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茅苍术转录因子AlWRKY65的克隆与功能初探

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药学学报 2024年第5期59卷 1494-1502页

作者：管凤雅刘巍玮迟凯文曾凯玲谢晋查良平安徽中医药大学药学院安徽合肥230012 安徽医科大学药学院安徽合肥230032

WRKY转录因子是植物特有的一类转录因子,在植物多种生理过程中发挥重要的作用。本研究以茅苍术转录组数据为依据,对茅苍术AlWRKY基因与AlTPS基因的FPKM值进行相关性分析,结合分析结果筛选出与AlTPS1、AlTPS6基因表达量具有显著正相关性... 详细信息

WRKY转录因子是植物特有的一类转录因子,在植物多种生理过程中发挥重要的作用。本研究以茅苍术转录组数据为依据,对茅苍术AlWRKY基因与AlTPS基因的FPKM值进行相关性分析,结合分析结果筛选出与AlTPS1、AlTPS6基因表达量具有显著正相关性且FPKM值相对较高的候选基因AlWRKY65,对该候选基因进行克隆,获得AlWRKY65基因的开放阅读框(ORF),分析其编码蛋白的相关信息并进行基因表达研究。研究结果表明,AlWRKY65包含一个681bp的开放阅读框,编码226个氨基酸。AlWRKY65基因编码的氨基酸序列与向日葵HaWRKY65、莴苣LsWRKY65等植物基因编码的氨基酸序列具有较高同源性;该蛋白具有1个WRKYGQK保守结构域,属于WRKY基因家族的第IIe组;系统进化树分析显示,茅苍术AlWRKY65与洋蓟CcWRKY65蛋白亲缘关系较近;运用实时荧光定量PCR检测AlWRKY65基因在2个产地不同组织中的表达水平,结果表明,不同产地的茅苍术AlWRKY65基因具有组织表达差异性,均在叶片中表达量较高;在茉莉酸甲酯(MeJA)诱导处理48 h内,AlWRKY65基因的表达量下调;亚细胞定位和转录自激活活性分析显示,AlWRKY65定位于细胞核,不具有自激活活性。这些结果为进一步研究AlWRKY65在茅苍术中的生物学功能提供参考。

关键词：茅苍术 WRKY转录因子基因克隆表达分析亚细胞定位

从“骨健康计划”视角观照中医药防治骨质疏松症的时代价值与新思路

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中国中药杂志 2024年

作者：章轶立孙传睿孙凯许爱丽申浩银河李玲慧朱立国魏戌南京中医药大学中西医结合学院中国中医科学院望京医院首都医科大学附属北京天坛医院

面向推进健康中国建设，提高人民健康水平的总体要求，2024年“骨健康计划”应运而生。其中，深入开展中医药防控体系建设对实施“骨健康计划”具有重要战略意义。该文聚焦影响人民群众“骨健康”的代表性病种骨质疏松症（osteoporosis... 详细信息

面向推进健康中国建设，提高人民健康水平的总体要求，2024年“骨健康计划”应运而生。其中，深入开展中医药防控体系建设对实施“骨健康计划”具有重要战略意义。该文聚焦影响人民群众“骨健康”的代表性病种骨质疏松症（osteoporosis，OP），认为加速推进中医药防治OP研究有利于提升居民对于OP的知晓率和认识水平，也有益于着眼OP演变规律并提升疾病认识与全程管理水平；其次，有益于给未来中医药防治OP提供整体研究框架，加强中医药防治OP研究的系统性与完整性；同时，有助于探索新的研究范式以及优化现有研究模式，推动中医药防治骨健康相关疾病领域实现创新性突破。在“骨健康计划”整体布局下，未来一段时间内可重点关注OP早期预防，创新OP极早期诊断干预方式；关注疾病及作用机制的靶标网络发现，深刻阐明OP核心发病机制与中医药疗效机制；此外不仅要关注骨骼本身局部病变及临床转归，更要高度重视其伴随的多种代谢疾病发生发展的情况；进一步着眼OP及其并发症领域促进先进交叉学科技术不断融合，建立基于临床应用场景、大数据驱动的研发体系。最终带动中医药在防治OP等骨病领域取得更大进展，不断为丰富深化“骨健康计划”研究内涵注入新动能。

关键词：骨健康计划骨质疏松症中医药研究思路

基于UPLC-Orbitrap-MS/MS技术的通络益晴方化学成分分析

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安徽中医药大学学报 2024年第4期43卷 100-107页

