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空肠弯曲杆菌生物膜的体外形成及鉴定

中国兽医科学 2012年第9期42卷 965-968页

作者：张蕾秦晓庆赵树臣侯振中东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030

采用结晶紫染色与正交试验相结合的方法,对空肠弯曲杆菌在不同温度、pH值、气体条件以及不同培养基条件下形成生物膜的能力进行了检测和比较;并以筛选出的最佳培养条件在盖玻片上形成的生物膜为对象,用光学显微镜及扫描电镜观察生物膜... 详细信息

采用结晶紫染色与正交试验相结合的方法,对空肠弯曲杆菌在不同温度、pH值、气体条件以及不同培养基条件下形成生物膜的能力进行了检测和比较;并以筛选出的最佳培养条件在盖玻片上形成的生物膜为对象,用光学显微镜及扫描电镜观察生物膜的结构。结果显示,在正常气体条件下培养1～3d,生物膜形成水平明显高于其他2种气体条件(P<0.01),4d后3种气体条件下的生物膜形成量均有增加,但3组间差异不显著,说明正常空气组分的条件更有利于生物膜的快速形成,而且37℃、正常空气条件下,在pH7.0的MH肉汤中培养5d,通过显微镜和扫描电镜观察,在盖玻片上可形成典型的、可观测的生物膜结构。

关键词：空肠弯曲杆菌生物膜正交试验鉴定

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低温下不同抗寒性冬小麦叶片组织结构比较

东北农业大学学报 2010年第4期41卷 7-11页

作者：于晶周子珊牟永潮张永侠苍晶东北农业大学生命科学学院哈尔滨150030

以强抗寒冬小麦品种东农冬麦1号和弱抗寒冬小麦品种济麦22为试材,应用光学显微镜和电子显微镜对不同低温下(5℃和-15℃)两个冬小麦品种的叶片显微、超微结构进行比较研究。结果表明,在5℃和-15℃低温下,东农冬麦1号和济麦22叶片的显微... 详细信息

以强抗寒冬小麦品种东农冬麦1号和弱抗寒冬小麦品种济麦22为试材,应用光学显微镜和电子显微镜对不同低温下(5℃和-15℃)两个冬小麦品种的叶片显微、超微结构进行比较研究。结果表明,在5℃和-15℃低温下,东农冬麦1号和济麦22叶片的显微结构无明显差异,但超微结构差异较显著。东农冬麦1号类囊体基粒片层和基质片层跺叠整齐,沿叶绿体的长轴方向平行排列,而济麦22叶绿体内的类囊体排列方向无规则,与叶绿体长轴形成各种角度。在-15℃时,两个品种叶肉细胞的线粒体皆肿胀呈圆形,嵴的结构模糊,且济麦22有个别线粒体嵴消失现象。该研究结果可为冬小麦抗寒种质的选育提供理论依据。

关键词：冬小麦抗寒性显微结构超微结构叶片

人成纤维细胞生长因子-21单克隆抗体的制备及抗原表位的确定

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细胞与分子免疫学杂志 2013年第8期29卷 834-837页

作者：郝智超徐黎明白银王琪王文飞李德山东北农业大学生命科学学院生物制药教研室

目的制备小鼠抗人成纤维细胞生长因子（hFGF）-21单克隆抗体（mAb）, 通过细菌展示确定该mAb的抗原表位。方法用hFGF-21作为检测和免疫抗原, 间接ELISA筛选分泌抗人hFGF-21 mAb的杂交瘤细胞株; 用FITC标记该mAb, 并克隆hFGF-21的不同... 详细信息

目的制备小鼠抗人成纤维细胞生长因子（hFGF）-21单克隆抗体（mAb）, 通过细菌展示确定该mAb的抗原表位。方法用hFGF-21作为检测和免疫抗原, 间接ELISA筛选分泌抗人hFGF-21 mAb的杂交瘤细胞株; 用FITC标记该mAb, 并克隆hFGF-21的不同片段到展示载体Apex上, 通过流式细胞仪筛选其抗原表位。结果成功筛选出1株抗hFGF-21抗体的细胞株, 其分泌抗体重链的亚型为IgG 2b, 轻链为Kappa链; 该杂交瘤细胞株腹水的效价为1∶4.096×10^6; 传30代及液氮中保存3个月, 该细胞株能稳定分泌抗hFGF-21 mAb, 且效价稳定; Western blot法检测证明该抗体与人FGF-21有很好的特异性; 该mAb与小鼠FGF-21有交叉反应; 通过流式细胞仪对抗原表位的筛选, 该mAb可与hFGF-21下游的第107-121个氨基酸反应。结论成功的制备出特异性、高稳定性的小鼠抗hFGF-21 mAb, 确定了该mAb的抗原表位在第107～121位氨基酸。

