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三维球体间充质干细胞移植对大鼠缺血再灌注损伤脑组织TNF-α及凋亡相关蛋白表达的影响

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第二军医大学学报 2015年第8期36卷 845-850页

作者：付清松夏玉军张明刘明单守勤青岛大学医学院人体解剖学教研室青岛266071 济南军区青岛第一疗养院青岛266071

目的观察三维(3-D)球体间充质干细胞(MSCs)移植对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)及凋亡相关蛋白表达的影响,探讨3-D球体MSCs的神经保护作用及可能机制。方法实验大鼠随机分为假手术组、溶剂对照组、3-D球体MSCs治疗... 详细信息

目的观察三维(3-D)球体间充质干细胞(MSCs)移植对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)及凋亡相关蛋白表达的影响,探讨3-D球体MSCs的神经保护作用及可能机制。方法实验大鼠随机分为假手术组、溶剂对照组、3-D球体MSCs治疗组(n=36),假手术组常规分离大脑中动脉(MCA)但不结扎,MSCs治疗组采用线栓法建立大脑中动脉缺血(MCAO)模型后给予MSCs移植,溶剂对照组模型建立成功后给予等体积溶剂对照。各组大鼠分别于移植治疗后1、3、7d进行神经功能评分;采用ELISA和RT-PCR方法检测大鼠脑组织中的TNF-α表达;采用免疫组化SABC法染色,观察损伤侧大鼠脑组织Caspase-3和Caspase-8蛋白的表达。结果与假手术组、溶剂对照组相比,MSCs治疗组大鼠神经运动功能评分降低(P<0.05);与假手术组相比,溶剂对照组大鼠脑组织TNF-α、Caspase-3和Caspase-8表达增加(P<0.01);与溶剂对照组相比,MSCs治疗组脑组织TNF-α、Caspase-3、Caspase-8表达下降(P<0.05,P<0.01)。结论 3-D球体MSCs移植可能通过下调脑组织中炎性因子TNF-α含量及减少凋亡相关蛋白的表达,改善大鼠脑缺血再灌注损伤后神经运动功能。

关键词：间质干细胞移植脑缺血再灌注损伤肿瘤坏死因子α Caspase-3 Caspase-8

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长航舰员心理健康状况及影响因素分析

第二军医大学学报 2017年第4期38卷 506-510页

作者：余鸿璋于海波王云霞第二军医大学心理与精神卫生学系上海200433

目的研究长航条件下舰员的心理健康状况及其影响因素。方法采用随机抽样法调查长航官兵172名。在长航前1周用艾森克人格量表(EPQ)、症状自评量表(SCL-90)对舰员进行心理健康状况评估;在长航4个月后,使用SCL-90、疲劳量表-14(FS-14)、阿... 详细信息

目的研究长航条件下舰员的心理健康状况及其影响因素。方法采用随机抽样法调查长航官兵172名。在长航前1周用艾森克人格量表(EPQ)、症状自评量表(SCL-90)对舰员进行心理健康状况评估;在长航4个月后,使用SCL-90、疲劳量表-14(FS-14)、阿森斯失眠量表(AIS)等对舰员进行心理测量与调查。通过前后两次SCL-90量表的总分及各因子得分间的差异检验,并将两次测量结果与军人常模比较,确定长航对舰员心理健康是否有影响。通过SCL-90总分及各因子(第2次测量)与AIS、FS-14、EPQ的相关关系研究舰员心理健康与睡眠、疲劳、人格特质的关系。以SCL-90为因变量,通过多元线性回归分析探究在长航条件下影响舰员心理健康的主要因素。结果长航4个月后,舰员心理健康水平远低于航行前,两次SCL-90测量间的得分差异具有统计学意义(P0.4,P<0.01)。多元线性回归分析显示神经质、晕船程度、睡眠总分、疲劳总分、工作压力、精神质、舰艇适应性是SCL-90总分的影响因素。结论海上长时间航行对舰员心理健康有不良影响,晕船程度、人格特质、工作压力、睡眠、疲劳、舰艇适应性等是影响舰员心理健康的主要因素。

