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基于UPLC-ESI-Q-TOF-MS分析中药鸡冠花子的化学成分

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中国现代应用药学 2024年

作者：王丽桂吕佳杰都述虎马坤芳范君婷鞠建明南京中医药大学附属中西医结合医院江苏省中医药研究院南京医科大学药学院

目的应用UPLC-ESI-Q-TOF-MS技术对中药鸡冠花子中化学成分进行定性分析。方法采用UPLC-ESI-Q-TOFMS技术采集数据，通过高分辨质谱提供的精确分子量和碎片离子信息，结合SciFinder数据库、青葙属相关文献、对照品信息、裂解规律进行数... 详细信息

目的应用UPLC-ESI-Q-TOF-MS技术对中药鸡冠花子中化学成分进行定性分析。方法采用UPLC-ESI-Q-TOFMS技术采集数据，通过高分辨质谱提供的精确分子量和碎片离子信息，结合SciFinder数据库、青葙属相关文献、对照品信息、裂解规律进行数据分析。结果从鸡冠花子中共鉴定出76个化学成分，包含13个环肽，18个三萜，16个黄酮，11个酚，6个苯丙素，4个甾体和8个其他类化合物，其中27个化学成分为该种首次发现。并首次归纳荨麻科类型环肽和茄科类型环肽的质谱裂解特点。结论建立的UPLC-ESI-Q-TOF-MS法对鸡冠花子中化学成分进行快速、准确、全面分析，为其质量控制和药效物质基础阐明提供科学依据。

关键词：鸡冠花子 UPLC-ESI-Q-TOF-MS 化学成分环肽三萜

加味二妙颗粒安慰剂的制备工艺及模拟效果评价研究

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中国中药杂志 2024年第1期49卷 123-129页

作者：汤若晗黄胜良张肇锋李存玉汤书婉郑云枫彭国平南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏融昱药业有限公司江苏淮安223000

探索加味二妙颗粒安慰剂的制备工艺并开展模拟效果评价,为加味二妙颗粒临床试验提供合格的安慰剂样品,也为中药颗粒剂型安慰剂的制备与质量评价提供参考。在加味二妙颗粒综合分析结果的基础上利用正交试验进行其安慰剂制备的味道模拟和... 详细信息

探索加味二妙颗粒安慰剂的制备工艺并开展模拟效果评价,为加味二妙颗粒临床试验提供合格的安慰剂样品,也为中药颗粒剂型安慰剂的制备与质量评价提供参考。在加味二妙颗粒综合分析结果的基础上利用正交试验进行其安慰剂制备的味道模拟和颜色模拟小试,并通过初步人工评价确定安慰剂处方:糊精10 g,党参浸膏5.0 g,苦瓜提取物1.6 g,乌梅提取物0.3 g,甜菊糖苷0.1 g,蔗糖八乙酸酯0.004 g,靛蓝0.004 g,柠檬黄0.003 1 g,日落黄0.001 8 g,乔木苦茶粉0.001 8 g,焦糖0.001 3 g。根据安慰剂处方进行中试。对安慰剂的模拟效果进行独立性、对比性人工评价及电子鼻、电子舌客观化检测,结果显示此安慰剂处方在独立性人工评价中错误率较高,在对比性人工评价中与加味二妙颗粒得分差距不大,相似度为99.61%;电子鼻检测安慰剂处方与加味二妙颗粒气味相似度为99.19%,电子舌检测结果显示两者口味差距不大,相似性较高。因此,加味二妙颗粒安慰剂模拟效果较好,与加味二妙颗粒相似度高,应用于临床试验时不易破盲。此研究为中药颗粒剂型安慰剂的制备及质量评价提供了参考,对促进中药颗粒剂型安慰剂生产的规模化,推动中药安慰剂的临床应用,提高中药疗效的说服力及认可度起到一定的积极作用。

关键词：加味二妙颗粒安慰剂制备工艺人工评价客观化评价相似性

黄蜀葵花总黄酮对肾脏葡萄糖重吸收影响的实验研究

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中华糖尿病杂志 2024年第6期16卷 691-699页