关键词：人成纤维细胞生长因子-21 单克隆抗体细菌展示流式细胞术

大鼠皮肤成纤维细胞中Ran蛋白的定位及可能作用

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解剖学报 2009年第5期40卷 785-788页

作者：曹允考李树峰杨立琳曾晓孙露霜严云勤王君伟东北农业大学动物医学学院哈尔滨150030 东北农业大学生命科学学院哈尔滨150030

目的探讨Ras相关核蛋白(Ran)在大鼠体细胞中的定位,及其与细胞周期相关蛋白间的相互作用。进一步揭示细胞周期调控和有丝分裂的分子机制。方法用组织块培养法成功地分离培养了大鼠皮肤成纤维细胞,并采用激光扫描共焦显微技术研究细胞有... 详细信息

目的探讨Ras相关核蛋白(Ran)在大鼠体细胞中的定位,及其与细胞周期相关蛋白间的相互作用。进一步揭示细胞周期调控和有丝分裂的分子机制。方法用组织块培养法成功地分离培养了大鼠皮肤成纤维细胞,并采用激光扫描共焦显微技术研究细胞有丝分裂过程中Ran的定位变化,至少重复3次。结果发现在有丝分裂间期,大鼠成纤维细胞中Ran主要分布于细胞核内,核仁内没有Ran分布,细胞质中Ran浓度极低。核膜破裂,细胞进入有丝分裂,Ran分布到整个细胞,但在染色体周围浓集,浓集区形态和纺锤体的形态一致;在后期和末期浓集区域随纺锤体的变化而变化,分布在被分开的染色体之间,其他地方浓度较低;核膜形成后又重新浓集于细胞核内;在整个有丝分裂中,Ran在细胞分裂区的细胞膜下未见特殊分布。结论Ran的分布随大鼠细胞周期的变化而改变,与其对间期细胞核的内输和外运,有丝分裂中正常纺锤体的组装和染色体的正确分配,以及细胞周期的正常的调控作用是一致的。

关键词： Ran蛋白成纤维细胞激光扫描共焦显微术大鼠

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酵母的固定化及在蓝莓酒发酵中的应用

食品工业科技 2012年第2期33卷 207-209,231页

作者：薄艳秋张秀玲东北农业大学食品学院黑龙江哈尔滨150030

为了研究固定化酵母的优越性,将固定化酵母与游离酵母进行比较。用加有SiO2和Al2O3的壳聚糖-海藻酸钠和加有SiO2和Al2O3的PVA-海藻酸钠载体进行实验,确定较优的载体。测定海藻酸钠、PVA、SiO2和Al2O3的最适添加量,通过正交实验,确定最... 详细信息

为了研究固定化酵母的优越性,将固定化酵母与游离酵母进行比较。用加有SiO2和Al2O3的壳聚糖-海藻酸钠和加有SiO2和Al2O3的PVA-海藻酸钠载体进行实验,确定较优的载体。测定海藻酸钠、PVA、SiO2和Al2O3的最适添加量,通过正交实验,确定最佳工艺条件。结果表明:海藻酸钠浓度为1.5%,PVA添加量为0.6%,Al2O3添加量为0.8%,SiO2添加量为1.4%时,发酵效果最好,发酵周期短,为3d,蓝莓酒风味也最好。因此,用加有SiO2和Al2O3的PVA-海藻酸钠载体发酵得到的蓝莓酒各方面性质最好。

关键词：固定化强化应用蓝莓酒

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水分对涂抹型再制干酪的影响

食品工业科技 2010年第6期31卷 115-117页

作者：杨宇张秀玲东北农业大学食品学院黑龙江哈尔滨150030

水分是影响涂抹型再制干酪感官、质构和微观结构的重要因素。通过测定涂抹型再制干酪的pH、融化性、质构性质(TPA),并结合微观结构观察的分析方法,确定水分对涂抹型再制干酪品质的影响。结果表明,水分的增大使样品中pH增大,但对pH的影... 详细信息

水分是影响涂抹型再制干酪感官、质构和微观结构的重要因素。通过测定涂抹型再制干酪的pH、融化性、质构性质(TPA),并结合微观结构观察的分析方法,确定水分对涂抹型再制干酪品质的影响。结果表明,水分的增大使样品中pH增大,但对pH的影响不显著,融化性显著增强(P<0.05),对硬度、黏着性和涂抹功影响极显著(P<0.01)。48%、54.3%和60%含水量时的微观结构明显不同,水分增大使酪蛋白网络结构由致密变得松散,同时脂肪球不断增大并聚集。

关键词：水分涂抹型再制干酪融化性质构微观结构

不同种植方式对苗期大豆、玉米根际土壤酶活性及微生物量碳、氮的影响

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东北农业大学学报 2013年第2期44卷 17-22页

作者：戴建军宋朋慧闫暮春徐婷婷东北农业大学资源与环境学院哈尔滨150030

通过盆栽试验的方法,研究不同种植方式对苗期大豆、玉米根际土壤脲酶、过氧化氢酶、多酚氧化酶和蔗糖酶活性和微生物量碳、氮的影响,试验共设9个处理,分别在前茬作物为大豆、玉米和大豆-玉米混作的土壤上种植大豆、玉米和大豆-玉米混作... 详细信息