关键词：心理健康舰员长航海军医学

星点设计-效应面法优化O-羧甲基壳聚糖复凝海绵对凝血酶的固定化作用

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中国药学杂志 2014年第2期49卷 138-142页

作者：吴迪齐同珍刘辉浦金辉张婧邹萍广州军区武汉总医院药剂科武汉430070 湖北中医药大学药学院武汉430065 荆州市第三人民医院药剂科湖北荆州434001

目的考察O-羧甲基壳聚糖复凝海绵对凝血酶的固定化作用。方法以水溶性O-羧甲基壳聚糖为载体、戊二醛为交联剂,加入凝血酶作为复凝血剂,采用星点设计-效应面法优化O-羧甲基壳聚糖复凝海绵处方,通过测定固定化凝血酶的活性回收率,考察凝... 详细信息

目的考察O-羧甲基壳聚糖复凝海绵对凝血酶的固定化作用。方法以水溶性O-羧甲基壳聚糖为载体、戊二醛为交联剂,加入凝血酶作为复凝血剂,采用星点设计-效应面法优化O-羧甲基壳聚糖复凝海绵处方,通过测定固定化凝血酶的活性回收率,考察凝血酶的固定化条件。结果 O-羧甲基壳聚糖复凝海绵固定凝血酶的最优处方为:O-CMC 2.49%;凝血酶49.87 U·mL-1;戊二醛0.49%。结论 O-羧甲基壳聚糖复凝海绵对凝血酶有良好的固定化作用。

关键词： O-羧甲基壳聚糖凝血酶固定化活性回收率星点设计-效应面法

三维球体间充质干细胞移植对大鼠缺血再灌注损伤脑组织Nogo-A及NgR表达的影响

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第二军医大学学报 2015年第10期36卷 1087-1091页

作者：刘明夏玉军张明付清松单守勤王洪霞青岛大学医学院人体解剖学教研室青岛266071 济南军区青岛第一疗养院青岛266071 青岛大学附属医院急诊神经内科青岛266071

目的探讨三维球体胎盘来源间充质干细胞(MSCs)移植对大鼠缺血再灌注损伤脑组织Nogo-A及其受体NgR表达的影响。方法大鼠随机分为假手术组(Sham组)、溶剂对照组(Vehicle组)及治疗组(MSCs组),后两组应用线栓法制备大脑中动脉缺血模型,缺血2... 详细信息

目的探讨三维球体胎盘来源间充质干细胞(MSCs)移植对大鼠缺血再灌注损伤脑组织Nogo-A及其受体NgR表达的影响。方法大鼠随机分为假手术组(Sham组)、溶剂对照组(Vehicle组)及治疗组(MSCs组),后两组应用线栓法制备大脑中动脉缺血模型,缺血2h后拔除鱼线再灌注,1d后MSCs组注射三维球体MSCs,Vehicle组注射等量培养液;移植后1、3、7d测定大鼠神经运动功能,取脑组织,应用RT-PCR法、蛋白质印迹法检测Nogo-A、NgR mRNA及蛋白表达。结果与Vehicle组相比,MSCs组大鼠7d神经运动功能有明显改善(P<0.05);移植后1、3、7d MSCs组Nogo-A、NgR mRNA及蛋白水平均较Vehicle组降低(P<0.05)。结论三维球体MSCs移植可改善脑缺血再灌注后神经运动功能,其机制可能与下调脑组织Nogo-A及其受体NgR水平有关。

关键词：脑缺血再灌注损伤间质干细胞移植 Nogo-A NgR

CCR7基因修饰未成熟树突状细胞诱导大鼠高危角膜移植免疫耐受

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中华实验眼科杂志 2015年第10期33卷 902-908页

作者：周琨高晓唯蔡岩李文静胡裕坤田丽丽付燕郑州市第二人民医院眼科解放军第四七四医院全军眼科中心乌鲁木齐830013 保定市第一中心医院东院眼科 071000

背景角膜移植术后免疫排斥反应是手术失败的主要原因,尤其是高危角膜移植.延长高危角膜移植术植片的存活时间是目前亟待解决的问题.目的研究趋化因子受体7 （CCR7）基因重组腺病毒（Ad）体外转染供体骨髓来源的未成熟树突状细胞（imDC... 详细信息