作者：陈娟孙红黄莉吉张舒周希乔葛静余江毅江苏省中医院南京中医药大学附属医院内分泌科南京210029 苏州大学附属独墅湖医院内分泌科苏州215000

目的探讨黄蜀葵花总黄酮(TFA)对肾小管葡萄糖重吸收的影响。方法24只C57BL/6小鼠按照随机数字表法分成3组:对照组、高脂喂养组(HFD)组及HFD+TFA组,每组8只。体外采用人近端小管上皮HK2细胞,棕榈酸(PA)处理模拟脂毒,并予TFA干预,分别为... 详细信息

目的探讨黄蜀葵花总黄酮(TFA)对肾小管葡萄糖重吸收的影响。方法24只C57BL/6小鼠按照随机数字表法分成3组:对照组、高脂喂养组(HFD)组及HFD+TFA组,每组8只。体外采用人近端小管上皮HK2细胞,棕榈酸(PA)处理模拟脂毒,并予TFA干预,分别为对照组、PA组及PA+TFA组。油红O染色评估肾皮质组织及胞内脂质含量,免疫荧光染色、实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)及Western blotting检测钠-葡萄糖共转运蛋白2(SGLT2)表达,并评估各组细胞葡萄糖摄取能力。组间比较采用单因素方差分析。结果HFD组小鼠肾小管中脂质沉积明显,而对照组小鼠肾小管中未观察到脂滴。与HFD组相比,HFD+TFA组小鼠肾小管中红染脂滴明显减少(P<0.001)。免疫荧光结果显示,3组小鼠肾小管均表达SGLT2,HFD组及HFD+TFA组小鼠SGLT2蛋白表达水平高于对照组(P<0.05)。然而,HFD+TFA组SGLT2蛋白表达水平较HFD组小鼠明显减弱(P=0.049)。qRT-PCR结果显示,HFD组小鼠SGLT2 mRNA表达水平明显高于对照组(P<0.001),而TFA干预后SGLT2 mRNA表达水平减弱。细胞实验观察到,TFA可显著减轻PA对细胞的毒性,缓解胞内脂质沉积,减弱SGLT2表达,并抑制细胞葡萄糖摄取能力(P<0.05)。结论TFA减轻肾小管脂质沉积,改善葡萄糖重吸收功能,其肾脏保护效应可能与介导SGLT2调控肾小管葡萄糖重吸收有关。

关键词：黄蜀葵花总黄酮脂质沉积钠-葡萄糖共转运蛋白2

基于网络药理学和分子对接探讨西黄丸治疗宫颈癌的作用机制

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现代药物与临床 2024年第2期39卷 325-334页

作者：邓鸿飞杨自力罗毅南京中医药大学附属中西医结合医院江苏南京210000

目的利用网络药理学和分子对接的方法研究西黄丸治疗宫颈癌的分子机制。方法采用计算机检索TCMSP、BATMAN-TCM数据库,并筛选西黄丸的有效活性成分及作用靶点。检索OMIM、GeneCards数据库,获得宫颈癌的疾病靶点,合并去重后,与西黄丸获得... 详细信息

目的利用网络药理学和分子对接的方法研究西黄丸治疗宫颈癌的分子机制。方法采用计算机检索TCMSP、BATMAN-TCM数据库,并筛选西黄丸的有效活性成分及作用靶点。检索OMIM、GeneCards数据库,获得宫颈癌的疾病靶点,合并去重后,与西黄丸获得的有效成分靶点取交集。运用String数据库构建蛋白质相互作用(PPI)网络图。利用Cytoscape3.9.1软件进行可视化,并采用DAVID数据库对交集基因进行(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。最后运用AutoDock Vina、Pymol软件进行分子对接验证。结果筛选得到西黄丸70个主要活性成分,包括表雄酮、槲皮素、雄甾酮等。与宫颈癌相关的靶点有116个,核心靶点有肿瘤蛋白P53(TP53)、表皮生长因子受体(EGFR)、蛋白激酶B1(Akt1)、白细胞介素(IL)-6、原癌基因(MYC)、转录因子AP-1(JUN)、半胱氨酸蛋白酶3(CASP3)、IL-1B、肿瘤坏死因子(TNF)、雌激素受体1(ESR1)、B淋巴细胞2(Bcl-2)、低氧诱导因子-1A(HIF-1A)、基质金属蛋白酶9(MMP9)、V-Rel网状内皮增生病毒癌基因同源物A(RELA)等。GO和KEGG分析结果显示,西黄丸治疗宫颈癌的重要通路有IL-17、TNF、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/Akt、p53、HIF-1等信号通路。分子对接结果显示:西黄丸的主要成分与核心靶点有良好的对接效果。结论西黄丸主要通过调节IL-17、TNF、PI3K/Akt、p53,HIF-1等信号通路治疗宫颈癌。