作者：李若晴刘嘉慧陈昶张盛陈云娜陈卫东王雷吴培云安徽中医药大学药学院安徽合肥230012 安徽中医药大学分子生物学(脑病)实验室安徽合肥230012 省部共建安徽道地中药材品质提升协同创新中心安徽合肥230012 中药复方安徽省重点实验室安徽合肥230012

目的通过超高效液相色谱—质谱联用(ultra-performance liquid chromatography-orbitrap-mass spectrometry/mass spectrometry,UPLC-Orbitrap-MS/MS)对通络益晴方的化学成分进行快速分析及初步鉴定。方法使用ZORBAX Eclipse Plus C 18色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸水梯度洗脱,流速0.4 mL/min,柱温35℃;采用电喷雾离子源,正、负离子模式扫描,通过保留时间、精确相对分子质量和二级质谱裂解碎片,结合参考文献,对所得成分进行分析与初步鉴定。结果根据建立的色谱条件,从通络益晴方中初步鉴定出94个化学成分,其中有黄酮类化合物31个、酚酸类化合物14个、脂肪酸类化合物9个、皂苷类化合物6个、异黄酮类化合物5个、氨基酸类化合物4个、三萜类化合物4个、醛类化合物4个、多肽类化合物3个、苯丙素类化合物3个、醇类化合物3个,以及其他类化合物8个;正、负离子扫描模式下得到8个重复的成分。结论UPLC-Orbitrap-MS/MS技术能快速、初步鉴定出通络益晴方中化学成分,可为通络益晴方物质基础研究和新药研发提供依据。

关键词：通络益晴方超高效液相色谱—质谱联用化学成分药效物质

基于脑—肠轴理论从肝论治消化性溃疡的中医治要探析

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环球中医药 2024年

作者：王伟明柳昕坤施嘉祥郑娅晴柳红良中国中医科学院广安门医院

肝胃不和证是消化性溃疡发生的主要证型之一，“情志不遂—肝失疏泄—胃失和降—化热致疡”是消化性溃疡肝胃不和证的核心病机，中医以疏肝和胃、清热止痛为治疗原则。当机体受精神、心理因素影响时，脑肠互动异常，交感神经兴奋，抑制... 详细信息

肝胃不和证是消化性溃疡发生的主要证型之一，“情志不遂—肝失疏泄—胃失和降—化热致疡”是消化性溃疡肝胃不和证的核心病机，中医以疏肝和胃、清热止痛为治疗原则。当机体受精神、心理因素影响时，脑肠互动异常，交感神经兴奋，抑制肠胃消化腺的分泌活动，从而出现腹胀厌食的症状，这个过程类似于中医学的肝胃不和证；结合胃溃疡的发生机理，肝胃不和证导致“胃疡”的病机与消化性溃疡应激状态脑—肠轴失调发病机制一致，在长期应激心理状态下，机体脑—肠轴调控机制失调，导致中枢神经与胃肠道之间的神经内分泌生物学机制紊乱，双向信号调节失衡，进而导致胃酸分泌亢进，突破胃黏膜的保护机制，最终诱发消化性溃疡。同时，中医通过疏肝和胃的原则治疗消化性溃疡起效的作用机制，通过对脑—肠轴调控机制中的不同环节进行探讨，可以得到一些相关的验证。

关键词：消化性溃疡肝胃不和证病机从肝论治脑—肠轴调控机制神经内分泌生物学机制下丘脑—垂体—肾上腺轴脑—肠肽含量水平

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从三焦论治幽门螺杆菌感染的六维辨证观

环球中医药 2024年第7期17卷 1249-1255页

作者：柳红良董斐谷晓红中国中医科学院广安门医院脾胃病科北京100053 北京中医药大学中医疫病研究院

六维辨证观强调从病因、病位、病期、病势、病理、病性六个不同维度对病证进行辨析,有利于中医临床思维的锻炼和形成。基于六维辨证观,可以更全面地认知从三焦论治幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,***)感染。辨病因,应综合考虑***致病... 详细信息

