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论著LncRNA-ROR介导上皮-间质转化对鼻咽癌细胞放疗抵抗作用的体外研究

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海军军医大学学报 2024年

作者：薛晓成张雪黄水仙张燚鲁丹陈晓平海军军医大学(第二军医大学)附属公利医院上海市卫生健康委员会炎症与慢病管理人工智能重点实验室海军军医大学(第二军医大学)附属公利医院耳鼻咽喉头颈外科

目的研究LncRNA-ROR介导上皮-间质转化在鼻咽癌细胞放疗抵抗中的作用。方法将鼻咽癌细胞CNE2分为空白对照组、转染对照组、敲低lnc-ROR组，CCK-8法检测lncRNA-ROR对CNE2增殖的影响；将CNE2细胞分为空白组、放疗组、放疗＋转染对照组、... 详细信息

目的研究LncRNA-ROR介导上皮-间质转化在鼻咽癌细胞放疗抵抗中的作用。方法将鼻咽癌细胞CNE2分为空白对照组、转染对照组、敲低lnc-ROR组，CCK-8法检测lncRNA-ROR对CNE2增殖的影响；将CNE2细胞分为空白组、放疗组、放疗＋转染对照组、放疗＋lncRNA-ROR过表达组，经6 Gy射线照射24 h后，细胞划痕实验检测lncRNA-ROR对鼻咽癌细胞转移能力及对细胞放疗抵抗的影响，蛋白印迹法检测lncRNA-ROR对鼻咽癌细胞放疗后上皮-间质转化相关蛋白表达的影响及对鼻咽癌细胞凋亡的影响，流式细胞仪检测lncRNA-ROR对鼻咽癌细胞凋亡周期的影响，细胞迁移实验检测lncRNA-ROR对鼻咽癌细胞放疗前后侵袭能力的影响。结果与空白对照组、阴性对照组相比，抑制lncRNA-ROR表达48、72 h后鼻咽癌细胞CNE2的增殖能力减弱（P＜0.05）；抑制lncRNA-ROR表达后鼻咽癌细胞CNE2的迁移率低于阴性对照组（P＜0.05），用6 Gy射线照射24 h后过表达lncRNA-ROR组CNE2细胞的迁移宽度小于其余对照组；抑制lncRNA-ROR可以导致上皮标志蛋白（E-钙黏蛋白、β-连环蛋白）表达升高、间质标志蛋白（N-钙黏蛋白、波形蛋白）表达下降。经6 Gy射线照射24 h后，与放疗组和放疗＋阴性对照组相比，放疗＋过表达lncRNA-ROR组CNE2细胞的上皮标志蛋白表达下降、间质标志蛋白表达升高（P＜0.05）；抑制lncRNA-ROR后，活化的caspase-3、caspase-9蛋白表达升高（P＜0.05），但总蛋白的水平没有明显变化，经6 Gy射线照射24 h后，过表达lncRNA-ROR组活化的caspase-3、caspase-9蛋白表达下降（P＜0.05），但总蛋白的水平没有明显变化。与对照组相比，6 Gy放射线处理后lncRNA-ROR过表达组CNE2细胞的凋亡数减少（P＜0.05）；细胞迁移实验结果显示，将鼻咽癌细胞CNE2经6 Gy放射线处理后，lncRNA-ROR过表达组CNE2细胞的迁移能力高于单纯放疗组与放疗＋阴性对照组（P＜0.05）。结论LncRNA-ROR可通过调控鼻咽癌细胞增殖迁移、抗凋亡及上皮间质转化，从而影响其放疗抵抗，是逆转鼻咽癌细胞放疗抵抗的潜在靶点。

关键词：鼻咽肿瘤放疗抵抗上皮-间质转化 LncRNA-ROR 体外研究

长链非编码RNA-ROR介导上皮-间质转化对鼻咽癌细胞放疗抵抗作用的体外研究

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海军军医大学学报 2024年第10期 1218-1225页