关键词：西黄丸宫颈癌网络药理学分子对接表雄酮槲皮素雄甾酮肿瘤蛋白P53 白细胞介素-17

基于基准关联度与信息熵权法优选桂枝配方颗粒中挥发性成分的β-环糊精包合工艺

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南京中医药大学学报 2024年第6期40卷 582-588页

作者：陈雅茜李卓远陶琳陈娜娜柯益鑫沈雯谢薇张雯李俊松南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏省中药高效给药系统工程技术研究中心江苏南京210023

目的结合基准关联度与信息熵权法,采用正交试验对β-环糊精(β-Cyclodextrin,β-CD)与桂枝配方颗粒中挥发性成分的包合工艺进行优化。方法在单因素考察的基础上,选择β-CD与桂枝芳香水的投料比、包合温度、包合时间为主要影响因素,以包... 详细信息

目的结合基准关联度与信息熵权法,采用正交试验对β-环糊精(β-Cyclodextrin,β-CD)与桂枝配方颗粒中挥发性成分的包合工艺进行优化。方法在单因素考察的基础上,选择β-CD与桂枝芳香水的投料比、包合温度、包合时间为主要影响因素,以包合物中桂皮醛的包合率、载药量及基准关联度为评价指标,采用信息熵权法计算各评价指标的权重系数,进行综合评价和优化正交试验包合工艺。通过薄层色谱法、紫外可见吸收光谱、傅里叶红外光谱、X射线衍射等方法对包合物进行表征。结果优选的最佳包合工艺为β-CD与芳香水的投料比3∶100(g·mL^(-1)),包合温度50℃,包合时间1 h。经验证,桂皮醛包合率为80.48%,载药量为8.63%,基准关联度为0.91。薄层、紫外、红外等表征实验表明芳香水中挥发性成分成功进入β-CD空腔,包合物制备成功。结论优选的包合工艺稳定可行,可为桂枝配方颗粒的制剂工艺研究提供参考。

关键词：桂枝配方颗粒芳香水 β-环糊精信息熵权法基准关联度正交试验包合工艺

野黄芩素纳米晶体的制备及治疗慢性瘙痒模型药效评价

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中草药 2024年第9期55卷 2946-2954页

作者：刘新颖王富江葛海涛南京中医药大学江苏南京221002 江苏苏中药业研究院有限公司江苏南京210031

目的制备野黄芩素纳米晶体(scutellarein nanocrystals,Scu-NCs),进行药剂学性质研究,并考察其对小鼠皮肤干燥瘙痒模型的治疗效果。方法采用反溶剂沉淀技术制备Scu-NCs,并通过冷冻干燥技术将其固化成固体粉末;测定ScuNCs的平均粒径、分... 详细信息

目的制备野黄芩素纳米晶体(scutellarein nanocrystals,Scu-NCs),进行药剂学性质研究,并考察其对小鼠皮肤干燥瘙痒模型的治疗效果。方法采用反溶剂沉淀技术制备Scu-NCs,并通过冷冻干燥技术将其固化成固体粉末;测定ScuNCs的平均粒径、分散系数、ζ电位并观察其微观结构;差示扫描量热法(differential scanning calorimetry,DSC)及傅里叶变换红外光谱法(Fourier transform infrared spectroscopy,FTIR)分析其晶型及化学结构的变化;测试其体外药物溶出速率和其凝胶剂的体外释放度;评价野黄芩素及Scu-NCs凝胶剂经皮给药对丙酮/乙醚和水(acetone-ether-water,AEW)诱导的小鼠干皮瘙痒模型的止痒作用。结果制备得到的Scu-NCs平均粒径为(379.1±1.7)nm,多分散系数(polydispersity index,PDI)值为0.238±0.081,ζ电位为(25.50±0.25)mV;野黄芩素纳米化后野黄芩素的晶型和化学结构未发生明显变化;ScuNCs冷冻干燥后粒径无明显变化;野黄芩素纳米化后提高了药物2 h内的溶出速率、溶出度及Scu-NCs凝胶剂6 h内的体外释放度;与AEW模型组相比,野黄芩素、Scu-NCs凝胶剂给药组可明显降低小鼠1 h内抓挠次数,抑制颈背部表皮增厚及皮肤中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)的表达,且Scu-NCs对AEW模型抑制效果更明显。结论Scu-NCs粒径较小且均匀,其纳米化后晶型和化学结构没有发生明显改变;将野黄芩素制备成纳米晶体后,可明显改善药物的溶出度与体外释放度,对皮肤局部慢性瘙痒具有更好的治疗效果。

