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腺病毒和慢病毒载体感染骨髓间质干细胞的比较

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中华医学杂志 2006年第47期86卷 3340-3344页

作者：马晓生姜建元吕飞舟马昕李小康黄煌渊复旦大学附属华山医院骨科上海200040 日本国立成育医疗中心研究所移植免疫研究室

目的比较腺病毒和慢病毒载体感染骨髓间质干细胞(rMSCs)的荧光病毒基因表达的稳定性及持续时间。方法将含有绿色荧光蛋白(GFP)基因的慢病毒载体质粒同辅助质粒一起共感染293T细胞,重组包装;将慢病毒和腺病毒载体分别感染rMSCs,培养5周,... 详细信息

目的比较腺病毒和慢病毒载体感染骨髓间质干细胞(rMSCs)的荧光病毒基因表达的稳定性及持续时间。方法将含有绿色荧光蛋白(GFP)基因的慢病毒载体质粒同辅助质粒一起共感染293T细胞,重组包装;将慢病毒和腺病毒载体分别感染rMSCs,培养5周,分别在1、3、5周通过流式细胞仪检测GFP的表达情况。从GenBank中调出人骨形态发生蛋白2(hBMP2)基因序列,设计带有NheI、AgeI双酶切位点引物。从人肝脏组织中抽提总RNA,再逆转录成cDNA,扩增出hBMP2基因的全长序列。测序验证后克隆到慢病毒载体pHIV-CS-CDF-CG-PRE上,通过PCR扩增、酶切、测序等方法鉴定重组慢病毒载体。将该重组慢病毒载体质粒同辅助质粒一起共感染293T细胞,通过重组而包装成能表达hBMP2基因的有活性的慢病毒。结果两种病毒载体感染后1周,绿色荧光蛋白表达分别是90%和71%,到5周时,慢病毒载体的绿色荧光蛋白表达明显高于腺病毒载体,分别是79%和0.05%。扩增出1.2kb左右的hBMP2全长基因与GeneBank中的hBMP2阅读框架序列完全一致;成功克隆和构建了含hBMP2基因的慢病毒载体pHIV-hBMP2;对慢病毒载体进行了成功包装和分析。结论含hBMP2基因的慢病毒载体可成功构建。慢病毒载体对大鼠骨髓间质干细胞的转染效率明显优于腺病毒载体。

关键词：慢病毒属腺病毒科干细胞骨形态发生蛋白质类

上海市西南城郊河道春季的浮游生物组成及水质评价

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复旦学报（自然科学版） 2007年第6期46卷 913-919页

作者：刘超禹娜陈立侨张广荣魏梓兴金鹏飞华东师范大学生命科学学院上海200062 上海市水利管理处上海200002

2007年2-4月间选取、调查了上海市西南城郊结合地区5条河道（午潮港、周家浜、水城路周家浜、曹杨环浜和丽娃河）的浮游动物种类组成、生物量和水质状况.利用浮游动物群落结构（生物数量和生物量分布、多样性指数）和水质化学指数（环... 详细信息

2007年2-4月间选取、调查了上海市西南城郊结合地区5条河道（午潮港、周家浜、水城路周家浜、曹杨环浜和丽娃河）的浮游动物种类组成、生物量和水质状况.利用浮游动物群落结构（生物数量和生物量分布、多样性指数）和水质化学指数（环境质量综合指数、化学评价指数）综合评价了所选河道的水质和污染程度.从所采集的水样中,经鉴定共有浮游动物16种,其中轮虫11种、枝角类4种和桡足类1种,优势种为长足轮虫（Rota-ria neptunia）、萼花臂尾轮虫（Brachionus calyciflorus）、小三肢轮虫（Filinia minuta）和蚤状氵蚤（Daphnia cuculla-ta）.生物多样性指数和理化指标的综合评价结果表明,5条河道的污染等级处于轻度污染至极严重污染之间,属于α-中污至多污型,提示基本消除黑臭后的河道正逐渐趋于良性恢复状态,但水体中的生物种类和组成偏简单,河道仍较为脆弱和不稳定,建议有关部门继续加强必要的巩固治理.

