾脏组织学形态。结果成功鉴定Grk2^(ΔHSC)小鼠基因型;两组小鼠体质量、繁殖能力无明显差异;免疫荧光双染及Western blot结果表明,Grk2^(ΔHSC)小鼠的肝星状细胞中GRK2蛋白水平明显低于对照组小鼠,Grk2^(ΔHSC)小鼠肺、脾、肾脏和心脏组织中GRK2蛋白表达与对照组相比无明显变化;HE染色结果显示,Grk2^(ΔHSC)小鼠肝脏及主要组织结构与Grk2^(fl/fl)相比差异无显著性,可用于后续研究。结论本研究应用Cre-loxP技术成功构建了肝星状细胞特异性Grk2基因敲除小鼠,为进一步研究GRK2在肝脏中的作用提供了优良工具。

关键词： G蛋白偶联受体激酶2 Cre-loxP重组酶系统细胞特异性敲除肝星状细胞基因鉴定繁育

肝细胞特异性Sirt3基因敲除小鼠模型的构建

同方期刊数据库博看期刊评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

安徽医科大学学报 2024年第3期59卷 384-390页

作者：许雅萍王语涵陈婷婷李南高萍萍李玲王华孙妩弋安徽医科大学临床药理研究所抗炎免疫药物教育部重点实验室合肥230032 安徽医科大学第一附属医院肿瘤科合肥230032

目的运用Cre-loxP技术构建肝细胞特异性沉默信息调节因子3(silence information regulator 3,Sirt3)基因敲除(Sirt3^(Δhep))小鼠,为研究肝细胞Sirt3基因在疾病中的生物学功能提供重要动物模型。方法将loxP标记的Sirt3 ^(flox/flox)小鼠... 详细信息

目的运用Cre-loxP技术构建肝细胞特异性沉默信息调节因子3(silence information regulator 3,Sirt3)基因敲除(Sirt3^(Δhep))小鼠,为研究肝细胞Sirt3基因在疾病中的生物学功能提供重要动物模型。方法将loxP标记的Sirt3 ^(flox/flox)小鼠与Alb-Cre纯合子(Alb-Cre^(+/+))小鼠进行交配,F1代Sirt3^(flox/-)/Alb-Cre^(+/-)小鼠再与Sirt3^(flox/flox)小鼠进行交配并鉴定,F2代基因型为Sirt3 ^(flox/flox)/Alb-Cre^(+/-)的小鼠即为本实验所构建的Sirt3^(Δhep)小鼠,Sirt3 ^(flox/flox)/Alb-Cre^(-/-)小鼠即为对照小鼠Sirt3 ^(flox/flox)小鼠。提取鼠尾DNA,通过PCR鉴定子代小鼠的基因型;免疫荧光双染观察Sirt3在小鼠肝细胞中的表达;提取Sirt3^(Δhep)小鼠原代肝细胞及心脏、脾脏、肾脏、肺组织蛋白,Western blot法验证Sirt3在小鼠肝细胞及其他组织中的表达水平;HE染色观察小鼠肝脏及心脏、脾脏、肺等组织结构。结果成功鉴定出Sirt3^(Δhep)小鼠;免疫荧光及Western blot结果显示,小鼠肝细胞中Sirt3蛋白表达水平低于对照组小鼠(P0.05);HE染色结果显示Sirt3^(Δhep)小鼠肝脏、心脏、脾脏、肺、肾脏的组织学特征与对照组小鼠相比无明显变化。结论成功构建肝细胞特异性Sirt3基因敲除小鼠,为进一步研究肝细胞Sirt3基因在相关疾病中的调控作用机制奠定了基础。

关键词：肝细胞 Sirt3 基因敲除 Sirt3^(Δhep)小鼠 Cre-loxP 基因型鉴定

同方期刊数据库

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

糖尿病皮肤功能障碍及其机制的研究进展

中华糖尿病杂志 2023年第2期15卷 195-198页

作者：张诗丽李姝贤黄佳利丁心怡罗祥蓉曹瑛高方邹梦晨南方医科大学南方医院内分泌代谢科广州510515 南方医科大学公共卫生学院广州510515

糖尿病皮肤病变是最常见但最容易被忽视的糖尿病并发症之一,严重影响患者的生存质量,甚至导致糖尿病足的发生。近年来研究提出,糖尿病皮肤病变可在一定程度上预测糖尿病并发症的进展、糖尿病足的发生,因此对于糖尿病皮肤病变的早期诊断... 详细信息