作者：薛晓成张雪黄水仙张燚鲁丹陈晓平海军军医大学(第二军医大学)附属公利医院耳鼻咽喉头颈外科海军军医大学(第二军医大学)附属公利医院上海市卫生健康委员会炎症与慢病管理人工智能重点实验室

目的探讨lncRNA-ROR介导上皮-间质转化在鼻咽癌细胞放疗抵抗中的作用。方法将鼻咽癌细胞CNE2分为空白组、阴性对照组、lncRNA-ROR沉默组，进行相应的处理。将CNE2细胞分为空白组、放疗组、放疗+阴性对照组、放疗+lncRNA-ROR过表达组(... 详细信息

目的探讨lncRNA-ROR介导上皮-间质转化在鼻咽癌细胞放疗抵抗中的作用。方法将鼻咽癌细胞CNE2分为空白组、阴性对照组、lncRNA-ROR沉默组，进行相应的处理。将CNE2细胞分为空白组、放疗组、放疗+阴性对照组、放疗+lncRNA-ROR过表达组(放疗处理为6 Gy射线照射24 h)，进行相应的处理。用CCK-8法检测CNE2增殖能力，通过细胞划痕实验和Transwell 细胞迁移实验检测细胞迁移能力，用流式细胞术检测细胞凋亡的情况，用蛋白印迹法检测凋亡相关蛋白和上皮-间质转化相关蛋白的表达。结果与空白组、阴性对照组相比，抑制lncRNA-ROR表达48、72 h后鼻咽癌细胞CNE2的增殖能力均减弱(均P<0.05)。抑制lncRNA-ROR表达后鼻咽癌细胞CNE2的迁移率低于阴性对照组(P<0.05)，而放疗+lncRNA-ROR过表达组CNE2细胞的迁移能力高于放疗组与放疗+阴性对照组(均P<0.05)。与放疗组、放疗+阴性对照组相比，放疗+lncRNA-ROR过表达组CNE2细胞的凋亡率均降低(均P<0.05)。抑制lncRNA-ROR后，活化的caspase 3、caspase 9蛋白表达均较空白组和阴性对照组升高(均P<0.05)；而放疗+lncRNA-ROR过表达组活化的caspase 3、caspase 9蛋白表达均较放疗组和放疗+阴性对照组下降(均P<0.05)。抑制lncRNA-ROR可导致上皮标志蛋白(E-钙黏蛋白、β-联蛋白)表达升高，间质标志蛋白(N-钙黏蛋白、波形蛋白)表达下降(均P<0.05)；而与放疗组和放疗+阴性对照组相比，放疗+lncRNA-ROR过表达组CNE2细胞的上皮标志蛋白表达下降、间质标志蛋白表达升高(均P<0.05)。结论 lncRNA-ROR可通过调控鼻咽癌细胞增殖、迁移、凋亡及上皮-间质转化影响其放疗抵抗，是逆转鼻咽癌细胞放疗抵抗的潜在靶点。

关键词：鼻咽肿瘤放疗抵抗上皮-间质转化长链非编码RNA-ROR

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胆囊胆固醇沉积症对胆囊结石形态的影响

中华医学杂志 2024年第23期104卷 2179-2183页

作者：张红雷孔祥余项雨凯邱晨张诚达选博吕贝宁王玉彬胡海田伏洲杨玉龙同济大学附属东方医院胆石病中心同济大学医学院胆石病研究所上海西部战区总医院全军普通外科中心成都

目的探讨胆囊胆固醇沉积症对胆囊结石形态的影响。方法回顾性纳入2020年12月至2021年10月在同济大学附属东方医院胆石病中心行胆囊切除术的胆囊结石患者, 根据胆囊结石形态, 分为病例组(泥沙样结石)和对照组(非泥沙样结石), 比较2组患... 详细信息