关键词：浮游动物多样性指数水质评价

膝前交叉韧带重建术后本体感觉促进训练对膝关节位置觉的影响

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中国临床康复 2005年第10期9卷 16-17页

作者：马燕红程安龙白跃宏江澜李韵袁伟芳沈晓艳蒋垚赵金忠上海交通大学附属第六人民医院康复医学科上海市200233 上海交通大学附属第六人民医院骨科上海市200233

目的:本体感觉是膝关节正常运动的必要条件,膝前交叉韧带(ACL)重建术后功能恢复的水平与术后本体感觉恢复程度有关。为此探讨ACL重建术后强化本体感觉训练对膝关节位置觉的影响。方法:上海交通大学附属第六人民医院康复医学科2001-03/20... 详细信息

目的:本体感觉是膝关节正常运动的必要条件,膝前交叉韧带(ACL)重建术后功能恢复的水平与术后本体感觉恢复程度有关。为此探讨ACL重建术后强化本体感觉训练对膝关节位置觉的影响。方法:上海交通大学附属第六人民医院康复医学科2001-03/2003-12进行膝ACL韧带重建术后的患者60例,按病区将患者分本体感觉促进组30例和对照组30例。对照组术后应用一般康复训练方法。本体感觉促进组除了应用一般康复训练方法外还加以本体感觉强化训练。术后6个月进行患者位置觉测定。结果:本体感觉促进组在被动角度重现测试中患膝的总平均偏差为(4.25±1.06)°,健膝总平均偏差为(3.87±1.95)°(P>0.05)。对照组患膝的总平均偏差为(4.91±1.01)°,健膝总平均偏差为(3.83±1.22)°,患膝的总平均偏差显著大于健侧(P<0.01)。结论:ACL韧带重建术后强化本体感觉训练能改善患膝位置觉。

关键词：膝前交叉韧带本体感觉康复

釉基质蛋白治疗牙周骨下袋缺损促进形成牙周硬组织的能力:数字化标准系列放射学观察

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中国临床康复 2006年第17期10卷 85-87页

作者：刘晓峰束蓉上海第二医科大学附属第九人民医院口腔内科上海市200011

目的:观测分析釉基质蛋白治疗牙周骨下袋缺损前后拍摄的数字化标准系列X线片,以评估釉基质蛋白促进形成牙周硬组织的能力。方法:选择2000-01/2002-01上海第二医科大学附属第九人民医院口腔内科收治的无全身系统性疾病的慢性牙周炎患者24... 详细信息

目的:观测分析釉基质蛋白治疗牙周骨下袋缺损前后拍摄的数字化标准系列X线片,以评估釉基质蛋白促进形成牙周硬组织的能力。方法:选择2000-01/2002-01上海第二医科大学附属第九人民医院口腔内科收治的无全身系统性疾病的慢性牙周炎患者24例,共40个牙位。按照牙位随机分为3组,釉基质蛋白组17个牙位,空白对照组13个牙位,甲壳素膜组10个牙位。各组患者在患牙区行改良Widman翻瓣术,釉基质蛋白组骨缺损区根面放置含釉基质蛋白的甲壳素膜,甲壳素膜组放置甲壳素膜,空白对照组不放任何材料仅做术区清创。各组分别于术前和术后6个月测定数字化X影像指标:釉牙骨质界到牙槽嵴顶的距离、釉牙骨质界到骨缺损底部的距离、牙槽嵴顶到骨缺损底部的距离。所有测量值的单位均由Cygnus系统的默认值换算为mm。结果:实验纳入40个牙位,全部进入结果分析。各组各项指标治疗前与治疗后6个月差值的比较:与釉基质蛋白组比较,甲壳素膜组和空白对照组治疗前后釉牙骨质界到牙槽嵴顶的距离差值均有所升高[(0.13±0.28),(0.20±0.41),(0.20±0.35)mm],釉牙骨质界到骨缺损底部的距离、牙槽嵴顶到骨缺损底部的距离差值均明显下降[(1.40±1.16),(0.35±0.56),(0.61±0.72)mm,P<0.05;(1.53±1.17),(0.55±0.79),(0.81±0.76)mm;P<0.01]。结论:釉基质蛋白治疗能够使骨缺损区的骨质修复量及骨缺损深度明显减少,可显著促进牙周骨组织的再生,充分显示了釉基质蛋白治疗牙周骨下袋缺损的优势。

关键词：牙釉质蛋白质类放射摄影术牙科数字引导组织再生牙周疾病外科学

前列腺原发性印戒细胞癌的病理诊断和形态发生机制

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中华病理学杂志 2002年第6期31卷 514-517页

作者：蒋智铭张惠箴陈洁晴刘亮周健华上海市第六人民医院病理科 200233

目的　探讨前列腺原发性印戒细胞癌的组织发生、病理特征和鉴别诊断。方法　在2 62例经穿刺活检证实的前列腺癌中选出 10例印戒细胞癌 ,用SP法作前列腺特异性抗原 (PSA)、前列腺酸性磷酸酶 (PAP)、雄激素受体 (AR)等 9种免疫组织化学标... 详细信息