关键词：野黄芩素纳米晶体凝胶慢性瘙痒外用制剂反溶剂沉淀技术冷冻干燥技术白细胞介素肿瘤坏死因子-α

电针对心肌缺血再灌注损伤大鼠心室结构和功能的影响

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针刺研究 2024年第1期49卷 6-14页

作者：吴双姜文丁雅萍刘琼琼白桦徐森磊张宏如夏铭徽顾一煌南京中医药大学针灸推拿学院养生康复学院南京210023 南通大学附属医院针灸科江苏南通226001 南京中医药大学南通附属医院脑病科江苏南通226001 南京中医药大学中医学院·中西医结合学院南京210023

目的:观察电针对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠心室结构和功能的影响,探讨电针改善MIRI后心室重塑的潜在机制。方法:将40只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组、LCZ696(阳性药对照)组,每组10只。通过冠状动脉左前降支结扎法建... 详细信息

目的:观察电针对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠心室结构和功能的影响,探讨电针改善MIRI后心室重塑的潜在机制。方法:将40只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组、LCZ696(阳性药对照)组,每组10只。通过冠状动脉左前降支结扎法建立MIRI模型。电针组取双侧“内关”进行电针治疗,每次20 min,隔日1次;LCZ696组每日按60 mg·kg^(-1)·d^(-1)的剂量予LCZ696灌胃。以上干预连续21 d。采用超声心动图检测各组大鼠左心室射血分数(EF)和短轴缩短指数(FS);酶联免疫吸附法检测各组大鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、血管细胞黏附分子1(VCAM-1)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)含量;HE染色法观察大鼠心肌组织病理形态变化;Masson染色法观察大鼠心肌组织胶原沉积情况及心肌纤维化程度;荧光定量PCR法检测大鼠心肌组织中心肌纤维化标志物CollagenⅠ、CollagenⅢ、CTGF mRNA表达水平;Western blot法检测大鼠心肌组织炎性因子IL-1β、IL-18表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠左心室EF、FS降低(P<0.001);血清中TNF-α、VCAM-1、ICAM-1含量增加(P<0.001);心肌纤维排列紊乱,并伴有炎性细胞浸润,心肌组织胶原沉积增多,心肌胶原纤维面积占比升高(P<0.0001);心肌组织中CollagenⅠ、CollagenⅢ、CTGF mRNA表达水平均升高(P<0.05,P<0.01),IL-1β、IL-18表达水平升高(P<0.000 1)。与模型组比较,电针组和LCZ696组大鼠EF、FS升高(P<0.01);血清中TNF-α、VCAM-1、ICAM-1含量减少(P<0.001,P<0.01);部分心肌细胞排列紊乱,炎性细胞浸润程度明显减轻,心肌组织胶原沉积减少,心肌胶原纤维面积占比降低(P<0.01);心肌组织中CollagenⅠ、CollagenⅢ、CTGF mRNA表达水平均降低(P<0.05),IL-1β、IL-18表达水平降低(P<0.01,P<0.05)。结论:电针能够改善MIRI大鼠心室结构和功能,其机制可能与下调心肌炎性反应,抑制MIRI后心肌组织中CollagenⅠ、CollagenⅢ、CTGF mRNA的表达水平有关。

关键词：心肌缺血再灌注损伤电针心室重塑心肌纤维化炎性反应

藿香腺鳞挥发油积累规律及其生物合成的机制研究

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中国中药杂志 2024年第1期49卷 62-69页

作者：舒娟贾聪玲党静洁梁亚芳李秋娟吴啟南刘潺潺南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏省中药资源产业化过程协同创新中心江苏南京210023 中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏南京210023

挥发油作为藿香的药效成分,积累并储藏在腺鳞中。以胡薄荷酮型藿香的叶片为材料,对藿香不同生长时期的叶片进行形态学观察,并通过GC-MS检测分析腺鳞中的挥发油成分。同时采用qRT-PCR技术测定挥发油中单萜生物合成途径中关键酶基因的相... 详细信息