目的探讨胆囊胆固醇沉积症对胆囊结石形态的影响。方法回顾性纳入2020年12月至2021年10月在同济大学附属东方医院胆石病中心行胆囊切除术的胆囊结石患者, 根据胆囊结石形态, 分为病例组(泥沙样结石)和对照组(非泥沙样结石), 比较2组患者的临床基线特征;通过多因素logistic回归分析影响胆囊结石形态的相关因素。结果共纳入110例患者, 病例组30例, 男13例, 女17例, 年龄26～73(54±14)岁;对照组80例, 男24例, 女56例, 年龄18～75(45±13)岁, 病例组的年龄高于对照组(P=0.003)。病例组的隐匿性胰胆反流(OPBR)发生率高于对照组[33.3%(10/30)比13.8%(11/80), P=0.020];胆囊胆固醇沉积症发生率低于对照组[30.0%(9/30)比73.8%(59/80), P<0.001]。多因素logistic回归分析结果显示:胆囊胆固醇沉积症(OR=0.19, 95%CI:0.07～0.49, P=0.001)是泥沙样结石的相关因素。结论胆囊胆固醇沉积症导致不同形态的胆囊结石的形成, 促进"固体形结石"的发生发展。

关键词：胆囊结石病胆囊胆固醇沉积症隐匿性胰胆反流

三维组架螺钉与环形钢板治疗Sanders ⅢAB型跟骨骨折的有限元分析

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医用生物力学 2024年第3期39卷 435-441页

作者：潘红元孔德伟刘粤龚璐璐赵一丁孔德策汪嘉琪王治杨铁毅范鑫斌宁夏医科大学上海市浦东新区公利医院研究生培养基地上海200135 上海市浦东新区公利医院骨科上海200135 同济大学生命科学与技术学院上海200092

目的探讨三维组架螺钉与环形钢板对SandersⅢAB型跟骨骨折的生物力学稳定性的影响。方法收集1名26岁志愿者跟骨CT和MRI数据,建立SandersⅢAB型跟骨骨折的三维有限元模型,分别使用三维组架螺钉与环形钢板固定,施加700 N纵向载荷,比较... 详细信息

目的探讨三维组架螺钉与环形钢板对SandersⅢAB型跟骨骨折的生物力学稳定性的影响。方法收集1名26岁志愿者跟骨CT和MRI数据,建立SandersⅢAB型跟骨骨折的三维有限元模型,分别使用三维组架螺钉与环形钢板固定,施加700 N纵向载荷,比较不同模型骨块及内固定应力与位移变化情况。结果在700 N纵向载荷下,两组模型骨块最大位移以及骨块与内固定最大应力均集中于后距关节面内固定与骨折线相交处。三维组架螺钉模型与环形钢板模型骨块整体位移相近。相较于环形钢板模型,三维组架螺钉模型骨块及内固定的最大应力和平均应力更小,位移与应力变化情况更接近完整跟骨模型。结论 SandersⅢAB型跟骨骨折固定时,三维组架螺钉与环形钢板两种固定方式均能提供良好稳定性。三维组架螺钉的生物力学性能优于环形钢板,更符合生物力学特点。

关键词：跟骨骨折三维组架螺钉环形钢板骨块内固定

丰富环境对大鼠缺血再灌注后星形胶质细胞A1/A2表型转换和认知功能的影响

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中国康复医学杂志 2024年第8期39卷 1094-1103页

作者：申鑫雅高振坤韩宇韩萍萍毕霞上海健康医学院附属周浦医院康复医学科上海市201203 上海中医药大学研究生院上海体育学院运动健康学院

目的:探究丰富环境对大鼠缺血再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)后星形胶质细胞A1/A2表型转换和认知功能的影响。方法:选用42只成年雄性SD大鼠,体重(220±20)g,接受大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)手术,2h后拔... 详细信息