六维辨证观强调从病因、病位、病期、病势、病理、病性六个不同维度对病证进行辨析,有利于中医临床思维的锻炼和形成。基于六维辨证观,可以更全面地认知从三焦论治幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,***)感染。辨病因,应综合考虑***致病因素的外感兼内伤属性,要注重三焦疾病“总在一经不移为辨”的病理特点;辨病性,应关注***作为病原微生物的致病规律,不能简单归结为湿热致病,其“粘附致炎”的病理属性需结合三焦气化的“通透性网状效应”从而表现出不同的证型;辨病位,***留滞部位在中焦胃腑膜层,胃黏膜分布规则的集合小静脉是反映中焦气化“通透性网状效应”的重要标志;辨病理,***粘附致炎的病理产物以气滞、湿、热、虚、瘀多见,影响三焦气化功能而呈现气机阻滞、湿热中阻、虚瘀共存等不同的病理状态;辨病期,***感染造成三焦“通透性网状效应”变差,日久生变,毒瘀虚互结,从而衍变经典的Correa模式。临床应注重***的根治治疗与胃黏膜癌前状态和癌前病变的共同处理策略;辨病势,根据***感染的不同阶段,注重对比正邪态势、病理因素态势的不同,叶天士针对“邪留三焦”提出的“分消上下之势”是很重要的治疗原则。

关键词：三焦理论 “通透性网状效应” 幽门螺杆菌感染六维辨证观抗生素替代疗法分消上下法方证规律

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寒温统一视角下新冠感染邪伏膜原理论探析

江西中医药大学学报 2024年第5期36卷 14-17页

作者：姜彧华雨欣鲁佳敏孙磊涛张恺阮善明沈敏鹤浙江中医药大学第一临床医学院杭州310053 浙江中医药大学附属第一医院/浙江省中医院杭州310006

新型冠状病毒感染(COVID-19,简称新冠感染)是以发热、咳嗽、咽痛为主要症状的传染性急性呼吸道感染。吴又可提出邪伏膜原理成为中医认识新冠感染病机的重要来源。新冠感染过程符合温病三焦传变规律,有明显的气机郁闭证候,在康复过程中... 详细信息

新型冠状病毒感染(COVID-19,简称新冠感染)是以发热、咳嗽、咽痛为主要症状的传染性急性呼吸道感染。吴又可提出邪伏膜原理成为中医认识新冠感染病机的重要来源。新冠感染过程符合温病三焦传变规律,有明显的气机郁闭证候,在康复过程中易出现余邪未尽的后遗症状,这与疫毒伏于焦膜留恋不去的病机相关。焦膜系统的生理功能在疫病感染过程中起到枢机作用,是疫邪入侵的隐伏之所,愈后余邪稽留、疫病症状反复的关键所在。基于本次新冠感染发生特点,提出寒温融合、三焦分治、邪透膜原的经验借鉴,以期为新冠感染治疗提供新的临床思路。

关键词：新型冠状病毒感染焦膜理论疫病中医理论

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从中医理论探析肠癌肺转移

浙江中医杂志 2024年第4期59卷 317-318页

作者：严亦慈朱颖余洁茹孙磊涛浙江中医药大学第一临床医学院浙江杭州310053 浙江中医药大学浙江杭州310053 浙江中医药大学附属第一医院浙江杭州310006

肠癌是常见的消化道恶性肿瘤之一,而转移是肠癌患者死亡的主要原因。基于中医对肠癌肺转移的认识,从“肺与大肠相表里”“肺朝百脉”“肺为娇脏”等中医理论出发,分别阐述“肺与大肠相表里”为肠癌肺转移的生理基础,“肺朝百脉”的生理... 详细信息

肠癌是常见的消化道恶性肿瘤之一,而转移是肠癌患者死亡的主要原因。基于中医对肠癌肺转移的认识,从“肺与大肠相表里”“肺朝百脉”“肺为娇脏”等中医理论出发,分别阐述“肺与大肠相表里”为肠癌肺转移的生理基础,“肺朝百脉”的生理功能又为肠癌肺转移提供途径,加之“肺为娇脏”的主要诱因,因此,肺成为易被癌毒侵袭的对象。这为中医理论指导下治疗肠癌肺转移提供新思路。