通过盆栽试验的方法,研究不同种植方式对苗期大豆、玉米根际土壤脲酶、过氧化氢酶、多酚氧化酶和蔗糖酶活性和微生物量碳、氮的影响,试验共设9个处理,分别在前茬作物为大豆、玉米和大豆-玉米混作的土壤上种植大豆、玉米和大豆-玉米混作。结果表明,①与大豆-玉米轮作相比,大豆连作降低了根际土壤多酚氧化酶和脲酶活性,玉米连作降低了脲酶活性而提高了过氧化氢酶活性,三种种植方式下蔗糖酶活性无显著差异。②与大豆-玉米混作相比,大豆连作和玉米连作都降低了根际土壤脲酶活性,提高了根际土壤蔗糖酶的活性,根际土壤多酚氧化酶的活性变化不明显。在前茬为玉米的土壤处理中,大豆-玉米混作的根际土壤过氧化氢酶活性显著低于单作大豆和单作玉米的处理。③大豆连作和玉米连作的土壤微生物量碳、氮均高于大豆-玉米轮作。在前茬为玉米的土壤处理中,大豆-玉米混作的土壤微生物量氮显著高于单作大豆和单作玉米的处理。④土壤微生物量碳与微生物量氮及其碳氮比都与土壤过氧化氢酶活性和多酚氧化酶活性呈显著相关或极显著相关。因此,不同的种植方式能够影响大豆和玉米的根际土壤酶活性和土壤微生物量碳、氮,但变化规律不尽相同。

关键词：种植方式土壤酶活性微生物量碳氮

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黑加仑果中花青素的提取及其抗氧化性的研究

食品工业科技 2008年第6期29卷 220-222页

作者：李文鹏张艳程建军东北农业大学食品学院黑龙江哈尔滨150030

以黑加仑为原料,通过溶剂法,以超声波为辅助手段,研究了黑加仑中花青素的提取。通过单因素实验,研究了提取溶剂、提取溶剂的浓度、料液比、超声波提取时间和超声波提取次数对黑加仑中花青素提取率的影响。研究表明,料液比、超声波提取... 详细信息

以黑加仑为原料,通过溶剂法,以超声波为辅助手段,研究了黑加仑中花青素的提取。通过单因素实验,研究了提取溶剂、提取溶剂的浓度、料液比、超声波提取时间和超声波提取次数对黑加仑中花青素提取率的影响。研究表明,料液比、超声波提取次数、超声波提取时间对提取率的影响显著。以此为依据,通过正交实验,以提取率为指标,得到最佳提取条件:丙酮浓度40%,超声波浸提时间15min,料液比1∶40,超声波提取次数2次,花青素的提取率最高。另外,采用TBRAS法研究了花青素对卵磷脂质体的抗氧化性,表明花青素的抗氧化能力接近BHA(0.2g/kg)的抗氧化能力。

关键词：黑加仑花青素提取抗氧化性

低温胁迫下东农冬麦1号分蘖节SSH文库的构建及文库中3个基因的表达模式

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作物学报 2011年第5期37卷 918-923页

作者：牟永潮崔红于晶苍晶曾俨孟健男东北农业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150030

为揭示高抗寒冬小麦品种东农冬麦1号的抗寒分子机制,在北方寒地自然条件下,于越冬前(5℃)和越冬期(-25℃)分别对分蘖节取样,利用抑制消减杂交技术构建该品种低温胁迫相关基因的cDNA文库。在cDNA文库中随机挑选300个阳性克隆测序,获得23... 详细信息

为揭示高抗寒冬小麦品种东农冬麦1号的抗寒分子机制,在北方寒地自然条件下,于越冬前(5℃)和越冬期(-25℃)分别对分蘖节取样,利用抑制消减杂交技术构建该品种低温胁迫相关基因的cDNA文库。在cDNA文库中随机挑选300个阳性克隆测序,获得230条高质量的表达序列标签(EST)。对该序列进行BLAST比对及功能注释,发现文库中基因组成类型复杂多样,其中应对胁迫的基因(如热激蛋白、CS66、Wcor8等)以及参与编码60S和40S核糖体亚基的基因出现的频率较高,这些基因可能与东农冬麦1号的安全越冬有密切关系。对文库中筛选到的2种未知基因和Clp基因进行荧光定量PCR分析,发现其表达水平随着温度降低而不同程度升高;在弱抗寒性小麦品种济麦22中,这些基因则有不同的表达模式。推测这些基因在抗低温胁迫过程中发挥重要作用。

关键词：东农冬麦1号抗寒基因抑制消减杂交(SSH) 表达序列标签(EST) 荧光定量PCR