目的:探究丰富环境对大鼠缺血再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)后星形胶质细胞A1/A2表型转换和认知功能的影响。方法:选用42只成年雄性SD大鼠,体重(220±20)g,接受大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)手术,2h后拔出线栓实现再灌注。术后3天,将造模成功的30只大鼠随机分为标准环境组(standard environment,SE)和丰富环境组(enriched environment,EE),另选用10只大鼠作为假手术组(sham)。EE组饲养于丰富环境笼子中,其余两组饲养于标准环境中。21天后,使用Bederson评分和m Nss评分检测各组大鼠的神经功能缺损情况,使用Morris水迷宫对大鼠的认知功能进行检测;随后使用蛋白质印迹分析星形胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的激活情况;实时PCR和ELISA对A1型星形胶质细胞标志物(C3)和A2型星形胶质细胞标志物(S100A10)的表达情况进行检测;苏木素-伊红(HE)染色观察梗死周围皮层组织病理学变化;TUNEL染色检测细胞凋亡情况。结果:与SE组相比,EE组GFAP的蛋白表达量显著减少(P<0.05)。EE组A1型星形胶质标志物C3的表达量显著低于SE组(P<0.05),而A2型星形胶质标志物S100A10的表达量则显著高于SE组(P<0.05)。与这一结果相对应,在EE组中,A1星形胶质细胞分泌的细胞因子TNF-α显著低于SE组(P<0.05),A2星形胶质细胞分泌的细胞因子BDNF显著高于SE组(P<0.05)。TUNEL染色和HE染色显示,EE组细胞凋亡和损伤情况更少(P<0.05)。此外,EE组大鼠的神经功能缺血情况较轻,包括Bederson评分和m Nss评分的显著差异(P<0.01);与SE组相比,EE组的大鼠有着更好的认知功能,表现为水迷宫实验中的潜伏期更短(P<0.05),在目标象限的停留时间更长(P<0.01),穿越平台的次数更多(P<0.05)。结论:丰富环境可以抑制星形胶质细胞的激活,同时引导已激活的星形胶质细胞转化为神经保护的A2型,抑制其转化为神经毒性的A1型,从而改善大鼠缺血性卒中后的认知功能。

关键词：缺血再灌注丰富环境星形胶质细胞大鼠认知功能

母亲反复妊娠丢失与子代健康相关性的研究进展

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中华围产医学杂志 2024年第6期27卷 516-519页

作者：王予刘铭同济大学附属东方医院产科上海200123

既往反复妊娠丢失不仅损害母亲的身心健康,也增加子代发生神经、心血管、呼吸、消化和血液等系统疾病的风险,威胁子代的远期健康。可能机制涉及遗传因素、免疫、氧化应激、子宫低灌注和胎盘因素等。本文就母亲既往反复妊娠丢失与子代各... 详细信息

既往反复妊娠丢失不仅损害母亲的身心健康,也增加子代发生神经、心血管、呼吸、消化和血液等系统疾病的风险,威胁子代的远期健康。可能机制涉及遗传因素、免疫、氧化应激、子宫低灌注和胎盘因素等。本文就母亲既往反复妊娠丢失与子代各系统健康的相关性及其机制的研究进展进行综述。

关键词：妊娠丢失子代远期健康风险因素机制

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中国老年护理机构安宁疗护服务模式构建研究

中国全科医学 2024年第22期27卷 2739-2744页

作者：王华萍朱华杰祝春满潘丹红上海市浦东新区老年医院安宁疗护科 201314 上海市浦东医院神经内科 201300

背景随着社会老龄化进程的加快,对安宁疗护服务的需求日益增加,但我国的安宁疗护发展起步较晚,相关的机构建设标准、管理规范还在试行阶段。老年护理机构作为重要的医养一体化服务机构之一,目前尚缺乏行之有效且同质化的安宁疗护服务模... 详细信息