挥发油作为藿香的药效成分,积累并储藏在腺鳞中。以胡薄荷酮型藿香的叶片为材料,对藿香不同生长时期的叶片进行形态学观察,并通过GC-MS检测分析腺鳞中的挥发油成分。同时采用qRT-PCR技术测定挥发油中单萜生物合成途径中关键酶基因的相对表达量。结果表明,藿香腺鳞的密度呈现先下降后趋于平稳的趋势。随着藿香叶片的不断生长,腺鳞中胡薄荷酮的相对含量由79.26%降至3.94%(89.97%~41.44%),而异薄荷酮的相对含量则由2.43%上升至77.87%(0.74%~51.01%),其他成分的变化相对不明显。单萜类成分相对含量与其关键酶基因相对表达量的相关性分析表明,薄荷酮、异薄荷酮的相对含量与胡薄荷酮还原酶(PR)的相对表达量存在显著的相关性(r>0.6,P科学依据和数据支撑,并初步揭示藿香中以胡薄荷酮和异薄荷酮为主的单萜类成分的生物合成机制,为后续研究藿香中单萜类成分合成积累的分子机制的深入研究奠定基础。

关键词：藿香腺鳞挥发油生物合成

小鼠初级体感皮层后肢区神经元对“足三里”不同温度热刺激的响应规律

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针刺研究 2024年第4期49卷 341-348,375页

作者：朱海滨金传阳周航孙征许骞陆成轩周子秋熊嘉玮张建斌南京中医药大学第二附属医院/江苏省第二中医院南京210017 北京大学分子医学南京转化研究院南京211800

目的:研究不同温度热刺激“足三里”的中枢响应规律,分析中枢响应的温度差异性。方法:健康成年C57BL/6j小鼠6只,采用动物脑立体定位仪定位小鼠大脑左侧初级体感皮层后肢区(S1HL),注射0.3μL腺相关病毒,通过双光子显微镜观察其神经元钙... 详细信息

目的:研究不同温度热刺激“足三里”的中枢响应规律,分析中枢响应的温度差异性。方法:健康成年C57BL/6j小鼠6只,采用动物脑立体定位仪定位小鼠大脑左侧初级体感皮层后肢区(S1HL),注射0.3μL腺相关病毒,通过双光子显微镜观察其神经元钙活动荧光成像,以荧光强度显示神经元中的钙离子浓度。分别以43、45、47℃热刺激小鼠右侧“足三里”,使用双光子显微镜直接记录小鼠大脑左侧S1HL神经元活动,观察并比较S1HL神经元对3种温度热刺激“足三里”的响应差异性,包括热刺激后2 s内的即时最大钙尖峰值和即时钙尖峰频率,3.5 min内的短时最大钙尖峰值、短时钙尖峰频率和钙尖峰持续时间,以及3 min内的分时段最大钙尖峰值和分时段钙尖峰频率。结果:与常温比较,43、45、47℃热刺激“足三里”均可使小鼠左侧S1HL神经元的即时最大钙尖峰值、即时钙尖峰频率、短时最大钙尖峰值、短时钙尖峰频率和钙尖峰持续时间升高(P<0.001,P<0.01)。不同温度热刺激比较,从即时最大钙尖峰值来看,小鼠S1HL神经元对47℃热刺激响应程度最高(P<0.001);从即时钙尖峰频率来看,其对45℃热刺激响应最频繁(P<0.001)。从短时最大钙尖峰值来看,不同温度热刺激对其影响差异无统计学意义;从短时最大钙尖峰频率来看,小鼠S1HL神经元对45℃热刺激响应最频繁(P<0.001)。从钙尖峰持续时间来看,小鼠S1HL神经元对45℃热刺激响应更为明显(P<0.01)。从神经元响应分时段分析来看,在3 min内,43、45、47℃热刺激下,小鼠S1HL神经元最大钙尖峰值都在第2分钟达到最高(P<0.001);钙尖峰频率与热刺激时段无显著联系。结论:S1HL神经元对43、45、47℃热刺激“足三里”均有响应,且响应存在特定温度差异性,小鼠S1HL神经元对45℃热刺激“足三里”响应较为活跃。

关键词：初级体感皮层热刺激足三里神经元响应双光子技术