糖尿病皮肤病变是最常见但最容易被忽视的糖尿病并发症之一,严重影响患者的生存质量,甚至导致糖尿病足的发生。近年来研究提出,糖尿病皮肤病变可在一定程度上预测糖尿病并发症的进展、糖尿病足的发生,因此对于糖尿病皮肤病变的早期诊断及治疗具有重要意义。但目前关于糖尿病皮肤病变的发病机制仍未完全阐明,糖尿病皮肤病变的早期防治也未引起临床上的重视,因此不乏见到因皮肤病变导致严重糖尿病足并最终截肢的病例。该文结合国内外最新进展,从皮肤结构、慢性炎症损伤、皮肤微环境等方面,归纳总结糖尿病患者皮肤病变的病理生理改变,探讨糖尿病皮肤功能障碍潜在的发病机制,阐述皮肤微生态对于糖尿病皮肤病变的影响,为糖尿病皮肤病变的早期诊断和治疗提供理论依据。

关键词：糖尿病糖尿病皮肤病变皮肤结构皮肤功能障碍皮肤菌群

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

吲达帕胺致双眼葡萄膜渗漏综合征1例

中华眼底病杂志 2023年第11期39卷 930-932页

作者：靳睿张玉洁华佳佳丁建光常红敏李传宝济宁医学院附属医院眼科山东省济宁市272000

患者男,18岁。因双眼突然视力下降2d,于2022年4月至济宁医学院附属医院眼科就诊。1个月前体检测得血压145/95mmHg(1mmHg=0.133kPa),未治疗;1周前复查血压150/90mmHg,口服吲达帕胺片(2.5mg/次,1次/d)控制血压。眼部检查:右眼、左眼视力均... 详细信息

患者男,18岁。因双眼突然视力下降2d,于2022年4月至济宁医学院附属医院眼科就诊。1个月前体检测得血压145/95mmHg(1mmHg=0.133kPa),未治疗;1周前复查血压150/90mmHg,口服吲达帕胺片(2.5mg/次,1次/d)控制血压。眼部检查:右眼、左眼视力均为0.02、矫正视力分别为0.6、1.0。右眼、左眼眼压分别为12、14mmHg;眼轴分别为23.57、23.50mm;中央晶体厚度分别为3.94、4.10mm。

关键词：葡萄膜渗漏综合征吲达帕胺病例报告

吊顶灯辅助的微创玻璃体切割联合空气填充治疗孔源性视网膜脱离的疗效观察

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华眼底病杂志 2022年第4期38卷 313-315页

作者：陈岱瑜胡一骏方莹林展杰吴冠蓉郑淳文孔惠谦余洪华广东省人民医院(广东省医学科学院)眼科广州510080 南方医科大学第二临床医学院广州510060 汕头大学医学院汕头515041 华南理工大学医学院广州510006

微创玻璃体切割手术(PPV)是治疗孔源性视网膜脱离(RRD)的主要手术方式之一,手术后多使用硅油、C3F8或无菌空气作为填充眼内物。硅油和C3F8填充手术后患者需较长时间保持特殊体位,且易引发高眼压、继发性白内障等并发症[1,2,3]。空气表... 详细信息

微创玻璃体切割手术(PPV)是治疗孔源性视网膜脱离(RRD)的主要手术方式之一,手术后多使用硅油、C3F8或无菌空气作为填充眼内物。硅油和C3F8填充手术后患者需较长时间保持特殊体位,且易引发高眼压、继发性白内障等并发症[1,2,3]。空气表面张力是硅油的30倍,顶压效果较好,具有视力恢复较快、无需二期手术、并发症发生率低等优点[4];但手术后复发性视网膜脱离发生率较高,可能是裂孔周围玻璃体残留及空气在眼内顶压时间较短所致[5]。吊顶灯多用于复杂PPV中辅助照明,国内有学者应用吊顶灯联合C3F8填充治疗上方RRD[6],但联合吊顶灯及空气填充治疗RRD则鲜见报道。为此,我们采用吊顶灯辅助微创PPV联合空气填充治疗一组RRD患者。现将结果报道如下。

关键词：视网膜脱离玻璃体切除术空气吊顶灯

腹膜透析患者低钾血症与腹膜炎发生的相关性——一项单中心回顾性队列研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

腹膜透析患者低钾血症与腹膜炎发生的相关性——一项单中心回顾性...