背景随着社会老龄化进程的加快,对安宁疗护服务的需求日益增加,但我国的安宁疗护发展起步较晚,相关的机构建设标准、管理规范还在试行阶段。老年护理机构作为重要的医养一体化服务机构之一,目前尚缺乏行之有效且同质化的安宁疗护服务模式与服务体系。目的建立科学、规范、可行的老年护理机构安宁疗护服务模式。方法于2020年4—5月,系统检索中/英文数据库以获取安宁疗护服务相关文献,同时邀请5名安宁疗护领域专家开展半结构化访谈,结合文献检索和半结构化访谈结果构建初始指标体系。于2020年5月,采用目的抽样法选取15名安宁疗护相关领域专家开展两轮函询,结合课题组分析与专家建议确定指标体系。两轮函询后,开展专家小组团体面谈,对形成的指标体系做进一步优化调整。结果在两轮函询中,问卷回收率均为100.0%,专家权威系数分别为0.89和0.94,一级指标的肯德尔和谐系数分别为0.54和0.59,二级指标的肯德尔和谐系数分别为0.18、0.10。最终构建的老年护理机构安宁疗护服务模式指标体系包含须具备的资源与条件、内容和流程、考核指标3个一级指标、36个二级指标。第2轮函询中,指标的重要性得分均值为3.87~5.00分,变异系数为0~0.25,满分率为63.0%~100.0%。结论本研究构建的老年护理机构安宁疗护服务模式的科学性和可靠性较好,可以为老年护理机构开展老年患者生命末期优质医疗服务提供借鉴。

关键词：临终关怀和姑息治疗护理服务模式护理机构老年人保健服务德尔菲技术

复方鱼桔颗粒通过抑制BMDM中NLRP3炎症小体激活发挥抗炎效果的作用机制研究

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中国免疫学杂志 2024年第7期40卷 1467-1473页

作者：马宇慧孟佳磊袁林齐璐瑶欧阳冰清雷鸣上海中医药大学附属第七人民医院上海200137 急救与创伤研究教育部重点实验室急诊创伤学院海南医学院海口571199

目的:研究复方鱼桔颗粒(FFYJ)对脂多糖(LPS)诱导的原代骨髓来源的巨噬细胞(BMDM)炎症模型的影响,及其对巨噬细胞中核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体信号通路的干预作用。方法:从C57BL/6小鼠腿部骨髓中提取并分离出原代细... 详细信息

目的:研究复方鱼桔颗粒(FFYJ)对脂多糖(LPS)诱导的原代骨髓来源的巨噬细胞(BMDM)炎症模型的影响,及其对巨噬细胞中核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体信号通路的干预作用。方法:从C57BL/6小鼠腿部骨髓中提取并分离出原代细胞,经50 ng/ml M-CSF诱导7 d后得到BMDM。分为对照组(Control)、模型组(LPS+ATP)、FFYJ低剂量组(FFYJ 50μg/ml)、FFYJ中剂量组(FFYJ 100μg/ml)、FFYJ高剂量组(FFYJ 200μg/ml)、阳性药地塞米松组(DEX)。FFYJ治疗组和阳性药组预处理BMDM 1 h后开始造模。乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测各组细胞上清中LDH的含量;ELISA检测各组细胞上清中炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6和IL-1β的含量;qRT-PCR检测各组细胞中TNF-α、IL-6和IL-1β mRNA水平;Western blot检测各组细胞中NF-κB、p-NF-κB、NLRP3、Caspase-1 p45、Caspase-1 p20和GSDMD-N蛋白水平;倒置荧光显微镜观察各组细胞经Hoechst-PI染色后的细胞焦亡情况。结果:与对照组相比,模型组细胞上清液中LDH、TNF-α、IL-6和IL-1β含量显著升高(P<0.000 1);模型组细胞TNF-α、IL-6和IL-1β的mRNA水平显著升高(P<0.000 1);p-NF-κB、NLRP3、Caspase-1p20和GSDMD-N的蛋白水平显著升高(P<0.05);PI阳性细胞数明显增多(P<0.05)。与模型组比较,FFYJ治疗和阳性药显著降低了BMDMs上清液中LDH、TNF-α、IL-6和IL-1β的含量(P<0.05);下调了细胞中TNF-α、IL-6和IL-1β的mRNA水平(P<0.05);抑制了p-NF-κB、NLRP3、Caspase-1 p20和GSDMD-N蛋白的表达(P<0.05);显著减少了PI阳性细胞数(P<0.05)。结论:FFYJ通过抑制BMDM原代巨噬细胞中NLRP3炎症小体的激活发挥抗炎效果。