背景角膜移植术后免疫排斥反应是手术失败的主要原因,尤其是高危角膜移植.延长高危角膜移植术植片的存活时间是目前亟待解决的问题.目的研究趋化因子受体7 （CCR7）基因重组腺病毒（Ad）体外转染供体骨髓来源的未成熟树突状细胞（imDCs）对大鼠高危角膜移植免疫排斥反应的影响,并探讨其可能的机制.方法取1只雄性Wistar供体大鼠股骨骨髓分离和培养骨髓源imDCs,用携带大鼠CCR7基因的重组Ad转染imDCs,收集1＆#215;107个imDCs重悬于500μl含体积分数1％胎牛血清的PBS中.将60只受体SD大鼠以角膜碱烧伤法建立高危角膜移植模型,并用30只Wistar大鼠角膜作为供体进行同种异体角膜移植.采用随机数字表法将SD大鼠分为PBS组、未修饰imDCs组、imDCs＋ Ad空载体组和imDCs＋ Ad-CCR7组,每组15只,按照分组不同分别于术前7d和术后3d经尾静脉注射相应溶液.术后每日裂隙灯显微镜下观察角膜植片存活情况,术后14d每组任意处死6只大鼠,取角膜植片行常规组织病理学检查,采用逆转录PCR（RT-PCR）法检测辅助性T细胞1（Th1）型细胞因子白细胞介素-2（IL-2）、γ干扰素（IFN-γ）和Th2型细胞因子IL-4、IL-10的mRNA表达水平.结果 PBS组、未修饰imDCs组、imDCs＋Ad空载体组和imDCs＋Ad-CCR7组角膜植片的平均存活时间分别为（10.44±1.88）、（16.00±2.18）、（15.11±2.03）和（23.67±2.83）d,4个组间总体比较差异有统计学意义（F=53.005,P=0.000）;与PBS组比较,未修饰imDCs组、imDCs＋ Ad空载体组和imDCs＋ Ad-CCR7组角膜植片的平均存活时间均明显延长,差异均有统计学意义（t=5.220、4.385、12.423,均P=0.000）;imDCs＋Ad-CCR7组植片的平均存活时间较未修饰imDCs组和imDCs＋Ad空载体组均明显延长,差异均有统计学意义（t=7.204、8.039,均P=0.000）.RT-PCR结果显示,与PBS组相比,未修饰imDCs组、imDCs＋Ad空载体组、imDCs＋Ad-CCR7组大鼠IFN-γ mRNA和IL-2 mRNA相对表达量均明显降低,而IL-4 mRNA和IL-10 mRNA相对表达量均明显升高,差异均有统计学意义（均P＜0.05）;与未修饰imDCs组和imDCs＋Ad空载体组比较,imDCs＋Ad-CCR7组IFN-γ mRNA和IL-2 mRNA相对表达量明显降低,而IL-4 mRNA和IL-10 mRNA相对表达量明显升高,差异均有统计学意义（均P=0.000）.结论尾静脉注射CCR7基因修饰的imDCs可以明显延长大鼠高危角膜移植术后角膜植片的存活时间,抑制角膜移植免疫排斥反应,可能与CCR7基因修饰的imDCs诱导的Th1/Th2功能偏移有关.

关键词：角膜移植植片存活/免疫免疫耐受辅助T淋巴细胞/免疫树突状细胞/免疫受体,趋化因子受体7/代谢

领悟社会支持和海军官兵急性应激反应的关系:心理弹性的中介效应

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第二军医大学学报 2017年第2期38卷 234-238页

作者：张水淼李新利崔轶蔡文鹏邓光辉第二军医大学心理与精神卫生学系军事心理学教研室海军92330部队医院

目的探讨心理弹性、领悟社会支持和海军官兵急性应激反应之间的关系。方法采用心理弹性量表(CD-RISC)、领悟社会支持量表(PSSS)和军人急性应激反应量表(MASS)对1 457名海军官兵进行问卷调查,获得有效问卷1 348份。运用结构方程模型分析... 详细信息