作者：刘丹阳南方医科大学

学位级别：硕士

背景和目的:低钾血症(Hypokalemia,LK)是接受透析治疗的终末期肾脏病(End stage renal disease,ESRD)患者的常见症状,并且在腹膜透析(Peritoneal dialysis,PD)患者中更为突出,增加了 PD患者的疲乏、营养不良、心律失常、心衰、心脏骤停... 详细信息

背景和目的:低钾血症(Hypokalemia,LK)是接受透析治疗的终末期肾脏病(End stage renal disease,ESRD)患者的常见症状,并且在腹膜透析(Peritoneal dialysis,PD)患者中更为突出,增加了 PD患者的疲乏、营养不良、心律失常、心衰、心脏骤停、死亡的发生风险。近年来,有研究提出低钾血症与PD患者腹膜炎的发生也有关,但其程度和持续时间在其中的作用尚未完全清楚。因此,我们进行了一项单中心、回顾性队列研究,以探讨PD患者低钾血症程度及持续时间与腹膜炎发生的内在关系,以及低钾血症对其他临床结局的影响。方法:本研究纳入了 2009年1月1日至2019年12月31日在南方医科大学南方医院肾内科置管并持续随访(首年3月/次,次年6月/次,此后1年/次)、年龄≥16周岁的602例PD患者,通过查阅医院病历系统收集相关资料,分析血清钾水平(Serumpotassium,SK)、LK的程度、LK的持续时间与PD患者腹膜炎发生的相关性,LK与腹膜炎发生的时间关系,同时探讨LK与PD患者全因死亡、PD撤退以及复合终点(死亡、心衰、心血管疾病、脑卒中)的发生等预后相关性。结果:1.整个随访期内,320例(53.7%)腹膜透析患者出现了 LK,123例(20.7%)患者则出现过严重低钾血症(Serious hypokalemia,SLK)。在基线时只有41例(6.82%)患者发生LK,3例(0.5%)发生SLK;接受腹膜透析治疗3个月后,LK和SLK的发生率分别上升至29.6%和6.5%,此后持续保持在25-32%和5.5-8.2%的范围内。2.多因素 Cox 回归分析显示,LK(HR=1.437,95%CI=1.014-2.038,P=0.042)和 SLK(HR=2.021,95%CI=1.429-2.857,P<0.001)与患者腹膜炎发生密切相关;当对每个随访点进行分析时,只有SLK仍与腹膜炎发生存在显著相关性。***和SLK中位持续时间分别为6(3-12)月和6(3-6)月,校正变量后,只有SLK的持续时间与腹膜炎的发生相关(HR=1.041,95%CI=1.018-1.064,P<0.001)。按持续时间分组,LK持续6个月以上(HR=1.757,95%CI=1.061-2.908,P=0.028)和 SLK 持续 3 个月以上(HR=2.623,95%CI=1.748-3.936,P<0.001)均与腹膜炎的发生显著相关。4.对同时患有LK和腹膜炎的研究对象进行分析,中位LK-腹膜炎时间和SLK-腹膜炎时间分别为9.5(-2-25.5)月和-5(-25-5)月。此外,我们发现70.4%(n=76)的研究对象LK发生时间早于腹膜炎发生时间,62.7%(n=37)SLK发生时间则晚于腹膜炎发生时间。***也增加了 PD患者复合终点的发生风险。结论:低钾血症的程度和持续时间与腹膜炎及复合终点的发生密切相关。低钾血症可能是腹膜炎的原因之一,而腹膜炎的出现也会加重低钾血症的程度。在临床工作中医护人员应积极管理腹膜透析患者的血清钾水平,避免低钾血症,特别是严重低钾血症的出现。

关键词：腹膜透析低钾血症腹膜炎回顾性研究