关键词：复方鱼桔颗粒 NLRP3炎症小体 BMDM 炎症因子

腓骨近端骨折对伸直状态下膝关节应力影响的有限元分析

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中国组织工程研究 2024年第30期28卷 4757-4762页

作者：汪嘉琪唐江安黄国华孔德策赵一丁龚璐璐潘红元孔德伟刘粤杨铁毅宁夏医科大学上海市浦东新区公利医院研究生培养基地上海市200135 上海市浦东新区公利医院骨科上海市200135 同济大学生命科学与技术学院上海市200092

背景:传统观点认为绝大多数的腓骨近端骨折是不需要固定的,他人和此次研究提示,近端腓骨结构对于膝关节后外侧结构的稳定性具有重要影响,其作用机制值得研究。目的:探讨腓骨近端骨折对于伸直状态膝关节各结构生物力学的影响。方法:运用... 详细信息

背景:传统观点认为绝大多数的腓骨近端骨折是不需要固定的,他人和此次研究提示,近端腓骨结构对于膝关节后外侧结构的稳定性具有重要影响,其作用机制值得研究。目的:探讨腓骨近端骨折对于伸直状态膝关节各结构生物力学的影响。方法:运用有限元方法进行仿真生物力学试验。选用1名健康青年男性志愿者膝关节MRI和CT影像数据资料建立伸直状态下的膝关节有限元模型,并模拟4种近端腓骨形态:模型A为完整模型,模型B为腓骨头下以远1 cm骨折模型,模型C为腓骨近端最顶端向远端1 cm的尖端缺损骨折模型,模型D为腓骨近端最顶端向远端2 cm的骨缺损模型。在股骨干上施加纵向集中载荷1500 N,对比分析膝关节伸直状态下,4种工况下膝关节各个结构最大等效应力、最大第一主应力的分布以及改变趋势。结果与结论:①模型A胫骨软骨、半月板外侧室最大等效应力大于内侧;胫骨平台、半月板内侧室最大第一主应力大于外侧;股骨软骨内侧髁最大等效应力大于外侧髁,股骨软骨内侧髁最大第一主应力大于内侧髁;②相较于模型A,模型C的软骨、半月板的最大等效应力和最大第一主应力大小以及分布情况无明显差异;③相较于模型A,模型B的最大等效应力上升幅度依次为内侧胫骨软骨(14.9%),股骨软骨内侧髁(13.6%),内侧半月板(6.6%);最大第一主应力上升幅度依次为内侧半月板(11.06%),内侧胫骨软骨(8.65%),股骨软骨内侧髁(7.46%);韧带的最大等效应力上升幅度依次为:腘弓状韧带(33.2%)>前交叉韧带(21.3%)>腓侧副韧带(17%)>后交叉韧带(14.3%)>前外侧副韧带(13.2%)>内侧副韧带(10.1%);④相较于模型A,模型D的最大等效应力上升趋势依次为内侧胫骨软骨(19.5%),股骨软骨内侧髁(17.9%),内侧半月板(9.9%);最大第一主应力依次为内侧半月板(14.04%),内侧胫骨软骨(13.03%),股骨软骨内侧髁(11.37%);韧带最大等效应力上升趋势依次为:前交叉韧带(25.2%)>后交叉韧带(18.9%)>内侧副韧带(18.5%)>前外侧副韧带(12.7%);⑤提示在膝关节伸直情况下,腓骨头下1 cm骨折和2 cm腓骨尖端骨缺损对内侧室软骨、前交叉韧带以及后外侧韧带复合体结构的影响较大。

关键词：腓骨近端骨折有限元分析生物力学半月板关节软骨

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