目的探讨心理弹性、领悟社会支持和海军官兵急性应激反应之间的关系。方法采用心理弹性量表(CD-RISC)、领悟社会支持量表(PSSS)和军人急性应激反应量表(MASS)对1 457名海军官兵进行问卷调查,获得有效问卷1 348份。运用结构方程模型分析变量之间的关系。结果领悟社会支持和心理弹性呈正相关(P<0.01),两者分别与军人急性应激反应呈负相关(P<0.01);心理弹性和领悟社会支持均可独立解释海军官兵急性应激反应方差变异,其中坚韧(β=-0.136,P<0.01)和家庭外支持(β=-0.229,P<0.01)对军人急性应激反应具有负向预测作用;心理弹性在领悟社会支持和军人急性应激反应之间部分中介效应显著,中介效应占总效应的比例为16.22%。结构方程模型拟合良好:χ~2/df=27.91/11=2.537,P=0.003;渐进残差均方和平方根(RMSEA)=0.032,比较适配指数(CFI)=0.997,适配度指数(GFI)=0.994,调整后适配度指数(AGFI)=0.986,规准适配指数(NFI)=0.995,相对适配指数(RFI)=0.986,增值适配指数(IFI)=0.997,非规准适配指数(TLI)=0.992。结论领悟社会支持对海军官兵急性应激反应既存在直接影响,也通过心理弹性的中介效应发挥间接影响作用。

关键词：心理弹性领悟社会支持军人急性应激反应调节效应中介效应

正加速度暴露对冠状动脉狭窄小型猪模型TNF-α和ICAM-1表达的影响

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解放军医学杂志 2014年第6期39卷 498-502页

作者：张泠罗惠兰刘兴德空军总医院干部病房心血管内科北京100142 贵阳医学院附属医院心内科贵阳550004

目的研究正加速度（＋Gz）暴露对冠状动脉不同程度狭窄小型猪血浆及心肌组织肿瘤坏死因子α（TNF-α）和细胞间黏附分子1（ICAM-1）表达的影响。方法健康成年雄性巴马小型猪25头，在胸腔镜直视下手术丝线永久性结扎左前降支近端建立冠... 详细信息

目的研究正加速度（＋Gz）暴露对冠状动脉不同程度狭窄小型猪血浆及心肌组织肿瘤坏死因子α（TNF-α）和细胞间黏附分子1（ICAM-1）表达的影响。方法健康成年雄性巴马小型猪25头，在胸腔镜直视下手术丝线永久性结扎左前降支近端建立冠状动脉狭窄模型。动物随机分为假手术组（n=5，冠脉血管未结扎）、轻度狭窄组（n=7，狭窄程度20％～49％）、中度狭窄组（n=6，狭窄程度50％～69％）和重度狭窄组（n=7，狭窄程度70％～90％）。各组小型猪进行＋Gz暴露，初始＋3Gz／60s暴露，G值增长率1G／s，每次旋转时间间隔10min，＋Gz强度最高不超过＋9Gz，分别观察各组最大＋Gz耐受值，并在其最大＋Gz暴露处理后10min留取静脉血分离血浆，双抗体夹心ABC-ELISA法测定TNF-α及ICAM-1含量。采用RT-PCR检测＋Gz暴露后各组小型猪左前壁心肌组织TNF-α和ICAM-1 mRNA的表达水平。结果与假手术组比较，轻度狭窄组最大可耐受＋Gz值变化不明显（P〉0．05），而中度狭窄组及重度狭窄组最大可耐受＋Gz值均明显下降（P〈0．05）。＋Gz暴露后，中、重度狭窄组模型猪血浆TNF-α和ICAM-1浓度及心肌组织TNF-α和ICAM-1 mRNA表达均较假手术组明显升高（P〈0．05），而轻度狭窄组与假手术组比较无明显差异（P〉0．05）。在最大加速度耐受条件下，随狭窄程度加重，中、重度狭窄组模型猪的血浆TNF-α和ICAM-1浓度及心肌组织TNF-α和ICAM-1 mRNA表达均有增加趋势。结论＋Gz暴露对冠脉不同程度血浆及心肌组织TNF-α和ICAM-1表达的影响不同，狭窄程度越重，影响越大。

关键词：正加速度冠状动脉狭窄肿瘤坏死因子α 胞间黏附分子1

模拟失重大鼠胃窦肌层Cox-2表达和血清SS及VIP水平的变化

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解放军医学杂志 2014年第5期39卷 383-387页

作者：李正鹏郭彪李晓鸥段育忠王平张宏文周金莲崔彦杨鹤鸣解放军306医院普通外科北京100101 解放军306医院病理科北京100101

目的研究尾悬吊模拟失重对大鼠胃窦肌层诱生型环氧化酶2（Cox-2）表达和血清生长抑素（SS）、血管活性肠肽（VIP）水平的影响。方法健康雄性Wistar大鼠64只，随机分为8组，按模拟失重时相分为0h（对照组）和6h、12h、1d、2d、3d、5d... 详细信息