关键词：肿瘤转移传舍肺与大肠相表里肺朝百脉肺为娇脏中医理论

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中医药临床优势病种——良性前列腺增生

中国实验方剂学杂志 2022年第2期28卷 220-226页

作者：沈建武王彬林生莫美张志杰韩亮柯明辉宋竖旗王海唐渊韩虎刘红明赵勇赵琦朱勇李海松张霄潇杨勇中国中医科学院西苑医院北京100091 北京中医药大学东直门医院北京100700 创新中药关键技术国家重点实验室天津300410 北京中医药大学东方医院北京100078 北京中医药大学房山医院北京102400 中日友好医院北京100029 中国中医科学院广安门医院北京100053 北京协和医院北京100730 北京大学第一医院北京100034 首都医科大学附属北京朝阳医院北京100020 中国人民解放军空军特色医学中心北京100142 解放军总医院第六医学中心北京100037 北京中医药大学东直门医院男科研究所北京100700 中华中医药学会北京100029

中华中医药学会组织中西医男科专家进行探讨,探索对良性前列腺增生以中医药为主导疗法的应用人群和治疗阶段。针对良性前列腺增生中医药具有很大的治疗优势,但必须要明确中医药在该病的什么阶段可以做为主导治疗方式,什么阶段最好采用... 详细信息

中华中医药学会组织中西医男科专家进行探讨,探索对良性前列腺增生以中医药为主导疗法的应用人群和治疗阶段。针对良性前列腺增生中医药具有很大的治疗优势,但必须要明确中医药在该病的什么阶段可以做为主导治疗方式,什么阶段最好采用现代医学治疗方式进行治疗,又在什么状况下可采用中西医结合治疗而获取临床的最佳治疗效果。经与会专家讨论认为,年老体弱,基础疾病多不能耐受麻醉和手术的具有临床症状的良性前列腺增生患者;不能耐受西药治疗药物的不良反应,或不能接受西药可能出现的不良反应的具有临床症状的患者;症状处于轻度下尿路症状[国际前列腺症状评分(IPSS)≤7分]和中度以上症状(IPSS≥8分)但生活质量尚未受到明显影响阶段的患者;膀胱逼尿肌功能减退,膀胱功能低下不能手术治疗,或经手术治疗后功能仍然不能使膀胱排空,仍存在较多残余尿的前列腺增生患者;前列腺增生合并前列腺炎,并且以前列腺炎为主要临床表现的前列腺增生患者;术后出现的非急性并发症等,是中医药治疗前列腺增生的优势阶段,可以采用中医药为主导的治疗。前列腺增生做为中医泌尿男科治疗的优势病种之一,在临床治疗中需充分考虑前列腺增生患者的症状程度及并发症状况、疾病的可能转归来确定具体的治疗方案。在以中医药为主导治疗时需定期复查患者的血清前列腺癌特异性抗原水平,排除前列腺恶性肿瘤的可能,足疗程、足周期的应用中医疗法进行治疗,同时亦可中西并用,使患者得到最有效的、最方便的、最经济的、最满意的治疗,将中医治疗该病的优势发扬光大。

关键词：前列腺增生优势病种中医药主导治疗

上市中药品种临床精准定位“两维三阶”研究模式构建与实践

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中华中医药杂志 2023年第1期38卷 238-243页

作者：赖新星刘婷婷熊雪娇董珍宇张弛吴圣贤高颖北京中医药大学中医脑病研究院北京100700 北京中医药大学东直门医院北京100700 北京中医药大学北京100029 首都医科大学附属北京朝阳医院北京100020

上市中药品种在临床应用中存在适应人群或疾病定位不清晰,疗效优势或结局指标不明确等问题,成为长期困扰中医药研究学者的共性研究难题。明确其临床定位是提升疗效证据级别、发挥中医药疗效优势、扩大患者健康获益的前提与关键。本团队... 详细信息

上市中药品种在临床应用中存在适应人群或疾病定位不清晰,疗效优势或结局指标不明确等问题,成为长期困扰中医药研究学者的共性研究难题。明确其临床定位是提升疗效证据级别、发挥中医药疗效优势、扩大患者健康获益的前提与关键。本团队针对该研究难题,构建了证据升级与证据外推有机融合、“系统评估-精准定位-高级证据”为核心的“两维三阶”研究模式。同时以松龄血脉康胶囊为典型案例,详细介绍如何整合文献证据与专家经验,发掘中药潜在疗效优势;如何利用真实世界研究实现临床精准定位;如何针对性优化临床试验方案,产生高级别临床证据;并重点论述该研究模式的整体框架、设计原则、实施要点。本研究为实现上市中药品种临床精准定位、获得高级别证据提供了一种创新研究模式与成功实践经验。

关键词：上市中药品种临床定位两维三阶真实世界研究随机对照试验