目的　探讨前列腺原发性印戒细胞癌的组织发生、病理特征和鉴别诊断。方法　在2 62例经穿刺活检证实的前列腺癌中选出 10例印戒细胞癌 ,用SP法作前列腺特异性抗原 (PSA)、前列腺酸性磷酸酶 (PAP)、雄激素受体 (AR)等 9种免疫组织化学标记和AB/PAS ,黏液卡红染色 ,3例作电镜观察 ,并与 10例胃肠道印戒细胞癌作比较。结果　 10例中仅 1例为纯印戒细胞癌 ,9例与经典型前列腺癌混合 ,印戒细胞癌成分均大于癌总量的 2 5 %。按形态特征和形成机制 ,可将印戒细胞分为胞质内空泡或内腔形成和胞质内PSA、PAP分泌物积聚二种类型 ,二种类型印戒细胞均缺乏胞质内黏液 ,故不同于消化道印戒细胞癌。结论　原发性印戒细胞癌是来自前列腺腺泡上皮的低分化特殊组织学类型腺癌。在穿刺活检中可以与来自消化道 ,泌尿道的浸润性或转移性印戒细胞癌鉴别。

关键词：前列腺原发性印戒细胞癌病理诊断形态发生机制前列腺肿瘤免疫组织化学

胰岛素对正常糖和高糖浓度下牛视网膜微血管内皮细胞血管内皮生长因子表达的影响

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中华眼科杂志 2008年第7期44卷 640-644页

作者：邬海翔夏欣刘堃郑志朱冬青许迅顾青上海交通大学附属第一人民医院眼科 200080

目的探讨胰岛素、糖浓度及其两者的联合作用对牛视网膜微血管内皮（BRE）细胞血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法对照实验研究。采用选择性培养方法，培养BRE细胞，传代后分别在正常糖（5mmol／L）或高糖（30mmol／L）浓度下培... 详细信息

目的探讨胰岛素、糖浓度及其两者的联合作用对牛视网膜微血管内皮（BRE）细胞血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法对照实验研究。采用选择性培养方法，培养BRE细胞，传代后分别在正常糖（5mmol／L）或高糖（30mmol／L）浓度下培养3d，甘露醇平衡渗透压，血清饥饿12h，给予或不给予100nmol／L胰岛素作用24h。实时荧光定量检测VEGFmRNA表达水平；人脐静脉血管内皮细胞增殖法、免疫荧光检测法、免疫印迹法检测VEGF蛋白表达水平。采用SPSS12．0统计学软件对数据进行分析，胰岛素、糖浓度及其交互作用对BRE细胞的VEGFmRNA和VEGF蛋白表达水平的影响，采用2×2析因设计定量资料方差分析，以P〈0．05作为差异有统计学意义。结果胰岛素或高糖浓度可以显著提高BRE细胞的VEGFmRNA（F=5．67，9．04；均P〈0．05）和VEGF蛋白（F=5．50，5．57；均P〈0．05）表达水平，但胰岛素联合高糖浓度的作用较其单独作用减弱。结论高糖浓度下可以降低胰岛素诱导的VEGF表达水平，因此，VEGF可能不是胰岛素治疗导致的糖尿病视网膜病变短期恶化的主要因素。

关键词：胰岛素视网膜血管内皮细胞血管内皮生长因子A 糖尿病视网膜病变

3种金属烤瓷冠修复后龈沟液中白细胞介素-8水平动态测定

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华西口腔医学杂志 2012年第3期30卷 255-258页

作者：许卫星苏俭生上海市卢湾区牙病防治所修复科上海200020 同济大学口腔医院修复科上海200072

目的探讨镍铬合金、钴铬合金、金合金3组金属烤瓷冠修复前后不同时期龈沟液(GCF)内白细胞介素-8(IL-8)水平变化,了解这3种金属烤瓷冠在不同时期对牙龈的刺激程度。方法临床随机选择3种金属烤瓷冠修复患者共45例,每组各15例,测定在修复... 详细信息

目的探讨镍铬合金、钴铬合金、金合金3组金属烤瓷冠修复前后不同时期龈沟液(GCF)内白细胞介素-8(IL-8)水平变化,了解这3种金属烤瓷冠在不同时期对牙龈的刺激程度。方法临床随机选择3种金属烤瓷冠修复患者共45例,每组各15例,测定在修复前以及修复后1、3、6个月GCF量,并采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测同期GCF中IL-8总量、IL-8含量。结果镍铬合金烤瓷冠在修复1、3、6个月后GCF量、IL-8总量与修复前相比差异均有统计学意义(P<0.05)。钴铬合金、金合金烤瓷冠在修复3个月后回复到修复前水平。3种金属烤瓷冠IL-8含量在不同时期差异均无统计学意义。结论 IL-8参与炎症的免疫调节,可作为评价不同金属烤瓷冠对牙龈组织刺激程度的指标,不同合金烤瓷冠内冠材料对牙龈存在不同的长期刺激,临床金属烤瓷冠修复时对内冠材料的选择应予以关注。