目的研究尾悬吊模拟失重对大鼠胃窦肌层诱生型环氧化酶2（Cox-2）表达和血清生长抑素（SS）、血管活性肠肽（VIP）水平的影响。方法健康雄性Wistar大鼠64只，随机分为8组，按模拟失重时相分为0h（对照组）和6h、12h、1d、2d、3d、5d、7d组（n=8）。采用尾悬吊法建立模拟失重动物模型。应用RT-PCR、Western blotting和免疫组化技术检测各组大鼠胃窦肌层组织中Cox-2 mRNA和蛋白表达情况，应用放免法测定血清SS、VIP浓度。结果免疫组化结果显示，Cox-2蛋白阳性表达为棕褐色，悬吊6h、12h、1d大鼠胃窦平滑肌细胞胞质染色变深并出现部分核染色阳性，2d开始逐渐恢复，但胞质着色仍较对照组深。RT-PCR结果显示，Cox-2 mRNA表达水平在尾悬吊6h即出现显著增高，12h、1d时仍呈高水平表达（P＜0.05），2d后表达水平逐渐回落（P＞0.05）。Western blotting结果显示，悬吊6h大鼠胃窦肌层Cox-2蛋白表达水平显著升高，12h、1d持续高表达，与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05），2d后逐渐恢复正常水平（P＞0.05）。血清SS浓度在尾悬吊模拟失重2-3d达峰值，与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05），其他各时相浓度值波动明显。血清VIP浓度同样在模拟失重早期即显著升高（P＜0.05），峰值出现在6-12h，其后经过2-3d的回落后复又升高。结论胃窦肌层Cox-2表达异常和血清SS及VIP水平变化在胃窦失重应激性动力障碍及恢复过程中可能发挥重要作用。

关键词：失重模拟环氧化酶2 生长抑素血管活性肠肽

失重对大鼠肾上腺髓质激素分泌及miRNA-375表达的影响

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解放军医学杂志 2015年第4期40卷 322-326页

作者：温丽君吴继华宋淑军王艳茹刘俊丽司少艳崔彦张建中周金莲安徽医科大学解放军306医院临床学院北京100101 解放军306医院病理科解放军306医院特种医学实验研究中心解放军306医院普通外科

目的研究模拟失重环境对大鼠肾上腺髓质激素分泌及miRNA-375表达的影响。方法健康成年雄性Wistar大鼠56只,随机分为0h（正常对照）、6h、12h、1d、3d、5d、7d共7个组（n=8）。采用Morey-Holton尾悬吊法建立模拟失重动物模型。各组大鼠... 详细信息

目的研究模拟失重环境对大鼠肾上腺髓质激素分泌及miRNA-375表达的影响。方法健康成年雄性Wistar大鼠56只,随机分为0h（正常对照）、6h、12h、1d、3d、5d、7d共7个组（n=8）。采用Morey-Holton尾悬吊法建立模拟失重动物模型。各组大鼠实验结束后眼球取血,取双侧肾上腺。采用放射免疫分析法检测血浆肾上腺髓质激素[多巴胺（DA）、去甲肾上腺素（NE）、肾上腺素（E）]水平,RT-PCR法检测肾上腺组织酪氨酸羟化酶（TH）mRNA和miRNA-375的表达,Western blotting和免疫组化技术检测肾上腺髓质TH蛋白表达。结果尾悬吊模拟失重条件下大鼠血浆肾上腺髓质激素波动明显,6~12h出现一过性下降,随后急剧升高,3d时形成峰值。RT-PCR结果显示,各组大鼠肾上腺组织TH mRNA表达波动明显,6h时呈现一过性下降,随即上升,1d时达峰值,之后呈下降趋势,5d时形成谷值。大鼠肾上腺髓质TH蛋白表达以尾悬吊3d时染色最强。肾上腺髓质中miRNA-375表达表现为尾悬吊早期（6h）呈一过性显著升高,随后快速下降,12h、1d和3d时表达受到明显抑制,表达量显著下降,5d时表达量增加,7d时显著升高（P〈0.05）。结论失重环境可影响大鼠肾上腺髓质激素分泌,其机制可能与miRNA-375通过复杂的信号通道调控TH表达有关。

关键词：失重模拟儿茶酚胺类酪氨酸羟化酶微RNAs