关键词：白细胞介素-8 龈沟液镍铬合金钴铬合金金合金

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造影显示的卒中患者颅内外动脉狭窄的分布

中华神经科杂志 2006年第5期39卷 309-311页

作者：陶庆玲孙瑄赵晖姚胜旗上海市长宁区中心医院神经内科 200336

目的分析缺血性卒中患者颅内外动脉狭窄的分布。方法收集我院缺血性卒中患者306例,所有患者均进行颈动脉彩超、经颅多普勒超声(TCD)、磁共振血管造影术(MRA)和数字减影血管造影(DSA)检查,狭窄程度按北美症状性颈动脉内膜切除试验(NASCET... 详细信息

目的分析缺血性卒中患者颅内外动脉狭窄的分布。方法收集我院缺血性卒中患者306例,所有患者均进行颈动脉彩超、经颅多普勒超声(TCD)、磁共振血管造影术(MRA)和数字减影血管造影(DSA)检查,狭窄程度按北美症状性颈动脉内膜切除试验(NASCET)测量标准分为5个等级。结果(1)颅内动脉狭窄149例(48.6%),颅外动脉狭窄25例(8.2%),颅内外动脉均见狭窄33例(10.8%);(2)207例动脉狭窄患者中,单支狭窄129例(62.3%),多支狭窄78例(37.7%);(3)动脉狭窄的常见部位依次为:大脑中动脉>椎动脉远端及基底动脉>颈内动脉颅外段>大脑前动脉>大脑后动脉>颈内动脉虹吸段>椎动脉起始段;(4)DSA所示狭窄程度:207例316条狭窄血管中,重度狭窄或闭塞87条(27.5%);(5)157/164例(95.7%)脑卒中病灶与血管狭窄的部位相对应。结论缺血性卒中患者以颅内血管狭窄为多见,大脑中动脉主干狭窄的发生率最高,其次是椎动脉远端及基底动脉。

关键词：血管造影术,数字减影脑动脉脑血管意外缩窄,病理性

NM23-H1B基因mRNA在卵巢上皮性肿瘤组织中表达的研究

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中华妇产科杂志 2006年第1期41卷 48-51页

作者：李文刘彦金志军丰有吉黄腊梅陈静第二军医大学附属长征医院妇产科上海200003 复旦大学附属妇产科医院妇科

目的研究NM23-H1B基因与卵巢上皮性肿瘤的相关性。方法收集2003年4月至2004年2月手术切除的卵巢上皮性肿瘤标本48份,其中卵巢上皮性癌(卵巢癌)40份,卵巢交界性上皮性肿瘤8份,正常卵巢组织标本8份。采用RT-PCR技术、RNA印迹(northern bl... 详细信息

目的研究NM23-H1B基因与卵巢上皮性肿瘤的相关性。方法收集2003年4月至2004年2月手术切除的卵巢上皮性肿瘤标本48份,其中卵巢上皮性癌(卵巢癌)40份,卵巢交界性上皮性肿瘤8份,正常卵巢组织标本8份。采用RT-PCR技术、RNA印迹(northern blot)法、原位杂交实验,检测NM23-H1B基因mRNA的表达。结果经RT-PCR方法检测在所有的标本中均有NM23-H1B基因mRNA的表达,在正常卵巢组织中表达较低,而在所有的卵巢肿瘤中表达均高于正常卵巢组织,早期(Ⅰ、Ⅱ期)卵巢癌中的表达高于晚期(Ⅲ、Ⅳ期)。northern blot法检测结果显示NM23-H1B基因mRNA在正常卵巢组织的表达较低,交界性肿瘤中的表达则与正常卵巢组织中相似,而在卵巢癌组织中表达明显增高,在早期卵巢癌中分化好(G1级)者表达明显高于分化较差(G2、G3级)者。原位杂交实验检测结果显示,在所有的卵巢癌标本中NM23-H1B基因mRNA阳性表达率为100%(40/40),在正常卵巢组织中阳性表达率为0,在8份卵巢交界性肿瘤标本中,有2份NM23-H1B基因表达阳性,阳性表达率为2/8。结论NM23-H1B基因与卵巢癌发生发展有相关性。

关键词：卵巢肿瘤转录因子逆转录聚合酶链反应印迹法,RNA 原位杂交